Efectos de la Leche de Vaca y de Bufala Sobre la Carcinogénesis

Resumen: V-023
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDESTE
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2004
Efectos de la Leche de Vaca y de Bufala
Sobre la Carcinogénesis Experimental del Intestino Grueso en Ratas.
Montenegro, M. A. - Catuogno, M. S. - Lértora, W. J.
Guanziroli, S. M. C. - Burna, A. N. - Sánchez Negrette, M.
Patología General y Sistemática. Facultad de Ciencias Veterinarias, UNNE
Sargento Cabral 2139, Corrientes (3.400) Argentina. e-mail: [email protected].
Trabajo subsidiado por la SGCYT-UNNE.
Introducción
En los seres humanos, los tumores del intestino grueso constituyen una causa importante de morbilidad y mortalidad en
gran parte del mundo. Factores dietéticos y del medio ambiente son considerados como responsables del 85-90% de
todos los casos (2) . La relación entre el cáncer de colon y componentes de la dieta, tales como grasas, fibras vegetales,
vitaminas y otros elementos, han sido evaluados en estudios epidemiológicos, así como también en trabajos
experimentales (1,2,3,12,15) . Estudios epidemiológicos efectuados en diferentes poblaciones y experimentales en animales
de laboratorio, mantienen la hipótesis de que la cantidad de grasa y la composición de los ácidos grasos de la dieta es
uno de los factores determinantes en la carcinogénesis del colon (6,7). Trabajos realizados en seres humanos, relacionan
al cáncer intestinal, principalmente el cáncer colorectal, con la ingestión de alimentos ricos en grasa de origen animal y
escaso consumo de fibras (11,13,17,18,19). Estos resultados refuerzan los estudios realizados en poblaciones del
Mediterráneo y en esquimales, poblaciones con bajo índice de cáncer de colon y cuya principal fuente de grasa es el
aceite de oliva y el aceite de pescado que contiene omega-3 y omega-6 (10). Así en Japón, donde se consume una dieta
con bajo contenido graso, se lo relaciona con un bajo riesgo de cáncer de colon (14). En Argentina, estudios realizados
sobre pacientes con diagnóstico de cáncer de colon, demuestran la estrecha relación existente entre el consumo de
huevos y productos lácteos, principalmente el queso y el riesgo de cáncer de colon (6,7,8,9) . La leche de vaca contiene
numerosos componentes con potencial de inhibir el proceso de la carcinogénesis. Tales componentes lo constituyen la
esfingomielina, el ácido linoleico conjugado (ALC), el ácido butírico, la vitamina A y la D entre otros (4,16) . La leche de
búfala contiene el doble de grasa que la leche de vaca, además de mayor concentración de proteínas, vitamina A y
calcio. Comparativamente con la leche de vaca, los ácidos grasos presentes en la leche de búfala en mayor
concentración son: caproico, caprílico, caprico, láurico, mirístico, palmítico, esteárico, palmitoleico y linoleico; en
menor concentración se encuentran los ácidos grasos butírico, miristoleico y oleico.
El objetivo del presente trabajo consistió en determinar el efecto de la dieta láctea, utilizando leche de vaca y leche de
bufala sobre el desarrollo de neoplasias del colon en un modelo de carcinogenesis experimental en ratas, inducida con
1,2-dimetilhidrazina (DMH). El mismo forma parte de una línea de investigación en carcinogénesis experimental y
modulación nutricional que estamos desarrollando en nuestro laboratorio.
Material y métodos
Fueron utilizadas 90 ratas Wistar, de 3 meses de edad, con un peso promedio de 190 g. Las mismas fueron alojadas en
jaulas individuales en ambiente con temperatura controlada de 21ºC, con dieta ad-libitum.
La dieta láctea fue administrada como sustituto del agua y comenzó a ser ofrecida dos semanas previas a la inoculación
de la DMH, su administración continuó durante las 10 semanas de tratamiento con la droga cancerígena y finalizó dos
semanas posteriores a la última inoculación, en total las ratas recibieron leche durante 14 semanas. Ambos lotes
auplementados con leche, aceptaron sin dificultad el suministro diario de la misma.
Los tumores intestinales fueron inducidos mediante una inyección subcutánea semanal de 1,2-dimetilhidrazina (DMH)
durante 10 semanas, a la dosis de 20 mg/kg de peso corporal. La solución de DMH fue preparada con 400 mg de la
droga disuelta en 100 ml de agua destilada estéril, conteniendo 37 mg de EDTA como agente estabilizador, dicha
solución fue mantenida a pH 6,5 usando hidróxido de sodio.
Todos los animales fueron sacrificados 4 meses luego de la última inoculación de la DMH. En cada uno de los
animales el intestino grueso en su totalidad fue extraído, abierto longitudinalmente y colocado sobre una plancha de
cartón y fijado con formol bufferado al 10 % durante 24 horas. El intestino grueso fue dividido para su estudio en cuatro
segmentos: recto, colon distal, colon proximal y ciego; determinándose el número de tumores, localización, tamaño y
forma o aspecto macroscópico. Los tumores fueron clasificados según su aspecto macroscópico en Polipoide: con sus
variedades pedunculados y de base sésil y No polipoide con sus variedades planos con aspectos de placas y planoulcerado.
La composición química de ambas tipos de leches se halla en la Tabla 1.
Los animales fueron divididos al azar en un Grupo Control (sin la administración de DMH) compuesto por Lote 1 (solo
agua, n=10), Lote 2 (suplementado con leche de vaca, n=10) y Lote 3 (suplementado con leche de bufala, n=10) y un
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Grupo Experimental (inoculado con DMH) compuesto por: Lote 4 (tratado sólo con DMH, n=20), Lote 5 (tratado con
DMH + leche de vaca, n=20) y Lote 6 (tratado con DMH + leche de bufala, n=20).
El diseño experimental utilizado fue el de bloques al azar, la conformación de los lotes se efectuó al azar por
aleatorización. Se trabajó con una variable categórica " tratamiento" (DMH con leche y DMH con agua) y una variable
cuantitativa discreta "cantidad de tumores". Se realizó análisis de la varianza "test de comparación de medianas". Para
la inferencia estadística se estipuló α = 5%, por debajo de la cual se rechazó la hipótesis nula.
Tabla 1: Composición química de la leche de vaca y de búfala
Leches
Humedad (%)
Grasa(%)
Proteinas (%)
Cenizas (%)
Extracto seco total (%)
Vitamina A(U.I.)
Búfala
83,00
8,16
4,50
0,70
17,00
104,29
Vaca
88,00
3,68
3,70
0,70
12,00
62,83
Resultados
Los lotes que fueron suplementados con leche de vaca y los lotes suplementados con leche de búfala, aceptaron sin
dificultad el suministro diario de la misma, en estos animales el agua fue sustituida en forma total por leche. Con
respecto a la ganancia de peso, se observó una mayor ganancia en los animales alimentados con leche de búfala.
Al final de la experiencia se observó que el lote alimentado con leche de vaca presentó 61 tumores, lo que representó
en promedio 3,05 tumores por rata; mientras que el lote que consumió leche de búfala presentó 67 tumores, lo que
representó un promedio de 3,35 tumores por rata. El lote que recibió unicamente DMH presentó 137 tumores,
correspondiendo un promedio de 6,85 tumores por rata. En el grupo control no se observó tumores.
Los tumores macroscópicamente fueron clasificados en Polipoides sesiles, Polipoides pediculados, planos y planoulcerados. En el Grupo Experimental el tipo Polipoide sesil predominó en el lote suplementado con leche de vaca,
mientras que el tipo Plano, predominó en el lote suplementado con leche de búfala y en el lote tratado con DMH. (Tabla
2).
Con respecto a la localización de los tumores, el intestino grueso fue dividido para su estudio en cuatro segmentos o
regiones anatómicas: ciego, colon distal, colon proximal y recto; en los tres lotes del Grupo Experimental la mayor
concentración de tumores se produjo en el colon distal (Tabla 3).
En lo que respecta al tamaño, los tumores fueron agrupados en diferentes rangos: 1-5mm, 6-10mm, 11-15mm, 1620mm, y +20mm; los tres lotes del grupo experimental tuvieron la mayor concentración de tumores en el rango de 15mm (Tabla 4).
Tabla 2: Tipos macroscópicos de tumores en los tres lotes del Grupo Experimental.
Lotes
DMH
(Lote 4)
Leche vaca+DMH
(Lote 5)
Tipo macroscópico
Polipoide sesil
58 (42,33*)
26 (42,62*)
Polipoide pediculado
6 (4,32*)
15 (24,59*)
Plano
70 (51,10*)
17 (27,86*)
Plano-ulcerado
3 (2,18*)
3 (4,91*)
Total
137
61
* Corresponde al porcentaje de tumores de cada tipo sobre el total de cada lote.
Leche bufala+DMH
(Lote 6)
23
13
28
3
(34,32*)
(19,40*)
(41,79*)
(4,47*)
67
Tabla 3: Localización de tumores del Grupo Experimental en las cuatro regiones anatómicas del intestino grueso.
Lotes
DMH
(Lote 4)
Leche vaca+DMH
(Lote 5)
Localización
Recto
32 (23,35*)
7 (11,47*)
Colon distal
68 (49,63*)
28 (45,90*)
Colon proximal
15 (10,95*)
22 (36,06*)
Ciego
22 (16,05*)
4
(6,55*)
Total
137
61
* Corresponde al porcentaje de tumores de cada región sobre el total de cada lote.
Leche búfala+DMH
(Lote 6)
13
27
23
4
(19,40*)
(40,29*)
(34,32*)
(5,97*)
67
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Tabla 4:Tamaño de tumores del Grupo Experimental en cada uno de los rangos estudiados.
Lotes
DMH
(Lote 4)
Leche vaca+DMH
(Lote 5)
Leche búfala+DMH
(Lote 6)
Tamaño
1-5mm
58 (42,33*)
32 (52,45*)
57 (85,07*)
6-10mm
58 (42,33*)
22 (36,06*)
8 (11,94*)
11-15mm
17 (12,4*)
7 (11,47*)
2 (2,98*)
16-20mm
1 (0,72*)
--+ 20mm
3 (2,18*)
--Total
137
61
67
* Corresponde al porcentaje de tumores en cada uno de los rangos estudiados sobre el total de cada lote.
Discusión y Conclusiones
La prevención en la lucha contra el cáncer es una importante estrategia, en el que la alimentación juega un rol
preponderante. Alimentos provenientes de rumiantes, principalmente la leche, es una rica fuente de componentes con
potencial anticancerígeno, tales como el ácido linoléico conjugado (ALC), el ácido butírico, la esfingomielina, la
vitamina A, D y el calcio, entre otros.
Trabajos experimentales en animales de laboratorio, a los cuales se adicionó esfingomielina, presentaron una
disminución en el número de tumores del colon inducidos experimentalmente(3). El ácido butírico juega un importante
rol en la regulación del crecimiento celular, en este sentido es inhibidor de la proliferación celular y un potente inductor
de la diferenciación celular in vitro para una amplia variedad de células neoplásicas, incluyendo leucemia, linfoma, de
la glándula mamaria, colon, recto, hígado, cervix y ovario 2. Se ha observado también que la vitamina A y sus
derivados poseen acción anticancerígena en cultivos celulares y en cultivos de órganos ( 18). Por otra parte, trabajos
experimentales utilizando dietas ricas en calcio y vitamina D, disminuyeron la incidencia de cáncer de colon en ratas.
En cuanto a la actividad anticancerígena del ALC, se ha demostrado reducción del número de papilomas en un modelo
de carcinogénesis epidérmica en ratón 4; también disminución en el desarrollo de tumores gástricos, inducidos
experimentalmente con benzo(a)pirene en ratas 6 . Ip et al. (1991) en ratas alimentadas con ALC, observaron
disminución de tumores de mamas inducidos experimentalmente con dimetilbenzantraceno (DMBA).
Todos estos trabajos demuestran que ciertos componentes de la leche poseen efectos anticancerígenos en diversos
modelos experimentales; no obstante, no hemos encontrado trabajos como el presente en el que se intente determinar
los efectos de una dieta láctea sobre un modelo biológico de carcinogénesis experimental del intestino grueso,
utilizando animales de laboratorio. En la presente experiencia observamos que en ambos lotes alimentados con leche
hubo disminución en el número de neoplasias, independientemente del tipo de leche utilizada, demostrando el efecto
protector de la misma ante el desarrollo de neoplasias. Este dato por una parte, refuerza la teoría de que diversos
componentes de la dieta juegan un rol importante en el desarrollo y/o en la inhibición del cáncer de colon, tanto en
seres humanos como en animales de experimentación, por otro lado resulta importante destacar la importancia del
consumo de leche entera fresca y pasteurizada, en la cual, posiblemente se conserven los componentes con potencial de
inhibir y/o disminuir el proceso de la carcinogénesis.
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