1. Título del Tópico Selecto Mecanismos de Internalización y control del Tráfico de Proteínas de Membrana en Animales y Plantas 2. Tutor responsable Nombre completo Adscripción Teléfono Correo electrónico 3. Profesores invitados Nombre completo Adscripción Teléfono Correo electrónico Nombre completo Adscripción Teléfono Correo electrónico Nombre completo Adscripción Teléfono Correo electrónico Dra. Karina Picazarri Instituto de Biotecnología (777) 329-1666/27666 [email protected] M. en C. Jonathan Rodríguez Instituto de Biotecnología (777) 329-1666/27666 [email protected] Dra. Rosa Ma. del Ángel Núñez CINVESTAV-IPN 5747-7000 EXT.5647 y 48 [email protected] Dra. Yvonne Rosenstein Instituto de Química 56 22 45 68 [email protected] Nombre completo Dra. Liliana Pardo López Adscripción Instituto del Biotecnología Teléfono (777) 329-1624 Correo electrónico [email protected] Nombre completo Dr. Pavel Isa Haspra Adscripción Instituto de Biotecnología Teléfono (777) 329-1612 Correo electrónico [email protected] Nombre completo Dra. Rosario Vera Estrella Adscripción Instituto de Biotecnología Teléfono (777) 329-1625 Correo electrónico [email protected] Nombre completo Dra. Gladys Iliana Cassab López Adscripción Instituto de Biotecnología Teléfono (777) 329-1660 Correo electrónico [email protected] Nombre completo Dra. Helena Porta Ducoing Adscripción Instituto de Biotecnología Teléfono (777) 329-1624 Correo electrónico [email protected] Nombre completo Dr. Luis Cárdenas Torres Adscripción Instituto de Biotecnología Teléfono (777) 329-1666 Correo electrónico [email protected] Nombre completo Dr. Federico Esteban Sánchez Rodríguez Adscripción Instituto de Biotecnología Teléfono (777) 329-1666 Correo electrónico [email protected] 4. Introducción/justificación del Curso La endocitosis es la internalización de material extracelular y componentes de la membrana plasmática al citoplasma. Se estima que cada hora la célula internaliza de 1 a 5 veces el equivalente de su membrana celular y que mas de la mitad de sus proteínas se encuentran asociadas a membranas. La constante remoción de la membrana se compensa con el reciclamiento de los endosomas que regresan muchas de las proteínas y lípidos a la superficie celular. Éste continuo recambio de la membrana implica una regulación exhaustiva y coordinada para controlar el tráfico de las vías endocíticas. Algunos endosomas son acidificados o transportados a compartimentos de degradación para regular negativamente la señal desencadenada por receptores y otras proteínas de membrana, para así controlar los flujos de iones y mantener la homeostasis celular. Los mecanismos de internalización difieren de acuerdo a la naturaleza de la carga y al linaje celular, y son tan variados como los procesos biológicos en los que participan. Básicamente, pueden clasificarse como dependientes e independientes de clatrina. La endocitosis dependiente de clatrina ha sido ampliamente estudiada en células animales, esta vía dirige la internalización de proteínas específicamente reconocidas por moléculas adaptadoras que reclutan a la clatrina hasta una invaginación naciente en la membrana. La vesícula formada y cubierta de clatrina se escinde por la actividad hidrolítica que la dinamina tiene sobre GTP. Los mecanismos de endocitosis independiente de clatrina se han estudiado menos y son muy variados, incluyen: 1) la endocitosis caveolar que es dependiente de dinamina e internaliza glucoesfingolípidos y algunos virus, 2) las vías endocíticas dirigidas por actina involucradas en la macropinocitosis, 3) la endocitosis dependiente de CDC42 y ARF1 e independiente de dinamina que internaliza toxinas bacterianas y marcadores de fase fluída, y 4) la endocitosis asociada a ARF6 que se encarga de muchas proteínas que carecen de secuencias de reconocimiento a proteínas adaptadoras. Además de la endocitosis de “housekeeping” se han identificado diferentes situaciones biológicas que requieren de la endocitosis como uno de los pasos necesarios para su ejecución. El reconocimiento de elicitores generales, patrones moleculares asociados a microbios (MAMP) de microrganismos patógenos o simbióticos se hace mediante receptores con dominios de repetidos ricos en leucina (LRR) como los receptores Toll en Drosophila o los receptores similares a Toll (TLR) en mamíferos; la similitud que existe entre animales y plantas para montar los mecanismos de reconocimiento MAMP permite extrapolar los conocimientos y hacer hipótesis que trasciendan las barreras entre ambos reinos. En plantas, el estudio de la endocitosis ha tomado relevancia en los últimos años debido a su importacia en distintos procesos celulares como son el reciclamiento de la membrana, el transporte de proteínas, los mecanismos mediados por receptores, señalización, internalización de la pared celular y de compuestos externos solubles. En plantas, la mayoría de los mecanismos descritos se sustentan en una maquinaria formada por vesículas recubiertas de clatrina provenientes del plasmolema. Los mecanismos independientes de clatrina en plantas han sido reportados en la literatura hace tan solo un par de años. Los objetivos del tópico son: 1) revisar los mecanismos de endocitosis, reciclamiento, secreción y degradación que sufren las proteínas de membrana y 2) analizar las implicaciones de dichos mecanismos en diferentes procesos biológicos de plantas y animales. En particular, enfocaremos nuestro estudio en los avances mas recientes en las áreas de homeostasis celular, diferenciación, desarrollo y respuesta a interacción con microrganismos patógenos y/o simbiontes. 5. Características para la impartición del Curso Indique el lugar en donde se realizará el Curso Número de sesiones y duración en horas por sesión (mínimo 36 horas) Disponibilidad de impartirlo por videoconferencia Número total de alumnos que puede aceptar Número de alumnos del PMyDCB que puede aceptar Instituto de Biotecnología, Campus Cuernavaca 16 sesiones de 5 horas por sesión No 18 50% 6. Método de evaluación Por favor incluya en este apartado el % de la contribución relativa de: Exámenes (2) 30.00% Participación en clase 70.00% Asistencia Presentación de un proyecto Otros 7. Temario del Tópico Selecto I. Tráfico vesicular en plantas y animales: Conceptos generales Febrero 2: Introducción de Tráfico de Vesículas (Karina Picazarri, 5h) Febrero 9: Introducción de Señalización y Receptores (Yvonne Rosenstein, 5h) Febrero 16: ¿Qué tan parecida es la maquinaria molecular de la Endocitosis en plantas y animales? (Karina Picazarri, 5h) Febrero 23: Control de calidad en la vía biosintética-secretoria: Modelos vegetales y animales (Liliana Pardo, 5h) II. Internalización y secreción de proteínas responsables de la homeostasis celular, la diferenciación y el desarrollo Marzo 2: Control del transporte de iones por ubiquitina (Jonathan Rodríguez, 5h) Marzo 9: Endocitosis y tráfico de canales y transportadores en plantas (Rosario Vera, 5h) Marzo 16: Internalización de los transportadores de auxinas PIN y su repercusión en el gravitropismo y el fototropismo de las plantas (Gladys Cassab, 5h) Marzo 23: Mecanismos de endocitosis y secreción en la formación del tubo polínico y pelos radicales (Luis Cárdenas, 5h). 30 Marzo: Endocitosis mediada por ubiquitina de receptores con actividad Tirosina Cinasa (RTKs) en animales (Karina Picazarri, 5h) Abril 6: Internalización y transporte a la superficie membranal de receptores acoplados a proteínas G (Liliana Pardo, 5h) Abril 13: Examen III. Procesos de endocitosis derivados de la interacción con microrganimos Abril 27: Internalización de virus en células animales: Dengue (Rosa Ma. Del Ángel, 2.5h); Influeza y Rotavirus (Pavel Iza, 2.5h) Mayo 4: Internalización de virus en plantas. Ejercicio de recapitulación y comparación en ambos modelos (Karina Picazarri, 5h). Mayo 11: Mecanismos de internalización mediados por receptores en respuesta a MAMP en modelos vegetales (Karina Picazarri, 5h) Mayo 18: Internalización de bacterias patógenas y sus toxinas (Helena Porta, 5h) Mayo 25: Endocitosis de bacterias gramnegativas: correlación entre un patógeno humano y un simbionte en Rhizobia (Federico Sánchez, 5h) Mayo 31: Examen 8. Bibliografía plantas, el ejemplo de Mycobacterium y Bibliografía (parcial) 1. Achour L, Labbé-Jullié C, Scott MG, Marullo S. An escort for GPCRs: implications for regulation of receptor density at the cell surface. Trends Pharmacol Sci. 2008 Oct;29(10):528-35. 2. Alberts Bruce et al., Molecular Biology of the Cell 5th Edition, 2008. 3. Bar M, Sharfman M, Ron M, Avni A. BAK1 is required for the attenuation of Eix-induced defense responses by the decoy receptor LeEix1. Plant J. 2010 Jun 17. [Epub ahead of print] 4. Bar M, Avni A. EHD2 inhibits ligand-induced endocytosis and signaling of the leucine-rich repeat receptor-like protein LeEix2. Plant J. 2009 Aug;59(4):600-11. Epub 2009 Apr 20. 5. Caswell PT, Vadrevu S, Norman JC. Integrins: masters and slaves of endocytic transport. Nat Rev Mol Cell Biol. 2009 Dec;10(12):843-53. 6. Cao XR, Lill NL, Boase N, Shi PP, Croucher DR, Shan H, Qu J, Sweezer EM, Place T, Kirby PA, Daly RJ, Kumar S, Yang B. Nedd4 controls animal growth by regulating IGF-1 signaling. Sci Signal. 2008 Sep 23;1(38):5. 7. d'Azzo A, Bongiovanni A, Nastasi T. E3 ubiquitin ligases as regulators of membrane protein trafficking and degradation. Traffic. 2005 Jun;6(6):429-41. 8. Grant BD, Donaldson JG. Pathways and mechanisms of endocytic recycling. Nat Rev Mol Cell Biol. 2009 Sep;10(9):597-608. 9. Hurley JH, Hanson PI. Membrane budding and scission by the ESCRT machinery: it's all in the neck. Nat Rev Mol Cell Biol. 2010 Aug;11(8):556-66. 10. Lefebvre B, Timmers T, Mbengue M, Moreau S, Hervé C, Tóth K, Bittencourt-Silvestre J, Klaus D, Deslandes L, Godiard L, Murray JD, Udvardi MK, Raffaele S, Mongrand S, Cullimore J, Gamas P, Niebel A, Ott A remorin protein interacts with symbiotic receptors and regulates bacterial infection. Proc Natl Acad Sci U S A. 2010 Feb 2;107(5):2343-8. 11. Limpens E, Ivanov S, van Esse W, Voets G, Fedorova E, Bisseling T. Medicago N2-fixing symbiosomes acquire the endocytic identity marker Rab7 but delay the acquisition of vacuolar identity. Plant Cell. 2009 Sep;21(9):2811-28. 12. Monami G, Emiliozzi V, Morrione A. Grb10/Nedd4-mediated multiubiquitination of the insulin-like growth factor receptor regulates receptor internalization. J Cell Physiol. 2008 Aug;216(2):426-37. 13. Otegui MS, Spitzer C. Endosomal functions in plants. Traffic. 2008 Sep;9(10):1589-98. 14. Pieters J. Mycobacterium tuberculosis and the macrophage: maintaining a balance. Cell Host Microbe. 2008 Jun 12;3(6):399-407. 15. Saijo Y. ER quality control of immune receptors and regulators in plants. Cell Microbiol. 2010 Jun;12(6):716-24. Epub 2010 Apr 6. 16. Sánchez-Navarro J, Fajardo T, Zicca S, Pallás V, Stavolone L. Caulimoviridae tubule-guided transport is dictated by movement protein properties. J Virol. 2010 Apr;84(8):4109-12. 17. Soldati T, Schliwa M. Powering membrane traffic in endocytosis and recycling. Nat Rev Mol Cell Biol. 2006 Dec;7(12):897-908. 18. Stefano Marullo, Liliana Pardo Lopez and Lamia Achour. 2010. Identifying GPCR escorts, chaperones and intracellular tethers regulating receptor. In: G Protein-Coupled Receptor Technology. Craig W. Stevens ,(Ed.) SPRINGER SCIENCE BUSINESS MEDIA, LLC. 19. Stenmark H. Rab GTPases as coordinators of vesicle traffic.Nat Rev Mol Cell Biol. 2009 Aug;10(8):513-25. 20. Traub LM. Tickets to ride: selecting cargo for clathrin-regulated internalization. Nat Rev Mol Cell Biol. 2009 Sep;10(9):583-96. 21. Zhang J, Zhou JM. Plant immunity triggered by microbial molecular signatures. Mol Plant. 2010 Sep;3(5):783-93. Epub 2010