QUANTA Lite™ ACA IgG III

QUANTA Lite® ACA IgG III
708625
Para Diagnóstico In Vitro
Complejidad CLIA : Alta
Aplicación
QUANTA LiteTM ACA IgG III es un ensayo basado en la técnica ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent
Assay) para la detección semi cuantitativa de anticuerpos IgG anticardiolipina. Los anticuerpos
anticardiolipina se utilizan como ayuda para ayudar en la evaluación del riesgo de trombosis en
pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES) o trastornos de tipo lúpico.
Sumario y Explicación de la prueba
Los anticuerpos anticardiolipina (ACA) están fuertemente asociados con las trombosis venosas y
arteriales.1 Estos indicios se observaron por primera vez durante los estudios realizados sobre el lupus
eritematoso sistémico (LES), una enfermedad que, entre otros síntomas, se caracteriza por las
trombosis. De los muchos anticuerpos encontrados en el LES, dos de ellos actuaban contra los
fosfolípidos, como la cardiolipina.2
Procedimiento de trabajo
Los pocillos de la microplaca contienen antígeno cardiolipina altamente purificado que se ha unido en
condiciones que mantienen su estado nativo. Se añaden controles y muestras convenientemente
diluidas en pocillos separados, uniéndose durante la incubación los anticuerpos anti cardiolipina al
antígeno que los recubre. El resto de componentes no unidos se elimina mediante lavado y se añade
conjugado anti IgG humana a cada pocillo. Un segundo paso de incubación permite que el conjugado se
una a los anticuerpos presentes. Tras un lavado que elimina el conjugado sobrante, se añade un
sustrato cromogénico y tras incubación la actividad enzimática presente en el pocillo es proporcional a la
intensidad de color desarrollado. Una vez que se haya detenido la producción enzimática de producto
coloreado, se determina la presencia o ausencia de anticuerpos contra la cardiolipina por medio de la
comparación de la densidad óptica de la muestra con la de una curva de calibración de cinco puntos.
Los resultados se dan a conocer de forma semicuantitativa en unidades estándar de anticardiolipina IgG
(GPL).
Reactivos
1.
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13.
Placa microperforada de poliestireno para ELISA recubierto con antígeno de cardiolipina
purificada y con GPI β 2 bovina (12-1 x 8 pocillos), envasada en su soporte en una bolsa de
aluminio con desecante
Control negativo ACA, 1 frasco de tampón conteniendo conservante y suero humano ausente de
anticuerpos humanos anti cardiolipina, prediluido, 1.2 ml
Control ACA IgG III ELISA, 1 frasco de tampón conteniendo conservante y suero humano con
anticuerpos anti cardiolipina, prediluido, 1.2 ml
Calibrador A ACA IgG III ELISA, 1 frasco de tampón conteniendo conservante y suero humano
con anticuerpos anti cardiolipina, prediluido, 1.2 ml
Calibrador B ACA IgG III ELISA, 1 frasco de tampón conteniendo conservante y suero humano
con anticuerpos anti cardiolipina, prediluido, 1.2 ml
Calibrador C ACA IgG III ELISA, 1 frasco de tampón conteniendo conservante y suero humano
con anticuerpos anti cardiolipina, prediluido, 1.2 ml
Calibrador D ACA IgG III ELISA, 1 frasco de tampón conteniendo conservante y suero humano
con anticuerpos anti cardiolipina, prediluido, 1.2 ml
Calibrador E ACA IgG III ELISA, 1 frasco de tampón conteniendo conservante y suero humano
con anticuerpos anti cardiolipina, prediluido, 1.2 ml
Diluyente de Muestra ACA III, 1 frasco de color paja conteniendo tampón con PBS, y
conservante, 50 ml
Solución de Lavado Concentrada ACA III, 1 frasco de concentrado 20x color rojo conteniendo
tampón con Tris, 50ml. Referirse a la Sección “Metodología” para instrucciones de dilución.
Conjugado HRP IgG, con anti- IgG humana de cabra, 1 frasco – de color azul conteniendo
tampón, estabilizante de proteína y conservante, 10ml
Cromógeno TMB, 1 frasco conteniendo estabilizantes, 10ml
Solución de Parada HRP, Acido Sulfúrico 0.344 M, 1 frasco, incolora, 10 ml
Advertencias
1.
2.
Aviso: Este producto contiene cloramfenicol al 0.02% en el conjugado considerado en el estado
de California como causante de cáncer.
Todo material de origen humano usado en la preparación de los controles para este producto se
ha examinado resultando negativo para anticuerpos contra HIV, HBsAg, y HCV por métodos
aprobados por la FDA. Ningún método puede sin embargo ofrecer garantía completa que HIV,
HBV, HCV o otros agentes contagiosos estén ausentes. Por lo tanto, los controles Control ACA
IgG III ELISA, Calibradores A,B,C,D E para ACA IgG III ELISA y ACA negativo deben manejarse
como si fueran material potencialmente contagioso.3
1
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Dado que se utiliza azida sódica como conservante, este producto puede ser tóxico por ingestión
o absorción a través de piel o mucosas. La azida sódica puede reaccionar con el plomo o cobre
de las tuberías para formar azidas metálicas potencialmente explosivas. Si se utilizan desagües
para la eliminación de reactivos se recomienda lavarlos con abundante agua para prevenir la
formación de dichas azidas metálicas.
El Conjugado HRP contiene diluido un producto químico venenoso y corrosivo que puede ser
tóxico si se ingiere. Para impedir quemaduras, evitar el contacto con piel o ojos.
El Cromógeno TMB contiene un irritante. Puede ser dañino si es inhalado, ingerido o absorbido
por la piel. Evitar la inhalación, ingestión o contacto con piel y ojos.
La Solución de parada HRP consiste de una solución diluida de ácido sulfúrico. Evitar exposición
a bases, metales, u otros compuestos que puedan reaccionar con ácidos. El ácido Sulfúrico es
venenoso y corrosivo, puede ser tóxico si ingerido. Para impedir quemaduras, evitar contacto con
piel y ojos.
Se recomienda utilizar el equipo protector apropiado al trabajar con este kit.
Los reactivos derramados deben limpiarse inmediatamente. Siga las normas aplicables en su
laboratorio acerca de la eliminación de residuos.
Precauciones
1.
2.
3.
4.
5.
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9.
Este producto es para ser usado en el Diagnóstico In Vitro.
La sustitución de componentes diferentes de los incluidos en el sistema puede generar
resultados inconsistentes.
Un lavado incompleto o ineficiente y una eliminación insuficiente de líquido de los pocillos puede
dar lugar a una pérdida de precisión y/o un fondo elevado.
La adaptación de este ensayo para su uso en procesadores automáticos u otros dispositivos,
totalmente o en parte, puede producir diferencias en los resultados en comparación con el
procedimiento manual. Es responsabilidad de cada laboratorio de validar sus procedimiento
automatizado y comprobar que produce resultados dentro de los límites aceptables.
Existe una variedad de factores que influyen en la realización del ensayo. Esto incluye la
temperatura inicial de los reactivos, la temperatura ambiente, la exactitud y reproducibilidad de
técnica de pipeteo, la calidad de la técnica de lavando, el fotómetro que se utiliza para medir los
resultados, y los tiempos de incubación durante el ensayo. Es necesario un exquisito cuidado y
un trabajo consistente para obtener resultados exactos y reproducibles.
Se recomienda seguir estrictamente el protocolo.
El sellado incompleto de la bolsa “zip-lock” que contenga tiras sin usar y desecante provocará la
degradación del antígeno que se apreciará en un empeoramiento de la precisión de resultados.
Pueden observarse absorbancias inaceptablemente bajas tras dos o más usos separados de un
conjugado HRP. Es importante seguir todas las recomendaciones de manipulación específicas
para este producto para evitar que esto ocurra.
La contaminación química del conjugado HRP puede ocurrir como resultado de una limpieza o
secado inadecuados del equipo o instrumentos. Residuos de productos químicos comunes en el
laboratorio como formalina, lejía, etanol, o detergente causan la degradación del conjugado HRP
con el tiempo. Enjuague bien todo equipo o instrumentos después de usar dichos productos.
Condiciones de Almacenaje
1.
2.
3.
Guardar todos los reactivos del kit en nevera a 2-8°C. No congelar. Los reactivos son estables
hasta la fecha de caducidad si son almacenados y manipulados correctamente.
Las tiras sin utilizar deben volverse a guardar en la bolsa de aluminio que contiene desecantes
cerrándola herméticamente y almacenándola a 2-8ºC.
La solución de lavado diluida es estable 1 semana a 2-8°C.
Recolección de Muestras
Este kit requiere suero como muestra. La adición de azida u otros conservantes a las muestras puede
afectar adversamente los resultados. No deben utilizarse muestras contaminadas, tratadas por calor o
que contengan partículas visibles. Deben asimismo evitarse las muestras lipémicas o hemolizadas.
Tras la recolección de las muestras de sangre, el suero debe ser separado del coágulo. El documento
NCCLS H18-A3 recomienda las siguientes condiciones de almacenaje para muestras: 1) Guardar las
muestras a temperatura ambiente no más de 8 horas. 2) Si el ensayo no se va completar en 8 horas,
refrigerar la muestra a 2-8°C. 3) Si el ensayo no se va completar entre 48 horas, o para enviar las
muestras, congelar a -20°C o a temperatura inferior. Una vez descongeladas las muestras deben
agitarse bien antes de utilizarse.
Procedimiento
Materiales Suministrados
1
1
1
1
1
1
1
Microplaca cardiolipina ELISA (12-1 x 8 pocillos), con soporte
1.2 ml control prediluido negativo ACA
1.2ml control prediluido Control ACA IgG III ELISA
1.2ml control prediluido Calibrador A ACA IgG III ELISA
1.2ml control prediluido Calibrador B ACA IgG III ELISA
1.2ml control prediluido Calibrador C ACA IgG III ELISA
1.2ml control prediluido Calibrador D ACA IgG III ELISA
2
1
1
1
1
1
1
1.2ml control prediluido Calibrador E ACA IgG III ELISA
50ml Diluyente de muestra ACA III
50ml Solución III de lavado concentrada 20X
10ml Conjugado IgG (cabra) anti IgG humana
10ml Cromógeno TMB
10ml Solución parada HRP (Ácido Sulfúrico 0.344M)
Material necesario no incluido
Micropipetas para 5, 100, 200-300 y 500µl
Puntas desechables para micropipeta
Tubos para dilución de muestras, 4ml
Agua destilada
Recipiente de 1L para la solución de lavado reconstituida
Lector de microplacas capaz de medir densidades ópticas a 450nm (y a 620nm para lecturas de doble
longitud de onda)
Metodología
Antes de empezar
1.
2.
3.
4.
5.
IMPORTANTE: Llevar todos reactivos y muestras a la temperatura ambiente (20-26°C) y
agitar.
Diluir la solución de lavado ACA 1:20 añadiendo el contenido del envase con concentrado a 950
ml de agua destilada. Si no va a utilizar toda la placa, puede preparar una cantidad menor de
solución de lavado añadiendo 4.0 ml del concentrado a 76ml de agua destilada para cada 16
pocillos que vayan a utilizarse.
Preparar una dilución 1:101 de cada muestra a procesar añadiendo 5 µl de muestra a 500 µl de
diluyente. Las muestras diluidas deben ser utilizadas dentro de las 8 horas de su preparación.
NO DILUYA los calibradores de A a E de ACA IgG III con, el control de ACA IgG III con ni el
control negativo de ACA 1:101.
La determinación de la presencia o ausencia de anticuerpos anti cardiolipina requiere dos
pocillos para cada uno de los calibradores y controles y uno o dos pocillos para cada muestra.
Se recomienda que las muestras se hagan por duplicado.
Preparación de la curva estándar: para los puntos de A a E de la curva estándar de cinco puntos,
use los calibradores de A a E de ACA IgG III con PREDILUIDOS directamente del vial. La curva
estándar de cinco puntos tiene los siguientes valores:
Punto
Unidades de fosfolípidos (GPL)
A
Calibrador A de ACA IgG III con prediluido
150.0
B
Calibrador B de ACA IgG III con prediluido
75.0
C
Calibrador C de ACA IgG III con prediluido
37.5
D
Calibrador D de ACA IgG III con prediluido
18.8 o 18.75
E
Calibrador E de ACA IgG III con prediluido
9.4 o 9.375
Procedimiento de Ensayo
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
TODOS REACTIVOS DEBEN ESTAR A TEMPERATURA AMBIENTE (20-26°C) ANTES DE
EMPEZAR EL ENSAYO. Ponga el número necesario de tiras en el soporte. Devolver
inmediatamente las tiras sin utilizar a la bolsa de aluminio y sellarla firmemente para
minimizar la exposición a la humedad.
Añada 100µL de los calibradores, las muestras diluidas de los pacientes, el control negativo de
ELISA y el control de ACA IgG III ELISA a los pocillos.
NOTA: El Control ACA IgG III ELISA y el Control ACA Negativo están ya prediluidos y listos
para su uso. El valor y el intervalo aceptable del control ACA IgG III ELISA figura impreso en la
etiqueta del vial. Si el Control no se encuentra entre los valores aceptables indicados, repita la
prueba. Si, después de repetir el test, el Control no se encuentra dentro del intervalo aceptable,
póngase en contacto con el Servicio Técnico de INOVA para que le faciliten más instrucciones.
Se recomienda realizar todos los tests por duplicado.
Cubrir los pocillos e incubar 30 minutos a temperatura ambiente en una superficie plana. El
tiempo de incubación empieza después de la adición de la última muestra.
Lavado: Aspirar el contenido de cada pocillo. Agregar 200-300µl de solución de lavado a todos
pocillos y aspirar. Repetir esta secuencia dos veces más para un total de tres lavados. Invertir la
placa y golpearla suavemente en material absorbente para eliminar cualquier fluido residual tras
el último lavado. Es importante que cada pocillo esté completamente vacío después de cada
paso de lavado. Mantener la misma secuencia para la aspiración que la usada para la adición de
muestras.
Agregar 100µl de Conjugado IgG HRP a cada pocillo. El conjugado debe pipetearse en las
condiciones más asépticas posibles y siguiendo buenas técnicas de laboratorio. Aspirar
solamente la cantidad de conjugado necesaria para el ensayo. PARA EVITAR CUALQUIER
CONTAMINACIÓN POTENCIAL MICROBIANA Y/O QUÍMICA, NUNCA DEVOLVER EL
CONJUGADO SIN USAR A SU RECIPIENTE ORIGINAL. Incubar los pocillos 30 minutos como
en el paso 3.
Lavado: Repetir el paso 4.
Agregar 100µl de Cromógeno TMB a cada pocillo e incubar 30 minutos en oscuridad a
temperatura ambiente.
3
8.
9.
Agregar 100µl de Solución de parada a cada pocillo. Mantener la misma secuencia y
temporalización que la efectuada en la adición de Cromógeno. Agitar suavemente la placa para
mezclar bien los pocillos.
Leer la absorbancia (DO) de cada pocillo a 450nm en un plazo máximo de una hora. Si se desea
seguir el método de lectura bicromática puede utilizarse 620 nm como longitud de onda de
referencia.
Control de Calidad
1.
2.
3.
4.
Los controles Control ACA IgG III ELISA, Calibrador A ACA IgG III ELISA y Control Negativo
ACA deben procesarse con cada lote de muestras para asegurar que todos reactivos y
procedimientos funcionan correctamente.
El usuario debe notar que debido a que los controles Control ACA IgG III ELISA, Calibrador A
ACA IgG III ELISA y ACA Negativo son prediluidos, no controlan procedimientos asociados con
dilución de especímenes.
Pueden añadirse controles adicionales según las directivas o requisitos del laboratorio. Pueden
prepararse controles válidos haciendo alícuotas de un “pool” de suero humano que debe
almacenarse a < -20°C.
Para considerar válidos los resultados deben considerarse satisfechos todos los criterios
especificados a continuación, si alguno de ellos no se cumple la prueba debe considerarse
inválida y repetirse.
a.
La absorbancia del control Calibrador A ACA IgG III ELISA debe ser superior a la del
Control ACA IgG III ELISA y la de este debe ser superior a la del control negativo.
b.
El control Calibrador A ACA IgG III ELISA debe tener una absorbancia mayor que 1.0
mientras que la del control negativo no debe exceder de 0.2.
c.
La absorbancia del Control ACA IgG III ELISA debe ser superior al doble del control
negativo, u oscilar entre 0.25.
d.
La concentración del Control ACA IgG III ELISA debe estar dentro del rango especificado
en la etiqueta.
e.
El usuario puede referirse al documento NCCLS (National Committee of Clinical
Laboratory Standards) C24-A3 para una guía adicional acerca de buenas prácticas de
laboratorio.
Cálculo de Resultados
1.
2.
3.
Determine el valor medio de todas las lecturas duplicadas.
Grafique la absorbancia media de la curva del calibrador en el ensayo de ACA IgG III en función
del log (registro de rendimiento) de concentraciones. Utilice un gráfico de curva de línea de mejor
ajuste o bien un gráfico log-log. Las unidades GPL asignadas a los calibradores están en el vial
del calibrador.
Determine la concentración en GPL de ACA desconocida en el eje "X" a partir de la absorbancia
correspondiente en el eje "Y".
Interpretación de los Resultados
La técnica ELISA es muy sensible y es capaz de detectar pequeñas diferencias entre poblaciones de
pacientes. Los valores presentados a continuación son sólo valores sugeridos. Cada laboratorio debe
establecer su propio rango normal basado en su propia metodología, controles, equipo y población de
pacientes.
1.
Un resultado positivo indica la presencia de anticuerpos anticardiolipina IgG y se puede usar
junto con otras pruebas serológicas y hallazgos clínicos para ayudar en la evaluación del riesgo
de trombosis en individuos con lupus eritematoso sistémico (LES) o trastornos de tipo lúpico.
2.
Los resultados se deben expresar en unidades GPL. En función de una evaluación de 488
muestras normales y de 139 muestras positivas a la cardiolipina IgG, IgM e IgA, se realizó un
corte indicado de 15 GPL. Se sugiere que cada laboratorio establezca su propio rango normal.
Aun cuando se utilice una curva de calibración, existe variación en los resultados con niveles
bajos y es frecuente obtener falsos positivos.4 Por este motivo, es recomendable que los valores
que van de 15 a 20 GPL inclusive, se consideren indeterminados, y que los resultados positivos
se asignen a las muestras de pacientes con más de 20 GPL. Harris y Pierangeli proponen otro
método semicuantitativo para expresar los resultados.4 En nuestra opinión, los valores de 20-80
GPL han de considerarse como positivos de débiles a moderados y los superiores a 80 GPL,
como resultados positivos fuertes.
3.
Un resultado negativo indica la ausencia de anticuerpos anti-cardiolipina o niveles inferiores al
punto de corte del ensayo.
4.
Se sugiere que los resultados informados por el laboratorio incluyan la afirmación “Los siguientes
resultados se obtuvieron con el kit INOVA QUANTA Lite® ACA IgG III ELISA. Los valores
obtenidos con kits de diferentes fabricantes pueden variar y no pueden intercambiarse entre
ellos. La magnitud de los niveles informados de IgG no puede correlacionarse con un punto
final”.
4
Limitaciones del Procedimiento
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
En la actualidad, se está investigando la relevancia clínica del ACA en otras enfermedades que
no sean LES.
En los estudios publicados sobre el LES, la incidencia de un ACA positivo es del 23 al 54% para
IgG y del 5 al 40% para IgM.
Cuando se encuentran títulos ACA negativos en presencia de indicios clínicos, puede estar
indicado un anticoagulante lúpico u otras pruebas adicionales como, por ejemplo, el anti-β 2 GPI.
No se puede realizar un diagnóstico tomando como base sólo los resultados de ACA. Éstos se
deben interpretar junto con los hallazgos físicos.
No se debe iniciar el tratamiento solo por un título positivo de ACA. También debe haber
indicaciones clínicas que lo respalden.
Un alto porcentaje de pacientes con sífilis activa confirmada o seropositiva tiene niveles altos de
ACA. Por lo tanto se deben emprender procedimientos de confirmación a fin de descartar la
sífilis.
Los ACA pueden aparecer en forma transitoria en diversas infecciones. Los pacientes que dan
positivo en ACA deben volver a ser sometidos a la prueba luego de esperar un tiempo adecuado.
La presencia de inmunocomplejos u otros agregados de inmunoglobulinas en la muestra del
paciente puede producir un aumento de uniones inespecíficas y causar falsos positivos en este
ensayo.
La funcionalidad del ensayo no ha sido establecida para matrices diferentes del suero.
Los resultados de este ensayo deben utilizarse conjuntamente con hallazgos clínicos y otras
pruebas serológicas.
Si no se calienta y mezcla bien el concentrado de PBS para ACA antes de utilizarlo, pueden
obtenerse resultados incoherentes.
Valores Esperados
Rango Normal
Se analizaron 488 muestras aleatorias de donantes normales para ACA de tipo IgG III. De este total,
tres muestras se encontraban dentro del rango indeterminado de 15 a 20 GPL. Se encontraron también
cinco muestras positivas durante la realización de las pruebas normales aleatorias. Se estableció que
dichas muestras eran realmente positivas en función de pruebas adicionales realizadas con otros kits
comerciales que disponen de la autorización 510 (k). En el 97.6% de las muestras normales se
encontraron valores inferiores a 15 GPL.
Sensibilidad y Especificidad Relativas
Correlación con la segunda generación de ACA tipo IgG de INOVA Diagnostics
Se analizaron un total de 627 muestras tanto de ACA de tipo IgG III de segunda generación como de
ACA de tipo IgG de tercera generación. Estas muestras incluyen las 488 muestras normales
mencionadas en el estudio de rango normal, así como las 139 muestras procedentes de pacientes con
resultados indeterminados o positivos en cardiolipina IgG, IgM e IgA. A continuación se muestra un
resumen de los resultados.
ACA de tipo IgG III de QUANTA Lite® (tercera generación)
I
+
- 521
5
2
Sensibilidad relativa
ELISA para ACA de tipo IgG I*
4
4
3
Especificidad relativa
segunda generación
+
2
1
85
Eficiencia relativa
*Indeterminado
5
96.6%
98.7%
97.3%
Curva representativa estándar mediante el HCAL de tipo IgG según el
criterio de Sapporo
A continuación se muestra una curva representativa que utiliza como estándar el anticuerpo monoclonal
HCAL según el criterio de Sapporo. Este material procede del laboratorio del Dr. Takao Koike. Se utiliza
en el CC de las placas ACA y está disponible en INOVA Diagnostics como artículo independiente, nº de
catálogo 508668. La curva se preparó mediante la dilución del HCAL al 1:100 en el diluyente de muestra
ACA y, a continuación, diluyendo en serie el material en el mismo diluyente.
Punto
A
B
C
D
E
F
HCAL 1:100
HCAL 1:200
HCAL 1:400
HCAL 1:800
HCAL 1:1600
HCAL 1:3200
OD
1.469
1.011
0.607
0.326
0.184
0.103
Sapporo Unidades µg/mL
0.188
0.094
0.047
0.0235 or 0.024
0.01175 or 0.0118
0.005875 or 0.0059
En la curva de muestra anterior, el punto de corte de 15 GPL correspondería a 0.0282 µg/mL del HCAL.
Cada laboratorio necesita determinar su propio rango normal.
Precisión y Reproducibilidad
La precisión y reproducibilidad entre ensayos fue evaluada analizando dos réplicas de un positivo y
negativas en cuatro ensayos separados. La precisión y reproducibilidad durante los ensayos fue
evaluada analizando dieciséis réplicas de un fuerte y negativas en un único ensayo. La media unidades,
la desviación estándar y el coeficiente de variación de las muestras se resumen a continuación.
Global
Intra ensayo
Inter ensayo
Positivo
Media GPL
84.6
79.5
89.8
DE
2.5
1.0
4.0
%CV
2.8%
1.3%
4.4%
Negativo
Media GPL
5.0
4.6
5.3
DE
0.4
0.3
0.4
%CV
6.8%
6.4%
7.3%
QUANTA Lite y INOVA Diagnostics son marcas comerciales registradas de Derecho de Autor 2011 Todos los
derechos reservados©
6
Referencias
1
2.
3.
1.
Lancet i, 912-913, 1985.
Clinics in Rheumatic Diseases 8, 137-151, 1982.
Centers for Disease Control/National Institutes of Health Manual Biosafety in Microbiological and
Biomedical Laboratories: Centers for Disease Control/National Institutes of Health, Fifth Edition, 2007.
th
The VII International Symposium on Antiphospholipid Antibodies, October 9-13, 1996, Louisiana State
University Medical Center.
Fabricante:
INOVA Diagnostics, Inc.
9900 Old Grove Road
San Diego, CA 92131
United States of America
Technical Service (U.S. & Canada Only) :
877-829-4745
Technical Service (Outside the U.S.) :
1 858-805-7950
[email protected]
Representante Autorizado:
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Altenhofstrasse 80
D-66386 St. Ingbert, Germany
Tel.: +49-6894-581020
Fax.: +49-6894-581021
www.mt-procons.com
628625ESP
April 2014
Revision 20
7