Universidad de Córdoba Programa de Biología general - Biología Celular Rafael Soto Meza PRÁCTICA No. 3 DETERMINACIÓN DE MEDIDAS AL MICROSCOPIO I. OBJETIVOS: Adquirir habilidad en la determinación aproximada del tamaño microscópico de estructuras celulares, células y microorganismos. Demostrar que el área del campo visual varía de acuerdo el número de aumento del objetivo que se está utilizando. II. INTRODUCCIÓN Tanto en las células y sus estructuras como los organismos que dominan el mundo microscópico, es difícil determinar un tamaño exacto debido a las dimensiones tan pequeñas que los caracterizan; lo que hizo del microscopio uno de los inventos más revolucionarios en el estudio de los organismos vivos y su constitución. En el estudio de la biología celular la unidad de medida más frecuente es la micra representada con la letra griega µ y equivale a 0,001 mm. Un milímetro (1 mm) equivale a 1.000 µ, de tal forma una µ es igual a 0,001 mm y 1 mm2 equivale a 1’000.000 µ2. El núcleo de una célula tiene un diámetro aproximado de 5 a 10 µ y la mitocondria de 2 µ de largo. Las moléculas biológicas suelen medirse en una unidad más pequeña, el Angstrom (Å), el cual equivale a 0,0001 µ; así 1µequivale a 10.000 Å.por otro lado el Nanómetro (nm) es una unidad para medir dimensiones atómicas, como por ejemplo el interior de una célula; 1 nm es igual a 10Å, y 1 Å equivale a 10-7mm.En los laboratorios se utiliza el micrómetro para obtener medidas microscópicas, sin embargo en el caso de no disponer de ese equipo de medición es posible estimar el tamaño de los objetos observados determinando el tamaño del campo visual del microscopio. III. MATERIALES Y EQUIPOS Microscopio Tijeras* Portaobjetos Papel milimetrado* Cubreobjetos Cabello* Frasco lavador Polen de flor* Estilete Lápices de colores* Cuchillas* Calculadora* *El material marcado con asterisco debe traerlo el estudiante. IV. PROCEDIMIENTO DETERMINACIÓN DEL ÁREA DEL CAMPO VISUAL Corte un cuadrado de papel milimetrado de 1cm2 y móntelo al portaobjetos, agregue una gota de agua, tenga cuidado para que los lados del papel milimetrado queden paralelos a los lados del portaobjeto. Con cuidado coloque sobre este el cubreobjetos, evitando la formación de burbujas. Coloque la preparación sobre la platina del microscopio y observe con el objetivo de menor aumento, cuadre la placa de tal manera que una línea del papel milimetrado pase por todo el centro del campo visual, como se ilustra en la figura 3.1. 21 Universidad de Córdoba Programa de Biología general - Biología Celular Rafael Soto Meza A. ¿Cuánto mide el campo visual del objetivo de menor aumento (4x)? En centímetros ________________ En milímetros _________________ En micras ____________________ En Angstrom __________________ En nanómetros ________________ Calcula en milímetros cuadrados el área del campo visual de este objetivo (Área= πr2) B. ¿Cuánto mide el campo visual del objetivo de Figura 3.1. 10x? Medición del campo visual En centímetros ________________ utilizando papel milimetrado. En milímetros _________________ En micras ____________________ En Angstrom __________________ En nanómetros ________________ Calcula en milímetros cuadrados el área del campo visual de este objetivo (Área= πr2) Determina el diámetro correspondiente a los objetivos 40x y 100x. Para ello divide el diámetro encontrado del campo visual del objetivo de menor aumento por la razón resultante entre el número del objetivo de mayor aumento y el número del objetivo de menor aumento. Puesto que el diámetro del campo visual es inversamente proporcional al poder de aumento de los objetivos, se puede determinar mediante la siguiente fórmula: = ; Donde d1 es el diámetro del objetivo de menor aumento y d2 es el diámetro del objetivo de mayor aumento. C. ¿Cuánto mide el campo visual del objetivo de 40x? En centímetros ________________ En milímetros _________________ En micras ____________________ En Angstrom __________________ En nanómetros ________________ Calcula en milímetros cuadrados el área del campo visual de este objetivo (Área= πr2) D. ¿Cuánto mide el campo visual del objetivo de 100x? En centímetros ________________ En milímetros _________________ En micras ____________________ En Angstrom __________________ En nanómetros ________________ Calcula en milímetros cuadrados el área del campo visual de este objetivo (Área= πr2) 22 Universidad de Córdoba Programa de Biología general - Biología Celular Rafael Soto Meza DETERMINACION DE MEDIDAS DE ESTRUCTURAS ORGÁNICAS 1. Realice un montaje de cabello con el objetivo de 40xy determine su grosor. 2. Realice un montaje de polen de flor con el objetivo de 40x y determine el diámetro de algunos granos. Realice dibujos de cada observación. V. PREGUNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA 1. ¿El diámetro del campo visual es directa o inversamente proporcional al poder de aumento del objetivo? Explique. 2. ¿Por qué es importante conocer el tamaño de un organismo microscópico? 3. ¿Cuáles son las ventajas de conocer previamente el diámetro del campo visual de un objetivo determinado? 4. ¿Qué relación existe entre el poder de aumento de los objetivos y el área del campo visual? Explique. 5. Calcule el tamaño en micras de un microorganismo con base en los siguientes datos: el diámetro del campo visual con el objetivo de 10x es de 1.4mm este organismo, al observarlo con el objetivo de 40x ocupa la mitad del diámetro del campo visual. ¿Cuál es el tamaño real del organismo observado? 6. Halle el área del campo visual de los objetivos de 40x y 100x en nanómetros cuadrados. Al finalizar la práctica entregue los resultados obtenidos al docente con los respectivos dibujos de las pruebas en el pre-informe. 23