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SINDROME DE SJOGREN
Bioq Marcela Demarchi
Hospital Córdoba
CRITERIOS DIAGNÓSTICOS DEL SS
Criterios diagnósticos
ANTICUERPOS ANTI RO/SS-A
Y ANTI LA/SS-B
Antígenos Nucleares Extractables
ENA
RO
LA
Sm
RNP
Scl-70
Jo-1
ANTICUERPOS ANTI RO/SS-A
Y ANTI LA/SS-B
Antígenos Nucleares Extractables
ENA
RO
LA
SS
LES
LES sc
LES N
SSc
PM/DM
EMTC
Dos Autoantígenos para el
autoanticuerpo Ro/SSA
Ro
Proteína de 60 KD
Complejo RNP-hY RNA
Ro 52
cromosoma 11
Ro 60
cromosoma 19
Localizados en diferentes
compartimentos celulares
Presentan diferentes
asociaciones clínicas
Frecuencia de AutoAc anti Ro 52 en
enfermedades autoinmunes
Rol patogénico del complejo Ro/SSA
Organización estructural Ro 52 (TRIM21)
FUNCIONES:
Ro 52 actividad ligasa E3 y actúa en
procesos de ubiquitinación
Es una proteína inducible por IFN y
reguladora de la respuesta de IFN
Ro 60 actúa como control de calidad de
RNA mal formados a los que se une
para su degradación
Journal of Autoimmunity 39 (2012) 77e82
Anticuerpos anti Ro52/TRIM-21 en
pacientes con Síndrome de Sjogren
Demarchi M, Busamia B, Gobbi C, Alba P, Albiero E
Servicio de Bioquímica, Unidad de Reumatología
Hospital Córdoba
OBJETIVOS
 Determinar la presencia de anticuerpos anti Ro 52 en
pacientes con SS primario
 Determinar la asociación ac anti Ro 52 con otros
autoanticuerpos
 Determinar la asociación de ac anti Ro 52 con las
manifestaciones clínicas
MATERIALES Y MÉTODOS
 Pacientes en estudio: pacientes que cumplen criterios
diagnósticos de SS (Criterios Europeo-Americano 2002)
 Grupo control: pacientes con LES, ES y otras patologías
donde la presencia de ac anti Ro 52 es relevante
 Método: ELISA (SS A/Ro y SS B/La) e Inmunoblotting
 Se seleccionaron 52 muestras de pacientes que presentaron
ANA positivo por IFI y Ac anti Ro positivos por la técnica de
ELISA las que fueron reanalizadas por la técnica de
inmunoblotting (IB) que permite discriminar los Ac anti:
Ro60, Ro52/TRIM-21, La, Sm, RNP, Scl 70, CENP-B, Jo-1
y Ribosomal P.
ALGORITMO DE DETECCIÓN DE
ANTICUERPOS ANTI RO Y ANTI LA
ANA
IFI
SUSTRATO:
CELULAS HEP-2 Y HEP-2000
HEP-2
HEP-2000
TÉCNICA SCREENING
¿COMO DETERMINO LA ESPECIFICIDAD
ANTIGÉNICA?
 IDRD EN GELES (OUTCHERLONY)
 ELISA
 INMUNOBLOTTING
OBTENCIÓN DE ANTÍGENO
•EXTRACTO DE TEJIDO
•EXTRACTO DE CULTIVO CELULAR
•PROTEÍNAS RECOMBINANTES: SISTEMA DE PROCARIOTES
RECONOCIMIENTO DEL ANTÍGENO
•Ro 52: EPITOPES LINEALES
•Ro 60: EPITOPES CONFORMACIONALES
INMUNOBLOTTING
SS-A 52, recombinant
SS-A 60, native
SS-B, recombinat
RNP, native
Sm, native
Scl-70, native
histidyl-tRNA synthetase (Jo-1),
native
centromere B, recombinant
Rib-P, native
RESULTADOS
Frecuencia relativa de patologías con Ac anti Ro
La asociación de Ac anti Ro52/TRIM21 con otros anticuerpos fue:
en SSp 94% con Ro60 y 75% La;
en LES 100% con Ro60, 53% con La, 33% con Sm, 27% con RNP y 20% con
Rib P,
en ES el 100% con Ro60
y en PI el 86% con Ro60.
CONCLUSIONES
•
El 68% de las muestras reanalizadas fueron positivas
para Ac anti Ro 52/TRIM21
• Ac Ro 52/TRIM21 se asociaron principalmente a SSp
y LES,
• Todas las muestras pertenecientes a SSp presentaron
Ac anti Ro52/TRIM21,
• Los principales Ac coexistentes con Ac anti
Ro52/TRIM21 fueron Ac anti Ro60 y anti La
MUCHAS GRACIAS