Benemérita Universidad Autónoma de Puebla. Facultad De Ciencias Químicas. Departamento De Bioquímica-Alimentos. Centro De Investigaciones En Ciencias Microbiológicas-Icuap. Diversidad de micromicetos y actinomicetos de interés ambiental y médico en suelo y plantas del monte aguajito de tehuitzingo, puebla. Para obtener el grado de: Químico Farmacobiólogo. Presenta: Sabino Vidal, Esmeralda. Asesor: Munguía Pérez, Ricardo. Puebla Pué. Junio 2011 CONTENIDO Página 1 INTRODUCCIÓN 1 2 ANTECEDENTES 3 3 JUSTIFICACIÓN 6 4 OBJETIVOS 7 4.1 OBJETIVO GENERAL 7 4.2 OBJETIVOS PARTICULARES 7 5 MARCO TEÓRICO 8 5.1 ZONA DE ESTUDIO 8 5.1.1 Localización 8 5.1.2 Extensión 9 5.1.3 Clima 9 5.1.4 Características del suelo 9 5.1.5 Principales ecosistemas 10 5.2 SUELO 12 5.2.1 Descripción general del suelo 12 5.2.2 Composición del suelo 13 5.3 ASPECTOS FÍSICOS DEL SUELO 14 5.3.1 Textura 14 5.3.2 Aireación 16 5.3.3 Porosidad 17 5.4 ASPECTOS QUÍMICOS DEL SUELO 17 5.4.1 Capacidad de intercambio catiónico (CIC) 18 5.4.2 pH del suelo 18 5.4.3 Conductividad eléctrica 19 5.5 GENERALIDADES DE LOS HONGOS 19 5.5.1 Características generales de los hongos 20 5.5.2 Estructura del hongo y composición de la pared celular 21 5.5.3 Reproducción de los hongos 22 5.5.4 Clasificación de los hongos 23 5.6 GENERALIDADES DE LOS ACTINOMICETOS 24 5.6.1 Distribución en el suelo 25 5.6.2 Influencias ambientales sobre los actinomicetos 25 5.6.3 Características morfológicas 26 5.6.4 Funciones en el ambiente 28 5.6.5 Importancia biotecnológica 29 ii 5.6.6. Importancia en la agricultura 30 5.7 ÍNDICE DE SHANNON – WEAVER 30 6 DIAGRAMA GENERAL DE TRABAJO 32 7 METODOLOGÍA 33 7.1 Muestra 33 7.2 Procedimiento técnico 34 7.2.1 Toma de muestra 34 7.2.2 Procesamiento de las muestras 35 7.2.2.1 Aislamientos a partir de suelo 35 7.2.2.2 Aislamientos a partir de plantas 36 7.2.3. Identificación fenotípica 36 7.2.3.1 Identificación macroscópica y microscópica 36 7.2.3.2 Identificación bioquímica de actinomicetos 38 7.2.3.3 Estimación de la biodiversidad 39 8 RESULTADOS 40 8.1 Flora de plantas silvestres 40 8.2 Flora de suelo 41 8.2.1 Aislamientos de los puntos muestreados en terreno conservado 41 8.2.2 Aislamientos de los puntos muestreados en terreno agrícola 44 8.3 pH 49 8.4 Biodiversidad (índice de Shannon) 49 9 DISCUSIÓN 52 9.1 Microorganismos identificados fenotípicamente 52 9.2 Determinación del pH 55 9.3 Estimación de la biodiversidad 55 9.4 Hongos identificados 56 9.4.1 Hongos saprófitos (contaminantes) 56 9.4.1.1 Paecilomyces sp. 56 9.4.1.2 Aspergillus sp. 57 9.4.1.3 Absidia sp. 58 9.4.1.4 Penicillium sp. 58 9.4.1.5 Syncephalastrum sp. 59 9.4.2 Agentes de micosis subcutáneas (cromoblastomicosis) 60 9.4.2.1 Fonseca pedrosoi 60 9.4.3 Actinomicetos 60 10 CONCLUSIONES 61 11 RECOMENDACIONES 63 12 BIBLIOGRAFÍA 64 13 GLOSARIO 69 14 ANEXOS 73 Introducción: Los microorganismos del suelo mantienen una actividad continua imprescindible para la vida en la Tierra, su principal función en el ambiente es la degradación de la materia orgánica, la cual se reintegra al suelo en forma de nutrimentos, y estos a su vez son absorbidos nuevamente por las plantas. Las bacterias y los hongos pueden fungir como fijadoras de nitrógeno o quimioautótrofos, además, pueden ayudar en el control biológico del suelo. Es por esta razón que se decide realizar esta investigación, dado que en la localidad la mayoría de personas se dedica a la agricultura. El objetivo que se pretende alcanzar es documentar la diversidad fúngica de micromicetos así como la de actinomicetos de interés ambiental y médico presentes en suelo y plantas del monte “Aguajito” de Tehutzingo, Puebla, para lo cual se recolectaron 20 muestras de suelo asociado a plantas silvestres y de cultivo, así como, 15 de plantas silvestres. Las muestras se maceraron en un mortero estéril y se realizaron diluciones seriadas (1:10, 1:100, 1:1000) por duplicado, inoculando en agar micobiótico con antibióticos; la microbiota se resembro hasta la obtención de cultivos puros, realizándose la identificación fenotípica a partir de microcultivos y tinciones con azul de algodón para el caso de los hongos y mediante el uso de pruebas bioquímicas para los actinomicetos, se determino la biodiversidad mediante el método de Índice de Shannon. Por otra parte se midió el pH de cada muestra tanto de suelo como de plantas. Se obtuvieron 22 aislamientos en suelo conservado, 4 hongos y 18 actinomicetos; en plantas silvestres se aislaron en total 11 hongos, teniendo al hongo contaminante Penicillium sp. con el 64% y al género Nocardia con 36% . En suelo agrícola se aislaron 302 hongos y 100 actinomicetos, siendo Pecilomyces sp. el hongos más incidente con el 67% y N. asteroides el actinomiceto de mayor frecuencia con el 66%. El pH de lugar de muestreo oscila entre de 4.35 a 7.05 y de las plantas de 6.20. El cálculo de la biodiversidad arrojó un valor de 1.94 el cual es considerado bajo, lo que resulta normal, puesto que el municipio es un lugar caluroso y seco.