UNIVERSIDAD VERACRUZANA FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS REGIÓN POZA RICA-TUXPAN “OBTENCIÓN DE GAS PIMIENTA A PARTIR DE CHILE JALAPEÑO (Capsicum annuum)” TESIS PARA OBTENER LA ACREDITACIÓN DE LA EXPERIENCIA RECEPCIONAL DEL PROGRAMA DE INGENIERÍA QUÍMICA PRESENTAN: KARINA ESLAVA HERNÁNDEZ JAIME ZEPETA ALARCÓN ASESOR: ING. LUIS ELÍAS CÁRDENAS PÉREZ CO-ASESOR: M.C. RAÚL ENRIQUE CONTRERAS BERMÚDEZ POZA RICA, VER. OCTUBRE 2011 ÍNDICE ÍNDICE. INTRODUCCIÓN I OBJETIVO E HIPÓTESIS IV JUSTIFICACIÓN V CAPÍTULO I: FUNDAMENTOS TEÓRICOS 1.1. 01 Propiedades del gas pimienta 03 1.1.1. Descripción del chile jalapeño 05 1.1.2. Capsaicina 06 1.2. Efectos 09 1.3. Tratamiento 11 1.4. Marco legal 13 CAPÍTULO II: METODOLOGÍA 15 2.1. Primera etapa: extracción de la capsaicina 2.1.1. Extracción de hidrodestilación la capsaicina asistida por 15 mediante radiación de microondas 2.1.2. Cuantificación del nivel de capsaicina por medio de cromatografía liquida de alta eficacia (HPLC) 2.2. 16 Segunda etapa: elaboración del gas pimienta 19 21 CAPÍTULO III. RESULTADOS 26 CONCLUSIONES 35 ÍNDICE BIBLIOGRAFÍA 37 GLOSARIO 39 ANEXOS 43 ANEXO 1. Escala Scoville. 43 ANEXO 2. Normas para el empleo de aerosoles defensivos con agente activo Oleoresin Capsicum (OC). 44 ANEXO 3. Procedimiento para determinar el grado de capsaicina establecido por la norma NMX-F-3891982. 47 ANEXO 4. Procedimiento para la determinación de la capsaicina contenida en capsicums según lo establecido por la norma oficial mexicana NOM119-SSA1-1994. 50 INTRODUCCIÓN INTRODUCCIÓN La química ha sido desde siempre, una de las ciencias más aplicadas al campo militar junto con los más recientes conocimientos de física moderna sobre fusión y fisión nuclear. Pero una de las aplicaciones más preocupantes de esta ciencia, es su potencial destructivo en el caso de que se emplee con fines bélicos. Acorde con la vertiente práctica de la química y así como las aplicaciones militares, se puede encontrar una multitud de usos de dicha ciencia, así como la industria petroquímica, plantas de reciclaje, etc. El empleo de agentes tóxicos como gases, es un hecho relativamente reciente, pero dada su elevada peligrosidad, ha sido restringido y prohibido en numerosas convenciones internacionales aunque no así respetado por todos los países. El uso indiscriminado y el terrorismo son los mayores motivos de preocupación acerca de estas peligrosas armas, así como el uso en guerras no del todo transparente, como en la guerra del golfo, y en países subdesarrollados. Durante la primera guerra mundial se buscó la innovación militar, se crearon diversos gases venenosos. Los más utilizados iban desde el gas lacrimógeno hasta agentes letales como el fosgeno y agentes incapacitantes como el gas pimienta, y es aquí donde tiene sus inicios este gas. Esta guerra química fue uno de los principales elementos de la primera guerra global y también de la primera guerra total del siglo XX. Los primeros usos de este agente químico comenzaron en forma de irritante, en lugar de venenos letales o incapacitantes, se utilizó por primera vez en la primera guerra mundial. [A, B] i INTRODUCCIÓN Un destino típico de los expuestos al gas era la ceguera. Era un espectáculo frecuente ver líneas de soldados cegados, con la mano sobre el hombro del hombre que lo precedía, guiados por un vidente hasta la enfermería. Hoy en día y ante la creciente ola de asaltos e inseguridad en la gran mayoría de las ciudades del mundo, cada vez son más las personas que buscan alguna alternativa para protegerse de los delitos. El gas pimienta es uno de los elementos que más ha crecido su demanda en los últimos años, por ser un objeto de defensa que se puede llevar disimuladamente en alguno de los bolsillos. Es utilizado principalmente como arma de defensa personal por la mayoría de las amas de casa, sin embargo, se sabe que también los oficiales de la policía lo utilizan como una de sus armas, pues muchas veces es difícil calmar a las multitudes, o algunos maleantes que no se pueden controlar.[D] Es muy común encontrarlo a la venta en el mercado bajo distintas presentaciones, como el tipo cartucho, sin embargo, para no llamar la atención de los maleantes se ha creado en muchas forma de uso común como los lapiceros, labiales, llaveros, entre otros, como se muestra en la Figura 1.[A,D] Figura 1: Presentación en la que se encuentra a la venta el gas pimienta. Fuente: http://www.grupo-seguro.com.mx/gas_pimienta ii INTRODUCCIÓN Este trabajo se estructurara de la siguiente manera: Capítulo I Se presentarán, los antecedentes, definiciones, y el marco legal. Se mencionará la normatividad necesaria que se utilizará para el desarrollo del producto. Capítulo II Se explicará la metodología a seguir para obtener el gas pimienta. Capítulo III Se darán a conocer los resultados obtenidos. Conclusiones Se darán a conocer cada uno de los objetivos alcanzados durante el desarrollo del trabajo y por último se hace mención de la bibliografía consultada para el desarrollo de esta tesis. iii OBJETIVOS E HIPÓTESIS OBJETIVOS E HIPÓTESIS OBJETIVO GENERAL Elaborar gas pimienta a partir de chile jalapeño (Capsicum Annuum). OBJETIVO ESPECÍFICO 1. Extracción de oleorresina del chile jalapeño (Capsicum annuum). 2. Determinar la concentración de capsaicina presente en la especie del Capsicum annuum, por medio del método de cromatografía liquida de alta eficacia. 3. Determinar la cantidad de grados Scoville presente en la concentración de capsaicina obtenida del chile jalapeño (Capsicum annuum). HIPÓTESIS Es posible la elaboración del gas pimienta a partir del chile jalapeño (Capsicum annuum). iv JUSTIFICACIÓN JUSTIFICACIÓN Dado que los estudios realizados nos han demostrado que en donde se encuentra la mayor concentración del “picor” en los chiles es en sus venas y semillas, esto nos ocasiona que se necesite una gran cantidad de chile para poder obtener la cantidad precisa de capsaicina necesaria para elaborar el “gas pimienta”, y debido a la gran producción de chile jalapeño que se produce en la región, se cree que es conveniente realizar este trabajo. Por otra parte, en los diversos procesos investigados para poder obtener la capsaicina, es necesario el uso de solventes orgánicos en cantidades elevadas, lo que da como resultado procesos de alto costo. Esto ha llevado a investigar alternativas, que conduzcan a producir un producto que no resulte con un elevado costo de producción, para lo cual se ha encontrado que existe un método que es más económico y sobre todo rápido, se trata de la hidrodestilacion asistida por la radiación de microondas, método que solo gasta agua destilada. v CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS El gas pimienta o spray de pimienta, también conocido como spray OC (Oleoresin Capsicum), gas OC o spray de capsicum, es un agente lacrimógeno (un compuesto químico que irrita los ojos hasta el punto de causar lágrimas, dolor e incluso ceguera temporal) que se utiliza para dispersar disturbios o como defensa personal, incluyendo defensa contra perros u osos. Se rocía a través de dispositivos aerosoles a corta distancia y directamente sobre los ojos de la víctima. Tiene un alcance efectivo de aproximadamente 3 a 4 m., brindando una mejor posibilidad de "escapar" de un atacante, para lo cual se apunta a la cara del mismo pues aquí es donde la mayoría de las membranas mucosas afectadas por el gas pimienta se encuentran. Es un agente no letal, aunque puede serlo en casos raros. El ingrediente activo en el gas de pimienta es la capsaicina, que es un compuesto derivado de la frutas de las plantas del género capsicum tales como los chiles como el serrano y jalapeño entre otros. Los efectos a largo plazo del gas pimienta no han sido investigados efectivamente. El porcentaje de ingredientes activos en el gas pimienta determina su potencia, cuanto mayor sea el porcentaje de OC, mayor es la capacidad inflamatoria del aerosol de pimienta. Se ha probado que el nivel adecuado de OC para el uso de los aerosoles disuasivos es de 1% y el aerosol de pimienta es 2%. Fabricado bajo los estándares de ISO - 9001, la energía de la pimienta realmente detiene al agresor dilatando los tubos capilares de los ojos causando ceguera temporal, inflamando las membranas mucosas provocando tos y nauseas.[B] 1 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS El gas pimienta se ha considerado como un arma química ya que utilizan las propiedades tóxicas de sustancias químicas para matar, herir o incapacitar al enemigo. Se encuentra clasificado dentro de las armas llamado agentes vesicantes, cuyo objetivo es principalmente ser utilizadas para investigación o con objetivos médicos, farmacéuticos o defensivos. Entre estas sustancias se encuentran los agentes nerviosos, la ricina y el gas pimienta. Cualquier producción de más de 100 g debe ser notificada a la organización para la prohibición de armas químicas y ningún país puede tener almacenada más que una tonelada de estos químicos. A continuación se muestra en la Tabla 1 la descripción del gas pimienta. [B] TABLA 1: Descripción del gas pimienta. CLASE DE AGENTE Agente lacrimógeno vesicante SÍNTOMAS EFECTOS VELOCIDAD DE ACCIÓN PERSISTENCIA NOTAS Provoca En las últimas dolor décadas punzante y Aproximadamente estos agentes agudo en de 4 a 6 horas si han sido Fuerte los ojos y el contacto fue en irritación en ceguera los ojos, en la piel los ojos y temporal. de 2 a 48 horas, y piel Puede los llegar a quedan afectados de ahí que se causar más rápidamente. llamen pulmones No persistente y peligroso por inhalación. utilizados a menudo como elementos antidisturbios grandes agentes ampollas antidisturbios. Fuente: http://es.wikipedia.org/wiki/Arma_qu%C3%ADmica 2 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS 1.1 Propiedades del gas pimienta El ingrediente activo en el gas pimienta es la capsaicina, que es un compuesto derivado de la frutas de las plantas del género capsicum como los chiles. El olor es acre, áspero, picante, similar al jengibre y es más irritante en un clima húmedo o sobre la piel húmeda. Es un aceite que se extrae de la cáscara del chile picante, está conformado por sustancias de naturaleza alcaloide llamadas capsaicinoides que son las responsables de causar la irritación. Pertenece al grupo de los gases abrasantes y es de origen vegetal. Reacciona con un gran número de moléculas del organismo, sus consecuencias más importantes se producen en forma de terribles quemaduras en la piel. En la tabla 2 se muestran las propiedades físicas características del gas pimienta. [E] TABLA 2: Propiedades físicas del gas pimienta PROPIEDADES FÍSICAS Peso molecular g/mol 159.1 Densidad g/cm3 1.27 Punto de ebullición °C 217 Punto de fusión °C 14 Presión de vapor mmHg a 25°C 0.11 Volatilidad mg/m3 a 25°C 900 Solubilidad en agua % a 20°C 0.06 Fuente: http://www.ehu.es/zorrilla/juanma/ARMAS/Armamento.pdf 3 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS En su estado puro, es un agente incoloro. A temperaturas ambientales es un sólido blanco, son estables en estado gaseoso y su dispersión se lleva a cabo por aerosoles. Es fácilmente soluble en disolventes orgánicos. [G] En disolución acuosa se descompone en productos no tóxicos mediante hidrólisis. Una vez más, en esta reacción el álcali actúa como catalizador. Este compuesto produce iones hidroxilo (-OH) en disolución acuosa. Ejemplo de ello es el hidróxido de amonio NH4+. Su función es la de acelerar la reacción sin influir en ella. Esta reacción ocurre muy despacio dada la escasa solubilidad del agente mostaza, sin embargo, este reacciona violentamente con las cloroaminas dando productos no tóxicos. Mecanismo de Acción: La acción de este producto se basa en la capacidad del mismo para establecer enlaces covalentes con otras sustancias. Mediante este enlace puede reaccionar con muchas moléculas orgánicas, principalmente las moléculas que contienen Nitrógeno y grupos -SH en proteínas y péptidos. Las moléculas afectadas son destruidas con las consecuencias siguientes: Irritación grave en los ojos, inflamaciones en la piel, quemaduras, estornudos. Estos síntomas no requieren una intervención médica, aunque el dolor y las quemaduras pueden ser remitidos médicamente. Si la intoxicación es mayor puede provocar mareos, ampollas y serias dificultades para respirar. En este caso si es necesaria la intervención médica. [G] 4 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS 1.1.1 Descripción del chile jalapeño. Como la base para producir gas pimienta, es el chile jalapeño, es necesario mencionar las características generales de esta planta: Nombre científico: Capsicum annuum. Reino: Plantae. Familia: Solanaceae. Género: Capsicum. Orden: Solanales. Clase: Magnoliopsida. Subclase: Asteridae. División: Magnoliophyta. En la figura 2 se muestran las partes que forman el fruto del chile jalapeño. Figura 2: Partes del chile jalapeño. Fuente: http://catarina.udlap.mx/u_dl_a/tales/documentos.pdf Son plantas anuales, semi-herbaceas, de hojas alternas y flores pequeñas blancas, verdosas y violáceas. Contiene principalmente la sustancia llamada capsaicina, también contiene las vitaminas A, B y C. el chile jalapeño es de color verde, de forma cónica alargada, mide en promedio 6.0 x 2.5 cm. [G] 5 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS Se le da este nombre porque se dice que antiguamente se cultivaba en Jalapa, Ver., desde donde se comercializaba a otras partes. También se le llamaba chile cuaresmeño, porque antiguamente se encontraba solo en la época de cuaresma. Cuando llega a su etapa de maduración toma un color rojo intenso y ahumado, y se convierte en chile chipotle, que en sus versiones secas, es de los chiles más importantes. Dentro del chile jalapeño, existen gran cantidad de variedades con leves diferencia de formas y grado picor. Más del 60% de chiles jalapeños producidos se procesan como salsas de chile, chiles encurtidos, chiles secos, y quesos con jalapeño. Es de una variedad medianamente picante, entre 2,500 y 8,000 puntos en la Escala Scoville (ver anexo I), aunque la intensidad del sabor depende en gran medida de las características del terreno y de la variedad de semilla; las más habituales son conocidas como típico, meco y morita. Buena parte de la capsaicina, el alcaloide que provoca la picazón, se concentra en las venas y semillas en el interior del fruto; retirarlas antes de su empleo proporciona un sabor más delicado. Se dice que dentro de sus propiedades benéficas para la salud, se ha encontrado que ayuda a la disminución del colesterol o para disminuir el cáncer de próstata. 1.1.2 Capsaicina. El compuesto químico capsaicina (8-metil-N-vanillil-6-nonenamida, C18H27NO3) es el componente activo de los pimientos picantes (capsicum). Es irritante para los mamíferos; produce una fuerte sensación de ardor en la boca. La capsaicina pura es un compuesto lipofílico, inodoro, incoloro, parecido a la cera. En la tabla 3 se muestran las propiedades físicas y químicas de este compuesto. [G] 6 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS TABLA 3: Propiedades físicas y químicas de la capsaicina. PROPIEDADES FÍSICAS Y QUÍMICAS Punto de fusión 65 °C Punto de ebullición 210 – 220 °C UV máx. 227, 281nm Sabor Picante Solubilidad Alcohol, Éter, Benceno, Cloroformo Insoluble Agua fría. Color Rojo – Naranja Masa molar 305. 41 g/mol Fuente: http://es.wikipedia.org/wiki/Capsaicina Este compuesto se puede almacenar durante años en forma estable y si se encuentra en estado puro si se llega a diluir cien mil veces, sigue siendo tan activa que aún es capaz de producir ampollas en la lengua. Es la responsable de la sensación de ardor, e incluso dolor, en la mucosa oral, estimula las secreciones gástricas y se sabe que esta molécula es capaz de actuar sobre fibras no mielinizadas delgadas, activando a ciertas sub-poblaciones de neuronas sensoriales. La capsaicina también posee cualidades descongestivas y, a concentraciones adecuadas, favorece en el cerebro la producción de endorfinas, que son moléculas que promueven la sensación de bienestar. Aunque parezca extraño, la capsaicina, por si misma, es una molécula sin sabor ni olor. Sus acciones se ejecutan a través de su reconocimiento por parte de una proteína receptora. La capsaicina también estimula un neuroreceptor de la piel, el receptor vanilloide subtipo 1 (VR1), que también se activa con otras sensaciones más familiares como calor y abrasión. De ahí que el efecto de la ingesta sea una sensación de ardor. [G] 7 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS Es hidrófoba, no se mezcla con el agua pero sí lo hace con las grasas. Es una sustancia fabricada por los pimientos o chiles como medio defensivo para protegerse del ataque de los animales herbívoros. Es empleado en algunas neuralgias, neuropatía diabética, algunos cuadros dolorosos referidos a territorios específicos de la piel y en los picores de los dializados por insuficiencia renal u otras afecciones difusas de la piel similares. Es de suponer que tiene cierta acción anticancerosa. Tradicionalmente el valor picante de los pimientos se ha medido en unidades de Scoville, según el sistema que se diseño a principios del siglo XX. [G] Escala Scoville. Esta escala es una medida de picor en los chiles. Estas frutas del genero capsicum contienen capsaicina, un componente químico el cual estimula el receptor térmico en la piel, especialmente las membranas mucosas. El número de unidades Scoville (SHU, del inglés Scoville heat units) indica la cantidad presente de capsaicina. Muchas salsas picantes usan la escala Scoville para publicitarse en los centros comerciales. Esta escala fue nombrada por Wilbur Scoville, quien desarrolló “El Examen Organoléptico Scoville en 1912”. Éste consiste en una solución con extracto del chile, que es diluida en agua azucarada hasta que el picante ya no puede ser detectado por un comité de (normalmente cinco) examinadores; el grado de disolución del extracto da su medida en la escala. Así, un chile dulce, que no contiene capsaicina, tiene cero en la escala de Scoville. Sin embargo entre los chiles más picantes como el habanero, encontramos un grado de 300,000 o más. Esto indica que el extracto fue diluido 300,000 veces antes que la capsaicina fuese indetectable. [C] 8 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS El grado de picante de cualquier pimienta, tal y como se muestran en la escala en "unidades Scoville," es imprecisa, debido a que las propias especies tienen variaciones que pueden cambiar en un factor de 10 o incluso de más dependiendo del cultivo, el clima o incluso el terreno de cultivo (esto es especialmente verdadero en los habaneros). En el anexo 1 se encuentra la escala Scoville, donde se muestran los niveles de capsaicina según el tipo de chile a analizar. [C] 1.2. Efectos El aerosol de pimienta es un agente inflamatorio opuesto a un irritante como la maza. Causa el inmediato cierre de los ojos, dificultad de respiración, picor de nariz y tos. La duración de sus efectos depende de la fuerza del aerosol pero el efecto completo medio dura alrededor de 30 a 45 minutos, con efectos disminuidos durando horas (para el uso correcto del gas pimienta ver anexo 2). Diversos estudios han demostrado que la exposición del ojo al OC es inocua, pero la exposición repetida puede provocar cambios a largo plazo en la sensibilidad de la córnea. “La Comisión de Opciones Tecnológicas y Científicas del Parlamento Europeo” (STOA) publicó en 1998 una extensa información del aerosol de pimienta y el gas lacrimógeno, donde dicen que: Los efectos del aerosol de pimienta son bastante más severos, incluyendo ceguera temporal con duraciones de 15-30 minutos, una sensación ardiente de la piel que dura de 45 a 60 minutos, espasmos de la parte superior del cuerpo que fuerzan a la persona a doblarse hacia delante y provoca una tos incontrolable dificultando la respiración y el habla de 3 a 15 minutos. [E] Para las personas que tienen asma, que están tomando otros medicamentos o son objeto de técnicas restrictivas que restringen la cantidad de aire al respirar, hay riesgos de muerte. Un estudio del “Aberdeen Proving Ground” de 1993 9 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS demostró que el aerosol de pimienta podía producir efectos mutagénicos, carcinogénicos, de sensibilidad, cardiovasculares y toxicidad pulmonar, neurotoxicidad, así como otras posibles fatalidades humanas. [E] Cuando es rociado por primera vez el gas hace que sea prácticamente imposible abrir los ojos y tener una visión útil, no hay incapacidad y la realización de tareas físicas sigue siendo posible, pero después de aproximadamente entre 15 segundos y un minuto una quemazón severa ocurre donde el spray haya estado en contacto con la cara. La sensación es reminiscente de los efectos posteriores de una quemadura de agua hirviendo. El dolor ocular comparable sería como poner solución limpiadora de lentes de contacto en el propio ojo, pero mucho más persistente y distrayente. El dolor persiste durante algún tiempo, unos 45 minutos de quemazón intensa (ver figura 3). El único alivio fue presionar la cara contra respiraderos de aire acondicionado. El lavado no es posible ya que el OC basado en aceites no es soluble en agua. [E] Figura 3: Heridas causadas por el gas pimienta. Fuente: http://es.wikipedia.org/wiki/Capsaicina 10 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS 1.3. Tratamiento El efecto puede durar hasta dos horas. La información sobre primeros auxilios describe técnicas simples y efectivas para prevenir y tratar la mayoría de los efectos derivados de la exposición a gases lacrimógenos: gas pimienta y otras posibilidades. Aunque no hay ninguna manera de neutralizar completamente el gas de pimienta, su efecto puede ser minimizado o parado. La capsaicina no es soluble en agua e incluso grandes cantidades de agua tienen poco o ningún efecto. Es, sin embargo, soluble en grasas y aceites de tal manera que se pueden utilizar leche o detergentes para disminuir sus efectos y lavarlo. Las víctimas deberían ser animadas a parpadear vigorosamente para soltar lágrimas, que ayudará a eliminar las sustancias irritantes de los ojos. Algunos de los aceites pueden ser lavados de la cara utilizando desengrasante, no jabón aceitoso como el detergente de suciedad media y un ventilador podría proporcionar algún alivio. Algunos aerosoles de pimienta de "triple acción" que puede neutralizarse con metabisulfito de sodio, aunque también es liposoluble y puede ser lavado hasta cierto punto con leche y algunos contienen un tinte cubrimiento de rayos UV. A continuación se describe el tratamiento general a utilizar para minimizar los efectos del gas pimienta. 1. Primeramente se deberá crear una solución de la siguiente manera: En un recipiente de 1 L mezclar agua potable con un 10% de aceite mineral. Agregar una cucharada de jabón líquido. Agitar constantemente hasta obtener la mezcla. 2. Dirigirse a un área ventilada donde personas no contaminadas puedan ayudar. De ser posible colocar la cara contra el viento y tomar lentas y profundas inhalaciones. [E] 11 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS 3. No tocar los ojos y la cara. Soplar la nariz y escupir. 4. Aplicar con una esponja la solución antes descrita de la siguiente manera de acuerdo a la parte donde fue expuesto el gas: En la PIEL, dentro de los primeros 5 a 30 minutos de la exposición, limpie el área con la solución. No debe frotarse, enseguida enjuague con agua limpia. Seque con un paño seco y limpio. Si ya paso ese lapso de tiempo, se debe aplicar la solución y posteriormente limpiar con un paño impregnado de alcohol. La solución debe ser removida en su totalidad para evitar quemaduras. En los OJOS, con ayuda de una gasa, salpicar agua en los ojos procurando que esta caiga directo al piso. Si se siente picazón, no debe de frotarse, sino esperar a que lagrimeen un poco, permitir el pestañeo, la visión podría nublarse un poco. A continuación aplicar una gasa mojada con agua potable. En LABIOS, aplicar unos segundos la solución y posteriormente lavar con agua potable, impidiendo que esta caiga en el cuello y ropa. 5. Tomar una ducha con agua fría y evitar el uso de detergentes, ya que estos poseen un vínculo entre la base aceitosa y el gas y provocando que el químico se disuelva. Lavar varias veces el cuero cabelludo con agua y jabón sin detergente. 6. Evitar el uso de cremas humectantes. 7. Si la exposición al gas fue critica, se recomienda cubrir el cuerpo tanto como sea posible como el uso de manga larga y gorra.[E] 12 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS 1.4. Marco legal. La ley federal de armas de fuego y explosivos autoriza el uso legal de productos defensivo no letales, de artes marciales y de tiro deportivo, donde se encuentra especificado el gas pimienta y algunos productos como los inmovilizadores eléctricos, armas de aire, entre otros. [J] Siendo el ingrediente activo del gas pimienta el extracto de tipo natural “oleoresin capsicum” (OC) o capsaicina, y al no estar tipificado dentro de las leyes de armas de fuego y explosivos, como agente peligroso o de uso exclusivo del ejército o la policía, se puede afirmar que este producto puede ser utilizado legalmente y bajo circunstancias apremiantes como medio de defensa y protección personal. El gas de pimienta está prohibido internacionalmente para la utilización en la guerra desde la convención de armas biológicas de 1972 pero no para la utilización de la seguridad interna. [J] La norma oficial mexicana NOM-119-SSA1-1994: Bienes y servicios. Materias primas para alimentos, productos de perfumería y belleza, colorantes orgánicos naturales, especificaciones sanitarias. Establece las especificaciones de identidad y pureza de los colorantes orgánicos naturales para su aplicación en los alimentos y productos de perfumería y belleza, en los que se emplean como materias primas. [I] Al considerarse éstos como aditivos, su uso puede representar un riesgo para la salud al encontrarse en ellos niveles altos de contaminantes, sustancias o solventes que se empleen para la extracción y que resultan perjudiciales para la salud del consumidor. Cuyo procedimiento establecido para determinar la capsaicina en capsicums se menciona en el anexo 4. [J] 13 CAPÍTULO I FUNDAMENTOS TEÓRICOS La norma mexicana NMX-F-389-1982, establece el procedimiento para determinar el contenido de capsaicina en capsicums, el cual se describe en el anexo 3. [G] El gas de pimienta aprobado hecho de un 2% de OC está disponible para cualquier persona mayor de 18 años. [J] 14 CAPÍTULO II METODOLOGÍA CAPÍTULO II METODOLOGÍA En la primera etapa de este proceso experimental, se seleccionará una muestra de chiles jalapeños, de los cuales se piensa obtener sus venas y semillas para poder realizar una extracción de la capsaicina y poder determinar el grado de unidades Scoville, presentes en esta muestra. En la segunda etapa se procederá a elaborar el gas con base a la capsaicina obtenida en la etapa anterior y se elegirá el método más factible para su elaboración. [G] 2.1 Primera etapa: extracción de la capsaicina Actualmente el procedimiento principal mediante el cual es posible obtener extractos de productos naturales en general y, en particular, del chile es el que se realiza por extracción de solventes orgánicos. Sin embargo, esta tecnología requiere del manejo de compuestos orgánicos volátiles e inflamables a temperaturas relativamente elevadas. Las oleorresinas capsicum obtenidas por extracción con solventes contienen en promedio 30 ppm de solvente, por lo que su presencia además de representar un riesgo potencial para los consumidores de estos productos, decrementan sus posibilidades de uso en aplicaciones que requieran materia prima muy limpia. Debido a que la capsaicina es una molécula con ciertas características de polaridad, los solventes más adecuados para poder realizar la extracción son: el alcohol metílico (CH3OH), el etílico (C2H5OH), el isopropílico [(CH3)2CHOH]; la acetona (C3H6O), éter etílico (C4H10O), y acetato de etilo (C4H8O2).[G] 15 CAPÍTULO II METODOLOGÍA En este caso, no se utilizará ninguno de estos métodos, pues diversas investigaciones han demostrado que un método mucho más rápido y económico es utilizar la hidrodestilación asistida por radiación, debido a que, la capsaicina no es soluble en agua fría y se puede acelerar el proceso de extracción, ya que mediante los métodos más comunes se tardaría horas en realizarlo, y con la hidrodestilación solo tomará unos minutos. 2.1.1. Extracción de la capsaicina mediante hidrodestilación asistida por radiación de microondas. La hidrodestilación es un proceso conocido para obtener el aceite esencial de las plantas aromáticas y utilizado para separar sustancias orgánicas insolubles en agua y ligeramente volátiles, de otras no volátiles que se encuentran en la mezcla, como resinas o sales inorgánicas u otros compuestos orgánicos no arrastrables. En la extracción, se adoptará el término hidrodestilación, para definir al proceso mediante el cual se obtendrá el aceite esencial (capsaicina) de una planta (chile jalapeño) haciendo uso del vapor saturado a presión atmosférica y la materia prima o muestra a analizar está en contacto íntimo con el agua generadora de vapor. (Ya que se desconoce lo que sucede en el interior del equipo principal y se pueden utilizar diferentes condiciones de vapor de agua, no existe un nombre claro y conciso para definir el proceso) [K]. Descripción del proceso Antes de iniciar con la extracción, se llevara a cabo la deshidratación y la molienda de las venas y semillas de chile jalapeño. Para ello se necesitan 500 g de venas y semillas que se dispersaran en cada una de las rejillas del deshidratador durante un periodo de tiempo de 4 horas, hasta que estén completamente secas. (Ver figura 4) 16 CAPÍTULO II METODOLOGÍA Pasado el tiempo, se procede a molerlas, hasta que quede lo más fino posible, esto es para que al realizar la extracción, se pueda obtener la mayor cantidad de aceite posible. Figura 4: Deshidratador. Fuente: http://www.comohacer.eu/deshidratador Ya obtenida la muestra, la extracción de la capsaicina se llevará a cabo empleando un equipo de destilación tipo Clevenger (ver figura 5), usando la trampa Widwell-Sterling y calentamiento por radiación de microondas mediante un horno convencional LG con potencia de salida de 220 w. Figura 5: Equipo de Extracción. Fuente: http://popups.ulg.ac.be/Base/document.php?id=830 17 CAPÍTULO II METODOLOGÍA TABLA 4: Materiales y equipo para la extracción de capsaicina. MATERIALES EQUIPO 100 g de venas y semillas de chile Matraz de bola de 1000 mL con jalapeño, secas y molidas. unión 24/40. 250 mL de agua destilada. Refrigerante de West. Fibra de vidrio. Vidrio en trozos. Trampa Widwell-Sterling con boca 24/40. Horno. Hielo. Una vez que se instala el equipo, los materiales se introducen de la siguiente manera: en el matraz de bola de 1000 mL se colocarán unos trozos pequeños de vidrio que servirán como cuerpos de ebullición y se cubrirán con una capa de fibra de vidrio. Seguido se introducirán las venas y semillas molidas, mismas que también serán cubiertas por una capa de fibra de vidrio para evitar que sean arrastradas por el vapor. Por último se agrega el agua destilada y se comienza el calentamiento, que durará 40 minutos, haciendo 4 intervalos de 10 minutos cada uno. El hielo se usara entre cada intervalo, para enfriar el equipo. Una vez concluido el proceso de extracción, se procede a retirar la trampa Widwell-Sterling, el aceite (en este caso la capsaicina) debe de haber quedado cristalizado, de no ser así, será necesario separarlo con la ayuda de un embudo de separación. 18 CAPÍTULO II METODOLOGÍA 2.1.2. Cuantificación del nivel de capsaicina por medio de cromatografía liquida de alta eficacia. La cuantificación de la capsaicina es una de las áreas que más han llamado la atención de los investigadores y probablemente la mitad de toda la información generada sobre los capsaicinoides está enfocada a su determinación analítica. . Entre la variedad de técnicas, las dos más importantes que se han desarrollado con base en la pungencia del chile son las técnicas sensoriales de Scoville y Guillete. Otras más consistentes son por colorimetría y cromatografía líquida de alta eficacia (HPLC). [C] Desarrollo del método HPLC El HPLC es un tipo de cromatografía en columna utilizada frecuentemente en bioquímica y química analítica. Es una técnica utilizada para separar los componentes de una mezcla basándose en diferentes tipos de interacciones químicas entre las sustancias analizadas y la columna cromatografía [L]. El compuesto pasa por la columna cromatografica a través de la fase estacionaria (normalmente, un cilindro con pequeñas partículas redondeadas con ciertas características químicas en su superficie) mediante el bombeo de líquido (fase móvil) a alta presión a través de la columna. La muestra a analizar es introducida en pequeñas cantidades y sus componentes se retrasan diferencialmente dependiendo de las interacciones químicas o físicas con la fase estacionaria a medida que adelantan por la columna. El grado de retención de los componentes de la muestra depende de la naturaleza del compuesto, de la composición de la fase estacionaria y de la fase móvil. [F] 19 CAPÍTULO II METODOLOGÍA El tiempo que tarda un compuesto a ser eluido de la columna se denomina tiempo de retención y se considera una propiedad identificativa característica de un compuesto en una determinada fase móvil y estacionaria. La utilización de presión en este tipo de cromatografías incrementa la velocidad lineal de los compuestos dentro la columna y reduce así su difusión dentro de la columna mejorando la resolución de la cromatografía. Los disolventes más utilizados son el agua, el metanol y el acetonitrilo. El agua puede contener tampones, sales, o compuestos como el ácido trifluoroacético, que ayudan a la separación de los compuestos. El método HPLC para determinar la capsaicina, se encuentra basado en la norma ISO 7543-2 publicada en 1993, la cual determina las especificaciones para determinar el contenido de capsaicina en el total de chiles (ya sea que se en polvo o entero) y sus extractos, el cual se describe a continuación. 1. Para la determinación de la capsaicina se utiliza un cromatógrafo de líquidos de alta resolución (HPLC), con detector de arreglo de diodos (Hewlett Packard; serie 1100) calibrado a una longitud de onda de 280 nm de absorbancia (según lo establecido por Collins, 1995). 2. Se utilizara una columna tipo C18 octadecilsilano con partículas de 25 µm de diámetro, 150 mm de longitud y 4.6 mm de diámetro. 3. Se introducirán 2 inyecciones de 20 µL del extracto en el cromatógrafo y el tiempo de análisis será de 20 min a un flujo de 1.0 mL/min. 4. La fase móvil consistirá de una solución metanol-agua, en una relación de 73/27.[F] 20 CAPÍTULO II METODOLOGÍA La cuantificación de capsaicina se hace con base en las curvas patrón correspondientes a los estándares 8-metil-Nvanillil- 6-nonenamida (Capsaicina, Sigma Co.) en concentraciones de 0.1, 0.05, 0.025 mg/mL. Y el contenido de capsaicinoides se transformara a Unidades Scoville de Picor, con base a la fórmula: [H] = + × 16.1 (1) En México algunas empresas como Herdez S.A, y Mc Cormick tienen respetar el procedimiento establecido en la norma NMX-F-389-1982, para determinar el grado de capsaicina que se encuentra presente en sus productos, la cual se describe en el Anexo 3.[F] La Secretaria de Salud, La Secretaria de Comercio y Fomento Industrial y La Procuraduría Federal del Consumidor, se basan en la norma oficial mexicana NOM-119-SSA1-1994: Bienes y servicios: materias primas para alimentos, productos de perfumería y belleza, colorantes orgánicos naturales, especificaciones sanitarias. Para determinar el grado de capsaicina en los capsicums, cuyo procedimiento se menciona en el anexo 4. [F] 2.2. Segunda etapa: elaboración del gas pimienta. En la segunda etapa se trata de fabricar el gas pimienta, usando como base la capsaicina que se extrajo de las venas y semillas del chile jalapeño, elemento que será pieza clave para lograr el efecto de picor, y elementos adicionales que le darán la consistencia del gas a nuestro producto, para ello se necesita lo siguiente.[J] 21 CAPÍTULO II METODOLOGÍA TABLA 5: Materiales y equipos para elaborar el gas pimienta. MATERIALES EQUIPO Capsaicina 0.5 mL. Matraz de destilación. Glicerina 10 g. refrigerante Bisulfato de Sodio 2 g. Matraz de erlenmeyer 300 mL Etanol 50 mL. Equipo para soporte Recipiente de almacenaje. Procedimiento 1. Se instala el equipo como se muestra en la figura 6. Una vez instalado el equipo, en el matraz, se colocan la capsaicina, la glicerina y el bisulfato de sodio, mismos que se mezclarán con el etanol. [J] Figura 6: Equipo para la obtención del gas pimienta. Fuente: http://www.panreac.es/spanish 22 CAPÍTULO II METODOLOGÍA 2. En seguida, se procede a calentar la mezcla hasta llegar a un punto de ebullición, se comenzará a notar un burbujeo y espuma, las burbujas indican que el gas se está procesando. 3. Una vez que la mezcla termine de hacer espuma, en el fondo del matraz se notará un residuo color café lo cual indica que el gas ha sido generado y que la reacción está terminada. Se retira la fuente de calor y se aguarda a que el gas termine de condensarse. 4. La solución obtenida en el matraz, es el producto final: el gas pimienta. Cuando este ya este frio, se pasa al recipiente donde será embazado, y quedará listo para usarse.[J] Balance de energía para calcular la cantidad de energía necesaria para vaporizar el aceite esencial Balance global al hidrodestilador: = El calor de energía necesario (Qnecesario) para realizar esta operación está compuesto por tres términos. a) Energía para el calentamiento del hidrodestilador (Qagua): = + = = (2) ∆ λ Donde λ = h = h 23 CAPÍTULO II METODOLOGÍA b) Energía para el calentamiento de las venas y semillas de chile jalapeño (QAc): = ∆ + λ (3) Donde la capacidad calorífica (Cp) del agua se toma a partir de tablas generales (Yunus A. Cengel. 2007). c) Flujo de calor perdido al exterior debido a la convección natural (Qperdido) =ℎ ( − ) (4) Donde el calor perdido por convección en las pérdidas del horno es despreciable. Por lo tanto la energía necesaria es calculada como una suma de las energías anteriores, con respecto a un periodo de tiempo de operación: = + + (5) Tomando en cuenta que la energía pérdida es mínima o nula se tiene que: = =( ∆ + λ) + + (6) ∆ + λ (7) Para calcular la energía necesaria que se necesita para vaporizar el aceite esencial se considera que: Potencia: 1650 W Tiempo de operación: 40 minutos Temperatura: 30°C – 100°C 24 CAPÍTULO II METODOLOGÍA Considerando que se usó al 50% de la potencia: = (300 ) = 825 (2400 ) = 1,980,000 1 1000 1 1000 1000 = 0.3000 90%agua = 0.2700 Kg (evaporada) 10%agua = 0.0300 Kg (líquido) = = 4.1830 = (0.3 = ∆ + ° λ ) 4.1830 ° (100° − 30° ) + (0.2700 = (87,843 ) + (633,122.8801 ) = 720,965.8801 ) 2,344,899.5560 − = 1,980,000 − 720,965.8801 = 1,259,034.1200 La energía necesaria para separar 0.0567 g de oleorresina de capsicum es de: QAc = 1,259,034.1200 J 25 CAPÍTULO III RESULTADOS CAPÍTULO III RESULTADOS En la primera etapa de este proyecto se realizó la extracción de la capsaicina, pieza clave en este producto. Primeramente se adquirió una muestra de 8 kg de chile jalapeño, a los cuales se les retiro las venas y semillas, obteniendo una muestra de 825 g. en venas y semillas. Posteriormente se introdujeron en el deshidratador, durante un periodo de 4 horas., y finalmente el resultado obtenido fue de 247.5000 g. en venas y semillas secas (ver figura 7). Figura 7: Venas y semillas secas de la muestra de chile jalapeño. Para iniciar con la extracción se tomaron 100 g. de la muestra de venas y semillas secas previamente molidas y se depositaron en el matraz con 300 mL de agua destilada. Se instaló el equipo como se muestra en la figura 8. 26 CAPÍTULO III RESULTADOS Después de haber sido sometida la muestra a la radiación del microondas durante un periodo de 40 minutos, el resultado finalmente obtenido fue un sólido que presentaba una característica muy grasosa, un color blanco, y con un olor muy peculiar al del chile y altamente irritante cuyo peso fue de 0.0567 g. (ver figura 9). Figura 8: Equipo empleado para la extracción de capsaicina. Figura 9: Resultado de la obtención de la capsaicina Durante esta primera etapa también se realizó la cuantificación del nivel de la capsaicina obtenida, entre la variedad de técnicas, las dos más importantes que se han desarrollado con base en la pungencia del chile son las técnicas sensoriales de Scoville y Guillete. Otras más consistentes son por colorimetría y cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) (García y Ortega, 1996). [H] Para la muestra obtenida se utilizó un cromatógrafo de líquidos de alta resolución como el que se muestra en la figura 10, calibrado a una longitud de onda de 280 nm de absorbancia Se utilizó una columna tipo C18 con partículas de 25 μm de 27 CAPÍTULO III RESULTADOS diámetro, 150 mm de longitud y 4.6 mm de diámetro. Se inyectaron 20 μL del extracto en el cromatógrafo y el tiempo de análisis fue de 35 min. [H] Figura 10: Cromatógrafo de líquidos de alta resolución. En la figura 11 se muestra el resultado del análisis del HPLC para las oleorresinas del compuesto capsicum: la capsaicina (CAP) y la dihidrocapsaicina (DHC), considerando esos datos y los que se muestran en la tabla 6, se pueden calcular las concentraciones de la capsaicina y la dihidrocapsaicina mediante las siguientes formulas [N]: Para la concentración de la capsaicina: = . . (8) Y para la concentración de la dihidrocapsaicina: = . . (9) 28 CAPÍTULO III RESULTADOS 1 2 Figura 11: Cromatograma del compuesto capsicum, (1) capsaicina, (2) dihidrocapsaicina. Tabla 6: Resultados del área bajo los picos de los compuestos capsicums CAPSAICINOIDES PICO TIEMPO DE AREA RETENCIÓN min mAU CAP 1 3.43 540.3 DHC 2 3.8 36.7 Sustituyendo los valores de la tabla 6 con la fórmula 8, para la capsaicina obtenemos: = 540.3 + 17.567 = 0.1091 5111.815 El resultado lo convertimos a ppm y tenemos: = 0.1091 1000 1 = 109.1328 ó109.1328 29 CAPÍTULO III RESULTADOS Y para la dihidrocapsaicina obtenemos: : 36.7 + 100.579 = 0.0261 5258.740 1000 1 = 0.0261 = 26.1049 ó26.1049 Los resultados obtenidos pueden ser convertidos a unidades Scoville (US) para determinar el grado de pungencia de la muestra de chile jalapeño que fue analizada, para ello se considera la siguiente fórmula: [H] Determinación del total de US presentes en la capsaicina: = + × 16.1 (1) Sustituyendo los resultados anteriores en la fórmula 1: = (109.1328 ) × 16.1 = 2,177.3283 + 26.1049 De igual manera se puede determinar las unidades Scoville presentes en la dihidrocapsaicina mediante la siguiente fórmula: [H] = + × 9.3 (10) Sustituyendo valores: = (109.1328 + 26.1049 ) × 9.3 = 1,257.7113 30 CAPÍTULO III RESULTADOS La cuantificación de capsaicina y dihidrocapsaicina se hizo tomando como base de referencia las curvas patrón correspondientes a los estándares 8-metil-N-vanillil-6nonenamida (Capsaicina, Sigma Co.) en concentraciones de 0.1 (1), 0.05 (2), 0.025 (3) mg/mL de metanol, y 8-metil-N-vanillilnonamida (dihidrocapsaicina, Sigma Co.) en concentraciones de 0.22 (1), 0.11(2), 0.055 (3) mg/mL de metanol (ver Figura 12, 13). El contenido de capsaicinoides (µ g) se transformó a Unidades Scoville de Picor, con base a la fórmula mostrada la cual considera que 1 Unidad Scoville de Picor: 15 µg de capsaicinoides totales (AOAC, 1998); la cantidad de capsaicinoides totales correspondió únicamente al contenido de capsaicina y dihidrocapsaicina. En la figura 12 se muestra el cromatograma de las soluciones estándar de la capsaicina y la dihidrocapsaicina así como su tiempo de retención. [N] Figura 12: Cromatograma de soluciones estándar de compuestos capsaicinoides 31 CAPÍTULO III RESULTADOS Figura 13: Curvas patrón de soluciones estándar. Sin embargo, debido a los resultados obtenidos, se puede decir que la muestra analizada del chile jalapeño, no tenía el nivel de pungencia establecido por la Escala Scoville, pues el rango en que se encuentra el chile jalapeño esta dado entre los 2,500 y 8,000 US, y el resultado obtenido fue de 2,177.3300 US. Pero aun así este nivel de pungencia es considerable para poder elaborar el gas pimienta. Durante la segunda etapa del proyecto se utilizó una mezcla formada por glicerina, bisulfato de sodio y la muestra obtenida de capsaicina. La reacción duro 2 horas, y durante ese tiempo se pudo notar que se desprendía un olor muy parecido al 32 CAPÍTULO III RESULTADOS amoniaco. El resultado final fue un líquido de color rojizo, muy irritante al tacto, cuya solución fue de 5 mL de gas pimienta. En la figura 13 se muestra el producto obtenido ya en el recipiente. [B, H] Figura 14: Gas Pimienta en un envase con atomizador. Análisis económico del producto Con el fin de conocer la rentabilidad del producto, se realizó el siguiente análisis económico: Energía gastada = 1,259,034.1200 J = 349.7317 w/h = 0.3497 Kw/h Materia prima: 8kg Solvente (agua): 1 L A continuación en la tabla 7 se muestran los detalles de los gastos en pesos del material utilizado. 33 CAPÍTULO III RESULTADOS TABLA 7: Costos COSTOS Costo unitario Costo materia prima Costo total $ 12.00 $ 96.00 $ 3800.00 $ 3800.00 $ 21.00 $ 21.00 Costo de energía* $ 1.5522 $ 1.62 Costo de mano de obra $ 250.00 $ 500.00 $ 50.00 $ 50.00 total $ 4,468.62 Costo del equipo Costo del agua utilizada Costo del envasado *Costo de tarifas mexicanas (informe preparado por el sindicato mexicano de electricistas) [M] Considerando la tarifa establecida por la CFE para empresas para el año 2011, el costo por Kw es de $ 1.5522 por hora, tomando en cuenta que el equipo se utilizó en 3 ocasiones durante 40 minutos y se gastó 0.3497 kw/h en cada ocasión, se puede decir que ese fue el costo de la energía, sin embargo, este dato no se puede considerar exacto dado que en las tarifas de la CFE no hay equidad, ya que los cobros no los hacen debido a lo que se gaste por kw/h, sino por bloques de consumo, por ejemplo de si se consume hasta 75 kw/h la tarifa seria de 1.5522, pero al rebasar este limite el precio aumenta casi 3 veces más. 34 CONCLUSIONES CONCLUSIONES Se logró elaborar la solución de gas pimienta a base de la oleorresina del chile jalapeño con una concentración de 2% de oleorresina de capsicum. El análisis químico de la oleorresina de chile jalapeño obtenido muestra la presencia de algunos capsaicinoides como capsaicina y dihidrocapsaicina. Estos compuestos son responsables de la pungencia de los chiles y en este caso del chile jalapeño, además de que es mayor la concentración de la capsaicina presente en la oleorresina obtenida que la dihidrocapsaicina. En base a los resultados obtenidos de la prueba de cromatografía liquida de alta eficacia se pudo cuantificar la concentración de la capsaicina y la dihidrocapsaicina presente en la oleorresina obtenida del chile jalapeño. También se pudo calcular los grados Scoville de la oleorresina obtenida y se encontró por debajo del rango normal perteneciente al chile jalapeño. Para aumentar el contenido de capsaicinoides se deberá utilizar chiles jalapeños maduros ya que la concentración es mayor que si utilizará verdes. En base a los resultados obtenidos, se pudo notar que el producto final fue una solución de 5 mL de contenido, que para lograrlo se necesitaron 8 kg de materia prima, en este caso el chile jalapeño, el cual es producto originario de la región, por el cual resulta relativamente económico la adquisición de dicho chile, en comparación a los demás chiles que se encuentran en el mercado local y no son originarios de la región. 35 CONCLUSIONES También se logró comprobar la efectividad del método de la hidrodestilación asistida por la radiación de microondas, ya que se pudo obtener la oleorresina de chile en un tiempo mucho menor que si se hubiera hecho con el equipo soxhlet, además de que resulta económico porque no se utilizan solventes organicos, sino que, solo se utiliza el agua destilada como solvente. 36 BIBLIOGRAFIA BIBLIOGRAFÍA. A.- Pita, René. Armas químicas: la ciencia en manos del mal. (2008). Madrid: Plaza y Valdés. ISBN 978-84-96780-42-2. [Online] B.- ARMA QUÍMICA: WIKIPEDIA: La Enciclopedia Libre. [Online]. Wikipedia, 2006. [Citado en Agosto 29 de 2011]. Disponible en: http://es.wikipedia.org/wiki/Arma_Quimica. C.- ESCALA SCOVILLE: WIKIPEDIA: La Enciclopedia Libre. [Online]. Wikipedia, 2006. [Citado en Octubre 1 de 2006]. Disponible en: http://es.wikipedia.org/wiki/Escala_Scoville. D.- Rodríguez, Javier. La química como armamento (2001). E.- CHILE JALAPEÑO: WIKIPEDIA: La Enciclopedia Libre. [Online]. Wikipedia 2006. [Citado en Septiembre 4 de 2008]. Disponible en: http://es.wikipedia.org/wiki/Chile_Jalapeño. F.- Restrepo, Mauricio. Oleorresinas de capsicum en la industria alimentaria (2006). Antioquia, Colombia. G.- Zavaleta, Leonor. Instituto tecnológico de Zacatepec: departamento de ingeniería química y bioquímica, Extracción de capsaicinoides (marzo 2009). H. - Arthur Gahungu, Eric Ruganintwali, Eric Karangwa, Xiaoming Zhang and Daniel Mukunzi, Volatile Compounds and Capsaicinoid Content of Fresh Hot Peppers (Capsicum Chinense) Scotch Bonnet Variety at Red Stage: State Key Laboratory of Food Science and Technology, School of Food Science and 37 BIBLIOGRAFIA Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu, P.R. China. Advance Journal of Food Science and Technology 3(3): 211-218, 2011.ISSN: 2042-4876 © Maxwell Scientific Organization, 2011. Received: March 30, 2011. Accepted: May 13, 2011. Published: June 06, 2011 I.- Secretaria de comercio y fomento industrial: Norma Mexicana NMX-F-389-1982, “alimentos, especias y condimentos; determinación de capsaicina en capsicums” (1982). J.- http://www.taringa.net/posts/info/1841678/Lo-que-querias-saber-sobre_-Armasno-letales.html. K.-Diego Márquez, Sitlali. Tesis: Evaluación del rendimiento en la obtención del aceite “Piper Auritum Kunth” mediante la hidrodestilacion asistida por microondas. (2011, Universidad Veracruzana). L.-Amador Loyda, Thalia. Tesis: Comparación de aceite esencial de limón persa, italiano y criollo mediante cromatografía de líquidos. (Junio 2010, Universidad Veracruzana). M.- Sindicato Mexicano de Electricistas. Disponible en: http://www.cfe.gob.mx. N.- Cázares Sánchez, Esmeralda. Capsaicinoides y preferencia de uso en diferentes morfotipos de chile (capsicum annuum L.) del centro-oriente de Yucatán. Genética y Botánica, campus Montecillo, colegio de Postgraduados. Estado de México. 38 GLOSARIO GLOSARIO ABSORBANCIA: es la intensidad de la luz con una longitud de onda específica que es pasada por una muestra. ACRE: sustancia que es ácida, áspera y picante en el sabor y en el olor. Que es rudo o poco agradable. ALCALOIDES: aquellos metabolitos secundarios de las plantas sintetizados, generalmente, a partir de aminoácidos. Los alcaloides verdaderos derivan de un aminoácido, son por lo tanto nitrogenados. Son básicos (excepto colchicina), y poseen acción fisiológica intensa en los animales aun a bajas dosis con efectos psicoactivos, por lo que son muy usados en medicina para tratar problemas de la mente y calmar el dolor. Ejemplos conocidos son la cocaína, la morfina, la atropina, la colchicina, la quinina, cafeína y la estricnina. ARRASTRABLE: que se deja llevar, o arrastrar por alguna sustancia. CAPSAICINA: es el componente activo de los pimientos picantes (Capsicum) CAPSAICINOIDES: aquellas sustancias relacionadas con la capsaicina y se producen como un metabolito secundario en diversas plantas del genero capsicum. CARCINOGÉNICO: es aquél que puede actuar sobre los tejidos vivos de tal forma que produce cáncer. Generalmente, el término se refiere a aquellos agentes que han sido introducidos por el hombre, pero puede usarse para toda sustancia que tiende a causar cáncer. 39 GLOSARIO CLOROAMINA: compuesto químico con la fórmula NH2Cl. Por lo general se utiliza como una solución diluida en función desinfectante. CROMATOGRAFÍA: método físico de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia y la física. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes. CUANTIFICACIÓN: es el proceso de convertir un objeto a un grupo de valores discretos ELUIDO: que fue separado de un sólido mediante un lavado. ENCURTIDOS: nombre que se da a los alimentos que han sido sumergidos (marinados) en una solución de sal, y que fermenta por sí solo o con la ayuda de un inoculo (microorganismo como Lactobacillus plantarum), en el cual baja el pH y aumenta la acidez del mismo con el objeto de poder extender su conservación. ENDORFINAS: péptidos opioides endógenos que funcionan como neurotransmisores. Son producidas por la glándula pituitaria y el hipotálamo en vertebrados durante el ejercicio, la excitación, el dolor, el consumo de alimentos picantes o el consumo de chocolate, por ejemplo, el enamoramiento y el orgasmo, y son similares a los opiáceos en su efecto analgésico y de sensación de bienestar. HIDRODESTILACIÓN: proceso para obtener el aceite esencial de alguna materia prima vegetal mediante el uso del vapor saturado a presión atmosférica. HIDRÓFOBA: sustancias que son repelidas por el agua o que no se pueden mezclar con ella. Un ejemplo de sustancias hidrófobas son los aceites. 40 GLOSARIO HIDRÓLISIS: es una reacción ácido-base entre una sustancia, típicamente una sal, y el agua. INOCUA: Que no hace daño. LACRIMÓGENO: Dícese de la sustancia o factor que provoca o estimula la secreción de lágrimas. LIPOFÍLICO: sustancia que tiene afinidad por las grasas y gran solubilidad en los lípidos, posee la propiedad fisicoquímica que favorece el equilibrio de partición y reparto de un soluto entre el agua y un disolvente orgánico inmiscible, a favor de que este influye en la absorción y bioacumulación. MIELINIZADA: se dice de la zona de la mielina que se sitúa en el sistema nervioso, formando vainas que rodean los axones de las neuronas. Se trata de un sistema de bicapas fosfolipídicas constituidas por esfingolípido, que permite la transmisión de los impulsos nerviosos entre las distintas partes del cuerpo a través de su efecto aislante. MUTAGÉNICO: Una sustancia o agente físico que causa mutaciones, es decir, que altera de forma permanente el ADN de las células. NEURALGIAS: síntoma provocado por un fallo del sistema nervioso consistente en un trastorno sensitivo o dolor sin que la función motora se vea afectada. OLEORRESINA: es una mezcla más o menos fluida de resina y aceite esencial. ORGANOLÉPTICO: Se dice de las propiedades de los cuerpos que se pueden percibir por los sentidos. 41 GLOSARIO PUNGENCIA: Sensación de picor, ardor e incluso irritación que producen algunos alimentos. RECEPTOR VANILLOIDE: se considera un receptor importante que integra varias señales diferentes del dolor. RICINA: toxina que se extrae de las semillas del ricino (Ricinus communis). Pertenece a la familia de proteínas conocidas como proteínas inactivantes de los ribosomas (RIP) que se unen a los ribosomas de las células eucariotas paralizando la síntesis de proteínas, lo que causa la muerte. SEMIHERBACEAS: Es una planta blanda y pequeña, no tiene leño o madera como si puede tener un árbol o un arbusto. TRIFLUOROACÉTICO (ACIDO): acido que se usa principalmente para análisis e investigación de química fina. VESICANTE: sustancia que puede ser sólida, líquida o gaseosa y que en contacto con la piel produce irritación y ampolla. Su acción va desde la irritación leve de la piel a la ulceración y fuertes quemaduras, llegando a producir la destrucción de los tejidos. VIOLÁCEAS: Familia de plantas dicotiledóneas, del orden parietales, flores axilares de cinco pétalos y fruto en cápsula o baya. 42 ANEXOS ANEXOS ANEXO 1: Escala Scoville para determinar las unidades de capsaicina que contienen los diferentes tipos de chiles. ESCALA DE SCOVILLE Unidades Scoville Tipo de chile 15.000.000–16.000.000 8.600.000-9.100.000 855.000–1.041.427 Capsaicina pura Nivel estándar del gas pimienta en EUA. Munición irritante del FN 303 Naga Jolokia 350.000–580.000 Habanero Savinas Roja 100.000–350.000 Chile Habanero, Scotch Bonnet 100.000–350.000 Chile Datil, Capsicum Chinense 100.000–200.000 Rocoto, Chile Jamaicano picante, Piri Piri 50.000–100.000 Chile Thai, Chile Malagueta, Chile Chiltepín, Chile Piquín 30.000–50.000 10.000–23.000 4.500–5.000 Pimienta Roja o de Cayena, Chile Picante Peruano, Chile Tabasco, algunos Chiles Chipotle Chile Serrano, algunos Chiles Chipotle Variedad de Nuevo México del Chile Anaheim, Chile Húngaro de cera 2.500–8.000 Chile Jalapeño 1.500–2.500 Chile Rocotillo 1.000–1.500 Chile Poblano 600-800 Salsa Tabasco 500-1.000 100–500 0 Chile Nuevo México Pimiento, Pepperoncini No picante, Pimiento Verde Fuente: http://es.wikipedia.org/wiki/Escala_Scoville. 43 ANEXOS ANEXO 2: Normas para el empleo de aerosoles defensivos con agente activo OC. 1.- El aerosol constituye un medio de defensa idóneo para aquellas situaciones conflictivas en que no se dan los requerimientos que justifiquen el empleo de armas de fuego, esto es, de manera restrictiva en situaciones límite y sustituyendo a éstas. 2.- Su uso habrá de limitarse a las acciones de agresión, resistencia o detención en las que sea preciso la inmovilización temporal y pueda justificarse su aplicación en atención a la racionalidad del medio empleado. Está especialmente indicado: Para reducir a individuos de gran corpulencia y especialmente agresivos, o grupos desproporcionados en número con la Fuerza actuante. Desalojo de locales cerrados de pequeñas dimensiones, empleando máscaras de gas la Fuerza actuante. Conducciones de presos, especialmente cuando sea preciso permanecer acompañándolos entre el público –caso de los hospitales y salas de audienciadonde pueden producirse fugas por forcejeo o ayuda exterior y se entienda muy limitada la utilización de las armas. Evitar el ataque de animales, especialmente perros, en auxilios, entradas para registro, etc., si bien éste efecto no está suficientemente probado. 3.- Su efecto óptimo se logra aplicándolo a distancia inferior a 3 metros y dirigiendo el gas hacia la cara del agresor o sobre las cabezas del grupo a reducir. 4.- Habitualmente se utilizarán en lugares abiertos o aireados. Se asegurará la evacuación y ventilación por un periodo de tiempo superior a una hora, si inevitablemente fuera necesario emplearlos en lugar cerrado y para casos muy excepcionales. La simple brisa puede introducir la pulverización en 44 ANEXOS compartimentos cerrados ajenos al lugar de empleo y producir efectos no deseados sobre sus ocupantes. 5.- A pesar del efecto contundente y disuasivo, generalmente no produce lesiones ni secuelas. No obstante, sus efectos no suelen ser neutralizados por pañuelos ni máscaras protectoras improvisadas. 6.- La presentación del agente activo OC, no explosivo ni inflamable a temperatura ambiente, en envase de bolsillo previsto de capuchón para dirigir la pulverización y proteger de descargas accidentales, garantiza la seguridad de empleo al usuario y permite las siguientes ventajas: Agredir blancos específicos. Efecto instantáneo sobre el adversario. No produce efectos secundarios. Pulverización a una distancia entre 3 y 5 metros con un ángulo de dispersión entre 8 y 10 grados. 7.- El envase dispone de seis descargas de un segundo de duración cada una. La dosis normal no debiera exceder de dos segundos. Se debe evitar la exposición prolongada o repetida así como inhalar sus vapores, descartando una administración precipitada con riesgo de contaminación al usuario. 8.- La primera consecuencia de la aplicación es el cierre repentino de ojos con una fuerte sensación de picor que se extiende a las zonas afectadas, durante aproximadamente un mínimo de 15 minutos. 9.- Los efectos tóxicos que alguna vez han sido apreciados son agitación, tos, dolor en el pecho y posible ataque de pánico por la sensación de asfixia aguda. En piel y mucosas de las zonas descubiertas produce eritema y fuerte sensación de quemadura, lagrimeo abundante, inflamación de los párpados y conjuntivitis. 45 ANEXOS 10.- Una vez reducida la persona, se procederá a un inmediato reconocimiento médico de la misma, sin perjuicio de que la Fuerza actuante le preste los primeros auxilios siguientes: No frotar nunca la zona expuesta o irritada. Retirar a la persona de la zona contaminada. Contacto con los ojos: Lavarlos con abundante agua fría, al menos durante 15 minutos. Contacto con la piel: Lavarla con agua y jabón o detergente suave y agua hasta la atención médica. Inhalación: Controlar la respiración y realizar la respiración artificial si fuese necesario. Mantener al afectado abrigado y tranquilo hasta la atención médica. Ingestión: Beber mucho agua hasta provocar el vómito y solicitar atención médica. 46 ANEXOS ANEXO 3: Procedimiento para determinar el grado de capsaicina establecido por la norma NMX-F-389-1982. Este método se basa en la determinación del contenido de capsaicina en los capsicums; en primer lugar mediante una serie de diluciones para la elaboración de una curva tipo, y en segundo lugar una extracción mediante columna. MATERIALES REACTIVOS APARATOS EQUIPO Pipetas de 20 y 50 Acetato de etilo Balanza analítica Columna cm3 con + 0.0001 g de cromatografía sensibilidad 19*250 mm para de con llave de paso Frascos Metanol volumétricos de 50 y 100 cm Equipo de reflujo capaz de medir el 3 rango UV Probeta Frasco Espectrofotómetro Alúmina activa de Carbón activado extracción Perlas de Vidrio* Patrón de capsaicina Fuente: Secretaria de comercio y fomento industrial: Norma Mexicana NMX-F-389-1982, “alimentos, especias y condimentos; determinación de capsaicina en capsicums” (1982). Curva de calibración Para la solución reguladora (SR) disolver 0.05 g de capsaicina en un frasco volumétrico de 50 cm3 con metanol al 90% y aforar. Solución de trabajo A 4 cm3 de la SR llevarla a 50 cm3 con metanol al 90 % = 80 mg/cm3. A 3 cm3 de la SR llevarla a 50 cm3 con metanol al 90 % = 60 mg/cm3 A 2 cm3 de la SR llevarla a 50 cm3 con metanol al 90 % = 40 mg/cm3. A 1 cm3 de la SR llevarla a 50 cm3 con metanol al 90 %= 20 mg/cm3. 47 ANEXOS Determinar los valores de absorbancia a 281.5 nm para cada una de estas soluciones usando metanol al 90 % como blanco (correr una gráfica de elaboración 340 a 240 nm). Ajustar la línea de cada curva y trazar la absorbencia corregida en 281.5 nm contra la concentración en una gráfica en papel lineal. Muestra Pesar 2 g de muestra preparada de capsicums en el interior de un matraz de extracción de 125 cm3. Adicionar aproximadamente 50 cm3 de acetato de etilo y reflujar durante 2 1/2 horas. Enfriar y filtrar en un matraz volumétrico de 100 cm3 y lavar con acetato de etilo hasta que el extracto quede claro. Transferir los lavados a un matraz volumétrico y diluir a 100 cm3 con acetato de etilo. Preparación de la Columna Insertar lana de vidrio mediante un tubo hasta el fondo de la columna. Introducir 25 cm3 de acetato de etilo estando la llave cerrada. Adicionar 3 g de alúmina activada y dejar asentar. Use alúmina tomada directamente del horno y pesada en caliente. Drenar la columna hasta 0.5 cm por arriba de la superficie de la alúmina. Procedimiento Transferir 20 cm3 del extracto preparado, a la columna. Drenar la columna aproximadamente 0.5 cm por arriba de la alúmina. Lavar la columna con 50 cm3 de acetato de etilo en tres porciones (15, 15 y 20 cm3) y drenar hasta 0. 5 cm por arriba de la alúmina después de los primeros lavados. La columna es dejada drenar hasta sequedad después del último lavado. 48 ANEXOS Diluir la capsaicina con 45 cm3 de metanol al 90 %, recolectar el lavado en un matraz volumétrico de 50 cm3 con metanol al 90 %. Correr una gráfica de 340 a 240 nm hasta obtener una absorbencia máxima en 281.5 nm. Si el color de la solución final es fuerte, puede distorsionarse el pico (generalmente la distorsión impide ajustar en forma adecuada la línea base), esta solución debe pasarse directamente a una columna con carbón activado. Usar una columna de cromatografía de 14 mm de diámetro interior y ajustar la llave de paso. Llenar la columna con lana de vidrio y adicionar 3 g de una mezcla de carbón y perlas de vidrio, hasta una altura de uno a dos cm. Pasar la solución final a través de esta columna descartar los primeros 10 a 15 cm3 de la solución y colectar los próximos 10 cm3. Expresión de resultados El contenido de capsaicina en la muestra se calcula con la siguiente fórmula expresada en unidades de Scoville. Dónde: U.S. = Unidades de Scoville 0.0667 = Es la concentración teórica de la capsaicina, la cual se utiliza como un factor de conversión a unidades de Scoville. La concentración final de la muestra (g/cm3) será 0.008 g/cm3, cuando se siga el método anteriormente descrito. Notas: 1. Los flujos usados en el procedimiento de cromatografía son aproximadamente de 4 cm3/min para la separación del acetato de etilo, sustancias que interfieren y para la elución de la capsaicina con una solución acuosa de etanol. 49 ANEXOS ANEXO 4: Procedimiento para la determinación de la capsaicina contenida en capsicums según lo establecido por la norma oficial mexicana NOM-119-SSA1-1994: Bienes y servicios: materias primas para alimentos, productos de perfumería y belleza, colorantes orgánicos naturales, especificaciones sanitarias. Los materiales a utilizar para realizar esta determinación son los siguientes: Metanol. 5 g de Capsaicina. Agua destilada. Pesar exactamente 5 g en un matraz, adicionar 100 mL de metanol al 70%, agitar por 30 minutos. Dejar reposar la solución por 5 minutos y filtrar. Tapar el embudo para evitar la evaporación. Los primeros 25 mL del filtrado se descartan y el resto del filtrado se mezcla bien. Distribuir esta solución en matraces de 100 mL y prepararlos de la siguiente manera: Matraz 1 2 3 4 Solución filtrada 4.00 mL 4.00 mL 4.00 mL 4.00 mL Agua destilada 17.80 mL 16.80 mL 19.00 mL 18.00 mL HCl 1N 1.00 mL 1.00 mL 1.00 mL 1.00 mL NaOH 1N 2.00 mL 2.00 mL 2.00 mL 2.00 mL A1 A2 A3 A4 Valor determinado Las soluciones se mezclan en los matraces con 100 mL de metanol. La absorbancia se evalúa A1-A4, las 4 soluciones son medidas a 248 y 296 nm (lámpara de deuterio, celda de cuarzo). 50 ANEXOS Cálculos: a) 248 [( ) ( b) 296 [( ) ( × × )]× = % )]× = % Dónde: 2500 = dilución. 314 y 127 = factores de corrección. W = Peso de la muestra en g. Las determinaciones de las réplicas de (a) y (b), no pueden diferir más de 10%. De lo contrario se deberá repetir la determinación. 51 ÍNDICE DE FIGURAS ÍNDICE DE FIGURAS Figura 1: Presentación en la que se encuentra a la venta el gas pimienta. II Figura 2: Partes del chile jalapeño. 05 Figura 3: Heridas causadas por el gas pimienta. 10 Figura 4: Deshidratador. 17 Figura 5: Equipo de extracción. 17 Figura 6: Equipo para la obtención del gas pimienta. 22 Figura 7: Venas y semillas secas de la muestra de chile jalapeño. 26 Figura 8: Equipo empleado para la extracción de capsaicina. 27 Figura 9: Resultado de la obtención de la capsaicina. 27 Figura 10: Cromatógrafo de líquidos de alta resolución. 28 Figura 11: Cromatograma del compuesto capsicum, (1) capsaicina, dihidrocapsaicina. (2) 29 Figura 12: Cromatograma estándar de compuestos capsaicinoides. 31 Figura 13: Curvas patrón de soluciones estándar. 32 Figura 14: Gas pimienta en un envase con atomizador. 33 ÍNDICE DE TABLAS ÍNDICE DE TABLAS Tabla 1: Descripción del gas pimienta. 02 Tabla 2: Propiedades físicas del gas pimienta. 03 Tabla 3: Propiedades físicas y químicas y de la capsaicina. 07 Tabla 4: Materiales y equipos para la extracción de la capsaicina. 18 Tabla 5: Materiales y equipos para elaborar el gas pimienta. 22 Tabla 6: Resultados del área bajo los picos de los compuestos capsicums. 29 Tabla 7: Costos. 33