Estrategias de control del Virus del Síndrome de la Mancha Blanca

Estrategias de control del Virus del
Síndrome de la Mancha Blanca
Dr. Arturo Sánchez Paz
WSSV: un patógeno letal para camarones
Datos: http://www.cosaes.com/
WSSV: un patógeno letal para camarones
•
Extremadamente virulento y letal (mortalidades
•
Relación filogenética distante con otros DNA
virus (Whispovirus, Nimaviridae)
•
Genoma muy grande (292-307 kpb)
•
Infecta un amplio rango de hospederos (~100
•
Más virulento conforme su genoma
disminuye su tamaño (Zwart et al., 2010)
•
No hay tratamientos terapéuticos o
profilácticos.
masivas 80-100% en 5 días)
especies de crustáceos, y rotíferos y poliquetos) (Sánchez-Paz
et al., 2010)
Estrategias de control contra el WSSV
Productos derivados de plantas
• Extractos de plantas de origen marino o
terrestre con actividad antiviral contra el WSSV.
• Detalles importantes a considerar. Uso correcto
de controles.
• Extracto acuoso de Cynodon dactylon y extracto
metanolico de Momordica charantia con potente
actividad anti-WSSV: 100% sobrevivencia de
Penaeus monodon (10-15 g) (Balasubramanian et al.,
2007)
Estrategias de control contra el WSSV
Productos derivados de plantas
• Los extractos de ambas plantas se mezclaron con
el inoculo viral, se incubó 3 h a 29°C, y
posteriormente se administró vía intramuscular.
• ¿Que efecto tuvieron los compuestos del extracto
sobre el inóculo viral?
• Se ha reportado que viriones de WSSV pierden
su capacidad infectiva al mantenerlos 4 h en
agua de mar (He et al., 1999).
Estrategias de control contra el WSSV
Productos derivados de plantas
• Fucoidan
de
algas
pardas
(Sargassum
polycystum
y
Cladosiphon
okamuranus):
reducción
significativa
de
mortalidad
(sobrevivencias
máximas de 93 y 77% 10 dpi,
respectivamente) de camarones
infectados con WSSV (Takahashi et al.,
1998; Chotigeat et al., 2004).
Estrategias de control contra el WSSV
Productos derivados de plantas
• Se sugiere que el fucoidan inhibe el acceso de
WSSV a las células blanco del camarón.
Administración oral.
• Inóculo con carga viral desconocida.
• Y… el inóculo diluido en agua de mar (1:8000)
por 2.5 h.
• En todo caso… es necesario dilucidar el
mecanismo de acción.
Estrategias de control contra el WSSV
Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral
Estrategias de control contra el WSSV
Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral
Bustillo-Ruíz et al., 2009
Estrategias de control contra el WSSV
Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral
Estrategias de control contra el WSSV
Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral
• VP31, VP36A, VP36B o VP281, VP110, VP136A,
VP187 y VP664 motivo RGD.
• RGD: ligando con integrinas en la superficie
celular.
• Uso de péptidos sintéticos para bloquear
receptores de integrina. Sin efecto inhibitorio
(Jiravanichpaisal et al., 2006).
Estrategias de control contra el WSSV
Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral
•
Uso de péptido sintéticos RGDT para bloquear
receptores de integrina. Efecto inhibitorio (Li et al., 2006)
•
RGDT? T brinda mayor especificidad y afinidad a la
interacción virus-célula hospedero (Plow et al., 2000).
Estrategias de control contra el WSSV
Bloqueo de reconocimiento celular y entrada viral
•
Uso de anticuerpos contra proteínas de WSSV. Resultados
muy alentadores (van Hulten et al., 2001b; Yi et al., 2004; Musthaq et
al., 2006, Chen et al., 2010; Patil et al., 2011).
1 Ab
2 Abs
3 o 4 Abs
Estrategias de control contra el WSSV
Atacando el proceso de replicación viral
• Replicación viral:
“supervivencia”.
punto
crítico
para
su
• Comprensión de los mecanismos de replicación
del WSSV: desarrollo de agentes terapéuticos
efectivos anti-WSSV.
• Poca información al respecto.
• Difícil encontrar compuestos que limiten la
replicación viral sin interferir con procesos
celulares del hospedero.
Estrategias de control contra el WSSV
Atacando el proceso de replicación viral
• WSSV no depende del genoma del hospedero
para replicarse.
• Genoma de WSSV: ribonucleotido reductasa (RR),
timidilato sintasa (TS), desoxiuridin-trifosfato
nucleotidohidrolasa (DTNH) y DNA polimerasa
(DNApol).
Estrategias de control contra el WSSV
Atacando el proceso de replicación viral
• La timidilato sintasa (TS) de WSSV… un blanco
muy interesante!!!
•
Homodímero
obligatorio
•
Dos sitios activos.
•
Entre ambos
monomeros existe una
interface que permite su
unión
Estrategias de control contra el WSSV
Atacando el proceso de replicación viral
•
La secuencia de la a-helice N-terminal de la interface
de la TS de WSSV muy diferente a la de camarón.
WSSV
Shrimp
•
MEG-EHQYLNLVREIL
MRHDEYQYLDLIRQIM
*. *:***:*:*:*:
15
16
Desarrollo de un inhibidor que se ligue específicamente a
la interface del monomero viral, con baja afinidad por la
enzima del camarón (Arvizu-Flores et al., 2009).
Estrategias de control contra el WSSV
Atacando el proceso de replicación viral
• RNAi: su uso contra WSSV ha sido ampliamente
divulgado (Robalino et al., 2004; Westenberg et al., 2005; Robalino et
al., 2005; Robalino et al., 2007; Kim et al., 2007; Xu et al., 2007; Wu et al.,
2007; Ongvarrasapone et al., 2008; Sarathi et al., 2008a; Sudhakaran et al.,
2011; Mejía-Ruíz et al., 2011)
Estrategias de control contra el WSSV
Atacando el proceso de replicación viral
Estrategias de control contra el WSSV
Atacando el proceso de replicación viral
La realidad
• Gran esfuerzo para desarrollar un agente
terapéutico contra el WSSV.
• Los resultados obtenidos son promisorios y
exigen mayor investigación.
• Áreas de oportunidad claras en las que se debe
profundizar.
• La mayoría de los tratamientos mencionados se
administran vía intramuscular u oralmente.
La realidad
• La inyección de millones de organismos en una
granja: tarea físicamente demandante
• Esta vía de administración no es factible para
animales tan pequeños (Johnson et al., 2008).
La realidad
Vía de administración oral
•No se asegura la administración de dosis mínimas
requeridas, ni la misma dosis para toda la población.
•Se desconoce si el tratamiento es totalmente
asimilable por las células blanco, o si sufre algún
efecto durante la digestión.
•Efectos secundarios? Impacto ecológico?
•Lixiviación… encapsulación: incremento en costos.
Perspectivas
• Avances recientes permiten visulaizar el
desarrollo de un tratamiento antiWSSV en el
mediano plazo (quizás unos 10-15 años).
• Aún se requiere una gran cantidad de estudios.
• Autorización
reguladores.
de
los
• Producción a gran escala.
• Precios accesibles.
órganos
sanitarios
Estrategias de control del Virus del
Síndrome de la Mancha Blanca
Dr. Arturo Sánchez Paz
Centro de Investigaciones Biológicas del Noroeste S. C. (CIBNOR)
Hermosillo, Sonora.
E-mail: [email protected]