Applied Biosystems® TrueScience™ Aneuploidy STR Kits Quick

TARJETA DE REFERENCIA RÁPIDA
Applied Biosystems® TrueScience™
Aneuploidy STR Kits
Nota: si desea conocer las recomendaciones de seguridad y riesgos biológicos, consulte el apartado “Safety” en el protocolo Applied
Biosystems® TrueScience™ Aneuploidy STR Kits (PN 4454039). Para conocer las advertencias y precauciones, consulte el folleto de los
Applied Biosystems® TrueScience™ Aneuploidy STR Kits (PN 4453329). Para todos los productos químicos, consulte la ficha técnica de
seguridad (SDS) y siga las instrucciones de manipulación indicadas. Use equipos de protección para los ojos, vestimenta protectora y
guantes apropiados. Para más información sobre los TrueScience™ Aneuploidy STR Kits, visite www.appliedbiosystems.com/aneuploidy.
Esta tarjeta de referencia rápida incluye:
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Aplicaciones . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
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Kits. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1
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Obtenga asistencia técnica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
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Procedimiento . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
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Introducción . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 2
Aplicaciones
Los Applied Biosystems® TrueScience™ Aneuploidy STR Kits son ensayos multiplexados basados en ADN diseñados para la rápida
determinación prenatal del estado de aneuploidía en las tres trisomías autosómicas viables más comunes y en los cromosomas
sexuales X e Y.
Kit
Aplicaciones
TrueScience™ Aneuploidy STR Plus
Detección cuantitativa in vitro rutinaria de las tres trisomías autosómicas viables más
comunes: trisomía 13 (síndrome de Patau), trisomía 18 (síndrome de Edwards) y trisomía 21
(síndrome de Down). Incluye, asimismo, marcadores del cromosoma X e Y más el marcador
TAF9L para la determinación del sexo.
TrueScience™ Aneuploidy STR-XY
Análisis del estado del cromosoma sexual, incluidas las aneuploidías comunes del
síndrome de Klinefelter y del síndrome de Turner.
TrueScience™ Aneuploidy STR-21,
TrueScience™ Aneuploidy STR-18,
TrueScience™ Aneuploidy STR-13
Kits suplementarios para cada cromosoma, que contienen marcadores autosómicos
adicionales. Estos kits están disponibles para realizar pruebas cromosómicas ampliadas
en aquellos casos en los que la prueba estándar no proporcione un resultado definitivo
o para aportar información adicional.
Todos los kits están diseñados para su utilización con el ADN extraído de muestras de las vellosidades coriónicas (CV) y del líquido
amniótico (AF).
Kits
Kit
4453756
TrueScience™ Aneuploidy STR-Plus
50
4453757
TrueScience™
Aneuploidy STR-Plus
10
4453601
TrueScience™
Aneuploidy STR-XY
50
4453755
TrueScience™
Aneuploidy STR-XY
10
4453758
TrueScience™
Aneuploidy STR-21
10
4453759
TrueScience™
Aneuploidy STR-18
10
4453760
TrueScience™
Aneuploidy STR-13
10
Tarjeta de referencia rápida de los Applied Biosystems® TrueScience™ Aneuploidy STR Kits
Obtenga asistencia técnica
Para acceder a los servicios más recientes y obtener información acerca de la asistencia técnica, vaya a www.appliedbiosystems.com
y, a continuación, haga clic en el vínculo Support, o póngase en contacto con su representante local de Applied Biosystems.
Procedimiento
1
Antes de empezar:
procedimientos a
realizar una sola vez
2
Antes de cada ciclo
Antes de utilizar los TrueScience™ Aneuploidy Kits, configure el analizador genético para el
análisis de fragmentos siguiendo el protocolo de su laboratorio.
a. Recoja las muestras.
Utilice muestras de las vellosidades coriónicas (CV) o del líquido amniótico (AF).
b. Extraiga el ADN.
Applied Biosystems le recomienda la realización del análisis de aneuploidía con una
alícuota de la suspensión celular que contenga células suficientes para la extracción
de entre 1,25 y 10 ng de ADN por prueba.
3
Amplifique el ADN
a. Descongele la mezcla de reacción y centrifúguela a 12 000✕g durante 10 segundos.
b. Combine 2,5 μL de ADN (controles neg.: 2,5 µL de agua) + 10 µL de la mezcla de reacción.
c. Centrifugue brevemente.
d. Ajuste el procesador térmico cíclico para: 15:00 a 95 °C, 26 ciclos ✕ [00:30 a 95 °C, 1:30 a
59 °C, 01:30 a 72 °C], 30:00 a 72 °C y mantener a 4 °C.
e. Realice la PCR.
4
Realice la
electroforesis capilar
Configure y lleve a cabo un análisis de fragmentos en su analizador genético siguiendo el
protocolo de su laboratorio.
5
Analice e interprete los
datos
Realice un análisis completo del estado del número de copias de cromosomas comparando las
proporciones de las áreas de los picos. Evalúe las proporciones de los picos A1/A2, en las que
A1 es el área del pico del fragmento más corto y A2 es el área del pico del fragmento más largo.
La proporción resultante es diagnóstica del número de copias del locus.
Applied Biosystems recomienda que cada laboratorio desarrolle sus propios procedimientos
y criterios de interpretación e informe. La Sociedad de Genética Molecular Clínica del Reino
Unido y la Asociación de Citogenetistas Clínicos han publicado unas directrices sobre las
prácticas correctas para QF‐PCR, que se pueden consultar en www.cmgs.org.uk.
Introducción
El método utilizado por los TrueScience™ Aneuploidy Kits se basa en la técnica de fluorescencia cuantitativa-reacción en cadena de
la polimerasa (QF-PCR). Mediante la amplificación por PCR, los cebadores marcados con colorantes fluorescentes se dirigen contra
regiones altamente polimórficas de secuencias de ADN denominadas repeticiones cortas en tándem (STR) que se encuentran en
los cromosomas de interés. Cada marcador STR objetivo es específico del cromosoma en el que se encuentra, por lo que el número
de copias del marcador STR puede ser diagnóstico del número de copias del cromosoma. Se han seleccionado marcadores STR
informativos que presentan una alta heterogeneidad, de manera que se puede determinar fácilmente el número de copias.
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Tarjeta de referencia rápida de los Applied Biosystems® TrueScience™ Aneuploidy STR Kits
No debe usarse en los EE. UU.
No está aprobado por la SFDA en China. Sólo debe destinarse a fines de investigación en China.
Exención de responsabilidades
Los resultados obtenidos con estos u otros kits diagnósticos se deben utilizar e interpretar exclusivamente en el contexto del cuadro clínico general. Applied
Biosystems no puede aceptar ninguna responsabilidad por las decisiones clínicas adoptadas.
Applied Biosystems no garantiza que esta guía represente un resumen completo de todos los resultados posibles al utilizar los Applied Biosystems®
TrueScience™ Aneuploidy STR Kits. Esta guía está concebida para uso exclusivo a efectos orientativos. No debe usarse en cualquier interpretación clínica de
los resultados del ensayo. Los laboratorios deben interpretar los resultados del ensayo de conformidad con sus propios procedimientos desarrollados a nivel
local. Las directrices sobre las prácticas correctas para QF‐PCR de la ACC/CMGS plantean recomendaciones en lo referente a la interpretación de los
resultados obtenidos.
Esta prueba está diseñada para detectar aneuploidías de los cromosomas sexuales y trisomías cromosómicas específicas, según se detalla en las
instrucciones de uso. Es posible que la prueba no detecte los reordenamientos estructurales que afecten a los cromosomas analizados y no detectará
anomalías en cualesquiera otros cromosomas. Es posible que la prueba no detecte el mosaicismo de los cromosomas analizados. El resultado de una prueba
de aneuploidía sólo puede aplicarse directamente al tejido analizado y puede no ser representativo del cariotipo fetal. La contaminación con células maternas
(MCC) y el mosaicismo confinado a la placenta (CPM) pueden dar lugar a discrepancias entre los resultados de Aneuploidy STR y los resultados del cariotipo.
Las heterocigosidades de los marcadores utilizados en este kit se han calculado a partir de un conjunto aleatorio de muestras enviadas para análisis de
rutina procedentes de una población predominantemente caucásica del Norte de Europa. Todos los cálculos basados en estas heterocigosidades se limitan
estrictamente a la población de la cual se tomaron las muestras. Se puede llevar a cabo un pequeño estudio con muestras de ámbito local como parte de
un estudio de validación para establecer las heterocigosidades en la población a analizar. No se espera que la variación de la población modifique
significativamente la capacidad informativa general del ensayo.
Símbolos utilizados en las etiquetas y los envases:
FABRICANTE
NÚMERO DE PRUEBAS
CONSULTE LAS INSTRUCCIONES DE USO
CONSÉRVESE A LA TEMPERATURA MOSTRADA
USAR ANTES DE LA FECHA MOSTRADA
CÓDIGO DE CATÁLOGO
LOTE O NÚMERO DE LOTE
Fabricado por:
Applied Biosystems Ltd
7 Kingsland Grange
Woolston, Warrington, Cheshire, UK WA1 4SR
TrueScience™ Aneuploidy Kits are an Elucigene QST*R product manufactured by Gen-Probe Life Sciences Ltd. in Abingdon, Oxon, UK within quality systems
accredited to ISO9001:2008 and ISO13485:2003
The trademarks mentioned herein are the property of Life Technologies Corporation or their respective owners. ELUCIGENE and QST*R are trademarks of
Gen-Probe Life Sciences Ltd.
EL TRUESCIENCE™ ANEUPLOIDY KIT ESTÁ CONCEBIDO PARA USO PROFESIONAL EN PRUEBAS DE DIAGNÓSTICO IN VITRO. ESTE
PRODUCTO NO OTORGA UNA LICENCIA PARA REALIZAR PCR BAJO PATENTES PROPIEDAD DE TERCEROS, INCLUIDOS
HOFFMAN-LA ROCHE (HOFFMANN-LA ROCHE LTD, DIAGNOSTICS, CH-4070 BASILEA, SUIZA) Y ROCHE MOLECULAR SYSTEMS,
INC (ROCHE MOLECULAR SYSTEMS, INC., 1145 ATLANTIC AVENUE, ALAMEDA, CALIFORNIA 94501)
El cliente es responsable de la validación de los ensayos y del cumplimiento de los requisitos de la reglamentación relacionados con el procedimiento y uso
del instrumento.
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Part Number 4457792 Rev. A 05/2010
Headquarters
5791 Van Allen Way | Carlsbad, CA 92008 USA
Phone 760.603.7200
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