UNIVERSIDAD NACIONAL DE QUILMES AREA BIOTECNOLOGIA BIOPROCESOS II SEMINARIO DE BIOSEPARACIONES 1- Estimar la velocidad de sedimentación de una partícula de 5 µm de diámetro y 1100 Kg. m-3 de densidad, en agua a 20º C con una viscosidad de 1.01 10-3 N.s.m-2 y una densidad de 1000 Kg.m-3 cuando: a- Sedimenta libremente b- Se localiza en un punto R: 0.15 m y gira a 3000 rpm. 2- Una centrífuga de tubos es empleada para cosechar levaduras después de una fermentación. La centrífuga consiste en un número de cilindros que rotan perpendicularmente al eje de rotación. Durante la centrifugación la distancia entre la superficie del líquido y el eje de rotación es de 3 cm. y la distancia desde el fondo del cilindro al eje es 10 cm. Asumiendo que las levaduras se comportan como esferas con un diámetro de 8 micrones y su densidad es de 1.05 g.cm-3 y que el fluido se comporta como agua pura, cuanto tiempo toma una separación completa si la velocidad de centrifugación es de 500 radianes por minuto? 3- Si una publicación de un trabajo sobre levaduras que usted debe realizar se encuentra en mal estado y no se puede apreciar el valor del numero de g a las que se lleva a cabo la centrifugación, cómo haría para calcular dicho valor si por suerte el tiempo de duración de la centrifugación no sufrió el mismo destino y es de 10 minutos. La centrífuga que usted tiene disponible es la del ejercicio 2, al igual que el comportamiento y las características del fluido. 4-a- Deben separarse células bacterianas provenientes de un cultivo continuo con un caudal de 3.34 10-3 m3.s-1. Asumiendo que las células son esféricas y que su diámetro promedio es de 1 µm, seleccione una centrífuga capaz de realizar dicha separación (ver tabla adjunta). La densidad de las células es de 1100 Kg.m-3, y la viscosidad del caldo es 3 veces la del agua. 4-b- Si luego de la cosecha las células se rompen con una Prensa Francesa y los restos celulares poseen un tamaño promedio de 0.5 10-6 m, calcular el flujo para la separación completa de los restos si la viscosidad del caldo se incrementó 4 veces. 5- Células de Chlorella están siendo cultivadas en cultivo continuo y desean cosecharse empleando una centrífuga de discos. La velocidad de sedimentación de estas células tiene un valor de 1.07 10-4 cm.s-1. La centrífuga a emplear posee 80 discos con un ángulo de giro de 40º, un radio externo de 15.7 cm y un radio interno de 6 cm. Si se desea trabajar a 6000 rpm, estime la capacidad volumétrica para esta centrífuga. 6- Cuando se realiza la filtración de un caldo miceliar con una caída de presión constante igual a 19.6 104 N.m-2 se obtienen los siguientes valores: Tiempo (seg) 9 46 126 240 405 610 860 Volumen filtrado (dm3) 10 20 30 40 50 60 70 El área de filtración es 1.1 10-2 m2, la concentración de sólidos del filtrado es de 40 kg.m-3 y la viscosidad del caldo es de 2 10-3 N.s.m-2. a- Calcule la resistencia específica de la torta. b-¿Cómo se puede optimizar el proceso de filtrado en relación al tiempo empleado en cada ciclo si el filtro se opera 24 hs por día y el tiempo necesario para limpiarlo es 0.5 hs. 7- Si un tambor de vacío se opera a 8.33 10-3 m3.s-1 y a un vacío constante de 6.93 104 N.m-2 calcule: a- El incremento de la eficiencia de filtración cuando se aumenta la velocidad de rotación de 0.3 a 0.5 rpm. b- El incremento de la eficiencia de filtración si el área sumergida del tambor se incrementa de 30 % a 40 % del área total. 8- Con los datos de una filtración de laboratorio de una suspensión de un esteroide se desea diseñar un filtro intermitente de marcos y placas. Las pruebas de laboratorio se realizan en un tubo de vidrio con una malla en el extremo inferior de resistencia despreciable. Los datos de los resultados del laboratorio son los siguientes: Peso seco de los cristales Volumen de la torta Profundidad de la torta Tiempo de filtración Gradiente de presión Torta incompresible 0.063 Kg 253 cm3 12.5 cm 9780 seg 1.01 Kg/cm2 si Estimar el numero de marcos de 430 x 430 x 30 mm y el tiempo de filtrado, para procesar 40 Kg/lote de peso seco de producto. Suponer que la bomba de alimentación produce una presión a la entrada del filtro de 0.68 kg/cm2 y que descarga a la atmósfera. 9- Se desea correlacionar la resistencia específica de la torta que forma una levadura con la caída de presión, para lo cual se realizan pruebas de filtración bajo las siguientes condiciones: Area de filtración 9.3 cm2 Viscosidad 0.001 N-seg/m2 Masa de sólido seco por volumen de filtrado 10 g/l Las pruebas se realizan a 4 gradientes de presión diferentes. Los datos de cada corrida fueron correlacionados obteniéndose los siguientes datos: Corrida Numero Gradiente de P (atm) 1 2 3 4 0.68 1.36 2.04 3.40 Ordenada al origen (seg/cm) 26 12 8 5 Estimar el índice de compresibilidad s para este material. Pendiente (seg/cm2) 3.00 2.00 1.60 1.10 UNIVERSIDAD NACIONAL DE QUILMES AREA BIOTECNOLOGIA BIOPROCESOS II BIOSEPARACIONES Centrifugación El estudio de las separaciones sólido-líquido por centrifugación está basado en la teoría de la sedimentación. Esta permite desarrollar algunas predicciones del comportamiento de los equipos centrífugos, no sola para poder especificarlos y dimensionarlos, sino que también ofrece un apoyo adecuado para su correcta operación. La teoría de la sedimentación está basada en la Ley de Stokes que establece los aspectos básicos del movimiento de un sólido en un líquido cuando existe un gradiente de densidad. Este movimiento puede ser causado por la fuerza gravitacional o por una fuerza centrífuga y de acuerdo a esto se puede expresar la velocidad de sedimentación de una partícula del siguiente modo: velocidad de sedimentación de la partícula: vg : (δp − δf ) 2 dp g 18.µ Válida para partículas esféricas, Re < 1 y bajas concentraciones Velocidad de sedimentación de la partícula en centrífugas esféricas: (δp − δf ) 2 2 dp ω r 18.µ dr dt : vc : ω: velocidad angular en radianes por segundo r: posición radial de la partícula dp: diámetro de la partícula δp: densidad de la partícula δf: densidad del fluido µ: viscosidad del fluido Z: ω 2r vc = : fuerza relativa de la centrífuga o número de g o efecto centrífuga g vg 2 nrpm r ω 2r Z: ≈ g 900 En esta última aproximación r debe expresarse en metros. Normalmente se utiliza el parámetro Z para caracterizar a la centrífuga pero no puede ser usado para estimar su capacidad. El máximo flujo posible al cual se puede trabajar en el caso de centrífugas que funcionan en forma continua, depende del tipo de centrífuga utilizada. Para centrífugas tubulares la expresión del caudal viene dada por: Q: v g π .L( Ro 2 − R1 2 )ω 2 g ln( Ro / R1 ) = vg ∑ Q o F : velocidad volumétrica de flujo (volumen/tiempo) L: Longitud de la centrífuga ∑ : Area equivalente de la centrífuga ( longitud2), útil para comparar distintas centrífugas Ro: Distancia radial del eje de giro a la superficie del líquido R1: Distancia del eje de giro a la pared del tazón En la mayoría de las centrífugas tubulares Ro≈R1=R por lo que la expresión anterior se reduce a: Q: v g 2π .LR 2ω 2 g = vg ∑ Debido a que ∑ aumenta con la longitud axial del rotor (L) y con su diámetro (2R) y velocidad (ω), el comportamiento mejora utilizando rotores más largos o más rápidos y anchos. Los valores que se pueden conseguir de Z vienen limitados por el material de construcción. En el caso de centrífugas de discos, la geometría del sistema es distinta a la tubular y matemáticamente más compleja. La expresión de Q para este tipo de centrífuga es la siguiente: Q: v g 2π .n( Ro 3 − R1 3 )ω 2 cot angenteθ 3g = vg ∑ N: número de discos θ: ángulo que forman los discos con el eje vertical de la centrífuga El flujo es función de las propiedades del caldo contenidas en vg, y de las características de la centrífuga contenidas en ∑. El Area equivalente de la centrífuga, ∑, es una constante que contiene sólo parámetros relacionados a la geometría de la centrifuga y a su velocidad angular (es independiente de las propiedades del caldo). Se utiliza para efectuar comparaciones entre distintas centrífugas y para escalamiento de equipos. Filtración La filtración consiste en la separación de un sólido de un fluido por acción del medio filtrante y un gradiente de presión como fuerza impulsora. La velocidad de filtración se expresa mediante la siguiente expresión: Velocidad de filtración: 1 dV ∆P = A dt µR La velocidad de filtración, es decir, el volumen de filtrado que puede ser recogido en un tiempo determinado es función de la superficie del filtro, la viscosidad del fluido y al caída de presión a través del material del filtro y de la pasta depositada sobre el filtro. La resistencia del medio filtrante y de la pasta del filtro juntos es por consiguiente crítica y esta resistencia depende de su compresibilidad. ∆P : fuerza impulsora, gradiente de presión R: resistencia total a la filtración: Rtorta + Rmedio Rtorta: αω = αρoV/A Para tortas incompresibles ω: cantidad de sólidos secos depositados por unidad de área α: resitencia específica de la torta ρo: masa sólida seca por unidad de volumen dV A∆P = dt µ (αρ V 1 + R ) o m A Esta ecuación puede escribirse en su forma recíproca e integrarse considerando que a t=0 V=0: µαρ o V µRm At =( ) + V 2∆P A ∆P Si se grafica At/V vs V/a se obtiene una recta que puede ser utilizada para la obtención de parámetros de filtración en equipos intermitentes a P cte. Los filtros rotatorios de tambor a vacío son tal vez los dispositivos más ampliamente utilizados para la separación de los microorganismos de los caldos de fermentación. En estos el elemento de filtración es un tambor rotatorio que opera en forma continua bajo presión interna reducida. La ecuación que define la filtración intermitente puede ser adaptada a la filtración continua empleando filtros rotatorios, donde el tiempo t es el que dura un paso de la formación de torta, el volumen V es el volumen de filtrado colectado en ese período y A es el área expuesta de filtración por ciclo o por revolución. Empleando otros parámetros de diseño adicionales dicha ecuación queda expresada de la siguiente manera: V 2 + 2.Vo.V = k . Rarea n Rárea: relación de área sumergida en el líquido respecto al área total V: volumen de filtrado por revolución (m3) n: velocidad de rotación (rpm) Vo: Parámetro de filtración que es directamente proporcional a la resistencia del medio filtrante K: Parámetro de filtración que es directamente proporcional al gradiente de presión y al cuadrado del área e inversamente proporcional a la viscosidad, al peso seco de la torta por unidad de volumen y a la resistencia específica de la torta.