ESTANDARIZACIÓN DE LA TÉCNICA DE WESTERN BLOT PARA

ESTANDARIZACIÓN DE LA TÉCNICA DE WESTERN
BLOT PARA LA CONFIRMACIÓN DEL DIAGNÓSTICO
SEROLOGICO DE TRIQUINOSIS HUMANA
CECILIA NAVIA NAJLE
UNIVERSIDAD DE TALCA.
RESUMEN
Triquinosis es una parasitosis considerada un problema de salud pública, por lo tanto es necesario
contar con métodos serológicos más específicos y sensibles para detectar la infección por T.
spiralis y así confirmar el inmunodiagnóstico de esta parasitosis.
Se implementó la técnica de Western Blot (WB) para determinar las principales fracciones
inmunogénicas de T. spiralis. Se estudiaron un total de 155 muestras de las cuales 48
correspondían a pacientes con infección por T. spiralis, recibidas entre los años 2002 y 2004; 59
muestras de sueros de pacientes con otras parasitosis ( 4 Cisticercosis, 21 Toxocariosis, 10
Hidatidosis, 10 Strongiloidosis, 5 Toxoplasmosis, 4 Giardiasis y 5 Enfermedad de Chagas ); 10
muestras de pacientes con otras enfermedades ( 4 Sífilis y 6 Enfermedades Inmunes) y 38
muestras de sueros negativos para Triquinosis, sin eosinofilia.
Realizado el WB, se identificaron 17 bandas polipéptidicas cuyos PM fueron calculados mediante
un gráfico semilogarítmico (log PM / Rf). Los PM calculados estaban dentro de un rango de 133
y 5 kDa.
Considerando la frecuencia de reconocimiento de estas bandas, se determinó el patrón
diagnóstico que considera a la fracción antigénica de 47 kDa como una banda fundamental en el
patrón junto con a lo menos una de las bandas de 63, 52, 32 y 28 kDa.
De acuerdo a los cálculos estadísticos, el patrón diseñado presentó una sensibilidad,
especificidad, valor predictivo positivo y negativo del 100 % con un índice de concordancia del
100 %. Estos valores confirmarían a WB como una técnica confiable para utilizarla en la
confirmación del diagnóstico serológico de Triquinosis.
ESTUDIO COMPARATIVO DE TRES TÉCNICAS PARA EL
DIAGNÓSTICO DE CASOS DE CRYPTOSPORIDIOSIS
HUMANA
MARCELA MARÍN SALGADO
UNIVERSIDAD E TALCA
RESUMEN
La Cryptosporidiosis es causada por el protozoo Cryptosporidium spp. En el hombre esta
infección afecta principalmente el tracto digestivo. Su importancia como patógeno radica en que
es más severo en niños y en pacientes inmunocomprometidos, y no existe tratamiento específico.
Con el fin de comparar tres técnicas diagnósticas se utilizaron 169 sedimentos fecales humanos,
provenientes del Laboratorio de Parasitología del Hospital Luis Calvo Mackenna y 10 muestras
positivas del Laboratorio de Referencia de Parasitología del Instituto de Salud Pública de Chile
(ISP).
De las 169 muestras se obtuvieron 2 resultados positivos para Cryptosporidium spp. por las
técnicas de observación directa con lugol y azul de metileno, tinción de Ziehl Neelsen modificado
y el Kit C - 1005 Crypto – Strip, obteniéndose una prevalencia de 1,18% para el grupo de
muestras estudiadas.
La frecuencia de infección con protozoos intestinales mediante la observación directa, no asoció
a otro parásito con Cryptosporidium spp.
El método de observación directa con lugol y azul de metileno presentó una sensibilidad de
91,66% y una especificidad de 100%, un valor predictivo positivo del 100% y un valor predictivo
negativo del 94,40%. El costo por determinación es bajo y puede ser considerado un método de
screening.
El Kit Crypto – Strip presentó una sensibilidad y especificidad de 100%, un valor predictivo
positivo y negativo del 100%. Su costo por determinación es más alto comparado con la
observación directa y tinción de Ziehl Neelsen modificado, pero el tiempo de realización es corto
y no requiere adiestramiento especial.
Las dos técnicas se compararon con los resultados obtenidos por la tinción de Ziehl Neelsen
modificada, que se utiliza como referencia en el Laboratorio de Parasitología del ISP por su bajo
costo y su buena interpretación.
De acuerdo a éstos resultados se puede concluir que la tinción de Ziehl Neelsen modificada
continuaría siendo el mejor método y ocuparía el carácter de Referencia para el Laboratorio de
Parasitología del ISP, recomendando implementarla como rutina en los Laboratorios del país para
la búsqueda de Cryptosporidium spp.