En el presente trabajo se encontr que las concentraciones

EXPRESION DEL GEN CYP1A1 HEPATICO DE TILAPIA COMO
BIOINDICADOR DE CONTAMINACION ACUATICA EN 2 LAGUNAS
COSTERAS NORVERACRUZANAS
Pablo SAN MARTIN1,2, Luisa C. R. HERNANDEZ3, Humberto GARZA4, Graciela
GARCIA1*, Omar ZAPATA5 y Arturo ORTEGA3.
1
Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Autónoma de Nuevo León, San
Nicolás de los Garza, Nuevo León. 2Facultad de Ciencias Biológicas y
Agropecuarias, Universidad Veracruzana-Tuxpan, carretera Tuxpan-Tampico, Km.
7.5, Tuxpan, Veracruz, 3Depto. de Genética y Biología Molecular, CinvestavZacatenco, Apdo. postal 14-740 México, D.F., 4ALS-Indequim, Monterrey, Nuevo
León, 5Depto. de Recursos del Mar, Cinvestav-Mérida, Km 6 Antigua Carretera a
Progreso, Cordemex, 97310, Mérida, Yucatán.
*Av. Pedro de Alba s/n, Facultad de Ciencias Biológicas/UANL (Jefatura de
Alimentos), San Nicolás de los Garza, Nuevo León; Tel: 01 (81) 83768771,
[email protected]
Palabras clave: PAH; HTP; mRNA; sedimentos, Oreochromis niloticus
RESUMEN
Se determinó la concentración de Hidrocarburos Aromáticos Policíclicos (HAP) e
Hidrocarburos Totales del Petróleo (HTP) en sedimentos, agua y organismos de
dos lagunas costeras veracruzanas y evaluó la capacidad de los extractos de
sedimentos para inducir la expresión del CYP1A1 en la tilapia (Oreochromis
niloticus), como bioindicador de contaminación. El área de estudio incluyó las
lagunas costeras de Tamiahua y Tampamachoco en el norte del estado de
Veracruz, para cada laguna se establecieron 6 estaciones, se realizaron
muestreos preliminares y definitivos de: sedimento, agua y organismos bajo la
metodología propuesta por la EPA 823B95001, 1995. Se optimizó la extracción,
concentración y purificación de HAP y HTP, para los análisis se utilizaron los
métodos EPA 418.1 y EPA 8270 respectivamente y para organismos el método
EPA 8310. En ambas lagunas y en todas las muestras los HAP se situaron por
debajo del límite de detección, mientras que los HTP fueron registrados en los
sedimentos de la estación 4 y 5 con 2637.52 y 75.41 mg/kg de HTP en Tamiahua
y para Tampamachoco en la estación 5 y 6 con 97 y 204 mg/kg de HTP. Por ello
se elaboraron extractos de sedimentos de las estaciones 4, 5 y 2 de la laguna de
Tamiahua con contaminación alta, moderada y baja respectivamente; los mismos
se inyectaron intraperitonealmente a tilapias, al término de 24 h, los organismos
fueron sacrificados y disectados para obtener los hígados y fueron analizados por
RT-PCR para determinar los niveles del mRNA CYP1A1, se encontró que los
peces tratados con extractos de sedimentos de la estación 4 presentaron un
incremento significativo en más de 16 veces respecto al control (aceite de maíz),
mientras que los peces de las estaciones 2 y 5 presentaron un incremento de 5
veces. El incremento significativo del mRNA hepático en tilapias expuestas a
1
extractos de sedimentos sugiere que la inducción del CYP1A1 puede ser utilizada
como herramienta para el monitoreo de HTP en ecosistemas acuáticos.
INTRODUCCIÓN
Entre los ecosistemas costeros del país sobresalen por diversas causas, las
lagunas costeras, las cuales están catalogadas como los ecosistemas que poseen
las más elevadas tasas de productividad conocidas, tanto primaria como
secundaria, además son áreas utilizadas comúnmente para la protección,
alimentación y reproducción de muchos organismos marinos, por lo que gran
número de pesquerías litorales, como la mayoría de las especies de camarón,
dependen de la conservación de estos ecosistemas; por pequeñas que sean,
mantienen una vida particular en su interior y generalmente son sitios donde la
biodiversidad asociada es un atributo muy importante (Contreras y Castañeda,
2004).
El petróleo es un insumo estratégico para la economía mundial, pues es la
principal fuente de energía en el mundo. Por su importancia en la economía, el
petróleo es un producto codiciado y se invierten grandes cantidades de recursos
en su búsqueda, extracción y refinación (Gold, 2000). Por otra parte, las mayores
pesquerías del mundo se concentran en áreas con una alta productividad
biológica, como son las zonas costeras. En algunas partes del mundo, éstas
comparten su alta productividad con las actividades de la industria petrolera, tal es
el caso de México, donde la producción del petróleo en la plataforma continental
alcanza volúmenes considerables. Por ello, las pesquerías del área estarán
sujetas a una contaminación crónica y a derrames de petróleo intermitentes por
muchos años (Vázquez y Páez, 1987). La contaminación de suelos y aguas con
compuestos derivados de la actividad petrolera, se ha convertido en un problema
en gran número de sitios de explotación, refinación y almacenamiento de
hidrocarburos. Se estima que 1.6 millones de barriles (2.5 108 l) se derraman
anualmente en el mar, que representa aproximadamente el 0.1 % del consumo
mundial por año (Internacional Oil Spill Statistic, 1999; OECD, 1991, en Fernández
2003). Volke y Velasco 2002 mencionan que en México dentro de los compuestos
peligrosos más comúnmente involucrados en emergencias ambientales entre 1997
y 1999 se encuentran el petróleo y sus derivados (gasolina, combustóleo, diesel),
agroquímicos, gas LP y natural, y que dentro de los contaminantes considerados
prioritarios debido a su alta toxicidad y a su persistencia en el ambiente se
incluyen entre otros a los hidrocarburos poliaromáticos (HAP), los cuales se
encuentran como componentes de los hidrocarburos totales del petróleo (HTP).
Los organismos marinos pueden ser utilizados como bioindicadores e integradores
de la calidad de agua en los ecosistemas marinos, debido a que proveen de
información útil acerca del potencial de biomagnificación en la cadena alimenticia
(Peña et al.1996), además se sabe que HAP, bifenilos policlorados (PCBs),
dioxinas, etc. estimulan la expresión de varios miembros de la superfamilia de
genes del citocromo P450, particularmente de la familia CYP1A (Rees et al. 2003).
Actualmente, la inducción del CYP1A en peces es analizada de manera rutinaria
2
en diferentes laboratorios alrededor del mundo y ha sido incorporada a varios
programas de vigilancia internacionales como NOAA (Nacional Oceanic and
Atmospheric Administration). Por otra parte, una combinación de las mediciones
de la inducción del CYP1A junto con otros bioindicadores, pueden dar una señal
de alerta temprana sobre los efectos que puedan causar los contaminantes en los
organismos expuestos y en los ecosistemas.
MATERIALES Y METODOS
El área de estudio (figura 1) incluye las lagunas costeras de Tampamachoco y
Tamiahua en el norte del Estado de Veracruz, ubicadas en la porción occidental
de las costas del Golfo de México entre las coordenadas 20º 18´ y 21º 02´ latitud
norte, 97º 19´ y 97º 22´ longitud este con un área aproximada de 1,500 Hectáreas
para Tampamachoco; 21º 06´ y 21º 20´ latitud norte, 97º 23´ y 97º 46´ longitud
este con un área de 88,000 Hectáreas para Tamiahua (Contreras y Castañeda,
1995) Se prospectó el área de estudio, se elaboró el plan y se realizaron los
muestreos con la metodología propuesta por EPA 823B95001, 1995. Para cada
laguna se establecieron 6 estaciones, el punto exacto de la estación fue registrado
con un sistema de posicionamiento global (GPS). Los sedimentos y organismos
fueron colectados durante los meses de enero y marzo del 2002 en
Tampamachoco y en marzo y octubre del 2003 en Tamiahua. De cada estación,
sedimentos superficiales a una profundidad de 0-5 cm fueron colectados con una
draga de acero inoxidable y colocados en frascos de vidrio de boca ancha, las
muestras fueron colocadas in situ en hielo y posteriormente transferidas en
almacenamiento a -20ºC hasta el análisis. 10 gr de sedimento fueron sometidos a
extracción con soxhlet durante 16 hrs con hexano grado analítico, los extractos
fueron concentrados a 2 ml utilizando un aparato Kuderna-Danish (K-D) siguiendo
el método EPA 3540C.
La cuantificación del PAH en las muestras fue realizada con un cromatógrafo de
gases (GC) Hewlett Packard HP-5890 series II, con interfaz a un detector selectivo
de masas (MS) HP 5971 y una columna capilar HP-5 MS, 30 m X 0.25 mm i.d.
(0.25 μm film). Las temperaturas programadas fueron 30ºC – 290ºC (a una tasa de
7ºC/min), la temperatura fue de 250ºC para el inyector y 280ºC para el detector.
Se utilizó Helio como gas acarreador (flujo 1 ml/min). El MS fue operado en modo
“scanning” de 35 a 550 uma. 2 μl de muestra fueron inyectados y el análisis se
realizó de acuerdo al método EPA 8270 C. Peces, camarones, ostras y jaibas
fueron colectadas frescas con la ayuda de pescadores de la región. Después de la
colecta, las muestras fueron colocadas en bolsas de papel aluminio protegidas
adentro de un frasco de vidrio y congeladas a -70ºC hasta el análisis. Únicamente
músculo de cada especie fue analizado individualmente. Las muestras fueron
homogeneizadas utilizando diclorometano (100 ml) y sometidas a extracción en
soxhlet por 24 hr. Los extractos de cada especie fueron purificados utilizando
columnas de vidrio para remover los lípidos co-extraídos. La cuantificación de los
PAH se utilizando un equipo HPLC siguiendo el método EPA 8310.
3
La extracción de HTP se realizó utilizando el método EPA 418.1 modificado, el
solvente fue vertido a la muestra y se agitó vigorosamente por 2 minutos para
realizar la extracción. Se dejó reposar para permitir la separación de las capas, la
del solvente se filtró a un matraz volumétrico de 100 ml con un embudo y papel
filtro. Los lavados se repitieron 2 ó más veces con otros 30 ml de solvente fresco y
recuperando todo en el matraz, finalmente se aforó a 100 ml y la muestra fue leída
en un espectrofotómetro de infrarrojo a una longitud de onda de 2950 cm-1. La
cuantificación de los HTP se realizó con la ecuación de una curva de calibración
de absorbancia contra concentración en mg/L de una mezcla de hexadecano,
isooctano, clorobenceno y aceite de referencia.
Figura 1. Mapa del área de estudio mostrando la localización de las estaciones de
muestreo en las lagunas de Tamiahua y Tampamachoco, Veracruz.
Para determinar el efecto de HAP y HTP sobre la expresión del CYP1A como
bioindicador de contaminación se seleccionaron 3 estaciones de muestreo
solamente de la laguna de Tamiahua, correspondientes a San Jerónimo, Boca de
Tancochín y Salto el Tigre previamente caracterizadas por presentar alta,
moderada y baja contaminación por HAP y HTP respectivamente. Para ello 10 g
de sedimento (n=6) de las estaciones de fueron sometidos a extracción por
4
Soxhlet durante 16 h y los extractos fueron concentrados por K-D a 5 ml, el resto
del solvente fue evaporado completamente bajo atmósfera de nitrógeno. La
mezcla de residuos orgánicos resultante fue reconstituida con 1 ml de aceite de
maíz en un sonicador Branson (modelo 2510) por 2 h a 60ºC. 12 peces (4 por
tratamiento) fueron inyectados intraperitonealmente (IP) con los extractos de
sedimentos a una dosis de 100 μL del extracto por cada 100 g de peso del pez y 4
peces fueron inyectados solamente con aceite de maíz, los cuales fueron
utilizados como control. Los peces tratados con extracto de sedimentos y con
aceite de maíz, fueron sacrificados 24 h después de la inyección. Cada pez fue
disectado para extraerle el hígado, el cual fue inmediatamente colocado en
nitrógeno líquido y posteriormente almacenado en ultracongelación a –70 ºC para
su posterior análisis.
El método utilizado para la extracción de RNA total es el descrito por Chomczynski
y Sacchi (1987), los hígados de tilapia (Oreochromis niloticus) fueron
homogeneizados en mortero y nitrógeno líquido en presencia del isotiocianato de
guanidina, una solución 4 M de β-mercaptoetanol, sarcosil al 0.6%, citrato de sodio
al 0.5% (solución “D”, pH 7). Para la cuantificación del RNA extraído, 1 μL de RNA
total fue diluido en 499 μL de agua estéril libre de RNAasas, la cuantificación del
RNA total se realizó en un espectrofotómetro Beckman DU 640 UV/VIS (260, 280,
260/280 y 280/260 nm). La tasa resultante entre la absorción de 260/280 fluctuó
entre 1.75 a 2.0. Adicionalmente la integridad del RNA se verificó
electroforéticamente, para ello se colocaron aproximadamente 1-3 μL de RNA total
por carril en un gel de agarosa al 1.5%, previamente teñido con bromuro de etidio
para observar las bandas de RNA con un transiluminador Biometra TI 3. A partir
del RNA total, el mRNA presente en cada muestra fue convertido a cDNA en una
reacción de volumen final de 20 μL, que contenía 0.5 μg de Oligo (dT), RNA
muestra (2 μg) y como componentes adicionales 5X first strand buffer, cloruro de
magnesio (MgCl2) 50 mM, 0.1 M DTT y la enzima M-MLVRT Moloney Murine
Leukemia Virus Reverse Transcriptase (200 u, Gibco BRL), la reacción fue
incubada a 37 ºC durante 1 hora.
El cDNA elaborado previamente (2 μL) se utilizó en conjunto con los
oligonucleótidos para realizar las reacciones de PCR, además de 100 mM dNTPs
(incluyendo los 4 desoxinucleótidos), 10 pmol de cada oligonucleótido y 0.05 u/μL
de Taq DNA polimerasa (Thermus aquaticus, Gibco BRL-Life Technologies,
Rockville MD) y como componentes adicionales: Buffer 10X PCR y MgCl2 50 mM.
Las amplificaciones del mRNA CYP1A fueron llevadas a cabo en un termociclador
PTC-100 MJ Research, bajo las siguientes condiciones: desnaturalización (1 min a
95 ºC), alineamiento (1 min a 58 ºC) y elongación (1 min a 72 ºC), durante 36
ciclos, además de una incubación final a 72 ºC por 7 min. Los productos de PCR
fueron resueltos junto con un marcador de peso molecular de 100 pares de bases
(pb) por electroforesis en geles de agarosa al 1.5% y teñidos en bromuro de etidio.
Las imágenes fotográficas fueron obtenidas del gel con luz ultravioleta (UV),
colocando el gel en un transiluminador Biometra TI 3. El volumen total de las
bandas (densidad óptica OD x mm) de los productos amplificados fueron
5
calculados mediante el software Kodak Digital Science EDAS 120 System
Densitometer (Eastman Kodak, CO, Rochester, N.Y.).
RESULTADOS Y DISCUSION
En el presente trabajo se encontró que las concentraciones individuales de los
HAP en muestras de sedimentos de la laguna de Tamiahua estuvieron situadas
por debajo del límite de detección de 1 mg/kg; lo que contrasta con los valores
observados por Botello y Calva (1998), en un trabajo realizado en la misma laguna
en el año de 1995. En dicho trabajo se reporta que para la estación 4 (Cabo Rojo)
se encontraron valores de 1.01, 1.95 y 4.08 para fluoreno, pireno y benzo(a)
antraceno respectivamente. En el presente estudio, la estación correspondiente es
la estación 3, del mismo nombre, donde los valores fueron inferiores a aquellos
para los mismos HAP. Otras estaciones con presencia de HAP reportadas por los
mismos autores son la estación 2 y 6 donde se encontró para la primera estación
1.40 y 1.02 μg/g para pireno y benzo(a)antraceno respectivamente; mientras que
para la última 1.02 y 1.63 μg/g para pireno e indeno; sin embargo en esta última
(Estero Cucharas) fue la única estación donde se detectó benzo(a)pireno con un
valor de 0.46 μg/g. Del presente estudio, las estaciones más próximas a las
anteriormente mencionadas corresponden a las estaciones 1 (Punta Arenas) y 2
(Salto El Tigre) en las cuales no se detectaron valores superiores de 1 mg/kg para
cada HAP individual.
Al igual que para Tamiahua, en la laguna de Tampamachoco, las concentraciones
de HAP individuales en las muestras de sedimentos estuvieron situadas por
debajo del límite de detección de 1 mg/kg, dichos valores son inferiores a los que
reporta Botello y Calva (1998) para la misma laguna, por ejemplo, los autores
mencionan que en la estación 3 (Frente a la Termoeléctrica) encontraron valores
de 1.62, 4.81 y 1.13 μg/g para pireno, benzo(a)antraceno y benzo(k)fluoranteno
respectivamente, y es la única estación en esta laguna en donde se encontró un
valor de 0.42 μg/g para Benzo(a)pireno. En el presente estudio las estaciones más
próximas a la anterior son estación 2 (Banda Mar Norte) y estación 4 (Banda Mar
Sur), en las cuales no se detectó valores superiores al límite de detección. Bajo
este esquema, las concentraciones de HAP individuales en muestras de agua de
las estaciones de muestreo, analizadas en ambas lagunas también se situaron por
debajo del límite de detección de 0.02 – 0.05 mg/l, dichos valores guardan
concordancia a los valores encontrados en las muestras de sedimentos, que
también fueron bajos. Una de las principales causas a las que se puede atribuir los
bajos valores de HAP en el presente estudio es a que en el mes de octubre del
año de 1999, en el área de estudio se produjo la peor inundación ocurrida en los
últimos 50 años, donde grandes masas de agua y sedimentos fueron aportadas a
las lagunas de Tamiahua y Tampamachoco, Veracruz y que las muestras al ser de
sedimentos recientes y superficiales, las mismas estarían presumiblemente no
contaminadas, que fue lo que se presentó este estudio.
6
Respecto a los HTP en las muestras de sedimentos de la laguna de Tamiahua, la
mayoría de las estaciones mostraron concentraciones inferiores al límite de
detección de 50 mg/kg (tabla I), excepto la estación 4 (San Jerónimo) y estación 5
(Boca Tancochín), donde se encontraron 2,637.52 y 75.41 mg/kg de HTP. Los
valores de HTP registrados en el presente estudio están principalmente
relacionados de manera directa e indirectamente con actividades de la industria
petrolera, ya que cercana a la estación 4 se encuentra un área de 20 Hectáreas
denominado pozo “Dos Bocas”, el cual fue explotado a principios de 1900 y que
actualmente se encuentra abandonado, sin embargo, en el mismo hay
emanaciones naturales que hoy en día es incosteable explotar y que por tal razón
principalmente en época de lluvias al incrementarse el nivel de crudo desborda,
vertiendo y aportando hidrocarburos a la laguna en este sitio. En Boca Tancochín,
los aportes de HTP, puede ser atribuida a la existencia de líneas de conducción
(ductos) que transportan crudo de mar a tierra y que al sufrir ruptura vierten crudo
al sistema lagunar en este sitio.
Tabla I. Concentración de HTP (mg/kg) determinado en sedimentos de las
lagunas de Tamiahua y Tampamachoco, Veracruz.
LAGUNA DE TAMPAMACHOCO
LAGUNA DE TAMIAHUA
E S T A C I O N E S
E S T A C I O N E S
1
*2
3
*4
*5 6
1
2
3
4
5
6
<50 <50 <50 2637.52 97 204 <50 <50 <50 2637.52 75.41 <50
En Tampamachoco, sólo las estaciones 5 (Torres) y 6 (Tubito) presentaron valores
de 97 y 204 mg/kg de HTP (tabla I). Éstos valores pueden explicarse por la
cercanía (aproximadamente 1 km) con el muelle de PEMEX, donde atracan barcos
los cuales muy posiblemente transportan crudo y que además por las actividades
de limpieza vierten el agua de lastre a este lugar, por lo que sin duda este sitio
puede ser un lugar de carga o descarga y por ende de introducción de petróleo,
que al ubicarse frente a la boca de la laguna y por la acción de las corrientes, los
hidrocarburos son transportados hacia el interior.
Considerando que no existe para estos contaminantes, límites máximos
permisibles en sedimentos (marinos, de ríos, lagos, lagunas costeras) afectados
por hidrocarburos, se tomó como referencia la normatividad establecida para
suelos, Norma Oficial Mexicana (NOM) de Emergencia NOM-EM-138-ECOL-2002
(uso: agrícola, forestal, recreativo y de conservación – residencial y comercial; en
ppm) que establece un máximo de 200 a 1,000 mg/kg (ppm). Para el caso de la
laguna de Tamiahua, sólo la estación 4 (San Jerónimo) fue la que sobrepasó en
más del doble el límite máximo permisible con un valor de 2,637.52 mg/kg de HTP
(tabla 21); mientras que para Tampamachoco, fue la estación 6 (tubito), la que
presentó un valor de 200 mg/kg de HTP (tabla I), todas las demás estaciones en
ambas lagunas presentaron valores situados por debajo del límite máximo
7
permisible establecido en la NOM. Las concentraciones de HTP en las muestras
de agua, presentaron valores inferiores al límite de detección de 5 mg/l.
En el presente estudio se analizaron especies de importancia económica de
peces, crustáceos y moluscos, mismas que constituyen un alimento importante
para las comunidades locales y que además son comercializadas en los
principales mercados de la región e incluso de la ciudad de México. El hecho que
ninguna de las especies analizadas de ambas lagunas presentaran valores
superiores al límite de detección de 0.17 – 0.25 mg/kg, guarda lógica, toda vez
que valores no detectables de HAP se presentaron en las muestras de sedimentos
y muestras de agua. Aunque el ostión americano es una especie abundante en
ambas lagunas y la misma es utilizada como indicador biológico debido a su
capacidad de bioacumular una gran variedad de contaminantes del agua y de los
sedimentos, en el presente trabajo concentraciones indetectables de HAP fueron
encontradas en estos organismos en ambas lagunas.
Por su parte Krahn et al., (1984) reportó que en análisis de rutina de HAP (pares)
en peces capturados en áreas contaminadas, frecuentemente muestren sólo
trazas de HAP, aún cuando los sedimentos contengan altas concentraciones de
estos compuestos; lo anterior descrito apoyaría a los resultados encontrados en el
presente trabajo, ya que al encontrar bajos valores de HAP en sedimentos, se
esperaría por ende bajos o nulos valores de los mismos en las especies bajo el
análisis. En el presente estudio el análisis de HAP se realizó sólo en tejido del
muscular y para peces es necesario considerar diferentes órganos y tejidos ya que
Al Hassan et al., (2003) no detectó ningún HAP individual tal como el
benzo(a)pireno entre músculo, branquia e hígado en peces comestibles
provenientes de áreas contaminadas del Mar de Arabia.
Aunque son relativamente pocos los trabajos realizados utilizando al mRNA
CYP1A1 como bioindicador de contaminación, en ellos se ha observado un
incremento en los niveles de expresión del gen. Similares resultados fueron
encontrados en el presente estudio, donde una fuerte inducción del CYP1A1
causó un incrementó significativo (p< 0.01) de más de 17 veces respecto al control
en los niveles de mRNA CYP1A1 hepático, 24 h después de que los peces fueron
inyectados intraperitonealmente (IP) con extractos de sedimentos de la estación 4
(San Jerónimo) de la laguna de Tamiahua, una expresión moderada de 5 veces
más se observó para los peces inyectados con extractos de la estación 5 (Boca
Tancochín) y estación 2 (Salto El Tigre), mientras que una débil expresión se
observó en los peces control (figura 2). Un patrón similar fue observado por Wong
et al., 2001, quienes observaron que la más alta expresión del mRNA del CYP1A1
hepático y del intestino en peces tratados con extractos de los sedimentos
costeros de las estaciones más contaminadas por HAP y PCBs del área de Hong
Kong y mencionan que en estudios ecotoxicológicos es esencial el uso de
métodos químicos y biológicos.
8
Figura 2. Gráfico de columnas que muestra la cuantificación de la expresión del
gen CYP1A1 mRNA (n=4). Las columnas con un mismo número de asteriscos no
son significativamente diferentes (p< 0.05) comparadas con el control, de acuerdo
a los resultados del ANOVA (one way) seguida de una comparación múltiple de
medias con rangos de Dunnet.
CONCLUSIONES
Los resultados de este estudio muestran que no existe contaminación evidente por
Hidrocarburos Aromáticos Policíclicos en los sedimentos, muestras de agua y en
tejido de algunas especies explotadas y de interés comercial en las lagunas
costeras de Tamiahua y Tampamachoco, Veracruz; durante el período en el que
se desarrolló el presente trabajo.
En este trabajo se detectaron Hidrocarburos Totales del Petróleo en los siguientes
sitios: 2,637 mg/kg de HTP en la estación 4 (San Jerónimo) y 75.41 mg/kg de HTP
en la estación 5 (Boca Tancochín) en la laguna de Tamiahua y 204 mg/kg de HTP
en la estación 6 (Tubito) en la laguna de Tampamachoco.
9
Los extractos de sedimentos de “San Jerónimo”, “Boca Tancochín” y “Salto El
Tigre”, tuvieron la capacidad de inducir la expresión del mRNA del CYP1A1 en la
tilapia (Orechromis niloticus).
La más elevada expresión del mRNA del CYP1A1 correspondió a “San Jerónimo”,
que también fue la estación con la concentración más alta de HTP.
El incremento significativo del mRNA del CYP1A1 hepático en tilapias expuestas a
extractos de sedimentos, sugieren que la inducción del CYP1A1 puede ser una
herramienta para el monitoreo de HTP en ecosistemas acuáticos.
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