UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 Análisis meiótico de Lathyrus hasslerianus (Leguminosae): origen de las microgametas Seijo, Guillermo Instituto de Botánica del Nordeste - UNNE. Sargento Cabral 2131 - (3400) Corrientes - Argentina. E-mail: [email protected] ANTECEDENTES L. hasslerianus es la única especie de la sección Notholathyrus que crece en las selvas subtropicales (Burkart 1935, 1942), y además la única que posee flores amarillas. Al estudiar la meiosis de esta especie en el estadío de tétrade se observó que algunas CMP presentaban microgametas, aparte de las gametas con tamaño aparentemente normal. La presencia de estas microgametas es indicadora de reducción de la fertilidad directamente relacionada con un comportamiento meiótico anormal. Sin embargo, varias son las posibles aberraciones del comportamiento meiótico que pueden llevar a la formación de microgametas. En el presente trabajo se analiza el comportamiento meiótico de L. hasslerianus con el fin de determinar el origen de las microgametas observadas en el estadío de tétrade. MATERIALES Y METODOS Para el estudio de la meiosis se analizaron botones florales de material proveniente del Dpto. San Pedro, Misiones, cuyo testigo, Seijo 2000, se encuentra depositado en el herbario del Instituto de Botánica del Nordeste (CTES). Los botones florales fueron fijados en etanol:ac. acético 3:1 y se colorearon según la técnica de Feulgen. El análisis meiótico consistió en observar y registrar los eventos que ocurren en cada una de las fases de la microsporogénesis, y determinar si corresponden a comportamientos normales o anómalos. RESULTADOS Y DISCUSION La profase meiótica fue normal y la frecuencia de células con diferentes configuraciones meióticas se presenta en la Tabla 1. Además en el 1,2 % de las metafases se observa un bivalente con disyunción precoz y en el 7 % un bivalente fuera de la placa metafásica. En la interfase II aparece un cromosoma fuera de los núcleos con una frecuencia de 3,6 %. En anafase II se observó el 5.9 % de células con un cromosoma segregando fuera de los dos husos mayores. En la telofase II se observó que en 5.4 % de las CMP, además de los cuatro núcleos esperados se presentaba un cromosoma monocromatídico fuera de éstos. El origen del mismo se podría explicar por la formación de un puente en la primera división, donde uno de los cromosomas que forman este puente se integraría a un núcleo y el otro quedaría en el citoplasma sin que el puente se corte. La cromátida normal del cromosoma que queda en el citoplasma podría segregar de la cromátida dicéntrica antes de la metafase II y así seguir su historia independiente. Como resultado de la meiosis, se forma una tétrada con una microgameta de un cromosoma monocromatídico (1.3 %), y cuatro gametas con tamaño normal, dos poseerán n=6 mientras que una de las restantes tendrán n=7 y la otra n=8; por lo tanto se forma una sola gameta balanceada. Las tétradas con una microgameta, también se podrían originar como consecuencia que segregue en la primera división por un univalente y uno de los cromosomas monocromatídicos se integre a uno de los núcleos mientras que el otro permanece en el citoplasma. De esta forma llega a la telofase II y en la tétrada se encuentra formando una microgameta con n=1. Las gametas con tamaño normal poseerán números variables entre 6 y 8 de cuerdo al destino que tengan los cromosomas del otro monovalente (que para que solamente quede un cromosoma monocromatídico en la T II se asume que se incorpora a un núcleo). Las CMP en telofase II con dos cromosomas monocromatídicos fuera de los núcleos (1 %) se explica por un monovalente que segrega (primera o segunda división), la diferencia se notará en la anafase II ya que si UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2000 segrego en la primera no tomará la forma típica de cromosoma en migración dentro de un huso. Estas CMP formarán tétradas con cuatro gametas de tamaño normal, dos con n=6 y dos con n=7 y dos microgranos con n=1. En el caso de que dos monovalentes presenten el comportamiento antes descripto se observarán telofases II con cuatro núcleos y 4 micronúcleos de 1 cromátida (1.5 %) y tétradas con cuatro gametas de tamaño normal, todas con n=6, y cuatro microgametas con n=1 (0.3 %). En el 3.2 % de las CMP en telofase II se observó un micronúcleo formado por un cromosoma bicromatídico. Este micronúcleo puede formarse a partir de un monovalente que no se incorpora a los núcleos no y que tampoco segrega nunca. También a partir l formación de un puente en la primera división, dónde las cromátidas normales de este puente segregan solamente en la segunda división. Los únicos cinetocoros que se unen al huso son los de las cromátidas normales, a través de las cuales se produce la tracción, éstas se separan y el puente queda como cromátida dicéntrica sin incorporarse a los núcleos. Esto lleva a la formación de una tétrada con dos gametas de tamaño normal con n=6 y dos con n=7, más una microgameta con dos cromátidas (o una cromátide dicéntrica). En el 1 % de las CMP en telofase II se ha observado, además de los cuatro núcleos normales, dos micronúcleos con un cromosoma monocromatídico y un micronúcleo con un cromosoma bicromatídico. Estos se pueden formar como consecuencia de dos monovalentes uno que segrega en la primera división incorporando una cromátida a uno de los núcleos y la otra permanece en el citoplasma, mientras que el otro monovalente no segrega nunca. Así, se forma una tétrada con tres gametas con n=6 y una con n=7, y además con una microgameta con n=1 y otra con n=2. También como consecuencia de segregación asimétrica de un puente. En esta especie se han observado cromosomas fuera de placa, segregaciones anómalas y puentes y fragmentos, los tres fenómenos capaces de originar microgametas, sin embargo, hasta el momento no es posible cuantificar la participación de cada uno en la producción de microgametas y gametas aneuploides. Tabla 1. Número y frecuencia de células con diferentes configuraciones en Metafase I. C = Bivalente cerrado; A = Bivalente abierto. Configuración 7C 6 C+ 1 A 5C+2A 4C+3A 3C+4A total Nº de células 27 17 2 2 1 49 % 55 35 4 4 2 100 BIBLIOGRAFIA Burkart, A. 1935. Revisión de las especies de Lathyrus de la República Argentina . Rev. Fac. Agron. Vet. Bs. As. 8 (1) : 41 - 128. Burkart, A. 1942. Nuevas contribuciones a la sistemática de las especies sudamericanas de Lathyrus. Darwiniana 6 : 9 - 29.