ESTUDIO EPIDEMIOLÓGICO DE LA INFECCIÓN POR PESTIVIRUS EN EL REBECO ALPINO (Rupicapra rupicapra) Y OTROS UNGULADOS SALVAJES Y DOMÉSTICOS DE VAL VARAITA Fernández-Sirera, L. 1, 2 ; Cabezón, O. 1, 2 ; Dematteis, A. 3 ; Meneguz, P.G. 3 ; Tizanni, P.3 ; Rossi, L.4; Rosell, R. 2, 5; Lavín, S.1 y Marco, I. 1 1 Servei d’Ecopatologia de Fauna Salvatge (SEFaS), Facultat de Veterinària, Universitat Autònoma de Barcelona, Bellaterra, España; 2 Centre de Recerca en Sanitat Animal (CRESA), Universitat Autònoma de Barcelona, Bellaterra, España; 3 Centro Ricerche Gestione Fauna Selvatica (CERIGEFAS), Università degli Studi di Torino, Sampeyre (CN), Italia; 4 Dipartimento di Produzioni Animali, Epidemiologia ed Ecologia, Università degli Studi di Torino, Grugliasco, Italia; 5 Departament d’Agricultura, Alimentació i Acció Rural. Generalitat de Catalunya. Introducción Introducción _________________________Introducción__ 2001-2002 42% 2005-2007 60-86% 2010 ? 2009-2010 ? Virus aislado en 3 animales sanos y uno enfermo (96, 06 y 07) _________________________Introducción__ Cuadro clínico • Depresión, debilidad • Emaciación • Diferentes grados de alopecia • Hiperpigmentación cutánea • Alteraciones del comportamiento Necropsia • Caquexia, procesos secundarios Histopatología • Meningoencefalitis no supurativa y espongiosis Marco et al, 2007 __________________________Introducción______ Agente etiológico Familia Flaviviridae Género pestivirus Virus de la PPC, BVDV-1,BVDV-2, BDV BDV 4 Extendidos a nivel mundial, cruzan barreras interespecíficas Alpes italianos Estudio Val di Susa (1999): 25,5% seroprevalencia en rebecos No se ha descrito la enfermedad Olde Riekerink et al, 2005; Thiel et al, 2005; Vilceck et al, 2006 _______________Objetivo del estudio_____ El objetivo del presente estudio es determinar la seroprevalencia de anticuerpos frente a pestivirus en el rebeco y otros ungulados salvajes y domésticos de Val Varaita muestreados entre los años 1994 y 2009, así como investigar la presencia de virus en estos animales Material y métodos Material y métodos ___________________Material y métodos__ Área de estudio _________________Material y métodos____ Especies estudiadas (suero) Ungulados salvajes: Rebeco alpino (Rupicapra rupicapra) n=315, 1994-2009 Corzo (Capreolus capreolus) n=229, 2000-2009 Íbice (Capra ibex) n=10, 2003-2008 Ciervo (Cervus elaphus) n=5, 2006-2009; n=63, 2002 Jabalí (Sus scrofa) n=15, 2009 Ungulados domésticos: Vaca (Bos taurus) n=175, 2009 Oveja (Ovis aries) n=36, 2009 _________________Material y métodos____ Análisis laboratorial ELISA para la detección de anticuerpos específicos contra la proteína P80 (Pourquier, France) Test de seroneutralización vírica (BDV-137/4 y BVDV-NADL). Replicación vírica detectada mediante IPMA (OIE, 2004) ELISA para la detección del antígeno vírico p80/125 (Synbiotics, USA) RT-PCR: One-Step PCR kit (Qiagen, Germany), primers 324 y 326 (Vilcek,1994) _________________Material y métodos____ Estadística Test de Chi cuadrado para detectar diferencias en la presencia de anticuerpos: - Entre machos y hembras de rebeco - Entre los animales de 0-2 años y los mayores de 2 años Cálculo del Odds Ratio (OR) y de su intervalo de confianza (95%) p < 0,01 Epi Info 3.5.1 Resultados Resultados y discusión ____________Resultados y discusión: rebeco______ Muestras estudiadas y % de Anticuerpos (AC) Año 1994 1995 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 n 41 38 16 29 43 28 17 33 20 15 5 27 % AC 61% 58% 31% 52% 33% 32% 53% 42% 50% 20% 20% 19% n total = 312 Seroprevalencia % AC global = 41% Seroprevalencia (%) 70 Foto O. Giordano 60 50 40 30 20 10 0 1994 1995 2000 2001 2002 2003 Año 2004 2005 2006 2007 2009 _____________ Resultados y discusión: rebeco _____ Efecto de la edad Seroprevalencia 80% 70% 60% 50% 40% 30% 0-2 años > 2 años SP global 20% 10% 0% 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2009 Año OR = 3,07 [1,61-5,84] Los animales mayores de dos años tienen una probabilidad 3 veces mayor de ser seropositivos _____________ Resultados y discusión: rebeco _____ Efecto del sexo Seroprevalencia 80% 70% 60% 50% 40% 30% SP global SP machos SP hembras 20% 10% 0% 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2009 Año OR = 2,43 [1,40-4,22 ] Las ♀ tienen 2,4 más probabilidades de ser seropositivas respecto a los ♂ No hay diferencias entre sexos en la clase 0-2 años _____________ Resultados y discusión: rebeco _____ Seroneutralización Rebecos con AC específicos anti-BDV (21%) Rebecos con AC específicos anti-BVDV (2%) Rebecos con AC inespecíficos BDV/BVDV (77%) BVDV-NADL BDV-137/4 La mayoría de los contactos han tenido lugar con un BDV Sin embargo algunos rebecos se han infectado con un BVDV No se ha determinado la especificidad de los AC en un 77% de los rebecos seropositivos (infección con los dos virus o con un tercer virus, no determinado) _____________ Resultados y discusión: íbice _______ Un íbice seropositivo (n=10) 700 600 500 400 300 200 100 BDV-137/4 BVDV-NADL 0 BDV-137/4 BVDV-NADL ♂ capturado en 2007 Foto O. Giordano ________ Resultados y discusión: corzo y jabalí_____ No se detectaron anticuerpos en ninguno de los 229 corzos analizados • ¿Baja susceptibilidad a la infección con los pestivirus circulantes? • ¿Diferente hábitat y comportamiento social? • ¿Presencia de otros pestivirus? Foto O. Giordano No se detectaron anticuerpos en ninguno de los 15 jabalíes analizados • Pocos animales muestreados • Diferente hábitat Fischer et al, 1998; Olde Riekerink et al, 2005 ______________ Resultados y discusión: ciervo_____ No se detectaron AC en ninguno de los ciervos cazados (n=5) Bajo número de animales muestreados Se encontró un animal seropositivo entre los ciervos usados para repoblar Val Varaita y otros valles colindantes en el año 2002. Los AC eran específicos de BVDV Krametter et al, 2004; Olde Riekerink et al, 2005 _________ Resultados y discusión: vaca y oveja_____ % de vacas seropositivas: 17% (n=175) Vacas con AC específicos anti-BVDV (70%) Vacas con AC específicos anti-BDV (7%) Vacas con AC inespecíficos BDV/BVDV (23%) % de ovejas seropositivas: 19% (n=36) 160 140 120 100 80 Ovejas con AC inespecíficos BDV/BVDV (100%) 60 40 20 0 1 BVDV 2 BDV __________ Resultados y discusión: virología_____ 16 rebecos y un jabalí presentaron un resultado positivo al ELISA de detección de antígeno, sin embargo tuvieron un resultado negativo en la RT-PCR Todos los corzos, ciervos, vacas y ovejas presentaron un resultado negativo al ELISA de detección de antígeno Foto O. Giordano Conclusiones Resultados y discusión _____________________________Conclusiones____ La elevada seropositividad hallada en el rebeco en Val Varaita nos indica que en esta población están circulando pestivirus La mayor tasa de seropositividad de las hembras nos indica que la transmisión de la infección es más eficaz que en los machos, debido a su mayor comportamiento gregario. Además, la ausencia de diferencias entre machos y hembras menores de 2 años, lo corrobora Con toda probabilidad, la mayoría de los rebecos han sido infectados por cepas de tipo BDV, sin embargo 3 rebecos presentaron AC específicos anti-BVDV, hecho que se debería tener en cuenta en los programas de erradicación de la diarrea vírica bovina La tasa de seropositividad hallada en las ovejas es similar a la descrita en los rebecos del mismo año, y es probable que exista relación en la circulación de virus entre estas dos especies _____________________Agradecimientos_____ Comprensorio Alpino CA CN2 “Valle Varaita” Ai cacciatori, al Presidente Luciano Floriano, al Dottor Rinaudo e, in particolare, ai Tecnici Faunistici Max e Omar Al Dottor Cesano A Stefano Catalano Programa de formación de profesorado universitario del Ministerio de Educación Gracias Gràcies Merci Grazie Mercé Grazas