Programa Nacional de Brucelosis Rige a partir de: 01/04/2010 Código: PN-B-MC-PG-003 Procedimiento de la toma de muestras y envío para brucelosis bovina Versión 01 Página 1 de 5 Elaborado por: Unidad de Epidemiología Revisado por: Coordinador del Programa de Brucelosis, Unidad de Epidemiología, LANASEVE Aprobado por: Coordinador del Programa de Brucelosis 1. Objetivo Establecer los lineamientos a seguir para la toma y el envío de muestras para brucelosis bovina. 2. Alcance Aplica para todos los médicos veterinarios oficiales y oficializados y técnicos de SENASA que realizan tomas de muestras para el diagnóstico de brucelosis. 3. Responsabilidad y autoridad 3.1 Director regional 3.1.1 Incluir en el plan anual operativo la programación de toma de muestras. 3.2 Jefe de vigilancia y control veterinaria 3.2.1 Vigilar porque el personal del departamento y los mèdicos veterinarios oficializados apliquen este procedimiento. 3.3 Médico veterinario oficial u oficializado 3.3.1 Tomar muestras de todos animales elegibles. 3.3.2 Entregar las muestras al laboratorio en la manera prescrita por el laboratorio. 3.4 Director de la Dirección de Operaciones 3.4.1 Velar por el cumplimiento de este procedimiento e incluir en los informes semestrales la información respectiva y enviar copia al Coordinador del Programa Nacional de Brucelosis. 3.5 Coordinador del Programa de Brucelosis 3.2.1 Verificar que se ejecuten las acciones que están contenidas en este procedimiento. 3.2.2 Revisar y actualizar este procedimiento cuando se requiera, considerando cambios en la situación sanitaria en el país y modificación de normas nacionales e internacionales. 3.2.3 Hacer un informe mensual en que se incluye los resultados de los análisis para la Unidad de Epidemiología, la Dirección de Operaciones, y a la Dirección General del SENASA. 3.3 LANASEVE y laboratorios oficializados © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada DIRECCIÓN GENERAL Programa Nacional de Brucelosis Rige a partir de: 01/04/2010 Código: PN-B-MC-PG-003 Versión 01 Página 2 de 5 3.3.1 Analizar las muestras recibidos de los médicos veterinarios oficiales e oficializados, cuya oficialización se encuentre al día. 3.3.2 Utilizar los métodos de diagnóstico convenidos entre el Programa Nacional de Brucelosis, el LANASEVE y la Unidad de Epidemiología. 3.3.3 Informar oportunamente al Programa Nacional de Brucelosis aquellas situaciones en las que se interrumpa el servicio de diagnóstico, como por ejemplo, cuando se agotan los reactivos. 4. Definiciones 4.2 Centro de acopio: Lugar de recepción de muestras encargado de realizar el embalaje y envío al laboratorio central o regional. 4.3 Hato: Conjunto de animales de una misma especie que se encuentra ubicado en una unidad epidemiológica, en forma permanente o por períodos. Se incluye dentro del mismo hato los animales que por razones de manejo, se ubican en período seco, de padreo, de desarrollo u otro en una finca distinta, pero que en intervalos de tiempo tienen contacto entre sí. 4.4 Hato libre: Es el que cuenta con el certificado emitido por el SENASA. 4.5 Hato en saneamiento: Es el que cuenta con un convenio de saneamiento entre el productor y SENASA. 4.6 Médico veterinario oficializado: Profesional en medicina veterinaria del ejercicio liberal, reconocido e inscrito ante el Colegio de Médicos Veterinarios de Costa Rica y autorizado por el SENASA para realizar determinadas actividades en programas oficiales. 5. Referencias 5.1 Decreto Nº 34858-MAG, Reglamento para la Intervención de la Brucelosis Bovina 5.2 PN-B-MC-PG-001- Procedimiento de Inspección del Manejo de Hato en Saneamiento 5.3 PN-B-MC-PG-002- Procedimiento de Inspección del Manejo de Hato Libre 5.4 PN-B-PG-003-RE-01-Informe mensual de Laboratorio sobre muestras analizadas para brucelosis 5.5 SEG-PE-001-RE-007-Recepción de muestras para diagnóstico (disponible en la página web de SENASA) 5.6 SEG-PE-001-RE-004-Ensayos y métodos utilizados (disponible en la página web de SENASA) 5.7 SEG-PE-001-RE-005-Criterios de Aceptación de la muestra (disponible en la página web de SENASA) 6. Abreviaturas y/o Siglas 6.1 LANASEVE: Laboratorio Nacional de Servicios Veterinarios 6.2 MC: Manual de Calidad 6.3 PN-B: Programa Nacional de Brucelosis © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada DIRECCIÓN GENERAL Programa Nacional de Brucelosis Rige a partir de: 01/04/2010 Código: PN-B-MC-PG-003 Versión 01 Página 3 de 5 6.4 PG: Procedimiento General 6.5 SENASA: Servicio Nacional de Salud Animal 6.6 CAN: Centro de Acopio 7. Descripción del procedimiento Toma de sangre 7.1 Antes de tomar las muestras, el médico veterinario oficial u oficializado tiene que revisar el registro del hato, y asegurarse que cada animal este identificado individualmente . Para este fin sigue el Procedimiento PN-B-MC-PG-001-Inspección del hato en saneamiento o PN-B-MC-PG-002Inspección del manejo de hato libre, según corresponda. 7.2 El médico veterinario oficial u oficializado identifica los animales elegibles para la toma de la muestra . En el caso que se requiera tomar muestras de un hato en saneamiento o un hato libre, los animales elegibles son los siguientes: Todos los bovinos pertenecientes al hato con más de un año de edad, excepto machos castrados. En el caso que se requiere tomar muestras de animales para la venta de los mismos: Todos animales de cualquier edad y sexo. 7.3 En el formulario SEG-PE-001-RE-007-Recepción de muestras para diagnóstico, se anota la identificación de cada animal para muestrear. Este formulario está disponible en la recepción de muestras de cada laboratorio del LANASEVE y en los centros de acopio. Los formularios también se encuentran en la página web de SENASA (www.senasa.go.cr.). 7.4 Se escribe sobre el tubo con marcador el número de tubo correspondiente y este se anota en el formulario de recepción con la identificación del animal. 7.5 Se sujeta al animal en un lugar seguro para este y la persona que ejecutará el sangrado. Cada animal se debe sangrar con una aguja estéril nueva (preferiblemente para extracción al vacío para evitar hemólisis). 7.6 El uso de una aguja estéril nueva es de alta importancia, porque el veterinario mismo puede infectar a los animales con brucelosis (infección iatrogénica)! 7.7 Se introduce el extremo externo de la aguja en la superficie ventral de la cola, a nivel del tercio proximal, en la línea media, a una profundidad de 0.5-1 pulgadas, . Otros sitios a recomendar para la toma de la muestra es la vena yugular. 7.8 (Se empuja el tubo para que se perfore el tapón de hule y el vacío se encargue de extraer la sangre.) © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada DIRECCIÓN GENERAL Programa Nacional de Brucelosis Rige a partir de: 01/04/2010 Código: PN-B-MC-PG-003 Versión 01 Página 4 de 5 7.9 En caso de que no haya salida de sangre, se puede mover la aguja de adentro hacia afuera (nunca hacia los lados) para buscar la vena. De no obtener resultados se retira primero el tubo, luego se saca la aguja y se puede intentar el procedimiento en otro espacio intervertebral, preferiblemente cambiando la aguja. 7.10 Cuando el tubo se ha llenado con al menos 3 mL de sangre (equivalente a 1.5 mL de suero), se retira y se coloca en un porta tubos o gradilla de forma vertical y nunca horizontal. Colóquelo a la sombra y déjelo reposar entre 20 minutos y 2 horas antes de refrigerar a una temperatura de no más de 2 a 8 C°, las muestras no pueden tocar hielo directamente ni congelarse, ni sol directo con el fin de evitar hemólisis. Una muestra hemolizada puede causar resultados erróneos. No utilizar tubos vencidos y preferiblemente tubos de plástico. 7.11 Para el análisis de laboratorio, se necesita de 1-2 mL de suero para cada enfermedad que se pretenda analizar. Ver documento SEG-PE-001-RE-005-Criterios de aceptación de la muestra. 7.12 Si la muestra no se entrega al laboratorio o CAM el mismo día, debe separarse el suero del coágulo por decantación. La muestra tiene que ser entregada al centro de acopio en un máximo de 3 días, o a un laboratorio oficializado en un máximo de 4 días. 7.13 La entrega de las muestras en los laboratorios oficializados solamente puede ser realizada por médicos veterinarios oficiales u oficializados o técnicos del SENASA. Estos deben cumplir las obligaciones establecidas y comunicadas por la Unidad de la Oficialización de Personas de SENASA, el contenido del Decreto Nº 34858-MAG, y de los procedimientos del Programa Nacional de Brucelosis. 7.14 El diagnostico utilizado es el ensayo Rosa de Bengala. En caso de un resultado positivo, se utiliza el ensayo ELISA competitivo como test confirmatorio. Quiere decir que un animal se considere positivo a la brucelosis si ambos ensayos resultan positivos. El tiempo de entrega de resultados y los métodos utilizados para el diagnóstico se encuentran en el SEG-PE-001-RE-004-Ensayos y métodos utilizados. 7.15 El laboratorio oficial u oficializado, sólo podrá entregar resultados positivos al veterinario oficial u oficializado o técnico de SENASA que tomó la muestra, bajo ningún motivo se entregarán resultados al propietario de los animales o a terceras personas, y deberá enviar copia de los resultados positivos al Coordinador del Programa Nacional de Brucelosis. 7.16 En el caso de que existan resultados positivos, la comunicación del reporte al funcionario que tomó la muestra debe hacerse por escrito y/o fax en las siguientes 24 horas de que se obtenga el mismo, con copia a la Dirección Regional correspondiente de SENASA. 7.17 El veterinario oficial u oficializado es responsable de informar al propietario de los resultados de laboratorio en no más de 8 días, y de efectuar el marcaje de los animales. 7.18 Si el médico veterinario oficial u oficializado determina que existe una sospecha razonable de que un hato certificado como libre de brucelosis esté infectado, ya sea por aumento en la incidencia © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada DIRECCIÓN GENERAL Programa Nacional de Brucelosis Rige a partir de: 01/04/2010 Código: PN-B-MC-PG-003 Versión 01 Página 5 de 5 de abortos, o porque hatos colindantes se encuentren infectados, o por seguimiento de denuncias que han sido presentadas en el SENASA sobre situaciones que podrían afectar la condición sanitaria del hato, podrá realizar muestreos para verificar su condición, estos muestreos pueden ser de solamente una parte del hato. Toma de tejido 7.19 Si el médico veterinario oficial u oficializado determina que existe una sospecha razonable de que un hato certificado como libre de brucelosis esté infectado, ya sea por aumento en la incidencia de abortos, podrá realizar muestreos para verificar su condición. En caso de abortos, el médico veterinario puede enviar tejidos como escrito en los puntos siguientes. 7.20 Los tejidos preferidos para el aislamiento son: cotiledones y abomaso del feto. También se pueden enviar tejidos como: secciones de placenta, líquidos fetales, bazo del feto. 7.21 Las muestras deben ser tomadas bajo las condiciones más asépticas posibles utilizando guantes, hoja de bisturí nueva, y se colocan en una bolsa nueva (preferiblemente con cierre). La muestra debe estar refrigerada con una temperatura no más de 4 C°, nunca congelada, y no debe adicionarse alcohol, formalina u otro preservante. 7.22 Se debe utilizar el formulario SEG-PE-001-RE-007-Recepción de muestras para diagnóstico. 7.23 El envío de las muestras debe hacerse al LANASEVE en el Barreal de Heredia. La recepción de la muestra debe hacerse con un máximo de 24 horas luego de haber tomado la muestra. © Documento Normativo Propiedad del SENASA, el documento vigente se encuentra en INTERNET cualquier versión impresa es una copia no controlada