CAPITULO 4 EXPERIMENTOS DE a i g o l o i b Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 124 BI ODI GE ST OR C ASE RO El aparato que vamos a construir usa una botella grande de 18 litros como el biodigestor. Una mezcla de agua y desechos animales producirá el metano, el cual recogeremos en un globo de goma o de plástico. El frasco de 18 litros funciona como el estómago de un animal vivo y le da a las bacterias que producen el metano el ambiente cálido y húmedo que necesitan. MATERIALES - Botella de plástico de 18 litros. - Globo de goma extra grande o Pelota inflable. - Conector T de acuario - Manguera para acuarios - Válvula para acuarios (con llave) - Un corcho que quepa en la boca de la botella - Un mechero bunsen CONSTRUCCION Primero debemos preparar el sistema de recolección de biogas. 1. Cortamos unos 20 cm de la manguerita de plástico para acuario, luego insertamos uno de los extremos en el lugar por donde se infla la pelota de goma y sellamos lo mejor posible. En la foto se puede ver un globo plateado que tiene una pequeña manguerita por la cual se sopla para inflarla. 2. Co mp ro bamo s si al sop la r po r l a manguerita el globo se infla sin problema. Luego, tomamos el corcho y le hacemos un agujero en el centro para luego colocar en éste el conector T para acuario. Lo aseguramos con silicona caliente. 3. Ahora conectamos otro trozo de 40 cm de manguera de plástico para acuario a una llave para acuario. Esta sirve para cerrar o abrir la provisión de aire del acuario y nos servirá como llave de paso para el metano. En la foto usamos una llave de gas de cocina, la cual sin embargo es muy grande. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 125 4. En el dibujo al lado se puede ver como se Válvula hacen las diferentes conecciones. Notaremos que hemos usado unos conectores que son tubos de cobre, que son los recomendados, pero son caros y di fíci le s de co nsegu ir. To da s la s conecciones se pueden hacer por medio de mangueras de acuario que son bastante gruesas y resiste ntes. El glo bo o pel ota de goma simplemente sirve como recipiente del gas e impide que el frasco se rompa con la presión de éste primero. Uno de los extremos de la válvula se conecta a una manguera sujeta a un mechero bunsen en el cual se quema el gas. También se puede usar una pequeña cocina a gas. Tubos de goma Adaptador T Tubo de Cobre Corcho Tapa Tubo de goma Globo PREPARACION DE LA MEZCLA Primero debemos cortar una botella de gaseosa de scartabl e para hacer un gran embu do, colocamos este en la boca del frasco biodigestor y vertemos un poco de estiércol. Usamos un palito para empujar el estiércol si este se bloquea en el embudo. Debemos hacer que llegue hasta la cuarta parte de la botella como máximo. Luego vertemos agua hasta que llegue casi al cuello de la botella, pero sin bloquear la boquilla del conector T que está en el corcho. Con un palo largo removemos la mezcla de agua y estiércol dejando que escape cualquier burbuja d aire que haya quedado atrapada. Finalmente tapamos la botella con el corcho y colocamos el biodigestor en un lugar cálido como una ventana o al lado de un calentador. Si se coloca en una ventana, debemos tapar o pintar la botella de negro para evitar que crezcan algas en el interior. Al cabo de unos días notaremos que el globo o la pelota se comienza a inflar, lo que denota que se está produciendo gas metano. Debemos tratar a este gas con mucho cuidado, pues se inflama fácilmente. En la foto se puede ver el aparato terminado en pleno funcionamiento. Hacemos notar que se usó un globo de mylar (pl ate ad o) qu e se ven de el d ía d e lo s enamorados. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 126 COMO HACER PARA ESCUCHAR A UN PEZ ELECTRICO Escuchando Es cuchando al pez nariz de Elefante En casi todos los acuarios se puede encontrar una criatura especial men te maravill osa ll ama da Pe z N ari z d e Ele fa nte o más propiamente: Gnathon emu s petersii , un miembro de la familia de los Mormiridos. Aparte del interés por la “pinta” del animalito, hay un aspecto más facinante: emite pulsos de electricidad en el agua con los cuales puede localizar comida, otros peces y a su pareja. Es simple escuchar estas señales eléctricas con equipo sencillo y barato como un audífono piezoeléctrico o un pequeño amplificador. Un audífono piezoeléctrico es un dispositivo simple, aunque en desuso hoy en día se lo usa en los receptores de radio a cristal. Se lo inserta en el oído y es muy sensible a las señales eléctricas, por lo que es perfecto para detectar las señales eléctricas que emite el Pez Nariz de Elefante para convertirlas en sonido. MATERIALES PROCEDIMIENTO Se hace lo siguiente: Toma los electrodos de bronce, córtalos a l a me di da ad ecu ad a, e s de ci r, q ue sobresalgan unos 10 cm del borde del acuario, luego suelda alos xtremos los cables del audífono. Para escuchar al pez simplemente sumerge uno de los cables del audífono en un Acuario extremo del tanque de agua y el cable restante en el otro extremo del tanque, luego coloca el Electrodos de bronce (para soldar) audífono en tu oreja. Si el pez está quieto los Audìfono piezoeléctrico pulsos se escuchan de vez en cuando. Pero si se mueve se incrementa la frecuencia de los Amplificador pulsos hasta que se oye casi un zumbido. Esto ocurre porque al moverse el pez, necesita más Cables de conexion información del ambiente para poder navegar. Pagina 127 Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Usa los pulsos como un sonar para evitar obstáculos, encontrar comida, evitar a los depredadores y para localizar otros miembros de su especie. Para que la señal se escuche más fuerte necesitarás un amplificador. Un estéreo tiene usualmente una entrada auxiliar o para el to cad isco s qu e pue des u sa r. Simplemente conecta unos cables y pon los dos cables dentro del tanque de agua de la misma forma en que hiciste anteriormente. La foto muestra un pequeño amplificador a pilas. De Donde Vienen las Señales Con ayuda de un osciloscopio o tarjeta de sonido de una computadora podemos capturar la señal y observar el gráfico que produce, tal como te mostramos abajo. Un cable va a la entrada del amplificador y unos conectores del tipo quijada de caimán se aseguran a dos trozos de electrodos de bronce que se introducen al agua a la izquierda y derecha del tanque. El pez se ha colocado temporalmente en un acuario pequeño para que la fotografía sea más fácil de tomar. Con el ampli ficador, varia s p ersonas puede n escuchar a este pez. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 128 Abajo se puede ver uno solo de los pulsos. Coloca un micrófono en el amplificador para captar los sonidos a una tarjeta de sonido de una computadora y examina los gráficos en detalle. El Organo Eléctrico E léctrico El órgano eléctrico del Pez Nariz de Elefante es claramente visible en esta foto, es el par de bandas blancas que va entre las aletas en el medio del cuerpo. En la foto de al lado se ve el órgano que emite las senales, es un músculo modificado. Los pe ces son mu y se nsib le s a pe qu eñ as can tid ad es d e co nt amin an te s en su medioambiente; en Alemania se usa el Pez Nariz de Elefante para detectar cantidades muy pequeñas de plomo y tricloroetileno en el agua de abastecimiento de las ciudades. Como las descargas eléctricas son tan fáciles de detectar y monitorear con una computadora, es un método más barato que las pruebas químicas y se puede hacer en forma continua. El número de descargas por minuto decae considerablemente cuando el nivel de las imp ureza s se e le va, in clu so a n ivel es considerados muy por debajo de lo peligroso. gato eléctrico de China, el Parasilurus asota. Son grandes peces con poderoso órganos eléctricos que usan para atontar a su presa y a lejar a los de pred adores. Otros peces eléctricos son como el pez Nariz de Elefante, en los que las descargas eléctricas son muy pe queñas y se usan para navegación y comunicación. De la misma familia (llamados peces mormyriformes) que el pez Nariz de Elefante hay otras especies como Pollimyrus isidori, Gymnarchus niloticus, y Brienomyrus brachyistius. Otra familia de descargas débiles son los sudamericanos gymnotoides tales como Hypopomus artedi, Sternopygus, y Eigenmannia. Mientras que elHypopomus produce pulsos como el Pez Nariz de Elefante l os o tros produ ce n o nda s sinu soi dal es Otros Peces Eléctricos continuas. Los peces gymnotoides de Sud y Los más conocidos son la Anguila Eléctrica de Amé ri ca Ei ge nman ni a vi rescen s, Sud América Electrophorus electricus, y el pez Apteronotus albifrons son fáciles de conseguir Gato africano Malopterurus electricus. Otro en los acuarios de peces tropicales. Todos famoso pez eléctrico es la Manta Raya del ellos emiten ondas continuas, en vez de pulsos.. Mediterráneo Torpedo torpedo. Hay un pez Pagina 129 Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas MICROSCOPIO CON ESFERA DE VIDRIO INTRODUCCION El microscopio es un instrumento que te permite visitar las cosa s muy pequeña s, aquellas que incluso no puedes ver a simple vista y cuya existencia se ignoraba hasta la invención de este. Te invitamos a construir un sencillo microscopio que te permitirá investigar en el mundo del microcosmos. Nuestro microscopio se basa en uno muy antiguo inventado por un científico aficionado del siglo XVII llamado Anton van Leeuwenhoek. Como su antecesor, nuestro microscopio está basado en un sólo pero poderoso lente. OSC OP EL M MII CR CROS OS C COP OPIIO O LE EUWENHOEK LEE UWE NHOEK UWENHOEK E DE D Una g ran pa rte de lo s descu bri mi entos científicos en el siglo pasado ( y aún hoy en día) fueron hechos por aficionados. Leeuwenhoek era un simple vendedor de telas. Utilizaba para su trabajo pequeñas “perlas de cristal” para examinar las telas en de tal le . N in gu no de lo s co le ga s de Leeuwenhoek tuvo la idea de observar otros objetos porque tal vez pensaron que no valía la pena hacerlo. Si embargo Leeuwenhoek, tenía una natural e insaciable curiosidad y comenzó a observar todo a su alrededor. Examinó saliva, sangre, agua estancada, vinagre, cerveza y muchas otras cosas. Todas el la s era n in tere san tes, pe ro e l ag ua estancada (cuanto más sucia mejor) fue el mejor objeto de estudio. Descubrió y examinó muchos microorganismos. Mandó reportes a la Academia de Ciencias de Inglesa, la Real Sociedad de Londres, quienes distribuyeron estos reportes y todo el mundo se enteró de estos descubrimientos. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 130 Por tanto el fundador de la microbiología fue un simple aficionado a la ciencia, pero la comunidad científica se dio cuenta de la importancia de estos descubrimientos sólo d espu és d e dé cad as. Para ob ten er ampliaciones más grandes, Leeuwenhoek hizo lentes cada vez más pequeños, llegando a fabricar lentes de 1 a 2 mm de diámetro. Estos lentes son difíciles de sujetar y enfocar y para evitar estos problemas Leeuwenhoek los sujetaba entre dos placas de bronce. Colocaba lo que quería observar en la punta de un tornillo, de manera que podía regular en forma precisa la distancia entre el objeto y el lente el ob se rvado r ten ía que a cercar e l ojo a l instrumento y mirar a través del lente. Este instrumento estaba compuesto de un solo lente. Por la gran curvatura de la lente, éste era muy poderoso y permitía magnificaciones de más de 300X casi tanto como un microscopio mod ern o. Este mi cro sco pi o se l la ma “microscopio simple”, porque está formado por un sól o le nte . Al mi smo tie mpo qu e Leeuwenhoek, un físico inglés llamado Robert Hooke, había construido un microscopi o compuesto, es decir, hecho de dos lentes: el objetivo (que va abajo) y el ocular (por donde se mi ra ). Sin e mb argo la s técni ca s d e fabricación de los lentes no era perfecta y por tanto estos microscopios tenía serios defectos ópticos, lo que los hacía menos efectivos que los microscopios simples. Solo en la primera mitad del siglo XVIII se perfeccionaron los microscopios compuestos. L ee uwe nh oe k con struyó cie nto s d e microscopios y algunos de estos aún existen y se co nse rva n en muse os (fi g. 1). Esencialmente, este instrumento no era fácil de usar y no tenía un sistema de iluminación. NUESTRO MICROSCOPIO Y EL DE LEEUWENHOEK importantes mejoras. Adaptó el uso de los portaobjetos y le puso un espejo movible para la iluminación. La más importante innovación de Stong es la construcción de los lentes. Mientras que Leeuwenhoek pulía los diminutos lentes biconvexos en forma manual, Stong usaba un procedimiento mucho más simple que se basaba en la tensión superficial del vidrio fundido para obtener lentes esféricos muy precisos. Trabajaba con varillas de vidrio y un mechero bunsen, con los cuales obtenía muy buenos lentes. Algunos de los gráficos que verás en esta nota son del cita do autor norteamericano. En la revista “Scienza & Vita” de diciembre del ’93, se puede ver un microscopio hecho en base al de Stong, pero con un mecanismo diferente y otro tipo de sistema de iluminación. Este mi cro sco pi o p ue de l le ga r a En los años 50, en la Revista “Scientific Ameri- magnificaciones de hasta 200X. Lo que lo can ” , D .L. Sto ng re de scu brió el vi ejo hace muy útil en el campo, para su uso por los profesores de biología. microscopio de Leeuwenhoek y le dio Pagina 131 Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 132 CONSTRUCCIÓN MICROSCOPIO DEL El microscopio que vamos a construir se puede d ivid ir en cua tro pa rt es: -La pa rte ó pti ca El a pa rato de en fo qu e - La estructura de soporte o portaplatina - El sistema de iluminación Para que tengas una mejor idea, puedes ver las figuras 1 y 2, si deseas puedes hacer modificaciones. Nosotros ya hicimos muchas, algunas de las cuales te contaremos luego. La parte óptica está formada por la lente u objetivo. En este caso una esfera de cristal con un diámetro de unos 1.2 mm a 2.5 mm que funciona como una lupa. Es muy poderosa y debe ser mantenida a una distancia de unos pocos milímetros de los objetos que deseamos observar. COMO HACER EL LENTE Para fabricar el lente necesitas (fig.4) una varilla de vidrio con un diámetro de unos 3 mm a 5 mm, un mechero Bunsen y un par de pinzas. Para reducir la formación de burbujas de gas en las esferas de vidrio, debes lavar bien la varilla de vidrio con agua y jabón. Evita tocar con las manos la parte central de la varilla. Luego de ajustar la llama del mechero Bunsen, calienta la parte central de la varilla mientras la haces girar entre los dedos. Cuando el vidrio esté lo suficientemente caliente y blando, quita de la llama y jala con firmeza con ambas manos hasta obtener una varilla de unos 0.3 m. Rompe la varilla con las pinza por el medio, sin tocar con los dedos. Luego acerca a la llama la varilla delgada y notarás que se produce una esferita, déjala en la llama hasta que tenga un tamaño de 1.5 mm a 2 mm. Luego saca de la llama y Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 133 deja que la esfera se enfríe. Ahora rompe la varilla a unos 10 mm de la esfera. Usarás esta colita para pegar la esfera en su lugar. Lo que garantiza la forma esférica de la bolita es la tensión superficial del vidrio fundido. Habrán rastros de hidrocarburos en la esfera de vidrio que fabricaste, por lo que tendrás que limpiarla con alcohol y un papel suave. El poder de ampliación de l objetivo es mayor cuanto menor es su tamaño. Aunque la fuerza gra vitaciona l tien de a deformar la esfera, para obtener lentes de bu en a ca li dad de be s ma nte ne r l as dimensiones que te damos. Deberás preparar unas 10 esferitas, luego las examinas con una lu pa p ara escog er l a q ue te ng a l as dimen sio nes ad ecuada s y que esté si n burbuj as de aire y otras imperfeccione s. Habrán rastros de hidrocarburos en la esfera de vidrio que fabricaste, por lo que tendrás que limpiarla con alcohol y un papel suave. El poder de ampliación de l objetivo es mayor cuanto menor es su tamaño. Có mo pue de s d ete rmin ar su po der de amp liación? Si mple mente re suel ve esta ecuación: I=333/d, donde I es el poder de ampliación y d es el diámetro de la esfera expresado en milímetros. Por ejemplo para una esfera de 1.66 mm de diámetro tendremos una ampliación de 200 X MECANI SMO ENFOQUE DE Como necesita mos enfo car co n mucho cuidado, el lente está sujeto a una lámina de metal conectada a dos tornillos. El primero Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 134 sirve para el enfoque y el segundo para el a ju st e fi no . El objetivo (lente) se coloca en una de las láminas sobre un agujero. En la fig. 3 se ven las dimensiones. La forma en U le da a las dos lá min as e stab il id ad . Como puedes ver en las figuras 2 y 3 la base del objetivo está curvada para darle más estabilidad. LA PORTAPLATINA La portaplatina es simplemente una caja de madera con dos aberturas a los lados. Está sujeta con pegamento y clavos. La parte de arriba debería tener un material como Formica, pero no es muy necesario. Lo que sí debes hace r es un agujero de unos 10 mm d e diámetro para que pase la luz del iluminador. También debes hacer dos agujeros para los tornillos. SISTEMA DE ILUMINACIÓN Esta es una parte crítica, porque una buena iluminación nos permitirá observar los objetos con nitidez. La luz del sol no sirve, así que es mejor usar un pequeño foco de linterna. MONTANDO EL OBJETIVO El objetivo debe ser pegado bajo la lámina de e nfo qu e e n e l a sie nto cón ico (f ig 3). Para pegar el lente coloca un poco de pintura para uñas en la colita (fig. 5). Sin tocar el lente con los dedos, debes presionarlo un poco hacia abajo para eliminar espacios, de hecho, si pasa algo de luz por los bordes, la nitidez de la imagen se reduce bastante. USO DEL MICROSCOPIO Este instrumento sirve para observar objetos transparentes. Por esta razón es mejor escoger objetos pequeños y transparentes. Debes colocar el objeto en una portaobjeto y taparlo con un cubreobjeto (fig. 6). Ten cuidado al bajar el lente, no debe mojarse ni ensuciarse. Enciende el iluminador, coloca al centro el objeto y coloca tu ojo tan cerca como sea posible del lente. Ahora enfoca con los tornillos hasta que se vea bien la imagen (fig. 7). Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 135 MICROSCOPIO ELECTRONICO (IMAGE NE S EN LA COMPUTADORA) Esta es una guía que permite construir, paso a paso, un microscopio USB. No hace falta ser un experto de la electrónica para conseguirlo, ni tampoco disponer de herramientas especiales. Solo hace falta una webcam USB de las más baratas, un LED blanco de alto brillo, un resistor y ganas de trabajar un rato. Si te animas, en aproximadamente una hora puedes tener tu microscopio conectado al computador. En realid ad, lo que vamos a hacer es substituir el ojo humano por la cámara web. Para ello, necesitamos en primer lugar desarmar la webcam, descartando la “cascara” plástica que la protege. Solo nos hará falta la placa electrónica y el dispositivo óptico que hay en su interior. Para desarmar la cámara solo necesitaras un destornillador y un par de minutos. Una vez hayas desarmado la webcam, quizás qui era s pro te ger los circu itos del lad o opuesto a la lente. Puedes utilizar alguna resina o pegamento plástico, siempre y cuando no sea conductor de la electricidad (la gran mayoría de ellos no lo son). El paso siguiente consiste en tomar el cable que une nuestra webcam con el ordenador y practicarle un corte a la funda que protege los conductores internos. Esta abertura, de unos 4 o 5 centímetros a lo largo del cable nos permitirá acceder a los cuatro cablecillos que hay en su interior. Veremos que uno de ellos es de color rojo, y otro negro. Estos dos cables corresponden a los +5V y GND del puerto USB. Los utilizaremos para alimentar el LED blanco de alto brillo que iluminará la muestra que queremos ver en el microscopio. Este LED debe conectarse eléctricamente a estos cables mediante una resistencia en serie, ya que un LED típicamente funciona con una tensión cercana a los 3V, y este conductor posee 5V. Una resistencia de 1/8 de watt y 220 ohm se encargará de reducir la tensión para que el LED no se dañe. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 136 A la hora de realizar las conexiones hay que tener cuidado de que el terminal más largo del LED sea el que se une al cable rojo. Caso contrario, no encenderá. Con esto terminamos las modificaciones de la webcam. Solo nos resta fijar la cámara y el LED sobre el microscopio. Deberemos fijar la lente de la cámara (sin separarla de la electrónica de control) al extremo del microscopio. Esta cámara reemplazará a tu ojo, y enviara las imágenes al ordenador. El LED se coloca debajo del soporte que sostiene las muestras a analizar. Seguramente deberás usar más pegamento o alguna cinta adhesiva para fijar todo. Tomate tu tiempo, de manera que todo quede firme y no demasiado desprolijo. Una vez que hemos hecho esto, conectaremos el cable de la cámara al puerto USB del ordenador. Utilizando el mismo programa que empleabas para ver tu bonita cara en la pantalla del PC podrás ver lo que pongas en el portaobjetos del microscopio. Es posible que debas hacer algunos ajustes con los controles del microscopio para que la imagen aparezca nítida, tal como lo haces cuando usas tu ojo para mirar. Fibras de algodón, aumento de 600x Granos de polen, directo a la pantalla de tu PC. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 137 PUN TO CIEGO DEL OJO La retina es el tejido nervioso que recubre la parte de atrás del ojo. Sobre ella se forman las imágenes que nos dan la sensación de visió n. Está formad a po r u na s cél ul as especialmente sensibles a la luz llmadas conos y bastoncillos. La retina está conectada al cerebro por medio del nervio óptico. El punto en el que éste se une a la retina se denomina pun to c ie go po r ca re cer de cél ul as fo tose nsi bl es (se nsi bl es a l a l uz). Normalmente no percibimos el punto ciego ya que al ver un objeto con ambos ojos la parte del mismo que llega sobre el punto ciego de uno de ellos, incide sobre una zona sensible del otro. Si cerramos un ojo tampoco seremos conscientes de la existencia del punto ciego debido a que el cerebro normalmente nos engaña y completa la parte que falta de la imagen. Esta es la razón de que no fuese conocida la existencia del punto ciego hasta el siglo XVII. Un experimento para comprobar la existencia del punto ciego · En una cartulina dibuja una cruz y un círculo como se ve en la siguiente figura: · Coloca la cartulina a unos 20 centímetros del ojo derecho. Cierra el izquierdo, mira la cruz con el ojo derecho y acerca lentamente la cartulina. Llegará un momento en que el círculo desaparecerá del campo de visión. En este momento su imagen se forma sobre el punto ciego. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 138 OBSERVANDO EL ADN FUNDAMENT FUND AMENTO AMENT O T TE EÓRICO ÓRICO El ADN es una de las partes fundamentales d e lo s cro moso ma s, son estructu ras constituidas por dos pequeños filamentos o brazos, que pueden ser iguales o desiguales, están unidos por un punto común llamado Centrómero; varían en forma y tamaño, pueden verse fácilmente al momento de la división celular por medio de un microscopio. L os cromoso mas q uími ca men te está n formad os p or p ro teín as y po r el Ácid o Desoxiribonucleico o ADN. Estructur Estr uctura uctur a del ADN El ADN está formado por unidades llamadas nucleótidos, cada una de las cuales tiene tres sustancias: el ácido fosfórico, un azúcar de cinco carbonos llamada pentosa y una base nitrogenada. El ácido fosfórico forma el grupo fosfato; la base nitrogenada es de cuatro clases: adenina (A), guanina (G), citocina (C) y timina (T). Según los descubridores del ADN, James Watson y Francis Crick, el ADN está formado por una doble cadena de nucleótidos que forman una especie de doble hélice semejante a una escalera en espiral; a los lados se disponen en forma alternada un fosfato y un azú ca r y en lo s p el da ño s do s ba se s nitrogenadas. Funciones y Propiedades del ADN a) El ADN controla la actividad de la célula. b) Es el que lleva la información genética de la célula, ya que las unidades de ADN, llamadas ge ne s, son l as re sp on sab le s de la s características estructurales y de la transmisión de estas características de una célula a otra en la división celular. Los genes se localizan a lo largo del cromosoma. c) El ADN tiene la propiedad de duplicarse durante la división celular para formar dos moléculas idénticas, para lo cual necesita que en el núcleo existan nucleótidos, energía y enzimas. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 139 OBJETI OBJET OBJE TIIV V VO O El objetivo principal de este experimento es el de poder ob servar sin a yuda de ningú n instrumento óptico (microscopio) el ADN, utilizando únicamente materiales caseros cuyo costo no sea alto. QUE NECESITAS Agua Un chorro de líquido lavaplatos 1/2 cucharada pequeña de sal 1 cucharada pequeña de etanol helado o alcohol desnaturalizado o alcohol de 90 grados (alcohol blanco común) 2 vasos 1 recipiente transparente con tapa PROCEDIMIENTO Disuelve media cucharada pequeña de sal en medio vaso de agua. Añade un chorro de líquido lavaplatos. Este líquido se usará para descomponer las células y liberar el ADN. Ponte aproximadamente una cucharada grande (20 - 25 ml) de agua clara en la boca. ¡No te la tragues! Enjuágate la boca con fuerza moviendo el agua de una mejilla a otra unos 30 segundos. Así se desprenden algunas células de las mejillas. Escupe el agua en un vaso de agua limpio. Añade aproximadamente 1 cucharada pequeña (5 ml) de este fluido a un recipiente pequeño limpio con tapa (serviría un tubo de ensayo de 20 ml o un bote con una capa de plástico transparente). Añade una media cucharada pequeña (2,5 ml) de la solución de sal y líquido lavaplatos (salina/detergente). Coloca la tapa en el recipiente y muévelo arriba y abajo con suavidad 3 o 4 veces para mezclarlo (sin sacudirlo para que no salga demasiada espuma). Así se descompondrán los varios cientos de células de las mejillas existentes y se soltará el ADN del núcleo. Incorpora con cuidado una cucharada pequeña de etanol helado en el tubo. El etanol o alcohol de 90 grados (isopropanol) también se rviría; a se gúrate de que e stá he lado colocando la botella en el congelador algunas horas antes del experimento. Observa el punto en que se juntan las dos capas. Quizás veas cómo se forman hilos de ADN, como filamentos nubosos que se estiran hacia la capa superior (etanol). El ADN no es soluble en etanol, por lo que cuando el etanol se encuentra con la solución de ADN empieza a precipitar (a formar una sal de ADN). Podrás atrapar los hilos de ADN con un gancho de vidrio (o uno que hayas hecho con un cierre de plástico) sumergiéndolo con cuidado a través de las dos capas. Si no funciona, invierte suavemente el tubo varias veces hasta que se mezcle el alcohol. El ADN precipitado parecerá una pequeña bola de hilo blanco. Cada una de las células del cuerpo tiene el mismo ADN en su interior. Hemos utilizado células de las mejillas porque son fáciles de obtener. El ADN se encuentra en el núcleo de una célula, que es el "centro de control" de la célula. Para extraer el ADN, hemos tenido que descomponer la célula: el detergente rompe la membrana de la célula (la capa exterior de una célul a) y h ace qu e el ADN y otros componentes internos de la célula salgan flotando. Al añadir el etanol (o alcohol) se separan los hilos de ADN de los demás elementos de dentro de las célu las. En reali dad, los científicos utilizan una técnica parecida en el laboratorio para aislar el ADN para nuevos experimentos, como el perfilamiento de ADN. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Pagina 140 Primero, necesitamos conseguir algo que contenga ADN. Como el ADN es la parte fundamental de todo lo vi vo, cua lq ui er co sa vi va t ie ne AD N. Para este experimento podemos usar arbejas. Pero podemos usar otras fuentes de ADN como: · · · · Espinacas Hígado de pollo Frutillas Habas QUE SE HACE 1. Colocar en la licuadora: · · · 1/2 taza de arbejas 1/8 de cuchara de sal de mesa 1 taza de agua L icua r e n vel oci da d a lta p or 1 5 seg un do s La licuadora separa las células de las arbejas unas de las otras. En realidad se obtiene una sopa de arbejas. 2. Se vacía la “sopa” de arbejas a travéz de un colador en un recipiente alto(como una taza de medir). Se añaden 2 cucharadas de detergente líquido (unos 30ml) y se mezlcla con cuidado. Se deja que la mezcla repose por unos 15 minutos. Se vacía la mezcla en tubos de ensayo o recipientes angostos y largos hasta una tercera parte. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 141 3.- Se añade media cucharilla de enzimas en el tubo de ensayo y se agita con cuidado. No hay que agitar demasiado fuete o se puede destruir el ADN. La enzima que se usa es el suavizador de carne en polvo, el cua se lo puede encontrar en cualquier supermercado o tienda. Si no se dispone de suavizador de carne se puede usar jugo de piña, jugo de papaya o una solución para limpiar lentes de contacto. 4.- Ahora se toma el tubo de ensayo y se lo inclina un poco y se vacía en el interio alcohol 90 grados o alchohol blanco común (alcohol etílico) de manera que forme una capa sobre la mezcla de arbejas. Se vierte el alcohol hasta que se tiene la misma cantidad de alcohol como mezcla de arbejas. El ADN se leventará en el interior del alcohol. Se puede usar una varilla de madera para sacar el ADN de la mezcla de arbejas hacia el alcohol. El alcohol es menos denso que el agua,de manera que flota. Como se forman dos capas separa das tod a la grasa y la protein a que hemos sepa rado debe migrar hacia abajo, mientras que el ADN se dirige hacia el alcohol. El ADN es una molécula larga fibrosa que se entremezcla en el alcohol, tal como se ve en la fotografía al lado. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 142 ELECTROFORESIS La Electroforesis es una de tantas técnicas de separación de sustancias diferentes. Se basa en la diferente mobilidad de los iones (moléculas con carga negativa o positiva) en un soporte que se somete a un campo eléctrico. Los ione se trasladan en el sustrato más o menso rápidamente dependiendo de su tamaño, carga, etc. De acuerdo a la técnica que se use, el aparato consiste de dos pequeños reipientes que contienen un electrólito, un soporte (que puede ser papel filtro, tiras de acetato de celulosa, gel o un tubo capilar), una fuente de poder de corriente continua (CC) y dos electrodos. La electroforesis se usa para separar sustancias tales como aminoácidos, proteinas, ADN, etc. Como en el caso de la cromatografía, la gente usa diferentes soportes y solventes de acuerdo a las sustancias que se separarán. QUE SE HACE 1 - Como se ve en el dibujo explicativo, se colocan dos recipientes alejados unos 3 cm. Se vacía en cada recipiente un electrólito hecho de una cucharada de sal de mesa y otro de una cucharada de bicarbonato de soda (bicarbonato de cocina) cada uno disuelto en 1 1/2 tazas de agua. Se coloca una placa de vidrio sobre ambos recipientes (haciendo un puente) y sobre esta se coloca una tira de papel filtro mojado en el electrólito. Esta tira de papel tiene ambos extremos sumergidos en los recipientes conteniendo los eléctrólitos para cerra el circuito eléctrico. Se toma un lápiz y se dibuja una linea a travez del papel y se coloca una gota de sangre encima. Se cubre el papel con una segunda placa de vidrio (se pueden usar portaobjetos para microscopios). 45 voltios, se pueden usar pilas conectadas en serie Usar dos placas de vidrio plano Electrólito Linea dibujada con lápiz Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Papel filtro Página 143 Se colocan los electrodos en el electrólito de cada recipiente y se apliocan unos 45 voltis de corriente contínua (de 4 a 8 Voltios por centimetro). Para los electrodos se pueden usar alambres de nicromo (obtenidos de la resitencia de un aparato eléctrico como una estufa, etc.). Para la fuente de alimentación se puede usar un transformador o pilas secas concetadas en série. Al pasar un momento, se podrán observar 5 pequeños puntos moviéndose hacia el electrodo negativo. Estos puntos están constituidos por los diferentes componentes proteicos del plasma: globulinas (alfa, beta, gamma), albuminas y fibrinogeno. En realidad para qu estas sustancias se puedan observar mejor se debe usar un compuesto que tiña; se puede usar el jugo de un repollo rojo. 2 - Se pueden tratar de separar algunas sustancias que se usaron en los eperimentos de cromatografía y observar lo que ocurre. Hya que recordar que algunas de lassustancias pueden no ser ionicas y el experimento no funcionará. CUIDADO!: No se deben usar altos voltajes para levar a cabo este eperimento. No se debe tocar ninguno de los electrodos o la tira de papel. Es buena idea colocar un fusible a uno de los cables, el fusible actuará cuando haya una sobretensión o algo no salga bien. Es recomendable no usar más de 10 mA; cuando los puntos lleguen al final de su viaje es preferible desconectar las baterías o pilas. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 144 CENTRIFUGADORA SENCILLA La centrifugadora es un aparato mecánico que utiliza la fuerza centrípeta para separar sustancias de diferentes densidades. Una centrifugadora común es un recipiente que gira a gran velocidad. El único límite para la fuerza centrípeta es la resistencia del metal con el que está fabricado el aparato. Las fuerzas centrípetas pueden ser miles de veces más intensas que la fuerza de la gravedad. Las centrifugadoras pueden usarse para la separación rápida de sustancias que en condiciones normales se separarían lentamente bajo la influencia de la gravedad. Por ejemplo, puede acelerarse el secado de un sólido centrifugándolo. Este principio se aplica en el ciclo de centrifugado de las lavadoras automáticas convencionales. La primera centrifugadora construida con éxito, un separador de nata, fue inventada en 1883 por el ingeniero sueco Carl de Laval. Desde entonces se han hecho muchas otras aplicaciones del centrifugado. (Para la separación de isótopos, como los isótopos de uranio, para la separación de células de la sangre y para la separación de azúcar del jarabe). Cuanto más pequeño es el diámetro de una centrifugadora, mayores son las fuerzas y las aceleraciones que se ejercen sobre el contenido, y más rápidamente puede girar sin romperse. Las centrifugadoras más potentes, conocidas como ultracentrifugadoras, son tubos largos y estrechos que giran a gran velocidad. La ultracentrifugadora fue desarrollada hacia 1920 por el químico sueco Theodor Svedberg, y mejorada por el físico estadounidense Jesse Beams. En la ultracentrifugadora de Beams el rotor, la parte que gira de una centrifugadora, se suspende magnéticamente en el vacío y se mueve mediante un motor eléctrico. De este modo, la fricción se reduce a una cantidad insignificante; por ejemplo, si un rotor de 2 mm da vueltas en un vacío de 1/400.000.000 de la presión atmosférica a 100.000 revoluciones por segundo y la fuerza motriz se desactiva, sólo se perderán 100 revoluciones por segundo cada hora. Centrifugadora médica Esta centrifugadora se emplea para separar los componentes de la sangre antes de ser analizados. La sangre se introduce en un tubo de ensayo que a su vez se coloca en el rotor de la centrifugadora. El roto r se h ace gi rar a gra n vel oci da d, co n lo qu e l os componentes más pesados de la sangre va n a l fo ndo de l tu bo mie ntra s lo s más l ig ero s se quedan en la superficie. Centrifugadora médica Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 145 Las centrifugadoras pueden llegar a costar varios cientos de dólares, la que aquí describimos es una centrifugadroa muy práctica y que casi no cuesta nada. Se usa en su construcción una vieja licuadora de cocina, un trozo de tubo de plástico y un contenedor de comida. Nosotros usamos una licuadora Osterizer, pero se pude usar casi cualquier tipo de licuadora. En realidad esta es una “microcentrifugadora,” (debido a que usa tubos de plástico miniatura para llevar las muestras) y consiste de tres partes: una base con motor, un cilindro interior giratorio con los tubos de muestras y una barrera fija exterior, que proteje al usuario de las altas velocidades desarroladas en el aparato. Antes de construir este aparato se necesita comprar un juego de tubos para centrifugadoras. Perforar agujeros en el cilindro giratorio Cortar esta parte y lijar los restos Tubo de microcentrifugadora Contenedor para comida, de plástico Tapa de tubo PVC Tapa del contenedor de comida La mayor parte de las licuadoras tienen una pieza de plástico directamente sobre la base. SE debe cortar esta pieza con una sierra y lijar cualquier parte saliente con lija. Luego se hace la barrera fija con una contenedor de comida (de plástico grueso) que debe ser al menos de 20cm de diámetro y tener 10 cm de profundidad. Se corta un gran agujero en el centro de la tapa del contenedor de comida y se encola sobre el eje giratorio de la licuadora con un peghamento fuerte, de manera que el eje sobresalga del medio. Debemos asegurarnos que el pegamento no ha colda o el eje ni ninguna de las partes giratorias. El rotor de la centrifugadora se hace de una tapa de tubo de PVC, que es basicamente un cilindro corto con un extremo cerrado. Se debe conseguir en la ferretería local una tapa de unos 10 cm de diámetro y debe tener unos 0,3 cm de espesor. Con cuidado se taladra un agujero a mitad de la altura del cilindro usando briocas cada véz más grandes hasta obtener un orificio del tamaño de los tubos para las muestras. Se repite este procedimiento tres veces para crear un total de cuatro orificios espaciados uniformemente alrededor de la circunferencia del cilindro de plástico. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 146 El eje del motor debe estar alineado con precisióndirectamente al centro de masa del cilindro giratorio y pude ser que este no sea el centro geométrico. Para encontrar el centro exacto para perforar se suspende la tapa de un corto trozo de hilo y de manera que su superficie plana queda en ángulo recto con el piso. El centro de masa queda en algún lugar entre la linea que va directamente hacia abajo del punto de suspensión. Para encontrar exactamente donde perforar se coloca tiza en una plomada y se lo alinea con el hilo del cual está suspendida la tapa. Con cuidado se baja la plomada, casi sin tocar la tapa y se dan toquesitos para que tengamos un rastro de tiza que os indicará el centro. Esto se debe repetir al menos dos veces. Ahora se debe peroforar con presición en el punto que se encontró, asegurandonos que el agujero sea completamente vertical, para esto se debe usar un taladro de mesa. Algunos ejes de las licuadoras son cuadrados. Lo que se hace en estos casos es perforar un agujero que sea lo más exacto posible, usar pegamento para segurar la tapa al eje y rellenar con pegamento los espacios que queden entre la tapa y el eje. También se puede recurrir al pegamento de silicona caliente para rellenar los espacios. Ahora debemos verificar el balance del cilindro giratorio. Se colocan los cuatro tubos en los orificios y se hace funcionar la licuadora a la más baja velocidad. Si se nota algo de vibración se deben hacer ajustes al cilindro. Esto se logra quitando un tubo de ensayo a la vez y encendiendo la licuadora. Si al quitar un tubo se reduce la vibración, lo que hay que hacer es limar el borde del cilindro giratorio justo sobre el agujero donde se coloca el tubo de muestra. Esto se debe repetir hasta que el cilindro gire sin vibraciones notorias. Se puede llevar el aparto a una reparadora donde por una pequeña suma el técnico encontrará la velocidad a la que gira nuestra licuadora. Con esta información se pude calcular la aceleración precisa de las muestras con la fórmula que se da en las siguientes páginas. Para probar la centrifugadora, se llena dos tubos de muestra, con un mililitro de leche. Se vierte en uno agua y en el otro vinagre (5 por ciento de ácido acético). Se colocan las tubos en agujeros opuestos. (Nunca se hace funcionar la centrifugadora con un solo tubo porque esto la desbalanceará.) Se coloca la cubierta protecora de plástico y se hace funcionar la licuadora por tres minutos a su más baja velocidad. Cuando el rotor a parado se quita la cubierta y se extraen los tubos y se ve lo que hay en el interior. Notaremos que lo blanco de la leche se ha colocado en el fondo del tubo que contiene vinagre. sto es porque el ácido a bajado el pH causando que las moléculas de caseina, que dan a la leche su color, se precipiten. Al vaciar la solución que queda obtendremos una solución de proteína pura, lo que nos habrá abierto las puertas al mundo de la bioquímica. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 147 Midiendo Aceleracion La aceleracion, a, a la que se somete a un objeto mientras se mueve en una trayectoria circular de radio r y una frecuencia f esta dada por: La a ce le raci ón cau sad a p or la gra ved ad (aproximada mente 9.8 metros/seg undo 2 en la supericie de la tierra) nos da una conveniente medida de la aceleración — 1 “g.” Como la velocidad de los motores se mide en revoluciones por minuto, y el radio (en el tubo que gira) se mide en centímetros, la expresión se vuelve: simplificando: (donde f giros por minuto y r en centimetros). Usa esta formula para convertir las velocidades de rotacion para los diferentes botones (velocidades) de la li cua do ra en e l n úmero de u ni da des g q ue experimentan las muestras. Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 148 LOS HONGOS QUE SE NECE NE CESIT NECES SITA ITA 1 botella de Soda (gaseosa) 2 cuharillas de azúcar 1 paquete de levadura en polvo 1 globo grande Agua tibia 1 Embudo COMO SE HACE Vierte el paquete de levadura en polvo dentro de la botella de soda vacía. Llena la botella hasta la mitad de agua tibia (no caliente). Añade 2 cuhraillas de azúcar a la klevadura y al agua. Coloca tu dedo sobre la boca de la botella y sacude bien el contenido. Coloca el globo en la boca de la botella. Observa periódicamente cada 3 horas. QU E OC UR Se RE bu c o irá rbu ja m e n le v i nfla s d e za r d i g a du nd o g as á a en ie r e ra e gr ad y el fo r for er gí a z s u n u alm g lob m a r cu m a a , en u ca h o e nt o se d n e g a al se ió xi e st r y p g io . La d e s q r va (d i lib o d pr o o d ue se al g ó xid er a e ca ce s u c e r o in f lo b o d al l e. ai r bo no se oy e c e ha a rb . E , el ce on st qu o) e e e se ste Experimentos para Ferias de Ciencias - M. Vargas Página 149