TEMA 4 – BIOTECNOLOGÍA ADN Es una macromolécula constituida por dos cadenas de nucleótidos enlazados en doble hélice, complementarios entre sí. El ácido fosfórico y la desoxirribosa forman el esqueleto de la cadena. Alineados de cadena a cadena están las bases nitrogenadas ( la adenina sólo se une a la timina mediante dobles enlaces de puentes de H y la citosina a la guanina con triples enlaces de puentes de H. Son los pares de bases) En el interior del núcleo de las células eucariotas, el ADN está asociado a una proteína especial llamada histona, formando la cromatina. Durante la división celular, la cromatina se condensa formando los cromosomas. Cada fragmento de cromosoma y por lo tanto de ADN es un gen que da las instrucciones necesarias para sintetizar una proteína. EL ADN SE REPLICA Es la única molécula de los seres vivos que puede hacer una copia exacta de si misma. Sucede justo antes de la división celular, así las células hijas heredan la misma dotación genética que la célula madre, transmitiéndose la información genética de generación en generación. La doble hélice del ADN se abre y cada una de las hebras sirve de molde para sintetizar su cadena complementaria. El ADN polimerasa es una enzima que va uniendo nucleótido a nucleótido la hebra molde con la nueva, que es exactamente igual a la cadena a la que estaba previamente unida la hebra molde. Al final del proceso hay dos moléculas de ADN. Si hay errores durante la replicación, da lugar a mutaciones, algunas de las cuales pueden provocar enfermedades. EL ADN TRANSMITE LA INFORMACIÓN Los genes llevan las instrucciones para la síntesis de una determinada proteína. Esta información se encuentra en todas las células de todos los seres vivos. Las proteínas son macromoléculas formadas por la unión de aminoácidos (hay 20 tipos diferentes). Cada proteína se caracteriza por su estructura en el espacio y por su secuencia. Las funciones de las proteínas son muy diversas, formar estructuras (músculos, uñas, etc), funciones de los órganos, caracterizan a los individuos (color de la piel o los ojos) - Transcripción y traducción En las células eucariotas el ADN está protegido en el interior del núcleo y la síntesis de la proteína se realiza en los ribosomas que son unos orgánulos situados en el citoplasma. El ácido ribonucleico ARN lee la información genética del ADN en el núcleo y lo lleva hasta el citoplasma donde se genera la proteina. El ARN tiene una sola cadena de ribosa en lugar de dexosiribosa y tiene las mismas bases salvo la timina que es sustituida por el uracilo, que también se unirá a la adenina. La transcripción es el proceso de síntesis de ARN, Este sale del núcleo con la información genética que llevará a los ribosomas para sintetizar las proteínas, se llama ARN mensajero. La traducción es el proceso en el que el ARNm se une a un ribosoma, el cual lee y traduce la información del ARN para sintetizar la proteína. El código genético asigna la equivalencia entre el lenguaje del ARNm (secuencia de bases) y el lenguaje de las proteínas (secuencia de aminoácidos). El ribosoma se mueve a lo largo de la cadena de ARNm y asigna a cada grupo de tres bases (codón) del ARNm el aminoácido que le corresponde procedentes del ARN de transferencia ARNt, para formar una nueva proteína. BIOTECNOLOGÍA Es la manipulación del material genético (ADN) de los organismos para desarrollar nuevas plantas, mejorar cultivos, desarrollar microorganismos para luchar contra las plagas, mejorar la sanidad animal, mejorar tratamientos en medicina, nuevas vacunas y fármacos, cuidar el medio ambiente, etc. - Herramientas biotecnológicas: Tecnología del ADN recombinante: permite aislar cualquier zona del ADN, crear copias y averiguar la secuencia de los nucleótidos. Ingeniería genética: se consigue la transferencia de genes de unos organismos a otros consiguiendo organismos trasgénicos (organismos genéticamente modificados OGM) Clonación celular: permite la reparación de tejidos y órganos. Cultivo de células y tejidos: se mantiene in Vitro células y órganos durante largos periodos de tiempo. TECNOLOGÍA DEL ADN RECOMBINANTE. Consiste en generar ADN formada por la unión de segmentos de ADN de origen diferente Ejemplos: - Enzimas celulares: Las enzimas de restricción cortan un ADN extraño y las enzimas ligasas unen fragmentos del ADN cortado con trozos de otro ADN de otro organismo formando los ADN recombinantes. - Análisis de fragmentos de ADN: Una vez cortados los trozos de ADN, se pueden separar por el proceso de electrolísis en gel de agarosa. Los trozos más pequeños se mueven más deprisa hacia el polo +, pues el ADN está cargado negativamente. Posteriormente se tiñe la muestra con bromuro de etidio para ver los trozos por fluorescencia observándose la huella genética de un determinado organismo que permite averiguar la identidad de un individuo. - Hibridación del ADN: dos hebras de ADN de cadena sencilla, una de las cuales es una sonda de ADN (fragmento artificial de ADN de cadena sencilla marcado con radiactividad o fluorescencia) se unen por ser complementarios, para originar una cadena de ADN. Sirve para identificar la presencia de un gen. Si se quieren analizar miles de genes se utilizan los biochips o chips de ADN, son láminas de vidrio donde en cada una de sus celdillas se desarrollan las reacciones de hibridación. Esta técnica ha permitido identificar mutaciones en genes que pueden causar determinadas enfermedades, personalizar medicamentos, desarrollar nuevos tratamientos, etc. - Clonación de ADN: es la producción de copias idénticas de fragmentos de ADN. Para ello el fragmento de ADN se introduce en una molécula transportadora (vector de clonación), capaz de entrar en una bacteria y autorreplicarse dentro de ella, consiguiéndose clones de bacterias transformadas. - Amplificación del ADN: Mediante la PCR (reacción en cadena de la polimerasa, se originan millones de copias de un segmento específico del ADN. El proceso consta de un ciclo de 3 fases que provoca la obtención de una gran cantidad de copias. - Secuenciación del ADN: Para conocer la secuencia de miles de genes y genomas completos de numerosos organismos. TÉCNICAS DE INGENIERÍA GENÉTICA Consiste en la manipulación del ADN para conseguir nuevas formas de vida. Mediante la ingeniería genética se pueden transferir genes entre especies diferentes. - OGM (Organismos genéticamente modificados) o transgénicos Son organismos que contienen algún gen procedente de otro organismo (transgen). Se obtienen plantas y animales con alguna característica que interesa al ser humano: • MICROORGANISMOS MODIFICADOS: para mejorar el medio ambiente, eliminando contaminación (por ejemplo eliminación con bacterias, de mareas negras, de metales pesados), producir biocombustibles (biodiesel y bioalcohol), plásticos biodegradables, producción de enzimas, por bacterias, como detergentes, medicamentos como los antibióticos. • ANIMALES TRANSGÉNICOS: Producir animales más resistentes y mejor calidad de los subproductos obtenidos del mismo, diseñar animales genéticamente modificados para el estudio del desarrollo de enfermedades, obtener órganos de animales para transplantes (xenotransplantes), animales para obtener medicamentos. • PLANTAS TRANSGÉNICAS: Consiste en mezclar genes de diferentes plantas para obtener mezclas de plantas que por si mismas no se podrían cruzar, para conseguir plantas más resistentes a las plagas, a las sequías, heladas, contaminación, modificar el periodo de maduración, el valor nutritivo de sus frutos y obtención de fármacos. - Terapia genética: Para curar y prevenir enfermedades producidas por un gen defectuoso, introduciendo en el paciente un gen terapéutico que reemplaza el defectuoso. Si se pretende curar una enfermedad, terapia génica somática, si se pretende prevenir enfermedades, terapia génica de la línea germinal introduciendo células transgénicas en un óvulo fecundado. CLONACIÓN REPRODUCTIVA Consiste en obtener organismos genéticamente idénticos. Consiste en eliminar el núcleo de un óvulo de un animal donante y sustituirlo por el núcleo de una célula procedente del animal que se quiere clonar, que posteriormente se implanta en el útero de una hembra. Con las técnicas actuales sólo algunos de los embriones clonados sobreviven y algunos de los que nacen desarrollan enfermedades y mueren pronto. CÉLULAS MADRE Son aquellas que pueden dividirse indefinidamente produciendo más células madre o en ciertas condiciones especializarse obteniéndose células musculares, sanguíneas, etc. Tipos de células madre: - Embrionarias: El cigoto ( óvulo fecundado por un espermatozoide) es una célula capaz de generar todas las células del organismo, totipotentes. Las células madre embrionarias del embrión temprano son pluripotentes, son el origen de todos las células del organismo aunque por sí solas no lo pueden conseguir (necesitan la placenta). - Adultas: son multipotentes, son capaces de originar muchos tipos celulares, pero no todos. Se pueden obtener de la sangre o la piel. - Fetales: proceden de fetos que no han llegado a desarrollarse. - Del cordón umbilical: son similares a las de origen embrionario. - Germinales embrionarias: de óvulos y espermatozoides, son totipotentes. APLICACIONES: - Probar nuevos fármacos. - Estudiar las fases iniciales de un embrión y su control genético. - Trasplantes, autotransplantes, regenerar tejidos de órganos dañados, etc.