ANÁLISIS INSTRUMENTAL II PREPARACIÓN DE MUESTRAS

Preparación de muestras para análisis cromatográfico
ANÁLISIS INSTRUMENTAL II
PREPARACIÓN DE MUESTRAS PARA ANÁLISIS CROMATOGRÁFICO
Estudiantes:
JUAN FELIPE SALINAS VILLADA – C.C 1.088.310.555
ALBEIRO FLOREZ ARENAS – C.C 1.112.777.407
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MÉTODOS DE PREPARACIÓN:
NOTA: Se necesita preparar la muestra antes de su introducción en el sistema,
mediante fraccionamiento, extracción o pre-separación.
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Extracción sólido-líquido.
Extracción liquido-liquido.
Filtración.
Extracción asistida por microondas (MAE, Microwave asisted extraction).
Extracción acelerada con disolventes (ASE, Accelerated solvent extraction).
Micro-extracción en fase sólida (SPME, Solid phase, Micro-extraction).
Extracción en fase sólida (SPE, Solid phase extraction).
DESCRIPCIÓN GENERAL DEL MÉTODO:
1. Extracción sólido-líquido: La extracción S/L es una operación básica o unitaria mediante la
cual se separan uno o varios constituyentes solubles contenidos en un sólido inerte
mediante la utilización de un disolvente adecuado. En un proceso de extracción S/L las
operaciones implicadas son:
 Cambio de fase del soluto. Esta etapa se considera prácticamente instantánea.
 Difusión del soluto a través del disolvente contenido en los poros del sólido inerte.
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Análisis Instrumental de Alimentos - Diplomatura de Nutrición Humana y Dietética. Asignatura de Análisis Instrumental de Alimentos.
Universidad autónoma de Madrid. [Recurso Online]. Ref. http://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/alimento/TemaJS-AISA.pdf
Preparación de muestras para análisis cromatográfico

Transferencia del soluto desde las inmediaciones de la interfase S/L hasta el seno de la
masa principal de disolvente.
2. Extracción líquido-líquido: Partición de los componentes de una mezcla entre dos líquidos
inmiscibles de diferente densidad.
3. Filtración: Se denomina filtración al proceso de separación de partículas sólidas de un
líquido utilizando un material poroso llamado filtro. La técnica consiste en verter la mezcla
sólido-líquido que se quiere tratar sobre un filtro que permita el paso del líquido pero que
retenga las partículas sólidas.
4. Extracción asistida por microondas (MAE, Microwave asisted extraction): Se extrae la
muestra aplicando energía de microondas en un disolvente adecuado.
Energía de microondas:
 Calienta selectivamente unas especies químicas frente a otras
 Produce extracciones rápidas y con cierta selectividad.
El calentamiento producido depende de la naturaleza química de la matriz y del
disolvente.
Cuanto mayor es la constante dieléctrica, mayor es la absorción de energía.
Procedimiento habitual:
Cuando el disolvente absorbe energía microondas:
 La muestra se coloca en un recipiente cerrado.
 Se calienta a temperaturas mayores que su punto de ebullición durante un tiempo
muy corto (aumenta la presión).
 Después se enfría y se despresuriza.
 Se separa o filtra el extracto.
5. Extracción acelerada con disolventes (ASE, Accelerated solvent extraction):
 Nueva técnica de extracción.
 Disolventes habituales.
 Presiones y temperaturas elevadas.
 Extracciones rápidas y efectivas de muestras sólidas.
Principios de la Técnica
 Temperaturas: 30 - 200 ºC.
 Presiones: 100 - 140 atm.
 Disolventes: orgánicos, agua, mezclas, etc.
 Muestras: sólidas.
Procedimiento: La muestra sólida se coloca en un recipiente que se sella. Se llena
con disolvente y se calienta a temperatura mayorque el punto de ebullición del
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disolvente, provocando un gran aumento de la presión en la celda. Durante el
tiempo de extracción parte del líquido es liberado y recogido en un vial. Al final de
la extracción, el extracto se expulsa de la celda con nitrógeno y se transfiere
automáticamente a un vial.
6. Micro-extracción en fase sólida (SPME, Solid phase, Micro-extraction): SPME es una
nueva técnica de extracción para compuestos orgánicos, que se basa en la adsorción de
los analitos de la matriz (aire, agua, muestras líquidas, etc.) por una fase sólida
inmovilizada sobre una fibra de sílice fundida. Una vez alcanzado el equilibrio, los
compuestos adsorbidos se desorben térmicamente en el inyector de un cromatógrafo de
gases o se redisuelven en un disolvente orgánico para analizarlos por HPLC.
7. Extracción en fase sólida (SPE, Solid phase extraction): SPE es una técnica de extracción
que se basa en la retención sobre un adsorbente sólido de los compuestos deseados
disueltos en una muestra líquida. La adición de un eluyente permite eliminar los
componentes de la matriz que interfieren, para después eluir y concentrar los analitos de
interés. La extracción en fase sólida sustituye a la extracción líquido-líquido clásica.
Ejemplos de Aplicaciones:
• Eliminación de pigmentos de vegetales y hortalizas.
• Retención de antocianinas y otras interferencias en análisis de pesticidas en vinos.
• Vitaminas en zumos.
• Residuos de antibióticos en leches.
Ventajas y desventajas de SPE
 Es una técnica muy sencilla y rápida.
 Existen numerosos adsorbentes disponibles en el mercado para SPE.
 Se puede acoplar a otras técnicas de separación.
 Emplea poco o ningún disolvente.
 SPE es muy efectiva para extraer compuestos polares o apolares de muestras
líquidas.
 Se puede automatizar.
 Está limitada a muestras líquidas.