Reproducción clonal in vitro de plantas de Jatropha curcas para el

Reproducción clonal in vitro de
plantas de Jatropha curcas para
el establecimiento del cultivo en
el CNEABR.
Ing. Carmen Gutierrez Córdoba
Objetivo General
Implementar el protocolo de
micropropagación de tempate
(Jatropha curcas) e Higuerilla
(Ricinus comunnis).
Objetivos Específicos
 Validar el protocolo de reproducción in vitro de Jatropha
curcas y Ricinus comunnis.
 Evaluar diferentes tratamientos en la micropropagación de
Jatropha curcas y Ricinus comunnis.
 Regenerar plantas in vitro a través de diferentes
explantes.
 Aclimatar las plantas cultivadas in vitro.
Metodología
 Fase 0: Selección y preparación de las plantas
madres.
 Fase 1: Elección de los explantes y su
desinfección.
 Fase 2: Establecimiento in vitro
 Fase 3: Multiplicación
 Fase 4: Regeneración y enraizamiento
 Fase 5: Aclimatación.
 Fase 0: Selección y preparación de las plantas madre
Las semillas de Higuerilla y J. curcas se
colectaron en Guápiles y las plantas
madres fueron traídas de Santa Cruz,
Guanacaste.
Fase 1: Elección de los explantes y su desinfección.
Desinfección
Explantes
1-Lavado con agua y jabón
• 1-Semilla Sexual
2- Alcohol de 70° por 10 min.
(semilla)
3-Hipoclorito de sodio al 1% por
15 min. (Hoja)
•
4- Flameado.(Semilla) con alcohol de
•
Hipocótilo
• Hoja embrionaria.
• 2- Hojas
96°
Fase 2: Establecimiento in vitro por
medio de semilla
• Las semillas se pusieron a
germinar en el medio M.S
completo.
Macronutrientes
micronutrientes
Quelatos de hierro
vitaminas
Ph5.8
Phytagel, azúcar
Fase3: Establecimiento in vitro utilizando
explantes de hoja, e hipocotilo.
Los explantes fueron inoculados en tres medio diferentes todos con el
MS completo lo que vario fueron los reguladores:
de crecimiento:
Medio M.S
Tratamiento 1
IBA
2mg/l
BA
3mg/l
2,4D
Tratamiento
2
Tratamiento 3
2mg/l
BAP
2mg/l
AIA
0.5mg/l
Resultados Obtenidos
Producción de callo embriogénico
Resultados obtenidos
1-El medio MS completo dio buenos resultados
para la germinación de semillas . Algunas
semillas no germinaron debido a que se
presento contaminación por hongos
principalmente endógenos muchas eran
semillas viejas contaminadas.
Se recomienda utilizar semilla viables de
buena calidad no contaminadas si se va a
realizar una multiplicación masiva de jatrofa
in vitro, utilizar semillas debidamente
identificadas.
RESULTADOS
OBTENIDOS
2-Los tratamientos 1 y 2 presentaron una
producción de callo en un 100% en
explantes de hipocotilo y hojas.
Se dio una multiplicación alta de callo
friable . Se han realizado tres
subcultivos a intervalos de 2 meses
cada uno.
Se puede recomendar estos dos medios
para la reproducción masiva de callo a
través de estos explantes en jatrofa,
Callos obtenidos en
explantes de hojas de
jatrofa
Resultados obtenidos
• 3-El tratamiento 3 es para lograr
la regeneración de plantas a
través de callo sin embargo hasta
la fecha los resultados no han
sido positivos todavía se
mantiene el callo sin regenerar
plantas. Algunos callos
regeneraron algunas hojas y
raíces pero se secaron.
Regeneración de algunos
callos
Multiplicación de callo a través de
hojas de jatrofas
Regeneración
Resultados obtenidos
• Se recomienda realizar un mejor
control de las condiciones físicas en el
cuarto de crecimiento, aquí se tienen
ornamentales, orquídeas y otro tipo
de plantas esto no permite controlar
estas condiciones especificas para
cada cultivo por lo que afecta su
desarrollo. Se tienen 2 aires
acondicionados que no logran
homogenizar la temperatura en el
cuarto de crecimiento
Resultados obtenidos
• Se recomienda instalar otro aire
acondicionado en el área de crecimiento el
año entrante para mejorar las condiciones
físicas del área de trabajo.
• Se están probando cuatro medios nuevos
para regeneración de plantas a través de
callo. Los resultados se verán el próximo
año hasta el momento no se han tenido
resultados. Se recomienda realizar la
compra de reguladores de crecimiento
nuevos para ver si estos medios no dan
resultado porque los reguladores a usarse
están vencidos.
Medio para regeneración
de plantas
TRATAMIENTOS
#1 MS
completo
#2 MS
completo
Acido giberelico
0.1ml/l
0.5mg/l
BA
KINETINA
IBA
#3 MS
completo
1.5mg/l
#4 MS
completo
0.5mg/l
0,04mg/l
0.05mg/l
2mg/l
1.5mg/l
• La transferencia tecnológica de estos
resultados se realizara incorporando
este protocolo en el curso auxiliar de
laboratorio para la micropropagación
de plantas , también impartiendo
charlas a instituciones o personas
interesadas reproducir jatrofa e
higuerilla in vitro
• Publicación del protocolo en el
boletín del núcleo agropecuario.