XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico

XIX Verano de la Investigación Científica y Tecnológica del Pacífico
DETERMINACIÓN DEL EFECTO DEL ONCOGÉN E7 DEL HPV SOBRE LA
EXPRESIÓN DEL GEN SUPRESOR DE TUMORES RARβ EN LINEAS CELULARES
DE CÁNCER CERVICAL
Wendy Figueroa Chávez. Instituto Politécnico Nacional, [email protected]. Asesor Dr.
Rodolfo Benjamín Ocádiz Delgado, CINVESTAV-Zacatenco, Centro de Investigación y de Estudios
Avanzados (IPN), [email protected]
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
El cáncer es uno de los principales padecimientos que aquejan a la sociedad hoy en día.
En particular, el cáncer cervical es el segundo tipo de cáncer más común en el mundo.
Más de 500,000 mujeres son diagnosticadas al año con esta enfermedad, y cerca de la
mitad de ellas muere. La alta incidencia de mortalidad y la falta de diagnósticos
tempranos eficientes han incrementado el interés por la búsqueda de marcadores
moleculares que permitan la detección temprana de la enfermedad. Se ha demostrado
que los niveles del receptor a retinoides RARβ se encuentra reducido en una variedad
de tumores sólidos incluyendo células escamosas de carcinomas, cáncer de mama,
pulmón, etc. Además, se ha propuesto que actúa como un represor de tumores, ya que
la reactivación del silenciamiento de la expresión de RARβ bajo un tratamiento con RA
conduce a la inhibición del crecimiento celular y la apoptosis. Debido a esto es posible
emplearlo en el diagnóstico temprano de dichas enfermedades. Por lo tanto, el objetivo
del presente trabajo fue correlacionar los niveles de expresión de dicho receptor nuclear
con la presencia del oncogén E7 de HPV.
METODOLOGÍA
Células C33a, derivadas de cáncer cervical, fueron cultivadas al 80% de confluencia en
medio D-MEM en una atmósfera controlada con 5% de CO2. Se extrajo el RNA total
mediante el método de TRIZOL. A partir del RNA total se sintetizó el cDNA mediante una
reacción de retrotranscripción. Posteriormente se cuantificó el RNA proveniente de los
genes codificantes de RAR-β en distintas cepas de células cancerosas [C33a-pcDNA3,
C33a-pcDNA3/E7, C33a-pcDNA3 tratado con TSA (0.6µM), C33a-pcDNA3/E7 tratado
con TSA (0.6µM), C33a-pcDNA3 tratado con TSA (1µM) y C33a-pcDNA3/E7 tratado con
TSA (1µM)] mediante la técnica qRT-PCR (empleando SYBR® Green como
flourocromo), tomando como referencia el gen constitutivo β2-microglobulina.
Posteriormente se analizaron los resultados obtenidos mediante un análisis de
cuantificación relativa.
CONCLUSIONES
Se analizó la expresión de RARβ en la línea celular C33a bajo diferentes condiciones,
encontrándose un aumento significativo en aquellas que expresaban constitutivamente
el oncogén E7, así como la disminución de éste en presencia de Trichostatin A 1M
(compuesto inhibidor de la histona desacetilasa), lo que puede sugerir que actúa como
represor génico a dicha concentración.
© Programa Interinstitucional para el Fortalecimiento de la Investigación y el Posgrado del Pacífico
Agosto 2014