Movilidad Bacteriana - Universidad de Granada

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Prácticas de Bacteriología
Introducción a la microscopía. Técnicas de observación de los microorganismos
Movilidad Bacteriana
Movilidad Bacteriana
Universidad de Granada
Objetivos de la práctica Introducción
Partes de la práctica :
Métodos de Tinción
Observación al microscopio
Tinción de Gram
Tinción de endosporas
Tinción de ácido-alcohol resistencia
Movilidad
Autoevaluación
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¿Como se mueven las bacterias?
Aunque hay excepciones el órgano responsable es el flagelo. El flagelo bacteriano solo tiene en común con el flagelo eucariota su función de
movilidad.
Encontrará información más completa sobre la movilidad de las bacterianas en los apuntes on line del Profesor E. Iañez.
La rotación del flagelo en un sentido u otro afecta a la dirección del movimiento de la bacteria. Este puede ser lineal o resultado de una sucesión de
carreras o volteretas.
2 En este video de la Society for General Microbiology expuesto en YouTube se explica claramente (en inglés) los diferentes medios de locomoción
de las bacterias incluyeno las precauciones que imponen las corrientes y el movimiento browniano en las interpretaciones de las imágenes al
microscopio, como se detalla y se aprende en esta práctica
\ \¿Qué ventajas aporta la movilidad a las bacterias?
El desplazamiento orientado en respuesta a estímulos externos de tipo físico o químico (quimiotaxis).
Observación microscópica de la movilidad de las bacterias
Se hace con suspensiones en agua sin teñir (preparaciones “en fresco”). Puede hacerse en suspensiones “ entre
portaobjetos y cubreobjetos” o en “ gota pendiente”.
Como precauciones utilizar un cultivo joven en fase exponencial de crecimiento. Los flagelos se desprenden con
facilidad de la célula. Por tanto no extender ni agitar con el asa.
Movilidad entre porta y cubreobjetos
Si la bacteria está en un medio líquido, depositar una gota sobre el portaobjetos con ayuda del asa en forma análoga a como se hace para preparar una
tinción partiendo de cultivos en medio líquido.
Si se parte de un cultivo sólido, depositar una gota de agua sobre el portaobjetos. Recoger una alícuota del cultivo y suspenderla en una gota de agua.
Puede convenir añadir solución salina estéril e incubar durante 1-2 horas: las bacterias se suspenden en la solución, que después es utilizada como si
se tratara de un cultivo en medio líquido.
Colocar sobre la preparación un cubreobjetos evitando atrapar aire. No comprimir. Será posible observar la movilidad mientras se mantenga agua
entre ambas superficies.
Depositar una gota de aceite de cedro sobre el cubreobjetos. Observar con objetivo de inmersión.
Ajustar la cantidad de luz bajando el condensador: Al no estar las células teñidas hay poco contraste que hay las células y el agua, un exceso de luz
impide observar las células como siluetas oscuras.
Resultado
Distinguir el movimiento debido a flagelos (caótico e irregular), del movimiento debido a las corrientes (todas las células se desplazan en la misma
dirección) y del movimiento browniano ( de las partículas inertes de pequeño tamaño cuando se encuentra suspendidas (movimiento vibratorio e
irregular).
Al concluir la observación, depositar la preparación en los recipientes destinados al material de deshecho. Imagen o vídeo.
Movilidad en gota pendiente
Mediante esta técnica se evitan las corrientes, que las preparaciones se sequen pronto. La gota presenta además multitud de planos de enfoque, con lo
cual resulta más fácil la observación.
Hacer la suspensión bacteriana sobre un cubreobjetos.
Parafinar (untar con vaselina) los bordes de la excavación de un portaobjetos de Koch.
Con el porta invertido presionar sobre el cubre hasta que se adhiera. Darle la vuelta.
Resultado
Resultado
Observar al microscopio con objetivo de inmersión y condensador bajo.
Al concluir desprender el cubreobjetos y depositarlo en los recipientes destinados al material de deshecho.
Movilidad sobre medios sólidos.
Las bacterias del genero Proteus pueden invadir toda la superficie del medio sólido si no se encuentra muy seca. Este
crecimiento invasor es característico de estas bacterias.
S. aureus (arriba) crece localizado en la zona de inoculación. Las cepas de Proteus (abajo) invaden toda la superficie del
medio (se aprecian las ondas de crecimiento en respuesta al agotamiento de nutrientes)-Este fenómeno dificulta el aislamiento
de bacterias (practica numero 4) cuando en la muestra se encuentran estas bacterias.
Movilidad en medios semisólidos
Si los medios de cultivo no tienen excesiva viscosidad, con relativa frecuencia las bacterias móviles pueden desplazarse en su interior. Se crea una
zona de turbidez en la zona ocupada por las bacterias.
Sembrar por picadura con ayuda de un hilo de platino un tubo con un medio semisólido.
Incubar el tiempo y temperatura necesarios para el desarrollo del microorganismo.
Resultado
Observar si el crecimiento bacteriano aparece exclusivamente en la zona de la picadura (el recorrido del hilo de platino) -bacteria inmóvil), o en una
zona difusa alrededor de ésta (bacteria móvil).
Al concluir desprender el cubreobjetos y depositarlo en los recipientes destinados al material de deshecho.
Objetivos de la práctica Introducción
Partes de la práctica :
Métodos de Tinción
Observación al microscopio
Tinción de Gram
Tinción de endosporas
Tinción de ácido-alcohol resistencia
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