REHABILITACIÓN POR BIORREMEDIACIÓN DE ÁREAS DESTINADAS A LA DISPOSICIÓN DE AGUAS DE PRODUCCIÓN PROVENIENTES DE LA ACTIVIDAD PETROLERA. Pozzo Ardizzi M. G.*; Manacorda A.M.*; Altamirano G.*; Barbieri L.*; Sanchez A.*; Cuadros D.*; Sanchez N.*; Diaz G.*. Arias C.** ; Fredes M.** ; Molina M.**. *Unidad Académica en Ciencias para la Salud. Universidad Nacional del Comahue. Buenos Aires 1400. (8300) Neuquén. Argentina. fax: 099-490375. E-mail: [email protected] ** Empresa PEREZ COMPANC S.A. RESUMEN Una de las prácticas de disposición del agua de producción en yacimientos petrolíferos ha sido el vertido de las mismas en terrenos bajos naturales, con subsuelos de baja permeabilidad, que facilitaban su eliminación por infiltración-evaporación. Este método se utilizó en el Yacimiento 25 de Mayo - Medanito S.E. hasta mediados de 1995. Este yacimiento pertenece a la empresa Pérez Companc S.A. y esta localizado en la región petrolera Catriel-25 de Mayo de las provincias de Río Negro y La Pampa. En la actualidad, el agua de producción es totalmente inyectada en profundidad, práctica considerada como la más adecuada e inocua en el marco de minimizar el compromiso ambiental. Por solicitud de la Empresa Pérez Companc, se elaboró un plan de trabajo cuyo objetivo fue realizar en forma conjunta la rehabilitación de los suelos contaminados , localizados en un sector del yacimiento que ocupaba una superficie aproximada de 8 Has. A tal efecto se formalizó un acuerdo de trabajo entre la Universidad del Comahue y la Empresa petrolera y se realizaron las tareas que se reportan en esta comunicación. Participan en este trabajo integrantes del Departamento de Estudios Ambientales y Coordinación Ambiental, de la Empresa y los integrantes del grupo de investigación de la Universidad. Las áreas de disposición en superficie, utilizadas en épocas anteriores, se veían afectadas por acumulación de sales y en sectores localizados se observaba disposición superficial de hidrocarburos. La remediación de las áreas comprometidas se logró adaptando técnicas de manejo mecánico de los suelos afectados, de manera que resultaran practicas apropiadas para incentivar la capacidad natural de autodepuración que poseen los suelos por la actividad oxidativa enzimática de su microflora nativa, en ciertos sectores del predio se consideró necesaria la bioaumentación para acelerar los procesos. Se fijó como objetivo principal diagnosticar el grado de deterioro ambiental producido y desarrollar una metodología para la rehabilitación de áreas afectadas por la disposición de aguas de producción, en el marco de una tecnología ambientalmente sustentable. • Como objetivos parciales se propusieron las siguientes acciones: Caracterizar el estado inicial y grado de afectación de los ambientes. Rehabilitar los suelos con un adecuado manejo mecánico. Inocular con microorganismos hidrocarburolíticos nativos, los sitios de persistencia de hidrocarburos. Monitorear en forma temporal y espacial la evolución de los contaminantes durante el tratamiento. Propiciar el repoblamiento del suelo con vegetación autóctona o forestar. Luego de un año de iniciados los estudios y tras 12 meses de tratamiento se ha logrado biorremediar el sector (8 Ha) que inicialmente reportaba una concentración de hidrocarburos promedio de 19,56% (con 54,59% en sitios de máxima acumulación). En la actualidad esos suelos contienen valores próximos a 2% de hidrocarburos remanentes (valores promedio en todo el predio). La población microbiana inicial de los suelos fue 1,4 105 células/g de suelo seco, incluyendo una población de organismos hidrocarburolíticos de 3,2 102 células/g suelo seco. Transcurridos 10 meses de tratamiento estas poblaciones se incrementaron a 2,9 107 células/g de suelo seco y 3,5 104 células/g suelo seco respectivamente. (valores promedio de 40 muestras superficiales extraídas en el predio). La rehabilitación de suelos contaminados con petróleo, aplicando el tratamiento de biorremediación por estimulación de la actividad hidrocarburolítica de los microorganismos nativos, ha demostrado ser un método ecológicamente sustentable que minimiza el compromiso ambiental que originan otros métodos de restauración. Palabras Claves: contaminación* Microorganismos Hidrocarburolíticos* petróleo* biorremediación* INTRODUCCIÓN La bibliografía científica y las revistas técnicas de divulgación reportan trabajos donde la actividad microbiológica degradadora de petróleo, es el agente responsable de biorremediación de las áreas contaminadas por derrames o volcado de efluentes , sean estas suelos, ríos o mares. Estudios pioneros en el tema son los comunicados por C.B.Kincannon (1972), quien describió en detalle los resultados de una experiencia realizada en suelos de la refinería de petróleo de la Compañía Shell localizada en Deer Park, Texas. En esta, como en otras experiencias posteriores , se demostró que la causa de la "desaparición" del petróleo se debía a un proceso biológico oxidativo y asimilatorio realizado por los microorganismos con actividad hidrocarburolitica (Cook y Westlake, 1973 : Parkinson, 1974). Un biotratamiento sustentable de los suelos contaminados, constituye una tecnología que básicamente incorpora el residuo sólido al suelo y mediante un manejo agronómico del mismo activa la biodegradación con la microflora nativa del suelo, permitiendo, en plazos determinados, la recuperación del suelo utilizado. Este proceso como la mayoría de los ciclos biogeoquímicos, es lento, sin embargo esta técnica puede ser substancialmente mejorada con el adecuado manejo de los suelos a los que se les agregan inóculos bacterianos, que contienen microorganismos hidrocarburolíticos, capaces de activar la velocidad de descomposición de los residuos incorporados acelerando el proceso de rehabilitación de los suelos involucrados. La caracterización de los productos liberados durante el tratamiento debe realizarse mediante un seguimiento temporal y espacial químico-analítico de los productos residuales que la biodegradación va liberando en las diferentes etapas secuenciales del proceso, acompasando de una evaluación de la dinámica poblacional de las poblaciones microbianas involucradas. METODOLOGÍA Y DETALLE DE ACTIVIDADES 1.1 RELEVAMIENTO SOMERO PRETRATAMIENTO DEL SITIO DE TRABAJO Se realizó una caracterización edafológica somera del terreno, con fines de diagnóstico respecto al grado de contaminación ocurrido en el suelo, determinando analíticamente concentración de hidrocarburos presentes en el perfil y distribución en el área afectada, características texturales , estabilidad estructural, velocidad de percolación, capacidad de retención de agua, pH, conductividad, humedad, presencia de metales alcalinos y metales pesados. Operativamente se tomaron muestras para caracterización preliminar de suelos (capa arable) y en sectores predeterminados se procedió a la toma de muestras en calicatas para analizar el grado de contaminación en el perfil del suelo. Paralelamente se realizaron determinaciones microbiológicas para evaluar numéricamente las poblaciones de microorganismos heterótrofos totales y microorganismos con actividad hidrocarburolítica. Las aguas subterráneas ( acuífero freático) se analizaron a partir de muestras extraídas de freatímetros existentes vecinos a los suelos en tratamiento. 1.2 PLAN DE MANEJO Y TRATAMIENTO DE LOS SUELOS Con los resultados de esta caracterización se diseñó un plan de manejo del suelo para su recuperación. A priori y por las observaciones y resultados preliminares, se detectaron cuatro sectores que presentaban grados relativamente homogéneos de contaminación, con algunos sitios de concentración del contaminante. En base a esta caracterización preliminar se estimó que el tratamiento de recuperación podría realizarse incentivando el crecimiento, desarrollo y multiplicación de las poblaciones microbianas autóctonas responsables de la capacidad de autodepuración natural del suelo. Se plantearon estrategias de manejo del suelo, para cada sector, que asegurasen aireación y humedad suficientes para estimular la actividad oxidativa enzimática de la microflora autóctona de esos suelos. Una vez determinadas las prácticas y el manejo del suelo, el personal de la Universidad realizó la supervisión del trabajo y el monitoreo analítico para seguir la evolución del sistema. La empresa realizó las tareas de campo y mecanización con maquinaria contratada , de acuerdo al plan de trabajo diseñado. 1.3 PLAN DE MONITOREO Y EVALUACIÓN DEL TRATAMIENTO Se estimó que el monitoreo debería realizarse bimensualmente y comprendería la toma de muestras de suelo en la capa arable y semestralmente en aguas subterráneas y en suelos en profundidad, para seguir la evolución de los contaminantes en el perfil. Se realizaron las siguientes determinaciones fisicoquímicos y bacteriológicas: Contenido de hidrocarburos (%) (extracción por Soxhlet) pH y Conductividad eléctrica (potenciometría) Humedad (%) (gravimetría) Metales alcalinos (espectrofotometría de Absorción atómica) Metales Pesados (espectrofotometría de Absorción atómica) Microflora heterótrofa total (recuento por NMP) Microflora hidrocarburolítica (recuento por NMP). 1.4 RESTAURACIÓN DE LA COBERTURA VEGETAL AUTÓCTONA Una vez concluida la tarea de rehabilitación de los suelos, será necesario restaurar la cobertura vegetal autóctona de los suelos afectados para evitar el posible deterioro posterior por erosión hídrica y eólica. para ello se ha previsto la participación de el grupo de docentes de la Cátedra de Botánica, que está desarrollando técnicas de multiplicación in vitro de especies arbustivas nativas. RESULTADOS Y DISCUSIÓN Se realizó un relevamiento somero del terreno a biorremediar cuya superficie total es de 8 Has. Sobre un total de doce puntos de muestreo superficial (0 a 15 cm), se detectó un contenido de Hidrocarburos promedio de 19,56% ( con 54,59% en sitios de máxima acumulación). En base a los resultados de las observaciones in situ y a los datos analíticos obtenidos se realizó una sectorización del predio como se muestra en el plano siguiente : Sitios de muestreo Estos sitios se prefijaron para seguir la evolución del tratamiento de biorremediación en el tiempo. Los resultados obtenidos se presentan a continuación : Dinámica del contenido de Hidrocarburos y Humedad del suelo en el horizonte superficial durante el tratamiento de biorremediación Yacimiento "MEDANITO" Sitio 1 % Hidrocarburos (g/100 suelo seco) 14 Inicio del biotratamiento 15 12 10 8 10 6 4 5 % Humedad (g/100 suelo seco) 16 20 2 0 2/10/96 4/11/96 19/02/97 2/05/97 6/06/97 11/07/97 fechas de muestreo 5/09/97 20/11/97 0 13/03/98 % Hidrocarburos % Humedad El sitio 1 es representativo de los suelos de la zona verde (ver plano). En el diagnóstico pretratamiento se observó en él, un suelo con estructura heterogénea en los primeros 8 cm, presentando agregados compactados y duros (terrones) de diámetros variables (entre 2 y 10 cm). En la capa subsuperficial el suelo presenta textura moderadamente suelta, sin agregados. En ambas capas aparecía petróleo mezclado con suelo, en forma de moteado. La textura predominante en este sector es franco arcillo arenosa. La concentración inicial de hidrocarburos fue de 5,8 % (con máximos de 13,50%) y con un contenido de humedad promedio de 3,2 %. Por las características descriptas, este suelo fue considerado de mediana a rápida recuperación con biotratamiento. Antes de iniciar el movimiento de suelos se realizaron otros dos muestreos en el sitio, los contenidos de hidrocarburos se mantuvieron constantes y la humedad presentó la variabilidad estacional esperada, según se observa en el gráfico anterior. El tratamiento mecánico de los suelos para el sector verde consistió en una primer etapa donde se realizó una pasada de arado de rejas (a 90º) y luego una pasada de rastra de disco en igual sentido para finalizar con dos pasadas de arado de reja en sentido cruzado; la acción mecánica continuó en los meses sucesivos trabajando el suelo, primero con rastra de disco y seguidamente con arado de disco (2 pasadas cruzadas en superficie), con una frecuencia aproximadamente mensual. El primer muestreo realizado 5 días después del primer tratamiento mecánico indicó que el contenido de hidrocarburos disminuyó a 3,5 % (valor promedio). Es evidente el efecto de la homogeinización producida por acción mecánica, pues se observa una efectiva acción de ruptura y disgregación de los terrones y del moteado de petróleo. Los resultados obtenidos en el siguiente muestreo (45 días después de iniciado el tratamiento y luego de la segunda acción mecánica) indicaron una concentración residual de hidrocarburos del 0,2 %. Este resultado fue interpretado con cautela, hasta su confirmación con los muestreos realizados en meses posteriores, donde se verificaron contenidos de Hidrocarburos estables de 0,40% (valor promedio de las últimas tres determinaciones). Las condiciones ambientales (precipitaciones y temperaturas moderadas) sumadas a la efectiva acción desagregante y homogeinizadora del tratamiento mecánico y al crecimiento exponencial observado en la población microbiana hidrocarburolítica detectada en este sitio, permiten inferir que el tratamiento ha estimulado la multiplicación de los microorganismos con actividad biodegradadora. Dinámica de las poblaciones microbianas vs conentración de Hidrocarburos Sitio 1 10000000 1000000 100000 10000 1000 100 10 1 1 % Hidrocarburos 2 3 Heterótrofas totales 4 5 Hidrocarburolíticas La reducción operada en la concentración de hidrocarburos, correspondió al orden del 90%, efecto que estimamos debe responder a la acción mecánica complementada por la actividad biológica intensamente estimulada por la aireación y humedad del suelo. Esto se confirma cuando se analizan comparativamente los parámetros fisicoquìmicos y microbiológicos en los estudios de monitoreo . Dinámica del contenido de Hidrocarburos y Humedad del suelo en el horizonte superficial durante el tratamiento de biorremediación Yacimiento "MEDANITO" Sitio 2 Inicio del biotratamiento 14 12 15 10 8 10 6 4 5 % Humedad (g/100 suelo seco) % Hidrocarburos (g/100 suelo seco) 16 20 2 0 2/10/96 4/11/96 19/02/97 2/05/97 6/06/97 11/07/97 5/09/97 20/11/97 fechas de muestreo 0 13/03/98 % Hidrocarburos % Humedad El sitio 2 ubicado en la zona amarilla (ver plano). Los resultados analíticos obtenidos en el primer muestreo confirmaron las observaciones realizadas en campo. En la capa superficial (0 a 10cm), se observó una costra de barros empetrolados de 3 a 5 cm de espesor y por debajo de ella una capa de suelo compactado. Luego de procesar las muestras (previa homogeinización) se detectó una concentración de hidrocarburos promedio de 19,95% (con máximos de 28,70%), que se mantuvo dentro de esos valores hasta el inicio del tratamiento mecánico, como puede observarse en el gráfico anterior. Este sector mereció un tratamiento inicial diferencial del resto de la parcela, pues se había detectado un piso de compactación a 40-50 cm de profundidad; Se utilizó arado con cincel para “levantar” la capa compactada. Aparecieron en superficie bloques de 20 a 30 cm de diámetro; para reducir su tamaño y disgregarlos, se trabajó con subsolador y luego arado de reja pasado en forma cruzada, posteriormente arado con disco. En las acciones mecánicas siguientes, se trabajó primero con arado de reja y luego con arado de disco. La textura del suelo en este sitio es arcillosa a arcilloso franco en los primeros 40 cm del perfil. La concentración de hidrocarburos, por efecto del manejo mecánico realizado, se redujo a un valor de 13,9 % y transcurridos 45 días de iniciado el tratamiento, el contenido de hidrocarburos registrado fue 10,4 %. Dinámica de las poblaciones microbianas vs concentración de Hidrocarburos Sitio 2 10000000 1000000 100000 10000 1000 100 10 1 1 % Hidrocarburos 2 3 Heterótrofas totales 4 5 Hidrocarburolíticas La disminución observada en el contenido de hidrocarburos en la primer etapa del tratamiento, puede atribuirse principalmente al efecto de dilución logrado por la acción mecánica realizada en profundidad, que “levantó” más suelo que en otros sitios, mezclando un volumen mayor de suelo con el petróleo acumulado en superficie. La acción microbiana en este sector no se manifiesta en las primeras etapas del tratamiento, debido a que la fuerte compactación del suelo ha impedido la difusión de oxígeno limitando la acción oxidativa de los microorganismos hidrocarburolíticos, actividad que se logró estimular a partir de la ruptura del suelo compactado y su disgregación y homogeinización, tal como se verifica con los estudios microbiológicos. Claramente se ha observado un marcado incremento y proliferación de microorganismos biodegradadores de petróleo y una consecuente disminución en el contenido de hidrocarburos en el suelo. Dinámica del contenido de Hidrocarburos y Humedad del suelo en el el horizonte superficial durante el tratamiento de biorremediación Yacimiento "MEDANITO" Sitio 3 14 12 15 10 Inicio del biotratamiento 8 10 6 4 5 % Humedad (g/100g de suelo seco) % Hidrocarburos (g/100g de suelo seco) 16 20 2 0 2/10/96 4/11/96 19/02/97 2/05/97 6/06/97 11/07/97 fechas de muestreo 5/09/97 20/11/97 0 13/03/98 % Hidrocarburos % Humedad Sitio 3. Este sitio pertenece al sector azul (ver plano). En las primeras observaciones realizadas aparecían en superficie terrones con barros empetrolados mezclados con suelo arcilloso, muy compactos, de diámetros heterogéneos; por debajo y hasta los 15 cm de profundidad se encontró suelo suelto mezclado con terrones sin observarse petróleo entre ellos. La concentración de hidrocarburos registrada en los muestreos pretratamiento (4,55% promedio, con máximos de 6,90%), reflejaron la distribución heterogénea del petróleo en el sitio. El tratamiento mecánico realizado en el sector consistió en trabajar el suelo con arado con reja y luego rastra de disco cruzada. El efecto homogeinizador del tratamiento mecánico (igual que en el sector verde) se evidenció en el primer muestreo postratamiento, donde la concentración de hidrocarburos se transformó de 4,55% antes de la primera acción mecánica a 3,95%, para estabilizarse en valores promedio de 0,75% luego del tratamiento, que consistió en arado con rastra de disco en pasadas cruzadas. Dinámica de las poblaciones microbianas vs concentración de Hidrocarburos Sitio 3 10000000 1000000 100000 10000 1000 100 10 1 1 2 % Hidrocarburos 3 4 Heterótrofas totales 5 Hidrocarburolíticas La acción conjunta del tratamiento mecánico y la actividad microbiana estimulada por la aireación y el contenido de humedad se tradujo en una efectiva disminución del contenido de hidrocarburos en el suelo cuya concentración residual se mantuvo en el mismo orden de magnitud en los últimos controles (0,75%, valor promedio). Dinámica del contenido de Hidrocarburos y Humedad del suelo en el perfil del suelo durante el tratamiento de biorremediación Yacimiento "MEDANITO" Sitio 4 16 % Hidrocarburos (g/100 suelo seco) Inicio del biotratamiento Sector sin tratar hasta la fecha 15 14 12 10 8 10 6 4 5 % Humedad (g/100 g suelo seco) 20 2 0 2/10/96 4/11/96 19/02/97 2/05/97 6/06/97 11/07/97 fechas de muestreo 5/09/97 20/11/97 0 13/03/98 % Hidrocarburos % Humedad Sitio 4, ubicado en el sector rojo, no fue tratado mecánicamente desde que se inicio el trabajo en los otros sectores, porque en estos suelos apareció una capa subsuperficial (a 20 o 30 cm) de un material de color gris y aspecto jabonoso, se sospechó una posible saponificación de algún sustrato orgánico con álcalis. Por precaución se decidió analizar primero esta capa, para descartar presencia de metales pesados, sulfuros u otro residuo de posible composición peligrosa. Finalizados los análisis químicos y habiendo descartado la presencia de sustancias peligrosas, se iniciaron las tareas mecánicas. En este sector se detectó el contenido mayor de hidrocarburos en superficie (20.24%, con máximos de 54,23%). El petróleo y el material grisáceo, se observaron dispuestos en forma laminar e intercalados con capas de sales y suelo, extendiéndose en profundidad. Dinámica de las poblaciones microbianas vs concentración de hidrocarburos Sitio 4 10000000 1000000 100000 10000 1000 100 10 1 1 % Hidrocarburos 2 Muestreos 3 Heterótrofas totales 4 5 Hidrocarburolíticas La población microbiana detectada inicialmente en este sector resultó diferente de otros sitios, se han reportado 4,5 10 5 microorganismos heterótrofos totales/g de suelo seco y 2,6 10 3 microorganismos hidrocarburolíticos/g de suelo. En este sector se inició el trabajo mecánico a mediados de julio. Se trató mecánicamente igual que el sector amarillo; en este caso se usó el subsolador para “levantar” a superficie el petróleo que se había detectado en profundidad y luego mezclarlo homogéneamente con el suelo. Se infería que también en este sector deberían realizarse prácticas de inoculación, sin embargo la respuesta de la actividad microbiana observada en los controles postratamientos, junto a la disminución registrada en el contenido de hidrocarburos, nos permiten aventurar una rápida respuesta biodegradadora, sin necesidad de bioaumentar. Para realizar un monitoreo exhaustivo, se realizaron en los sitios de estudio diez calicatas, nueve de ellas en el sector de biotratamiento y una en suelos sin contaminación, usada como testigo, hasta profundidades de 60 a 70 cm. En ellas se determinaron parámetros fisicoquímicos que permitieron seguir la dinámica de los contaminantes en el perfil del suelo. A continuación se detallan, en forma comparativa, los resultados obtenidos en los muestreos pretratamiento, durante el tratamiento y postratamiento . Se seleccionaron y se graficó un perfil representativo por sector. La calicata 1 está ubicada en el sector verde, coincidentemente con el sitio 1 del muestreo superficial. En las muestras extraídas pretratamiento, a diferentes profundidades entre 0 y 70 cm, se midió pH y conductividad eléctrica en extracto de suelo en relación 1:2,5. El pH registra valores levemente ácidos en superficie (6,90) y un moderado incremento en alcalinidad en profundidad. La CE presenta valores altos (1100 103 mmhos/cm) y levemente crecientes hasta los 40 cm, luego decrece. La humedad presenta valores altos (10,58% en superficie) y crecientes en profundidad (hasta 21,23% a 70 cm). En este sitio se ha detectado un contenido de Hidrocarburos de 5,50% en los primeros 8 cm, decreciendo en profundidad para minimizarse a partir de los 40 a 70 cm. Estas características permitieron predecir que sería un sector de rápida recuperación sólo con tratamiento mecánico y sin bioaumentación. Profundidad (cm) Dinámica de la concentración porcentual de Hidrocarburos en el perfil del suelo Calicata 1 Sitio 1 0-15 0,66 0,95 15-25 1,5 0,3 1,22 7,39 0,53 0,08 0 25-40 40-50 0 50-70 0 0 0 0,78 0,27 0,22 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Hidrocarburos (g/100g suelo seco) % HC postrat. % HC en trat. % HC pretrat. Comparando los resultados en cada horizonte del perfil, se verifica experimentalmente la rápida biorremediación del sector. Si las conductividades altas se mantienen al finalizar el tratamiento se deberá enmendar el suelo con una enmienda adecuada y recomendar un programa de lavado del suelo para controlar la salinidad, pero a posteriori de la biodegradación de los hidrocarburos presentes. Los metales alcalinos analizados se muestran en el gráfico que continúa : Distribución y evolución de las concentraciones de metales alcalinos en el perfil del suelo Calicata 1 Sitio 1 costra Sr (3) 0a5cm Sr (2) Profundidad (cm) Sr (1) Ba (3) 5a15 Ba (2) Ba (1) Mg (3) 15a25 Mg (2) Mg (1) Ca (3) Ca (2) 25a45 Ca (1) Na (3) Na (2) >45 Na (1) 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 (1) pretratamiento Concentración (2) en tratamiento (mg/100g suelo seco) (3) postratamiento Las concentraciones detectadas en el perfil del suelo, permiten visualizar que de ellos, los valores mas elevados corresponden a Mg, Ca y Na, cuyas concentraciones se mantienen con moderadas variaciones en los horizontes del perfil, a lo largo del tratamiento. Alentadoramente, Estroncio y Bario, reportan valores muy bajos. En las mismas calicatas se realizó el monitoreo de metales pesados en el perfil , en los gráficos siguientes se ilustra su distribución pre y postratamiento. Evolución temporal y espacial de la concentración de metales pesados en el perfil del suelo Calicata 1 Sitio 1 Fe x 102 (3) Fe x 102 (2) Fe x 102 (1) Cd (3) 0a5cm Cd (2) Cd (1) Cr (3) Cr (2) 5a15 Cr (1) Profundidad (cm) Mn x 102 (3) Mn x 102 (2) Mn x 102 (1) Zn (3) 15a25 Zn (2) Zn (1) Cu (3) Cu (2) 25a45 Cu (1) Ni (3) Ni (2) Ni (1) >45 Pb (3) Pb (2) Pb (1) 0 5 10 15 20 25 30 35 Concentracion (mg/100g suelo seco) 40 45 50 (1) pretratamiento (2) en tratamiento (3) postratamiento Del análisis comparativo puede establecerse que no se han detectado concentraciones altas de metales pesados, a excepción de Hierro y Manganeso, con relación a ellos, el hierro especialmente reporta significativos incrementos a consecuencia del tratamiento de biorremediación. La calicata 2 está localizada en el sector rojo, coincidentemente con el sitio 4 del muestreo superficial preliminar. En las muestras extraídas a diferentes profundidades entre 0 y 50 cm se midió pH y conductividad eléctrica en extracto de suelo en relación 1:2,5. El pH registra un valor levemente ácido en superficie (6,97) y presenta un moderado incremento en alcalinidad en profundidad (7,75 a 50 cm). La CE presenta valores moderados y constantes hasta los 50 cm (400 103 mmhos/cm). La humedad presenta valores altos (15,76% en superficie) y relativamente constantes en profundidad (hasta 13,91% a 50 cm). En este sitio se ha detectado una concentración de 15,76% de Hidrocarburos en los primeros 20 cm, valor próximo al detectado en los muestreos superficiales anteriores (aproximadamente 20%), muestra de la heterogeneidad en la distribución. La concentración de hidrocarburos decrece en profundidad para minimizarse a partir de los 35 cm. Dinámica de la concentración de Hidrocarburos en el perfil del suelo Calicata 2 Sitio 4 15,76 0-20 5,99 20-35 Profundidad (cm) 10,65 0 1,56 2,9 0,77 35-40 0 0,17 0,72 40-50 0 0 0 50-70 0 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Hidrocarburos (g/100g suelo seco) % HC postrat. % HC en trat. % HC pretrat. En este sector aparecen las capas de materiales grisáceos intercaladas con suelo y petróleo en disposición laminar. Estas características permitieron predecir que sería un sector de difícil y lenta recuperación, Se indicó posponer el inicio del tratamiento mecánico hasta analizar los componente químicos de las capas grises, a fin de descartar la presencia de severos contaminantes. Se estimó probable la necesidad de bioaumentar la población microbiana hidrocarburolítica nativa. Sin embargo a pesar de haber iniciado el tratamiento en este sector 50 días después de los suelos restantes, en el gráfico que muestra la dinámica de la concentración de Hidrocarburos para el sitio 4, puede verse la inesperada respuesta al tratamiento, de igual manera se observa la disminución del contenido de hidrocarburos en el perfil, con solo 5 meses de tratamiento. A continuación puede verse la distribución de metales alcalinos en el perfil del suelo y su evolución con el tratamiento. Distribución y evolución de las concentraciones de metales alcalinos en el perfil del suelo Calicata 2 Sitio 4 Sr (3) 0-5 Sr (2) Sr (1) Ba (3) Profundidad (cm) 5a15 Ba (2) Ba (1) Mg (3) 15a30 Mg (2) Mg (1) Ca (3) 30a45 Ca (2) Ca (1) Na (3) 45 a 55 Na (2) Na (1) 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 Concentración (mg/100g suelo seco) (1) pretratamiento (2) en tratamiento (3) postratamiento La presencia y distribución de metales pesados presenta en este sitio puntos de máxima concentración respecto a otros sitios del predio, posiblemente a causa que este fue el sector colector del vertido de las aguas de producción que luego se extendían a la superficie restante. Evolución temporal y espacial de la concentración de metales pesados en el perfil del suelo Calicata 2 Sitio 4 Fe x 102 (3) Fe x 102 (2) Fe x 102 (1) 0-10 Cd (3) Cd (2) Cd (1) 10 a 20 Cr (3) Profundidad (cm) Cr (2) Cr (1) Mn x 102 (3) Mn x 102 (2) Mn x 102 (1) Zn (3) 20-30 30-45 Zn (2) Zn (1) Cu (3) Cu (2) > 45 Cu (1) Ni (3) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Concentracion (mg/100g suelo seco) 50 Ni (2) (1) pretratamiento (2) en tratamiento (3) postratamiento En este sector, Hierro, Zinc, Manganeso presentan valores altos. La calicata 3 está ubicada en el sector amarillo, coincidentemente con el sitio 2 del muestreo superficial. En las muestras extraídas a diferentes profundidades entre 0 y 70 cm se midió pH y Conductividad eléctrica en extracto de suelo en relación 1:2,5. El pH incrementa moderadamente su alcalinidad en profundidad (de 7,22 a 7,85) y la CE presenta valores moderados y constantes hasta los 70 cm (700 103 mmhos/cm). La Humedad presenta un valor bajo en superficie (5,85%) y valores altos y crecientes en profundidad (hasta 15,74% a 70 cm). Este sector presentó horizontes subsuperficiales compactados por "pisoteo" debido al tránsito de maquinarias. En este sitio se ha detectado un 18,50% de Hidrocarburos en los primeros 15 cm, decreciendo bruscamente en los siguientes 15 a 50 cm a valores de aproximadamente 2%, para minimizarse a partir de los 60 a 70 cm. Estas características permitieron predecir que sería un sector donde deberemos aplicar acciones mecánicas diferenciales, para destruir la compactación subsuperficial. Dinámica de la concentración porcentual de Hidrocarburos en el perfil del suelo Calicata 3 Sitio 2 Profundidad (cm) 18,5 3,53 3,09 0-15 15-30 0,38 0,55 30-40 0,27 0,18 2,33 2,45 2,75 40-50 0 0 0,4 50-70 0 0 0 2 4 % HC postrat. 6 8 10 12 14 Hidrocarburos (g/100g suelo seco) % HC en trat. 16 18 20 % HC pretrat. La acción mecánica aplicada para romper los pisos de compactación subsuperficiales permitió activar la bioxidación de los hidrocarburos con los resultados que gráficamente se pueden observar. Los metales alcalinos predominantes, al igual que en los sitios anteriores son Ca, Mg y Na. En profundidad se observan moteados calcáreos más o menos abundantes. Distribución y evolución de las concentraciones de metales alcalinos en el perfil del suelo Calicata 3 Sitio 2 0a10 Sr (3) Sr (2) Profundidad (cm) Sr (1) Ba (3) 10a20 Ba (2) Ba 819 Mg (3) Mg (2) 20a35 Mg (1) Ca (3) Ca (2) Ca (1) Na (3) >35 Na (2) Na (1) 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 (1) Concentración (2) (mg/100g suelo seco) (3) 9000 pretratamiento en tratamiento postratamiento Con relación al contenido de metales pesados y su dinámica en el perfil a consecuencia de biotratamiento, valen las consideraciones realizadas para la calicata 1 y sus resultados analíticos se grafican a continuación. Evolución temporal y espacial de la concentración de metales pesados en el perfil del suelo Calicata 3 Sitio 2 Fe x 102 (3) Fe x 102 (2) Fe x 102 (1) Cd (3) 0-5 Cd (2) Cd (1) Cr (3) Cr (2) 5a15 Cr (1) Profundidad (cm) Mn x 102 (3) Mn x 102 (2) Mn x 102 (1) 15a30 Zn (3) Zn (2) Zn (1) Cu (3) 30a45 Cu (2) Cu (1) Ni (3) Ni (2) Ni (1) 45 a 55 Pb (3) Pb (2) 0 5 10 15 20 25 30 35 Concentracion (mg/100g suelo seco) 40 45 50 Pb (1) (1) pretratamiento (2) en tratamiento (3) postratamiento La calicata 6 está localizada en el sector azul, coincidentemente con el sitio 3 del muestreo superficial. En las muestras extraídas a diferentes profundidades entre 0 y 45 cm se midió pH y Conductividad eléctrica en extracto de suelo en relación 1:2,5. El pH se modifica de levemente ácido en superficie (6,85) a moderadamente alcalino en profundidad (7,63 a 45 cm). La CE presenta los valores más altos y constantes medidos en todo el predio (> 2000 103 mmhos/cm) La humedad presenta valores muy bajos (1,97%) en los primeros 10 cm y altos y constantes en profundidad (18% promedio en el perfil). En este sitio se detectó inicialmente una concentración de 7,12% de Hidrocarburos en los primeros 10 cm, decreciendo a valores de aproximadamente 2% en profundidad ; luego de transcurridos los 8 meses de tratamiento los resultados de la degradación de los hidrocarburos se representan comparativamente a continuación. Dinámica de la concentración porcentual de Hidrocarburos en el perfil del suelo Calicata 6 Sitio 3 1,09 1,56 0,41 10a20 Profundidad (cm) 7,25 1,57 0-10 0,39 0,51 20-30 0 1,3 30-45 0 45-70 0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 Hidrocarburos (g/100g suelo seco) % HC postrat. % HC en trat. % HC pretrat. Estas características permitieron predecir que sería un sector de rápida recuperación sólo con tratamiento mecánico y sin bioaumentación respecto al contenido de petróleo. Sin embargo, las conductividades altas indican que se deberá enmendar y lavar los suelos de este sector para controlar la salinidad localizada en el área. Los metales alcalinos presentes en mayor concentración son Ca, Mg y Na, no se observan concentraciones preocupantes de estroncio y bario. Distribución y evolución de las concentraciones de metales alcalinos en el perfil del suelo Calicata 6 Sitio 3 0a5 Sr (3) Sr (2) Profundidad (cm) 5a10 SR (1) Ba (3) Ba (2) Ba (1) 15a25 Mg (3) Mg (2) Mg (1) Ca (3) 25a35 Ca (2) Ca (1) Na (3) >35 Na (2) Na (1) 0 1000 2000 3000 4000 5000 6000 7000 8000 9000 Concentración (g/100g suelo seco) (1) pretratamiento (2) en tratamiento (3) postratamiento En los gráficos que siguen se puede observar que la distribución en el perfil de metales pesados en este sector como en los ya descriptos sigue un mismo patrón de comportamiento presentando Hierro, Manganeso y Zinc los valores más elevados. Evolución temporal y espacial de la concentración de metales pesados en el perfil del suelo Calicata 6 Sitio 3 Fe x 102 (3) Fe x 102 (2) Fe x 102 (1) Cd (3) 0a10 Cd (2) Cd (1) Cr (3) Cr (2) 10a20 Cr (1) Profundidad (cm) Mn x 102 (3) Mn x 102 (2) Mn x 102 (1) 20a35 Zn (3) Zn (2) Zn (1) Cu (3) Cu (2) 35-55 Cu (1) Ni (3) Ni (2) Ni (1) >55 Pb (3) Pb (2) Pb (1) 0 5 10 15 20 25 30 Concentracion (mg/100g suelo seco) 35 40 45 50 (1) pretratamiento (2) en tratamiento (3) postratamiento CONCLUSIONES La composición química de los suelos depende de la composición mineralógica de las rocas que les dieron origen, de allí la gran variabilidad que se observa entre distintos suelos. Los elementos inorgánicos responsables de la nutrición mineral del las plantas se clasifican en los suelos como macro y micronutrientes, según las concentraciones limites en que los vegetales los toleran o los requieren. La bibliografía consultada indica, en forma muy general, valores mínimos y máximos para algunos elementos, expresados en mg/100g de suelo seco.(Bear, 1978). El cuadro siguiente los reporta: Elemento Concentración (mg/100g suelo seco) Máximos Calcio Ca Potasio K Magnesio Mg Sodio Na Manganeso Mn Hierro Fe Zinc Zn Cobre Cu Niquel Ni Mínimos 1661,00 2249,00 1086,00 1243,00 1386,00 5500,00 22,00 6,00 4,00 85,00 132,00 0,00 29,00 15,00 476,00 10,00 0,02 0,20 La Ley 24.051, de Residuos Peligrosos establece niveles guía de calidad de suelos, en cuanto a los denominados constituyentes peligrosos, establece los siguientes valores para los metales pesados que se han estudiado en este trabajo: Metal pesado Bario Ba Cadmio Cd Zinc Zn Cobre Cu (total) Cromo Cr (total) Níquel Ni (total) Concentración en suelos (mg/100g suelo seco) Uso agrícola Uso residencial 75,00 0,30 60,00 15,00 75,00 15,00 50,00 0,50 50,00 10,00 25,00 10,00 Uso industrial 200,00 2,00 150,00 50,00 80,00 50,00 El contenido de metales alcalinos se encuentra dentro de valores, si bien elevados, posibles de encontrar en suelos salinos. En todas las calicatas se observan horizontes con moteado de calcáreo en diferentes profundidades según el sitio. El suelo del yacimiento analizado en un sector de monte, sin contaminación por la actividad petrolera, presenta los siguientes valores respecto a la concentración de metales pesados VALORES PROMEDIO DE CONCENTRACIÓN DE METALES PESADOS (mg/100g suelo seco) EN EL SUELO TESTIGO, Sitio de MONTE (sin tratamiento y sin contaminantes) Profundidad 0a10 cm 10a25 cm 25a40 cm 40a55 cm >55 cm Fe Cd Cr Mn Zn Cu Ni 1223,0 0,060 ND 70,00 3,500 1,500 950,0 0,030 0,810 60,00 3,500 1,400 970,0 0,035 0,500 55,00 2,900 1,150 1174,0 0,010 0,600 76,00 1,050 1,500 1136,0 0,030 0,420 69,00 0,600 1,500 Pb 1,900 2,400 2,500 2,200 2,500 1,300 1,500 1,400 1,000 0,600 Los suelos del sector sometido a rehabilitación por el biotratamiento presentan los valores promedio calculados por horizonte para todo el predio: VALORES PROMEDIO DE CONCENTRACIÓN DE METALES PESADOS (mg/100g suelo seco) EN LOS SUELOS BIOTRATADOS Profundidad Fe Cd Cr 0a10 cm 2373,0 0,039 10a25 cm 2590,0 0,037 25a40 cm 2240,0 0,033 40a55 cm 1632,0 0,042 >55 cm 1828,0 0,035 0,890 0,800 0,670 0,690 0,800 Mn Zn 130,00 115,00 102,00 75,00 76,00 5,570 7,380 5,890 4,680 4,450 Cu Ni Pb 2,100 2,270 1,760 2,550 2,620 1,520 1,960 2,350 1,070 1,800 2,070 1,160 1,970 2,220 1,050 Analizando los dos cuadros anteriores puede establecerse que las concentraciones de los metales níquel Ni, cromo Cr, cadmio Cd y plomo Pb, no han sido aumentadas por la disposición en estos suelos de aguas de producción e hidrocarburos; Las concentraciones de hierro Fe, manganeso Mn, zinc Zn y cobre Cu, se observan incrementadas en los horizontes superficiales, en los suelos del sitio en rehabilitación. El contenido de metales pesados no alcanza valores de carácter tóxico, por el contrario, salvo el hierro, los elementos como Zn, Cu, Ni y Mn se encuentran dentro de los valores máximos en que un suelo puede contener naturalmente como micronutrientes para las plantas y por debajo de los valores límites permitidos por la Ley de residuos peligrosos para suelos de uso industrial. En todos los casos, la concentración de Hierro, se ve incrementada con el biotratamiento, podría deberse a la acción siderófora de los microorganismos nativos del suelo, supuesto que debería verificarse evaluando si existen en la microflora autóctona grupos microbianos vinculados en las biotransformaciones del hierro. Igual consideración debe hacerse en general para otros metales como Bario, Zinc y Manganeso, pues ellos han incrementado su concentración luego del tratamiento, aunque siempre por debajo de los valores establecidos por la ley 24.051 para suelos de uso industrial, y lo más destacable es que también están por debajo de los valores para suelos de uso agrícola. Analizando comparativamente los resultados del tratamiento de rehabilitación en los cuatro sectores, respecto a la concentración residual de Hidrocarburos, puede concluirse que en los sectores azul y verde, la microflora nativa del suelo, estimulada por un adecuado manejo mecánico, ha logrado bioconvertir con éxito, los hidrocarburos presentes a valores residuales que representan solo entre 10 a 15% de la concentración de hidrocarburos inicial. En consecuencia se unificaron estos sectores en un predio que ha recibido como tratamiento final una fertilización con nitrógeno y fósforo previa a la siembra realizada en abril del corriente año, donde se sembró una pastura extractiva (agropiro), con una densidad de siembra de 30 Kg./Ha, que será analizada en sus diferentes estados fenológicos para verificar su eficiencia como “extractora” de hidrocarburos residuales. Finalmente el cultivo será cortado e incinerado, el suelo finalmente roturado y la vegetación autóctona reimplantada. En el sector Rojo, se observó una respuesta inmediata al tratamiento, considerando que solo en los primeros 4 meses de trabajo se redujo la concentración de hidrocarburos a menos del 50% de la inicial. Para acelerar el proceso se inoculará este sector con microorganismos hidrocarburolíticos multiplicados in vitro pero proveniente de los suelos del sector, es decir se procederá a realizar prácticas de bioaumentación. Por razones operativas se propone unificar este sector con el sector amarillo. Si bien en este último la concentración de hidrocarburos residual representa solo un 15% del inicial, se ha detectado un contenido de sodio muy alto en los horizontes superficiales, por cuanto se estima oportuno continuar el tratamiento mecánico del suelo en este sector. Esta experiencia ha servido para demostrar que la recuperación de suelos contaminados con hidrocarburos, por la técnica de laboreo del suelo con estimulación de la actividad oxidativa biodegradadora de los microorganismos autóctonos, representa una tecnología ambientalmente sustentable para rehabilitar los suelos afectados. BIBLIOGRAFÍA Atlas, R. 1981. Microbial degradation of petroleum hidrocarbons: an environmental perspective. Microbiological Reviews. 45: 180-209. Bear, F. 1978. Suelos y Fertilizantes. De. Omega. Calabresse, E. and P. Kostecky. 1993. Principles and practices for petroleum contaminated soils. Lewis Publishers USA. Kincannon, D. and Y.S. Lin. 1985. Microbial degradation of hazardous wastes. Proceedings of the 40th Purdue Industrial Waste Conference.Lewis Publishers. USA. 607-619. Leahy, H. and R. Colwell. 1990. Microbial degradation of hidrocarbons in the environnment. Microbiological Reviews. 54: 305-315. Ley 24.051, de Residuos peligrosos. República Argentina. Pozzo Ardizzi, M.G. y col. 1996. Biodegradación de residuos de petróleo por bioaumentación con bacterias nativas de suelos regionales. Gerencia ambiental. 25: 391-393.