AZUL ALCIAN pH 2,5 pH1 04 - 161802 IVD Dispositivo médico-diagnóstico in vitro Código CND: W01030799 Número mínimo de test realizables….....…100 Tiempo de ejecución....................... 50 minutos Caducidad del producto ........................ 2 años Temperatura de almacenamiento........15-25°C Equipo complementario............... no necesario Uso Preparación de muestras cito-histológicas para examinar por microscopía óptica. Aplicación Método indicado para evidenciar y diferenciar de mucopolisacáridos ácidos sobre muestras de tejido. Para poder evidenciar las mucinas sulfatadas de mucinas débilmente sulfatadas, ácido hialurónico, y sialomucinas. El método prevé la utilización de 2 muestras seriales. Tratando el primero con la solución de tinción Azul Alcian pH 2,5 y la sucesiva con la solución Azul Alcian pH 1 es posible, confrontando con los preparados, diferenciar las mucinas débilmente sulfuradas de mucinas sulfatadas, ácido hialurónico y sialomucinas. Principio Las tinciones Alcian forman parte del grupo de las cuproftalocianinas; se unen a los polianiones de los mucopolisacáridos ácidos por medio de puentes salinos. En el método a pH 2,5 la tinción se transforma en el pigmento Monastral azul con una solución de tetraborato de sodio, este pigmento es insoluble, y se presta por lo tanto, a ulteriores manipulaciones sin difundirse, además, en el tejido (Azul Alcian PAS). Los polianiones con los cuales al Azul Alcian reacciona están constituidos por radicales sulfurosos y carboxílicos (los radicales fosfatos de los ácidos nucleicos no reaccionan), de consecuencia reaccionan sólo las mucinas ácidas. Advertencias: A pH 2,5 se ionizan y tiñen todas las mucinas ácidas. A pH 1 se ionizan y tiñen las mucinas fuertemente sulfatadas. Método 1) Método para pH 2.5 Llevar la muestra al agua destilada. Poner sobre la muestra 10 gotas del reactivo A: dejar actuar 30 minutos. Sin lavar, gotear los portaobjetos y poner sobre la muestra 10 gotas del reactivo B: dejar actuar 10 minutos. Lavar en agua destilada. Deshidratar a través la serie ascendente del alcohol; xileno y bálsamo 2) Método para pH 1.0 Llevar la muestra al agua destilada. Poner sobre la muestra 10 gotas del reactivo C: dejar actuar 30 minutos. Sin lavar, gotear los portaobjetos y poner sobre la muestra 10 gotas del reactivo D: dejar actuar 10 minutos. Lavar en agua destilada. Deshidratar a través la serie ascendente del alcohol; xileno y bálsamo Resultados Mucopolisacáridos ácidos......................................................................................................... Azul - turquesa Reactivos A) Azul Alcian solución pH 2,5 ........................................................................................................ 30 ml B) Sodio tetraborato solución hidroalcohólica ................................................................................. 30 ml C) Azul Alcian solución pH 1 ........................................................................................................... 30 ml D) Solución diferenciadora............................................................................................................... 30 ml Advertencia sy precaucione s El producto debe ser utilizado únicamente por personal técnico especializado. El producto está clasificado como peligroso. Leer con cuidado las informaciones que están en la etiqueta (símbolos de peligro, frases de riesgo y de seguridad) y consultar siempre la ficha de seguridad donde se puede encontrar la información relativa a los riesgos presentados del preparado, adoptar medidas preventivas durante el uso y medidas de primeros auxilios y en caso de vertido accidental. No utilizar en caso de que el recipiente primario tenga daños. Almacenamiento Conservar el preparado a temperatura ambiente. Mantener los recipientes bien cerrados. Estabilidad Después de la primera apertura, el reactivo es válido hasta la fecha de caducidad indicada, únicamente si está correctamente guardado. Eliminación Residuos peligroso; gestionar por empresas especializadas y autorizadas, según la ley vigente. Bibliografía • • • Lev R, Spicer SS. Specific staining of sulfate groups with alcian blue at low pH. J Hist Cytochem 1964; 12:309. Mowry RW. Alcian bleu technics for the histochemical properties of rodent acid mucopolysaccharides J Hist Cytochem 1956; 4: 407. Spicer SS. A correlative study of the histochemical properties of rodent acid mucopolysaccharides J Hist Cytochem 1958; 6:399. Fecha de emisión: Junio 2013 Sociedad productora: Bio-Optica Milano s.p.a. Pagina 2 di 2 Bio Optica Milano s.p.a. via San Faustino 58 • I - 20134 Milano tel. +39 02212713.1 • fax +39 022153000 www.bio-optica.it