09 vacuna de DNA recombinante

La vacuna de DNA recombinante
RESUMEN:
Aproximadamente 350 millones de personas están infectadas con hepatitis B en el mundo. El Perú
es uno de los países con alta prevalencia de Hepatitis B en América Latina. La hepatitis B causa
hepatitis crónica, cirrosis y carcinoma hepatocelular. La vacunación es el único método que ha
demostrado ser eficaz en el control de la enfermedad.
Este es un estudio prospectivo, aleatorio, conducido con el propósito de evaluar la
inmunogenicidad y seguridad de la vacuna Hepavax-Gene, una nueva vacuna.
de DNA recombinante, en personas sanas mayores de 10 años de edad en el Perú.
La vacuna fue administrada vía intramuscular en el músculo deltoides en dosis de 10 microgramos
a personas de 10 a 19 años y de 20 microgramos a mayores de 19 años, con el esquema de
vacunación de tres dosis: el día 0, a los 30 días y a los 180 días. 67 personas terminaron el
estudio de un total de 188 personas admitidas inicialmente.
La inmunogenicidad fue satisfactoria: 100% de los participantes en el Grupo A (10 a 19 años) y
100% de los participantes del Grupo B (mayores de 19 años). Con una media aritmética de
28,583.92 mIU/mL y una media geométrica de 5,754.32 mIU/mL en el Grupo A. y con una media
aritmética de 8,708.3 mIU/mL 2 y una media geométrica de 2,179.32 mIU/mL en el Grupo B. Los
eventos adversos fueron del 4.69%. Ninguno fue severo.
La vacuna de DNA recombinante derivada de H. Polymorpha es inmunogénica y segura en
peruanos sanos mayores de 10 años aplicada en tres dosis a los días 0, 30 y 180.
PALABRAS CLAVES: Hepatitis B – vacuna, Títulos de anticuerpos, Hansenula Polymorpha
INTRODUCCIÓN
Aproximadamente 350 millones de personas están infectadas con hepatitis B en el mundo. El Perú
es uno de los países de alta prevalencia de Hepatitis B en América Latina y esta enfermedad es
una causa importante de hepatitis crónica, cirrosis y carcinoma hepatocelular en nuestro país.(1-2)
En tribus del Nor- oriente peruano, (Jivaroes) la prevalencia de hepatitis B es del 94% (3) y la
morbi-mortalidad por el virus en áreas de alta prevalencia como Abancay y Huanta alcanza tasas
muy altas (4-5).
El tratamiento de esta enfermedad genera costos elevados, en los Estados Unidos, por ejemplo,
los costos médicos directos relacionados a la Hepatitis B exceden a un millón de dólares por día.
La hepatitis B es una enfermedad prevenible por vacunas; la vacunación es el único método que
ha demostrado ser eficaz en el control de la enfermedad. Las primeras vacunas disponibles fueron
derivadas de plasma, luego se introdujeron las vacunas de DNA recombinante, en Estados Unidos
en 1986.
La vacuna recombinante de hepatitis B es usada a gran escala en los programas de inmunización.
De estas vacunas, la que usa la levadura de Sacharomyces cervisiae es la más usada. En los
últimos años se desarrolló una vacuna recombinante de hepatitis B usando la levadura Hansenula
polymorpha, se establece que esta vacuna ha mejorado la productividad y estabilidad. (6)
Este estudio fue conducido con el propósito de evaluar la inmunogenicidad y seguridad de la
vacuna Hepavax-Gene (Biotoscana Farma), una nueva vacuna de DNA recombinante, en
personas sanas mayores de 10 años de edad en Perú.
MATERIALES Y MÉTODOS
El presente es un estudio, prospectivo aleatorio, para investigar la inmunogenicidad y seguridad
de la vacuna de DNA recombinante de Hepatitis B: Hepavax Gene en personas sanas mayores de
10 años con tres dosis.
En Agosto del 2002 se inició el estudio en familiares de los trabajadores de Servicio de Agua
Potable y Alcantarillado de Lima (SEDAPAL), las personas que participaron en el estudio
correspondieron a cuatro regiones diferentes de Lima: Villa el Salvador, Tingo María, Atarjea y
Comas. Se utilizó las tablas de muestreo aleatorio para la selección de voluntarios.
Criterios de inclusión:

No vacunación previa

Personas mayores de 10 años.

Personas en buen estado general.

A todos los participantes, antes de ser admitidos en el estudio se les tomará una muestra
de sangre para determinar la presencia de Ag HBs, Anti HBc total y Anti HBs.

Marcadores negativos de Hepatitis B al momento de la admisión.

Consentimiento informado firmado por los participantes o por sus padres.
Criterios de exclusión:

Personas vacunadas previamente.

Personas con algún marcador viral de hepatitis B positivo.

Estado febril agudo, o enfermedad en el momento de la vacunación.
Criterios para retirar un paciente del estudio:

Personas con efectos adversos severos a la vacuna

Personas que no deseen continuar por razones diferentes a los efectos adversos.

Por decisión del investigador, por incumplimiento de las normas establecidas para el
desarrollo del estudio.
Se utilizó el esquema de vacunación 0-30-180 días, en los participantes de 10 a 19 años (Grupo
A) se utilizó 10 microgramos/dosis y en los mayores de 19 años (Grupo B) se utilizó 20
microgramos/dosis. Cada dosis fue inyectada en el deltoides vía intramuscular.
Todos los participantes del estudio firmaron una ficha de consentimiento informado, en los
menores de 19 años la ficha fue firmada por sus padres.
Seguimiento:
Después de cada dosis los pacientes fueron controlados por teléfono durante las primeras 48
horas e interrogados sobre la presencia de síntomas posteriores a la vacunación, en cada una de
las dosis aplicadas, esta entrevista telefónica fue realizada personalmente por el investigador
principal según ficha de reacciones adversas que fue entregada en el momento de la vacunación.
Las reacciones fueron clasificadas de acuerdo a su severidad en leves, moderadas o severas,
locales y sistémicas, definiendo como severa a las reacciones que colocaron en riesgo la vida del
paciente.
Entre 30 y 60 días después de la última dosis se tomó una muestra de sangre para la
determinación de los títulos de anticuerpos protectores. Se empleó para el examen la prueba de
determinación cuantitativa. La determinación cuantitativa de Anticuerpos al Antígeno de Superficie
del Virus de Hepatitis B (Anti-HbsAg) subtipos ad y ay se realizó por la técnica de inmunoensayo
enzimático de micropartículas (MEIA) (Abbott Laboratories. Abbott Park, IL USA) en un
autoanalizador Axsym (Abbott). Para la calibración del autoanalizador se emplearon calibradores
con concentraciones referenciados a los calibradores de Imunoglobulinas anti-Hepatitis B de la
Organización Mundial de la Salud (OMS) expresadas en mIU/mL (1st International Reference
preparation of anti-Hepatitis B Inmunoglobulin). El valor del punto de corte Negativo (Cut off) fue
menor a 10 mIU/mL. Los sueros positivos con valores mayores a 1000 mIU/mL fueron diluidos por
el autoanalizador hasta el valor de 25000 mUI/mL, aquellas muestras con valores superiores a
25000 mIU/mL fueron adicionalmente diluidas manualmente.
La respuesta a la vacunación se clasificó según los títulos de Anti HBs en:
1. Títulos menores de 10 UI/L Sin seroprotección.
2. Títulos mayores de 10 UI/L Seroprotección.
RESULTADOS:
Un total de 188 personas mayores de 10 años fueron admitidas al estudio, 100 del grupo A y 88
del Grupo B.
Fueron excluidas 6 personas por tener algún marcador para hepatitis B positivo.
Acudieron a recibir la segunda dosis 106 personas, y la tercera dosis 86 personas, de las cuales
solamente acudieron al control para toma de sangre y titulación de anticuerpos 67 personas.
Finalmente un total de 67 personas, 37 del grupo A y 30 del grupo B concluyeron el estudio.
GRUPO A: (10 años – 19 años)
19 personas correspondieron al sexo masculino y 18 al sexo femenino.
GRUPO B: (Mayores de 19 años)
8 personas fueron de sexo masculino y 22 personas fueron de sexo femenino.
Inmunogenicidad.
Todos los voluntarios del grupo A tuvieron títulos anti Ag HBs mayor a 10 mIU/mL, indicando 100%
de seroprotección (gráfico No. 1)
Gráfico 1.- Menores de 19 años de edad Títulos de Seroconversión.
36/37 lograron títulos altos mayores a 100 mIU/mL.
El título mas bajo del grupo A fue 45.90 mIU/mL y el mas alto fue 219,490 mIU/mL con una media
aritmética de 28,583.92 mIU/mL y una media geométrica de 5,754.32 mIU/mL
Todos los voluntarios del grupo B tuvieron títulos anti Ag HBs mayor a 10 mIU/mL, indicando 100%
de seroprotección.
Gráfico 2.- Mayores de 19 años de edad Títulos de
Seroconversión.
28/30 lograron títulos altos mayores a 100 mIU/mL.
El título mas bajo del Grupo B fue 90.40 mIU/mL y el más alto fue 73,970 mIU/mL con una media
aritmética de 8,708.32 mIU/mL y una media geométrica de 2,179.32 mIU/mL
Seguridad.
Un total de 7 reacciones adversas (4.69%) se registraron en las 201 dosis aplicadas en ambos
grupos
Tabla No. 1.- Efectos adversos locales y sistémicos después de la aplicación de 201 dosis.
DISCUSIÓN
La Organización Mundial de la Salud (OMS) recomendó en 1991 que la vacuna para Hepatitis B
debería ser integrada al programa nacional de inmunizaciones en todos los países con prevalencia
de portadores de Hepatitis B del 8% o superior a esta cifra y desde 1997 en todos los países del
mundo.
Si bien es cierto, que la infección por hepatitis B puede ser prevenida, este sigue siendo un
problema de salud en países con alta prevalencia de la enfermedad. En algunos estudios el
porcentaje de individuos que no desarrollan anticuerpos protectores después de tres dosis de
vacuna corresponden del 5% al 10% y en tanto continúan en riesgo de la infección, en este grupo
se encuentran los sujetos de edad avanzada, los mal nutridos, inmunodeficientes, drogadictos
endovenosos, varones, fumadores, pacientes con enfermedades crónicas, entre otros (7)(8).
Muchos esfuerzos para mejorar este problema se ha hecho, como aumentar las dosis de vacuna,
fabricar diferentes clases de vacunas entre las que contienen los antígenos preS1 y PreS2, o
asociarse a otras drogas para mejorar la respuesta como los interferones o la Thimosina. (8)(9) y
otros intentos también se han evaluado para reducir el número de dosis.
La clásica vacuna de DNA recombinate de Hepatitis B usa Saccharomyces cerevisae, la cual ha
demostrado ser efectiva en muchas publicaciones con porcentajes de seroconversión del 70.7%
(3) al 98.2% Kang et al. (9); Sin embargo, las vacunas que usan el sistema de Saccharomyces
cerevisae tienen algunas limitantes:
Limitantes de S. cerevisiae como huésped para la producción de proteínas heterólogas

Frecuentemente es difícil obtener altos campos de producción.

- Baja estabilidad del Plásmido.

- Se produce hiperglicosilación de las glicoproteínas. (La longitud de proteínas de las
cadenas de manosa es en promedio, más de 40. Con H. Polymorpha es sólo de 8-14
unidades).

De esta manera se afectan significativamente la inmunogenicidad, actividad, y vida media
del producto” (10)

Este estudio demuestra que la vacuna de Hepatitis B Hepavax Gene es inmunogénica en
personas sanas peruanas, mayores de 10 años, alcanzando títulos protectores del 100% y
con respuesta superior a 100mIU/mL en el 97.29% de los vacunados en el grupo A y con
respuesta superior a 100 mIU/mL del 93.33% en el grupo B, resultados comparables a este
fueron obtenidos en otras publicaciones (12) (13) (14).

Esta vacuna de DNA recombinante fue también encontrada ser bien tolerada y segura en
esta serie de pacientes y entre otras publicaciones (12) (13) (14).

Ningún evento adverso severo fue encontrado, la mayoría de las reacciones fueron locales
y se resolvieron espontáneamente.

Debemos destacar que los títulos de seroconversión observados en las personas del grupo
A son más elevados que en el grupo B. justificamos estos resultados porque la mejor
respuesta siempre se ve en pacientes jóvenes; por otro lado, los títulos son realmente altos
comparativamente con otros estudios. (3) (13) (14)(15).

Sobre la respuesta de anticuerpos anti Hepatitis B (anti HBsAg) se acepta que son
respondedores inmunes los que hacen un título de 10 mUI/mL o superiores. A más alto el
título más persisten los anticuerpos anti HBsAg Cuando el título de anti HbsAg cae por
debajo de 10 la infección puede ocurrir pero siempre será subclínica y en general sin lograr
detectarse el HBsAg en el suero. No hay estudios que muestren que hay casos agudos
entre respondedores pero si algunos asintomáticos y ninguno con evidencia de convertirse
en portadores crónicos. (16) (17)
CONCLUSIONES:
1. 67 personas terminaron el estudio de un total de 188 personas admitidas inicialmente.
2. La inmunogenicidad fué satisfactoria: 100% de los participantes en el Grupo A y 100% de
los participantes del Grupo B. Con una media aritmética de 28,583.92 mIU/mL y una media
geométrica de 5,754.32 mIU/mL en el Grupo A. Con una media aritmética de 8,708.3
mIU/mL 2 y una media geométrica de 2,179.32 mIU/mL en el Grupo B. El título medio
geométrico (5,754.32 mIU/mL) del grupo A es de los más altos publicados para Hepavax
Gene.
3. Los eventos adversos fueron del 4.69%. Ninguno fue severo.
4. La vacuna de DNA recombinante derivada de H. Polymorpha es inmunogénica y segura en
personas sanas peruanas mayores de 10 años aplicada en tres dosis los días 0, 30 y 180
días.