Agronomía Colombiana, 1998VolumenXVNo,2, 3 pag, 137-142 EFECTO DE LA INCORPORACION DE PLANTAS ANTAGONICAS SOBRE LA ACTIVIDAD PARASITICA DEL NEMATODO DEL NUDO DE LA RAIZ Meloidogyne hapla EN UN CULTIVO DE ZANAHORIA BAJO CONDICIONES DE INVERNADERO*' Effect of the incorporation of antagonistic plants on the parasitic activity of the root-knot nematode Meloidogyne hapla in a greenhouse carrot crop César G. Alvarez2, Enrique Torres3 y Raf de Vis' RESUMEN En el Centro de Investigaciones y Asesorías Agroindustriales (CIAA) de la Universidad Jorge Tadeo Lozano, localidad de Chía (Cundinamarca), se llevó a cabo un ensayo bajo condiciones de invernadero para evaluar el efecto de la incorporación de material vegetal fresco proveniente de siete especies de plantas (Tagetes zipaquirensis, T. erecta, Brassica cempestris, Bidens pilosa, Ruta graveolens, Taraxacum officinale y Ricinus communis) sobre el rendimiento y calidad comercial de un cultivo de zanahoria (Daucus carota) varo Mokum y sobre la densidad poblacional del nemátodo del nudo de la raíz Meloidogyne hapla y la intensidad de la nodulación asociada con su establecimiento sobre plantas de zanahoria. No se encontraron diferencias significativas en cuanto al rendimiento biológico de la zanahoria, pero los tratamientos con R. • Recibido en Enero de 1998 Contribución del Departamento de Sanidad Vegetal, Facultad de Agronomía, Universidad Nacional de Colombia, Apartado Aéreo 14490, Bogotá, y del Centro de Investigaciones y Asesorías Agroindustriales de la Universidad J. T. Lozano, Apartado Aéreo 140196, Chía 2 Ingeniero Agrónomo 3 Profesor Asociado, Colombia Universidad 4 Coordinador Area Control Universidad J. T. Lozano Nacional Biológico, de CIAA, graveolens y T. officinale mostraron la mayor producción de zanahoria comercial (3070 g.m·2 y 2270 g.m·2) con diferencias significativas respecto al testigo (1090 g.m-2). Las densidades poblacionales finales de juveniles infectivos [J21 de M. hapla fueron significativamente más bajas en los tratamientos con R. communis, T. officinale, B. campestris y T. erecta (65-130 Jj100 g de suelo) que en el testigo (435 Jj1 00 g de suelo). En la nodulación se encontraron diferencias significativas entre el testigo (5.0 nudos/ápice de zanahoria) y los demás tratamientos (1,9-2,6 nudos/ápice de zanahoria). Palabras claves: integrado, fitoparásitos, Hortalizas, control alelopatía, nemátodos cultivos protegidos. SUMMARY A trial was conducted at the Centro de Investigaciones y Asesorías Agroindustriales (CIAA) of the Universidad Jorge Tadeo Lozano, Chía (Cundinamarca) under greenhouse conditions to assess the effect of incorporating fresh above-ground material of seven plant species (Tagetes zipaquirensis, T. erecta, Brassica cempestris. Bidens pilosa, Rufa graveolens, Taraxacum officinale and Ricínus communis) on the yield and commercial quality of a carrot (Daucus carota) crop var. Mokum, on the population density of Meloidogyne hapla and on the 137 intensity of root-knotting of carrot. No significant differences were detected in the biological yield of carrot plants, but commercial average production obtained from plots.treated with R. graveolens and T. officinale were the highest (3070 g.m·2 and 2270 g.m·2) and significantly different from the control plots (1090 g.m·2). Final average population densities of infective secondstage juveniles [J21 of M. hapla were significantly lower in the plots treated with R. communis, T. officinale, B. campes tris and T. erecta (65-130 Jj100 g of soil) than in the control plots (435 Jj1 00 g of soil). Significant differences were detected between rootknotting intensity of control plots (5.0 knots per root tip) and the averages of other treaments (1.9-2.6 knots per root tip). Key words: Vegetables, integrated pest management. allelopathy, plant parasitic nematodes, protected crops. INTRODUCCION Dentro de los problemas fitopatológicos que han cobrado mayor importancia en los últimos años a nivel nacional se encuentran los nemátodos, los cuales son particularmente problemáticos en cultivos de flores, palma africana y algunas hortalizas. En ese contexto, surge la necesidad de evaluar medidas alternativas de reducción de las densidades poblacionales de los nemátodos fitoparásitos tales como la incorporación al suelo de material vegetal con efectos antagónicos a estos nemátodos. Tales alternativas se justifican particularmente para Meloidogyne, el género de nemátodos fitoparásitos de mayor importancia económica a nivel mundial. Cuando se calcula en 12,5 % las pérdidas ocasionadas por todos los nemátodos fitoparásitos, poco menos de la mitad (5 %) es directamente atribuible al género Meloidogyne (Eisenback y Triantaphyllou, 1991). Además, Meloidogyne es el género con la más amplia distribución geográfica y cuenta con el rango más amplio de hospedantes (2200 especies de plantas). Cuatro de las cerca de 60 especies estudiadas, se destacan como las más importantes en todo el mundo: Meloidogyne incognita, M. javanica, M. arenaria y M. hapla (Taylor, 1968). Dentro de los antecedentes en el control de nemátodos con plantas antagónicas puede citarse a Hasan (1992) quien afirma que algunas plantas producen sustancias aleloquímicas con acción nematóxica que se liberan en el suelo como resultado de volatilización, exudación radicular o descomposición. Muchos investigadores, entre los cuales figuran Huang (1984), Akhtar et al., (1990), Eisenback y Triantaphyllou (1991), Hasan (1992) y Camelo (1994), han estudiado el efecto de plantas en forma de extractos, en rotación con cultivos tolerantes, intercaladas o incorporadas en el suelo, sobre las poblaciones de Meloidogyne y los cultivos susceptibles a este nemátodo. En general, los resultados de este tipo de estudios muestran la viabilidad de usar plantas antagónicas en el control de Meloidogyne. En el caso de los extractos, Navarro (1997) informa de la actividad nematicida contra Meloidogyne spp. de los extractos de ruda de Castilla (Ruta graveolens L.), chipaca (Bidens pilosa L.) y diente de león (Taraxacum officinale L.) en pruebas de laboratorio. Por su parte, Camelo (1994) encontró actividad nematicida de la maleza nativa "Ruda gallinaza", Tagetes zipaquirensis H.K.B. en juveniles de Meloidogyne sp. • Con respecto a las rotaciones, Huang (1984) encontró que cuando se cultivaba Tagetes patula L. durante cuatro meses antes de la siembra de zanahoria, se disminuían las densidades poblacionales de M. javanica en un 90% para el primer ciclo de zanahoria, aumentando el rendimiento de la zanahoria comercializable. Respecto al intercalado, Montiel et al. (1995) encontraron que la siembra asociada de Tagetes spp. con guayabo (Psidium guajaba L.) redujo la densidad de Meloidogyne spp. en 85,6 %, Y el grado de 138 nudosidad de las raíces del guayabo en 91,9%. Estrada y Peláez (1982) observaron que la siembra intercalada de T patula con tomate disminuyó de manera significativa la densidad de Meloidogyne sp. y la incidencia de su ataque en el tomate. En lo concerniente a la incorporación, Hasan (1992) hace referencia a observaciones de otros autores en el sentido que la adición de plantas picadas de higuerilla (Ricínus communis), mahua (Madhuca butyracea), margosa o neem (Azaridachta indica A. Juss.), mostaza (Brassica campestris L.) y maní (Arachis hypogaea) al suelo suprimió las poblaciones de M. incógnita y redujo el grado de nudosidad en raíces de espinaca. De otra parte, Akhtar et al. (1990) encontraron que la adición al suelo de hojas picadas de Melia azedarach L., Calotropis procera R. Br., higuerilla, buchón de agua (Eichornia crassipes Mart.) y neem a 110 kg.ha·1 redujo la reproducción de varias especies de M. incognita y otros nemátodos fitoparásitos en un cultivo de fríjol mungo. Las hojas de C. procera ofrecieron la máxima eficacia seguidas de las hojas de buchón, neem, M. azedarach e higuerilla. Los autores concluyen que el potencial de estas enmiendas orgánicas para controlar a los nemátodos fitoparásitos puede atribuirse a la toxicidad de los productos de descomposición, al incremento en la predación contra los nemátodos, o a la actividad parasítica de los habitantes del suelo. Además, sugieren que estas enmiendas pueden provocar cambios en las propiedades físicas o químicas del suelo que inhiben a los nemátodos, o incrementan la resistencia del hospedante. MATERIALES Y METOCOS El ensayo se llevó a cabo en un invernadero del CIAA, con una temperatura promedio de 15 -c y una humedad relativa del 80%, bajo un diseño completamente al azar de nueve tratamientos con cuatro repeticiones. Cada repetición o unidad experimental consistía en una cama cuadrada de 1 m2 y 25 cm de altura elaborada con cuatro estacas de madera, alambre y polietileno. El suelo depositado en cada cama provino de un invernadero con infestación del nernátodo y fue homogenizado mediante volteo con pala. La textura de este suelo era franco-arcillosa, con pH 5,8 Y disponibilidad adecuada de macro y microelementos para el cultivo, según lo mostró el análisis de caracterización. La parte aérea (hojas, tallos, flores y frutos) del material vegetal de las especies que se detallan adelante se picó mediante una picadora "Tornometal", y se Incorporó a la dosis de 1000 g,m2 Las especies utilizadas fueron higuerilla, chipaca, ruda de Castilla, diente de león, "amapola" (Tagetes erecta L,), mostaza, y ruda gallinaza. Se aplicaron dos dosis de higuerilla (1000 Y 500 g.m2) para evaluar la posible fitotoxicidad de este material en la zanahoria, dado que existían antecedentes de este efecto en otros cultivos (Navarro, 1997), Las plantas fueron identificadas en el Herbario Nacional Colombiano. Diez días después de la incorporación se procedió a sembrar 4 surcos de zanahoria varo Mokum en cada unidad experimental. La razón de sembrar diez días después de la incorporación fue permitir la descomposición del material, por lo cual, durante ese péríodo de tiempo el suelo se mantuvo húmedo mediante riego, Al final de las 12 semanas del ciclo de cultivo de la zanahoria, se determinaron las siguientes variables en cada unidad experimental: • Nodulación: Número de nudos por ápice de zanahoria (promedio de una muestra de 32 zanahorias) Rendimiento (peso fresco de calidad comercial) expresado en g.m·2: El rendimiento total es el peso de todas las zanahorias cosechadas. El rendimiento de primera (1 a) es el peso de las zanahorias con longitud igualo superior a 10 cm, diámetro (se considera la parte más gruesa) igualo superior a 1,9 cm y peso mayor a 10 g. El rendimiento de segunda (2a) es el peso de las zanahorias con longitud entre 5 y 9,9 cm, diámetro entre 1,4 Y 1,8 cm y peso entre 5 y 9,9 g, El rendimiento de tercera (3a) es el 139 peso de las zanahorias no comerciales. El rendimiento de zanahoria comercial es la suma de los rendimientos de 1a Y 2° tacan la ruda de Castilla y la higuerilla aplicada a la dosis de 1.0 kq.m", como los tratamientos que presentaron menor nodulación. • Densidad poblacional de M. hapla: Corresponde al número de juveniles (J2) de M. hapla en 100 g de suelo usando como método de extracción el embudo de Baermann. El promedio general de rendimiento para el ensayo fue de 5400 g.m-2• No se detectaron diferencias significativas en el rendimiento total aunque la "Amapola" y el testigo presentaron los menores valores en esta variable. Los datos de la variable densidad poblacional se transformaron a log (x) y los de las demás variables a ~x, con el fin de acercarlos a los supuestos de homogeneidad de varianzas y normalidad de errores. Se hizo un ANAVA para cada variable con los datos transformados y se hizo una prueba de Duncan para detectar diferencias entre los tratamientos. RESULTADOS Los resultados se presentan en el Cuadro 1. Para la variable de nodulación, la prueba de Duncan detectó diferencias significativas entre el testigo (5,0 nudos por ápice de zanahoria) y los demás tratamientos (1,9 a 2,8 nudos por ápice de zanahoria). Se des- En el caso del rendimiento de zanahoria de 1°, la prueba de Duncan establece diferencias significativas entre la ruda de Castilla y la "amapola" respecto al testigo, mientras que para la variable rendimiento de zanahoria de 2° se encuentran diferencias significativas de los tratamientos ruda de Castilla y diente de león con respecto al testigo. Al considerar el rendimiento comercial, se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos ruda de Castilla y diente de león con respecto al testigo. En todos los casos se observa siempre una mayor proporción de zanahoria de segunda que de primera. Cuadro 1. Resultados generales del ensayo de control del nemátodo del nudo de la raíz de la zanahoria mediante la incorporación de material vegetal. Promedio de cuatro repeticiones. Tratamiento Testigo Ricinus communisO.5 R. communis 1.0 Bidens pilosa Taraxacum officinale Tagetes erecta T ztoecúirensts Ruta graveolens Brassica campestrís Nudos Rendipor miento ápice de total zanaho9·m:2 ria 5.0 2.8 * 1.9 * 2.3 * 2.6 * 2.0 * 2.6 * 2.0 * 2.0 * 4930 5400 5800 5750 5220 4700 5830 5700 5170 Los tratamientos marcados con asteriscos en la prueba de Duncan. la. clase 9·m:2 2a. clase 9·m:2 Rendimiento comerclal q.rn.? 3a. clase 9·m:2 Nenltb:bs por 100 9. de suelo 300 480 680 240 650 960 610 1050 * 560 780 570 1470 1060 1620 * 1150 1180 2020 * 1160 1080 1050 2150 1300 2270 * 2090 1790 3070 * 1730 3850 4330 3660 4450 2950 2620 4040 2480 * 3440 435 127 * 71 * 234 67 * 102 * 198 162 77* n son diferentes al testigo a un nivel de significancia 140 del 5% Los mayores valores en el rendimiento de zanahoria de 3" se presentan para los tratamientos chipaca, higuerilla 500 g.m·2, higuerilla 1000 g.m·2, ruda gallinaza y mostaza sin que se presenten diferencias estadísticamente significativas entre estos tratamientos y el testigo. La ruda de Castilla presentó el menor valor de rendimiento de 3" y fue significativamente inferior al testigo. Algunas de las plantas que tuvieron efecto en este trabajo, como el diente de león, la ruda gallinaza, y la ruda de Castilla, ya habían demostrado ser antagónicas a Meloidogyne sp. en condiciones de laboratorio en nuestro medio (Camelo, 1994; Navarro, 1997). Los resultados de este trabajo confirman las propiedades nematicidas de estas plantas y su efecto benéfico sobre la producción de zanahoria comercial. El tratamiento con la más alta densidad poblacional de nemátodos es el testigo, sin que presente diferencias significativas con los tratamientos chipaca, ruda gallinaza y ruda de Castilla. La prueba de Duncan detectó diferencias significativas entre el testigo y los tratamientos higuerilla 1000 g.m·2, diente de león, "amapola", mostaza e higuerilla 500 g.m·2. Aunque la metodología usada en este trabajo no permite explicar la efectividad de las enmiendas utilizadas en el control de M. hapla, es presumible encontrar la explicación en algunas de las razones propuestas por Akhtar et al. (1990) y Hasan (1992) quienes aducen que la adición de materiales orgánicos, como los originados por la incorporación de plantas, puede generar toxicidad a los nemátodos al descomponerse, incrementar o favorecer la actividad predatora y parasítica en el suelo contra los nemátodos y originar cambios en las propiedades fisicoquímicas del suelo que inhiben a los nemátodos. Sería interesante que en futuros trabajos relacionados con éste, se incluyeran variables que delimitaran con más exactitud los mecanismos de efectividad de estas enmiendas y las causas de su efecto diferencial en el control de los nemátodos fitoparásitos. No se observó ningún efecto de fitotoxicidad como clorosis o crecimiento retardado del área foliar en la zanahoria sembrada bajo los dos tratamientos de higuerilla durante el ciclo de cultivo. En cambio, es evidente el efecto benéfico de la aplicación de la mayor dosis de higuerilla en todas las variables del ensayo con respecto a la menor dosis. DISCUSION Los resultados de este trabajo muestran que la incorporación de material vegetal de ruda de Castilla, y diente de león redujo la densidad poblacional de M. hapla y protegió las raíces de zanahoria, lo cual valida el supuesto inicial concerniente a la efectividad de la adición de enmiendas orgánicas en la lucha contra los nemátodos fitopatógenos y que reporta la literatura (Akhtar et al., 1990; Hasan, 1992). Las diferencias significativas entre tratamientos en términos de calidad de la zanahoria justifican ampliamente el control de M. hapla en la varo Mokum dado el alto valor comercial de este cultivar respecto a variedades más comunes de zanahoria (el precio de venta de esta variedad osciló durante 1997 entre $1.400 y $1.700 por kilogramo). Los resultados evidencian además que algunos tratamientos como la ruda de Castilla, que exhibieron buenas producciones de zanahoria comercial, mostraron al final del ciclo una densidad poblacional relativamente alta de nemátodos en el suelo; mientras que otros tratamientos, como la mostaza, que tuvieron uno de los más bajos promedios en rendimiento comercial, mostraron densidades finales bajas de nemátodos. Lo anterior puede explicarse si se considera que tratamientos como la ruda de Castilla, que mostraron buenos rendimientos comerciales, tuvieron alta efectividad en la disminución de las densidades poblacionales iniciales, pero su efecto no se prolongó en el tiempo y los nemátodos que entraron a las raíces de la zanahoria 141 dejaron descendencia que se expresó como inóculo abundante al final del ciclo del cultivo. Por el contrario, tratamientos como la mostaza fueron poco efectivos en el control de las poblaciones iniciales pero muy supresivos con los nemátodos que eclosionaban de las masas de huevos de las raíces de zanahoria que ya habían sufrido el daño de las poblaciones iniciales. Siguiendo este argumento, tratamientos como la mostaza no pueden ser descartados en un plan de manejo integrado de M. hapla. NAVARRO, R. 1997. Comunicación personal. Universidad Católica de Oriente. Ríonegro, Antioquia. TAYLOR, A. L. 1968. Introducción a la nematología vegetal aplicada. FAO. Organización de las Naciones Unidas para la Agricultura y la Alimentación, Roma. BIBLlOGRAFIA AKHTAR, M., SUHAIL, A. y APARNA Y. 1990. Effect of organic amendments to soil as nematode supressants. Intl. Nematol. Network Newsl. 7(3):21. _______ - __-_CAMELO, A. P. 1994. Estandarización de las condiciones óptimas para el cultivo de fitonemátodos y determinación de la posible actividad nematicida de Tagetes zipaquirensis. Tesis. Química farmacéutica. U. Nal. Bogotá. EISENBACK y TRIANTAPHYLLOU. 1991. Root knot nematodes: Meloidogyne pp 191-274 en: Manual of agricultural nematology. W. R. Nickle, ed. Marcel Dekker, New York. ESTRADA, W. y PELAEZ L. 1982. Siembra intercalada de tomate (Lycopersicon esculentum) y rosa amarilla para el control de Meloidogyne sp. Tesis Ing. Agrónomo. U. Nal. Medellín. HASAN, A. 1992, Allelopathy in the management of root-knot nematodes pg 413441 en: Allelopathy: basic and applied aspects. V. Rizvi, ed. Chapman & Hall, Londres. HUANG S, P. 1984. 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