BIOQUIMICA Y FISIOLOGÍA MICROBIANA Dra. Yenizey Merit Alvarez Cisneros Fisiología microbiana: Ciencia que estudia el funcionamiento de las células microbianas a nivel bioquímico. Incluye el estudio del crecimiento, el metabolismo y la estructura. Bioquímica: Es la ciencia que estudia la base molecular de la vida (proteínas, carbohidratos, lípidos y ácidos nucleicos), así como las reacciones químicas que sufren estas biomoléculas (metabolismo) para obtener energía (catabolismo) y generar moléculas propias (anabolismo). Microorganismo Los microorganismos también llamados microbios son seres diminutos que individualmente son demasiado pequeños para ser observados a simple vista. Nomenclatura La nomenclatura científica asigna dos nombres a cada organismo: genero y epíteto científico (especie). staphylococcus aureus Staphylococcus aureus S. aureus Escherichia Coli Escherichia coli E.coli Theodor Escherich Clasificación de los microorganismos Habían 5 reinos. Pero ahora hay tres Dominios – Eukarya, organismos con núcleo y organelos, multicelulares y algunos unicelulares (fungi, plantae, animalia y protista). – Bacteria, no compartamentalizados, unicelulares. – Archaea, unicelulares con membranas características y genoma muy alejado del bacteriano. Jerarquía taxonómica Dominio Reino BACTERIA No asignado Proteobacterias Filo Clase Gammaproteobacterias Orden Enterobacteriales Familia Enterobacteriaceae Género Escherichia Especie E. coli Bacterias Procariotas Archaea Microorganismos Eucariotas Protozoos Hongos Algas microscópicas Bacteria o eubacteria – Bacteria (con mayúscula) se refiere al dominio, – bacteria, (con minúscula) se refiere a los procariontes, los miembros de los dos dominios, Bacteria y Archaea son procariontes. Características: • Célula procariota • Ribosoma 70S • Pared bacteriana de peptidoglucano • Ausencia de esteroles en la membrana • Ausencia de mitocondrias, RE y AG. • Órganos de movilidad simples • Cromosoma único y plásmidos Archaea o arqueobacterias • Célula procariota •Pared bacteriana sin peptidoglucano •Morfología (bacilos, cocos y hélices) • Propiedades fisiológicas 1. Aerobios 2. Anaerobios facultativos 3. Anaerobios estrictos • Habitan en ambientes extremos 1. Metanógenos (Methanobacterium) 2. Halófilos extremos (Halobacterium y Halococcus) 3. Termófilos extremos o (Thermoplasma acidhophilus) Diferencias Bacteria Archaea Tipo celular procariota procariota Reproducción asexual asexual Pared celular Contiene peptidoglucano No contiene peptidoglucano Lípidos de membrana Compuesto por cadenas rectas de carbono unidas al glicerol por enlaces éster. Compuesto por cadenas de carbono ramificadas unidas al glicerol por cualquier enlace. Primer aminoácido en la síntesis proteica Formilmetionina Metionina Histonas No Si Bacterias Procariotas Archaea Microorganismos Eucariotas Protozoos Hongos Algas microscópicas Hongos • Célula eucarionte unicelulares (levaduras) o multicelulares (setas) • Material genético localizado en el núcleo • Ribosoma 80S • No tienen capacidad de fotosíntesis • Tienen paredes celulares compuestas por “quitina” • Reproducción sexual o asexual Estructura de la célula La estructura básica de la célula consta de: Citoplasma ADN Orgánulos Membrana plasmática Estructura celular Estructuras permanentes • Pared celular • Membrana citoplasmática • Citoplasma • Ribosomas • ADN Estructuras variables • Flagelos • Fimbrias y pili • Exopolisacáridos (cápsula y glicocalix) • Endosporas Célula Procariota • El material genético está libre en el citoplasma. • Sólo posee ribosomas como orgánulos. • La pared celular esta conformado por peptidoglucano. • Reproducción asexual “fisión binaria” • Es la célula que presentan las bacterias y Archaea. Célula Eucariota • El material genético está encerrado en una membrana que forma el núcleo. • Poseen un gran numero de orgánulos rodeados por membrana. • Algunas no tienen pared celular y si existe posee una estructura química sencilla. • Reproducción sexual (mitosis) o asexual. • Es la célula que presentan todos los demás seres vivos. CELULA VEGETAL CELULA ANIMAL La célula vegetal se caracteriza por: 1.- Presenta una pared celular rígida que contiene celulosa, además de membrana. 2.- Presenta cloroplastos, responsables de la fotosíntesis. 3.- Presenta una gran vacuola central. 4.- Carece de centriolos. Membrana plasmática: La membrana delimita el territorio de la célula y controla el contenido químico de la célula. Modelo del mosaico fluido 50% 40% Fosfolípidos: son lípidos anfipáticos compuestos por una molécula de glicerol, a la que se unen dos ácidos grasos (saturado e insaturado) formando un enlace éster y un grupo fosfato unido a un grupo orgánico. Colina, serina o etanolamina Ácido graso insaturado Ácido graso saturado glicerol Fosfatidilcolina Los lípidos en Bacteria y Archaea tienen diferentes enlaces químicos Éster - Bacteria Éter – Archaea Glicerol Isopreno La membrana plasmática realiza las siguientes funciones: 1) Aísla el citoplasma del medio externo (permeabilidad selectiva) 2) Regula el flujo de materiales entre el citoplasma y su medio (adquisición de nutrientes y eliminación de desechos). Pasivos (difusión simple, difusión facilitada y osmosis) Activo ( transporte activo y traslocación) 3) Permite la interacción con otras células 4) Barrera de permeabilidad • Moléculas pequeñas sin carga • Hidrofóbicas Citoplasma: Componente líquido que se encuentra dentro de la membrana plasmática. Compuesto principalmente por 80% agua y moléculas orgánicas e inorgánicas, material genético (plásmidos) y ribosomas. Ribosomas: Contienen todos los componentes necesarios para la síntesis proteica. Ribosoma 70S en procariotas (2 subunidades 30S y 50S) Ribosoma 80S en Eucariotas (2 subunidades 60S y 40S) Compuestos por RNA y proteínas Coeficiente de sedimentación (unidades Svedberg) Flagelos: Son apéndices filamentosos relativamente largos que propulsan a las bacterias. Compuestos por tres elementos fundamentales: un filamento (flagelina), el gancho y el cuerpo basal. Clasificación: 1. atricas 2. monotricas 4. lofotricas 3. anfitricas 5. peritricas Filamento Gram - Gancho Cuerpo Basal Gram + Fimbrias y pili: Apéndices pilosos más cortos, rectos y delgados que los flagelos. Cumplen funciones de fijación y transferencia de ADN. Compuestas por “pilina” Las fimbrias nacen en los polos de las células bacterianas El pili es mas largo que las fimbrias y solo se encuentran uno o dos por célula. Participa en la transferencia intracelular de ADN (conjugación) Conjugación Exopolisacáridos: Cubierta de naturaleza polisacárida que rodea una bacteria. Sintetizados en la membrana citoplasmática, y atraviesan la pared celular para localizarse en la parte externa. Clasificación: 1.Cápsula (Rigidez) • Protege de la fagocitosis • Factor de virulencia • Tinción negativa 1.Glucocáliz (Flexibles) • Participa en la formación de biopeliculas • Protege de fagocitosis o de la acción de antimicrobianos Endosporas o células en reposo: Son cuerpos deshidratados con una gruesa pared o capas adicionales. Producidas bajo condiciones adversas para la célula (carencia de nutrientes o falta de agua) Se forman en el interior de la membrana celular y son liberadas al medio ambiente Pueden sobrevivir a temperaturas extremas, falta de agua y exposición a muchos compuestos tóxicos y radiaciones. • Clostridium sp. • Bacillus sp. esporulación o esporogénesis Pared celular en Bacteria: Es una estructura compleja y semirrígida responsable de la configuración de la célula. Rodea a la membrana plasmática protegiendo el interior de la célula de cambios adversos en el medio externo. Contribuye al mantenimiento de la forma de la bacteria Actúa como sitio de anclaje para los flagelos Compuesta por peptidoglucano “mureína” PEPTIDOGLUCANO: Formado por cadenas lineales de disacárido (NAG + NAM) que constituyen un esqueleto de hidratos de carbono unido por polipéptidos mediante un puente transversal peptídico. Diferencia entre Gram positivas y negativas Gram (+) Gram (-) • Varias capas de peptidoglucano • Una sola capa de peptidoglucano localizada en el periplasma • Ácidos teicoicos Poliglicerol fosfato • Tiene una membrana lipídica externa (ácido lipoteicoico) Poliribitol fosfato (ácido teicoico de la pared) • Retiene el colorante cristal violeta (mo de azul-morado) Lipoproteínas Lipopolisacáridos (LPS) Fosfolípidos Proteínas (porina) • No se tiñe con cristal violeta, pero si con safranina (mo de rosa-rojo) Polisacárido O Lípído A LPS Porina Ácido teicoico Ácido lipoteicoico Pared celular de Archaea • No contiene peptidoglicano • La pared puede ser de: – pseudopeptidoglicano (pseudomureina) tiñe G+ – pseudomureina cubierta de proteína, tiñe G+ – monocapa superficial de proteina o glicoproteina, sin pseudomureina (algunos halófilos, alg.metanogénicos y termoacidófilos) tiñe G- • Existen Archaea sin pared Pseudopeptidoglicano de Archaea Diferencia entre la estructura celular de Bacteria, Archaea y Eucarya Propiedad Bacteria Eucarya Archaea Membrana nuclear NO SI NO Organelos NO SI NO Tamaño ribosoma 70S 80S 70S Peptidoglucano en la pared SI NO NO Esteroles en membrana NO (hopanoides) SI SI Lípidos de membrana Ester unidos a glicerol Ester unido a glicerol Eter, ramificados