Ficha tecnica

 INGENASA
INgezim MAEDI SCREENING
R.13.SLS.K1
INgezim MAEDI SCREENING es un ensayo inmunoenzimático basado en la técnica de ELISA indirecto, que usa un anticuerpo
monoclonal (AcM) específico de inmunoglobulinas de pequeños rumiantes y 2 péptidos: específico del virus de Maedi Visna (MVV) y
específico del virus de la encefalilitis caprina (CAEV).
BASE TÉCNICA DEL KIT
PLACAS TAPIZADAS CON PEPTIDOS
DE LENTIVIRUS
ADICIÓN DE MUESTRA
LAVADO
ADICIÓN DE CONJUGADO
1. Las placas se suministran tapizadas con los dos péptidos específicos de los dos
lentivirus (MVV y CAEV). Las muestras se añaden en los pocillos y se incuban.
2. Si las muestras contienen anticuerpos específicos de lentivirus de pequeños
rumiantes, éstos se unirán al antígeno.
3. Cuando se añade un AcM-PO específico de IgG caprina y ovina, éste se unirá a las Igs
de la muestra unidas al antígeno. Esta unión se revela mediante reacción colorimétrica
tras adición de substrato.
APLICACIÓN
Detección de anticuerpos específicos de lentivirus en muestras de suero ovino y caprino.
LAVADO
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
ADICIÓN DE SUSTRATO
POSITIVO
NEGATIVO
El ensayo establece dos Cut Off: positivo y negativo.
Las muestras se considerarán Positivas cuando su valor de IP sea superior al Cut Off
positivo. Las muestras se considerarán Negativas cuando su valor de IP sea inferior al
Cut Off negativo. Las muestras cuyo valor de IP se encuentre entre ambos valores se
considerarán Dudosas.
VALIDACIÓN
1. Sensibilidad diagnóstica
Se analizó un panel de 88 sueros infectados con los
genotipos A y B. Los resultados obtenidos indicaron una
sensibilidad de 95%.
2. Especificidad diagnóstica
Se analizó un panel de 70 sueros infectados con el
genotipo E o negativos. Los resultados obtenidos
indicaron una especificidad mayor del 99,9%.
4. Correspondencia con otros ensayos disponibles en el
mercado.
Se analizaron 44 muestras de campo de oveja y cabra por
INGEZIM MAEDI Screening, y dos kits comerciales (1 Y 2).
Los resultados obtenidos indicaron que la correspondencia
con estos kits fue del 73% y 75% respectivamente.
3. Especificidad analítica
Se ha descrito en la bibliografía que existen animales
vacunados frente a BTV que muestran cross-reacción en
algunos ensayos de detección de anticuerpos específicos
de M. visna. Con objeto de determinar si INgezim Maedi
screening muestra este efecto, se analizaron diferentes
extracciones a diferentes días post vacunación de 20
animales vacunados frente a BTV. Los resultados
obtenidos indicaron que el ensayo no muestra
crossreacción para este tipo de anticuerpos.
COMPOSICION DEL KIT
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PRODUCTO FABRICADO POR INGENASANº
REGISTRO 3295 RD
Placas de microtitulación de 96 pocillos
Vial con Control Positivo.
Vial con Control Negativo.
Vial con Conjugado.
Frasco con Solución de Lavado concentrada.
Frasco con Diluyente.
Frasco con Substrato (ABTS).
Frasco con tampón substrato.
Frasco con Solución de Frenado.
IT-73840
IT-73780
CADUCIDAD:
9191.INGE
9175.ING2
12 meses
Conservado 2ºC y 8ºC
Ed.100114
INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA APLICADA, SA – C/ Hermanos García Noblejas, 39 – 28037 MADRID (SPAIN) – Tel (+34) 91 368 0501
www.ingenasa.com
INGENASA
INgezim MAEDI SCREENING
R.13.SLS.K1
INgezim MAEDI SCREENING is an immunoenzymatic assay based on an indirect ELISA technique, which uses a monoclonal
antibody (MAb) specific to small ruminant immunoglobulins and two peptides: specific to Maedi Visna virus (MVV) and specific to
Caprine Arthritis-Encephalitis virus (CEAV).
TECHNICAL BASIS OF THE KIT
PLATES COATED WITH LENTIVIRUS
PEPTIDES
SAMPLE ADDITION
Ó
WASHING
CONJUGATE ADITION
Ó
WASHING
1. Plates are coated with the two peptides specific to both Lentivirus (MVV and
CAEV). Samples are added and incubated.
2. If the sample contains antibodies specific to small ruminants Lentivirus, they will
bind to the antigen.
3. When a MAb-PO specific to small ruminants immunoglobulins is added, it will bind
to the Igs of the sample previously bound to the antigen. This binding is detected by the
development of a colorimetric reaction after the addition of the substrate.
APPLICATION
Detection of specific antibodies to Lentivirus in ovine and caprine serum samples.
INTERPRETATION OF THE RESULTS
SUBSTRATE ADDITION
POSITIVE
NEGATIVE
Ó
Two cut offs are used for the results interpretation. Samples are considered Positive if
their IP value is higher than the positive cut off. Samples are considered Negative if their
IP value is lower than the negative cut off. Samples with IP value within the range of both
cut offs, are considered Doubtful.
VALIDATION
1.
Diagnostic Sensitivity
A panel of 100 sera from small ruminants infected with
genotypes A or B were analyzed. The results obtained
indicated 93% sensitivity.
2. Diagnostic Specificity
A panel of 88 sera from animals infected with serotype E
or negative were analyzed. The results obtained
indicated 95% specificity.
3.
4. Correspondence with other assays available in the
market.
44 ovine and caprine field samples were analyzed by INGEZIM
MAEDI Screening and two other commercial kits. The results
obtained indicated that the correspondence with these kits was
73% and 75% respectively.
Analytical Specificity
It has been described in several references that some
kind of cross reaction may appear in assays for the
detection of specific antibodies to M.visna in BTV
vaccinated animals. In order to check the performance of
the INgezim Maedi screening kit regarding this effect,
different extractions at different days post vaccination of
20 animals vaccinated to BTV were analyzed. The results
obtained indicated that INgezim Maedi screening does
not show cross-reaction to this kind of antibodies.
COMPOSITION OF THE KIT
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PRODUCT MANUFACTURED BY INGENASA
REGISTRATION NUMBER:3295 RD
Microtitration plates of 96 wells
Vial with Positive Control.
Vial with Negative Control.
Vial with Conjugate.
Bottles with Washing Solution concentrated.
Bottles with diluent
Bottle with substrate (ABTS).
Bottle with Substrate Buffer.
Bottle with stop solution.
IT-73840
IT-73780
Shelf life:
9191.INGE
9175.ING2
12 months
Store at 2ºC-8ºC
Ed.100114
INMUNOLOGÍA Y GENÉTICA APLICADA, SA – C/ Hermanos García Noblejas, 39 – 28037 MADRID (SPAIN) – Tel (+34) 91 368 0501
www.ingenasa.com