MANUAL DE OPERACIÓN AUTOCLAVE WACS-1080 Laboratorio de Botánica Marina 1.- Partes principales del autoclave. El autoclave vertical marca DAIHAN modelo WACS-1080 es un equipo para la esterilización de materiales y utensilios en laboratorios. Su proceso de esterilización es realizado a través de vapor de agua saturado, dónde una determinada cantidad de agua es calentada a través de un conjunto de resistencias eléctricas, proporcionando la generación de vapor necesaria. B C D A E G F F H G Figura 1. Detalle de partes externas de autoclave. A) Consola de control y comando, B) Manómetro de presión interna de trabajo, C) Manilla de ajuste y apertura, D) Tapa desplazable, E) Sección de acceso a válvulas de libración de presión o “despiche”, G) Ruedas de desplazamiento con freno accionable, F) Canastillo para ingreso de material al autoclave. C Especificaciones técnicas: • Marca: DAIHAN • Modelo: WACS-1080. • Dimensiones (mm): interna (mm) 400 Ø 630 h, externa (w x d x h) 780x580x900. • Número de canastillos: 2. • Dimensiones de canastillos (mm): 340 Ø 310 h. • Capacidad: 80 L. • Temperatura de operación: 90 a 132ºC. • Tiempo de esterilización: Depende del material a ser esterilizado (máx. 99 hrs 59 min 59 sec). • Presión de esterilización: 1,2 Kgf/cm2 a 121 ºC, 2,0 Kgf/cm2 a 132 ºC. • Corriente: AC 220V 50/60 Hz, 1 fase, enchufe de tres polos. El equipo cuenta con dispositivos de seguridad para proteger al usuario y el equipo: - Disyuntor bipolar para protección sistema eléctrico. - Controlador de temperatura que cancela el ciclo en caso que la temperatura en el interior del equipo este 3 ºC arriba de la temperatura programada. - Válvula de alivio ajustada para ser actuada en la máxima presión de trabajo admisible (MPTA). - Control de microprocesador digital programable (PID). 2.- Etapas para uso del autoclave. Preparación de materiales. Se debe empaquetar el material de laboratorio (material de vidrio) mediante el uso de papel kraft, además de adosar papel indicador de autoclave (cinta autoclave). Para ello el material de vidrio debe ser previamente tratado en una solución con ácido muriático al 2% por 24 horas, lavado con detergente neutro y enjuagado con abundante agua, posterior a su enjuague se deberá dejar escurrir el agua, de manera que no sea empaquetado aun mojado. Figura 2. Preparación de material de vidrio lavado y seco para su ingreso en el autoclave. A) Formato de empaquetar matraces Erlenmeyer y disposición de cinta de autoclave en la parte superior, B) Formato de empaque de pipetas C graduadas, se marca destino de puntas y volumen de las pipetas, C) Formato de empaque de tubos de ensayo y disposición de cinta de autoclave en la parte superior. Revisión del equipo autoclave. El equipo debe ser revisado el nivel de agua destilada al interior del tambor antes de su utilización. Para ello se debe visualizar que el nivel de agua alcance la marca al interior del tambor. En caso que el nivel sea inferior, se debe introducir el volumen faltante mediante el uso de un balde del área de lavado. Además se debe revisar que la válvula de liberación de presión 1 (Fig. 3B) esté cerrada la válvula 2 debe estar abierta (Fig. 3C), sin embargo, si se desea controlar la cantidad de vapor liberado sea menor puede cerrar dicha válvula, pero si la válvula queda cerrada al termino del ciclo del autoclave no se podrá liberar el vapor al interior del equipo, por lo que es aconsejable que no quede totalmente cerrada. B A C Figura 3. A) Nivel necesario de agua destilada al interior del tambor del autoclave para su correcto funcionamiento, B) Válvula 1 y C) Válvula 2. Ingreso de material para autoclavar. Primeramente se debe ingresar el canastillo de acero inoxidable al interior del autoclave, y posteriormente el material de laboratorio (material de vidrio) al interior del canastillo, tratando de que el material quede bien acomodado y que la altura de los matraces no interfiera con la tapa del autoclave. En caso de ingresar botellas con agua de mar se debe garantizar que lleven tapas o tapones. A Figura 4. A) Material al interior del autoclave almacenado en canastillo metálico. Cierre de autoclave y configuración de temperatura y periodo para autoclavar. Posteriormente al ingreso del material al interior del autoclave, equipo debe ser cerrado, para ello se procede desplazar la tapa, luego se procede a cerrar la manilla, realizando un giro en el sentido derecho. La tapa debe quedar bien ajustada. Una vez terminado el proceso de cierre de la tapa, se procede a configurar el equipo desde el panel digital. Primeramente cerciórese que el equipo este enchufado a la corriente, y luego accione el switch de encendido al lado izquierdo del panel y el equipo mostrará en el display P.V. (Fig. 5B) la temperatura actual del tambor interno y la temperatura a configurar en el display S.V. (Fig. 5C). A continuación presione el botón “MODE” (Fig. 5D) y en el display P.V. aparecerá “TEMP” y en el display S.V. aparecerá la temperatura en la cual está configurado el equipo para autoclavar. En el caso de querer cambiar la temperatura cambie la posición del digito con los botones izquierda (Fig. 5E) o derecha el valor con el botón modificar valor (Fig. 5F) y cambie (Fig. 5G). Posteriormente configure el tiempo de autoclave presionando nuevamente el botón “MODE” (Fig. 5D) y en el display P.V. aparecerá “TIME” y en el display S.V. aparecerá el periodo en la cual está configurado el equipo para autoclavar, para cambiar el periodo cambie la posición del digito con los botones izquierda (Fig. 5E) o derecha (Fig. 5F) y cambie el valor con el botón modificar valor H B I J K C A D E F G L (Fig. 5G). Figura 5. Detalle de panel de control y comando del autoclave. A) Botón on/off, B) Display P.V., C) Display S.V., D Botón MODE, E) Botón izquierdo de cambio de digito, F) Botón derecho de cambio de digito, G) Botón para modificar valor, H) Luz de indicación de encendido, I) Luz de indicación de “calentando”, J) Luz de indicación de operación de tiempo, K) Manómetro para visualización de presión interna de equipo, L) Botón de display autotuning. Una vez configurado la temperatura y periodo de autoclave presione el botón “MODE” (Fig. 5D) para guardar los valores y el equipo retornará a su estado inicial y presione el botón on/off (Fig. 5A) para iniciar el proceso de autoclave. El equipo calentará la cámara hasta la temperatura configurada, una vez que alcance dicha temperatura y equipo mantendrá contante y se iniciará por el periodo que se seleccionó en la configuración. Presionando el botón display autotuning (Fig. 5L) el display mostrará el valor actual de temperatura y tiempo repetidamente. Al finalizar el periodo de autoclave sonará una alarma, y 30 segundos después el equipo iniciará la liberación de presión (vapor) a través del despiche ubicado en la parte trasera del autoclave. Retiro de material autoclavado. Se debe revisar el manómetro del equipo y cerciorarse que no exista presión interna en el equipo, solo así es posible abrir la tapa y retirar el material. Es recomendable esperar 30 minutos antes de retirar el material ya que la temperatura interna del tambor puede ocasionar accidentes. En caso de retirar material aún caliente se debe usar guantes protectores de calor. Observaciones: • • • Tener cuidado con apoyar las manos sin protección durante el equipo esté en funcionamiento, debido a la alta temperatura que alcanza Comprobar que la presión al interior del equipo sea 0 Kgf/cm2 para poder retira material al interior del equipo Realizar el recambio de agua destilada al interior del equipo cada 14 días. *Se prohíbe el ingreso de material plástico no autoclavable, además de sustancias toxicas al interior del autoclave.