Cromatografía líquida

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Cromatografía líquida
Clasificación
Cromatografía líquida convencional
Adsorción
Reparto
Cambio iónico
Exclusión
Afinidad
HPLC (CLAR)
Cromatografía líquida plana
Capa fina
Papel
Cromatografía líquida convencional
eluyente
capa protectora
(arena, papel de filtro)
relleno
disco de vidrio sinterizado
.
vacío
a)
b)
Cromatografía líquida
ADSORCION (CLS)
Adsorbentes: gel de sílice (SiO2.xH2O)
(activación)
alúmina (Al2O3.xH2O)
Disolventes: serie eluotrópica (ordenación según la capacidad relativa
para desplazar solutos de un adsorbente dado. Ej (gel de sílice)
agua>metanol>acetona>ac. etilo>cloroformo>benceno>tolueno> etc
REPARTO (CLL)
Normal: fase estacionaria polar; Inversa: fase estacionaria no polar
Soportes sólidos: gel de sílice, tierra de diatomeas, celulosa,
almidón, microbolas de vidrio
Fase estacionaria: agua (para muchos compuestos orgánicos)
Eluyentes: cloroformo, Cl4C, hidrocarburos, etc.
Cromatografía de cambio iónico
R-H+ + M+ <--> R-M+ + H+
Kd = [M+]R [H+] / [M+] [H+]R
Resinas de cambio iónico
Resinas ácidas y básicas
Exclusión molecular
Exclusión molecular
Exclusión molecular
Separación de proteínas
Geles
O
=
CH2=CH–CONH2
(CH2=CH–C–NH–)2CH2
Acrilamida
NN'-metilenbisacrilamida
CONH2 CONH
.
– CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH –
CONH
CONH
CH2
CONH
CH2
CONH CONH2
CONH2
– CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–
CONH
CH2
CONH2 CONH
CONH2
–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–CH2–CH–
CONH
CONH
Cromatografía de afinidad
C de A: fundamento
Equipo HPCL
Cromatógrafo HPLC
Bomba recíproca
Bomba recíproca
Bomba de desplazamiento
Válvula
de entrada
Eluyente
Válvula
de salida
Columna
Cámara conteniend
eluyente
Detector de índice de refracción
Detector electroquímico
Detector de fluorescencia
Derivatización
Bucle
Columna
Detector
Baño de agua
Bomba
.
Reactivo
.
Cromatografía plana
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en capa fina
Cromatografía en papel
Cromatografía en papel
Cromatografía de fluidos supercríticos
Zona
supercrítica
80
70
P, atms.
Punto crítico
(31.3ºC, 72.9 atms.)
60
Líquido
50
Sólido
40
30
Gas
20
10
Punto triple (–56.4 ºC, 5.11 atms.)
–80
–60
–40
–20
0
20
t, ºC
40
Descargar