Microscopía y Técnica Histológica

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO
Atlas Digital del Departamento de Biología Celular y Tisular de la Facultad de Medicina
El primer paso de toda técnica histológica es la obtención de la muestra. Aquí observamos un segmento de
intestino, quede claro que no procesaremos toda la muestra. Deberemos seleccionar un fragmento
representativo, que en la imagen se aprecia en el extremo inferior derecho.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Las muestras representativas seleccionadas se ponen en las cápsulas de inclusión. Estos dispositivos con
numerosos huecos permiten la entrada de las soluciones de procesamiento
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Este es el procesador automático de tejidos. Aquí se pueden quedar las muestras ya encapsuladas de un
día para otro, con lo que se ahorra mucho trabajo
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Aquí se observa el momento en que el
procesador automático de tejidos levanta
la canastilla con cápsulas en las que se
encuentran las muestras para
procesamiento histológico.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Este acercamiento nos muestra el detalle de la canastilla y ahora podemos distinguir claramente las
numerosas cápsulas de inclusión que contiene
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Esta imagen muestra el “centro incluidor de tejidos”.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
El personal técnico presiona suavemente, con lo que se libera la parafina líquida
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Estos son los bloques de parafina. Note que la sombra del tejido se aprecia a simple vista.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
El microtomo es el dispositivo que permite fijar el bloque y obtener secciones cuyo espesor se mide en
milésimas de milímetro
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Aquí se aprecia el bloque de parafina montado y sobre la cuchilla, la tira de cortes de parafina
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Con el debido cuidado, el técnico separa la tira de cortes de parafina de la superficie de la cuchilla
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Se le agrega alcohol a la tira de cortes que se encuentra sobre el portaobjetos, con el fin de que se
extiendan las secciones.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Los cortes se extienden aún más en la superficie del baño de flotación.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Los cortes extendidos, son capturados por medio de un portaobjetos de la superficie del baño de flotación
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Esta es una cestilla portamuestras. Observe que con este dispositivo el técnico puede manejar hasta 50
laminillas.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Alcohol-ácido
Hematoxilina
Alcoholes en grados
decrecientes
Eosina
Alcoholes en grados
Agua amoniacal
Aquí observamos la batería de tinciones.
crecientes
Aquí observamos la batería de tinciones.
Xilol
Xilol
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
El técnico va pasando la canastilla con cortes en blanco a lo largo de la batería.
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Nuestros cortes pasan a la famosísima hematoxilina
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Aquí vemos dos canastillas con cortes ya teñidos con hematoxilina y eosina. Se encuentran en recipientes
con xilol, esperando el último paso: el montaje
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
El técnico agrega una gota de resina y posteriormente aplica la lámina cubreobjetos
TÉCNICAS HISTOLÓGICAS. EL LABORATORIO DE HISTOLOGÍA
Este es el criostato. Se trata de un microtomo rotativo común que se encuentra en el interior de una cámara
fría. Con este instrumento se realizan los cortes congelados para estudios transoperatorios
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MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ILUMINACIÓN COMÚN
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Un microscopio es un instrumento que permite observar estructuras pequeñas. Aquí vemos el aspecto de
una pulga y notamos detalles de las patas. Observe que las zonas más gruesas (cuerpo y dorso) se ven
obscuras; esto se debe a que para formar una imagen, la luz debe atravesar el cuerpo
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ILUMINACIÓN COMÚN
Este es un corte de lengua teñido con tricrómico de Gomori. Para observar contraste de estructuras, con el
microscopio fotónico de iluminación común usamos generalmente colorantes
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. ESTEREOSCÓPICO
El microscopio estereoscópico, o de disección, nos permite observar el detalle de tejidos en fresco, como
esta superficie interna intestinal. Las pequeñas salientes se llaman vellosidades.
Aquí observamos a mayor aumento el detalle de las vellosidades intestinales con el microscopio
estereoscópico.
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO.
Estas son células de descamación de la mucosa oral. Cuesta trabajo identificar el detalle del citoplasma y de
los núcleos. Compare con las siguientes imágenes.
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES
Aquí observamos las mismas células de descamación de la mucosa oral de la imagen anterior. Compárelas.
Note que ahora identificamos claramente los límites celulares, detalles del citoplasma y del núcleo. Este
sistema de contraste óptico se conoce como contraste de fases. Observe que las imágenes obtenidas con
este sistema se caracterizan por un halo brillante.
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY
Ahora vemos células de descamación de mucosa oral y la imagen nos permite apreciar claramente contraste
de núcleo y citoplasma. Note que la imagen recuerda el aspecto de un relieve. Este sistema de contraste
óptico se conoce como interferencia diferencial según Nomarski.
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES
Frotis sanguíneo en fresco observado con contraste de fases. No olvide el halo o brillo claro. Estos son
eritrocitos.
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY
RETICULOCITOS
Frotis sanguíneo en fresco, observado con el sistema de interferencia diferencial según Nomarski. Observe
el aspecto de relieve y note que algunos eritrocitos están muy plegados. Se trata de reticulocitos que
normalmente se mueven en el preparado en fresco.
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO NOMARSKY
Eosinofilo
Neutrófilo
Frotis sanguíneo
observado con interferencia diferencial según Nomarski. Se identifican eritrocitos y dos leucocitos. Observe
que uno tiene gránulos gruesos y núcleo bilobulado (eosinófilo), mientras que otro tiene gránulos finos
(neutrófilo).
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO CONTRASTE DE FASES
Estos son macrófagos observados con el sistema de contraste de fases. El halo claro brillante es evidente
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. CAMPO OBSCURO
El método más antiguo y fácil de realizar es el llamado sistema de campo obscuro. Estas son células de
descamación de mucosa oral. Observe que sus componentes se ven blancos, mientras que el fondo es
completamente negro.
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. CAMPO OBSCURO
El método más antiguo y fácil de realizar es el llamado sistema de campo obscuro. Estas son células de
descamación de mucosa oral. Observe que sus componentes se ven blancos, mientras que el fondo es
completamente negro
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUS POLARIZADA
Esta imagen es parecida al campo oscuro en cuanto que el fondo se ve negro. Pero note que las zonas
brillantes pueden tomar varios colores, no sólo el blanco. Este sistema se conoce como luz polarizada. Aquí
observamos un fragmento de hueso
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUZ POLARIZADA
Este es otro hueso en el que se identifican las osteonas. Note el intenso brillo en diversos colores. En
realidad en esta imagen tomada con luz polarizada, el Dr. Joaquín Carrillo agregó colores de difracción
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. LUZ POLARIZADA
Este es un corte de músculo esquelético, previamente teñido y observado con luz polarizada. Observe el
intenso brillo de las bandas transversales (anisótropas).
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. FLUORESCENCIA
El microscopio de fluorescencia equipado con un sistema óptico especial es indispensable para la
observación de las técnicas de inmunofluorescencia
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF
Un sistema de interferencia diferencial que en su tiempo fue muy empleado, es el de Jamin-Lebedeff. En
esta y las siguientes imágenes vemos las mismas células de descamación de mucosa oral con colores
brillantes que van cambiando.
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF
Células de descamación de mucosa oral observadas con interferencia diferencial según Jamin-Lebedeff
MICROSCOPIO. MICROSCOPIO FOTÓNICO. JAMIN-LEBEDEFF
Células de descamación de mucosa oral observadas con interferencia diferencial según Jamin-Lebedeff