Determinación del antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA

Universidad Nacional del Nordeste
Secretaria General de Ciencia y Técnica
COMUNICACIONES CIENTÍFICAS Y TECNOLÓGICAS 2008
Determinación del antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA) y de apoptosis en neoplasias
malignas de la glándula mamaria canina
Rosciani, Adriana S.; Merlo, Winnie A.;Ortega, Hugo H.;Insfrán, Rosa M.;Giménez, Laura; Sánchez
Negrette, Marcial.
Identificación del Plan Rol de las células mioepiteliales en tumores de la glándula mamaria canina.
de Trabajo / Proyecto:
Facultad / Instituto:
Facultad de Ciencias Veterinarias - UNNE -
Domicilio:
Sargento Cabral 2139. CP3400. Corrientes. Argentina.
Teléfono/Fax:
03783-425753
Palabras Claves:
Pcna, Apoptosis, Tumores Mamarios Caninos
- E-mail: [email protected]
RESUMEN
Los tumores mamarios constituyen las neoplasias malignas más frecuentes en la hembra canina y son llamativos por su
estructura y comportamiento biológico variables. De acuerdo a la bibliografía clásica el 30 % de los tumores extirpados
son malignos, sin embargo para otros autores el porcentaje asciende al 50% y en un reporte basado en una serie de 56
pacientes de la región nordeste argentina, el 95% correspondió a neoplasias malignas. El rango de supervivencia de las
pacientes tratadas se encuentra entre los 4 y 17 meses y debido ha ello numerosos grupos de trabajo buscan nuevas
técnicas diagnósticas que tengan valor pronóstico.
El desarrollo del cáncer es un proceso en el que no sólo interviene la desregulación de factores proliferativos y la
activación de oncogenes, sino también la desregulación de factores de inhibición del crecimiento celular y la pérdida de
función genética supresora. La regulación del equilibrio entre vida y apoptosis, aunque bastante compleja, es
fundamental en la progresión del cáncer y la respuesta al tratamiento. En oncología moderna reviste gran interés la
valoración de la cinética celular. El estudio de parámetros que reflejen las fases del ciclo en que se encuentran las
células neoplásicas, ha demostrado gran utilidad en la evaluación del comportamiento biológico de los tumores. La
estimación de la fracción de crecimiento por medio de la demostración immunohistoquímica de los llamados antígenos
nucleares asociados a proliferación como Ki-67 y PCNA ha logrado interés creciente debido a su fácil realización. Con
la finalidad de valorar esta interrelación de factores, las estrategias basadas en mediciones de laboratorio debieran
considerar: proliferación celular, apoptosis y vascularización intratumoral.
La apoptosis es un mecanismo de muerte celular programada, responsable de la eliminación de células en los tejidos
normales, pero también ocurre en contextos patológicos específicos. En el adulto, la muerte celular programada
participa en el mantenimiento del equilibrio, junto con la proliferación celular, siendo así responsables de conservar el
número de células en aquellos tejidos sometidos a un continuo recambio celular. Además constituye un mecanismo de
defensa mediante el que las células alteradas, potencialmente peligrosas, son eliminadas. En las neoplasias mamarias
malignas de la especie humana, se observa incremento de apoptosis que se relaciona con un mal pronóstico.
Reportándose resultados similares en los tumores mamarios caninos.
El antígeno nuclear de proliferación celular (PCNA) es una proteína nuclear asociada al ciclo celular. Es detectable
durante G1, S, G2 y fase M del ciclo. Comercialmente se producen anticuerpos monoclonales que reconocen no
solamente antígenos humanos sino también PCNA en tumores caninos y felinos.
El presente trabajo tiene como objetivo analizar la determinación de apoptosis y de proliferación celular en los tumores
mamarios caninos para utilizarlos posteriormente como parámetros de carácter pronóstico.
En esta oportunidad se estudiaron 54 tumores mamarios malignos. Los mismos fueron agrupados teniendo en cuenta la
última clasificación de la OMS ( Misdorp et al., 1999). Para la determinación de apoptosis se realizó, en cortes
coloreados con Hematoxilina y Eosina, un conteo de figuras apoptóticas a 400 aumentos por medio de una grilla
cuadriculada de 1 cm de lado. La inmunomarcación de PCNA se efectuó por medio de la técnica de EstreptavidinaBiotina, utilizando anticuerpos primarios monoclonales de ratón, Clon PC10 de Novocastra. El recuento de células
epiteliales positivas (a PCNA) se realizó a 400 aumentos, utilizando la misma grilla que para apoptosis. Se establecieron
los valores medios de apoptosis y PCNA para cada tipo tumoral. Posteriormente fueron analizados estadísticamente.
Los tumores estudiados se agruparon de la siguiente manera: Carcinomas Complejos (16), Carcinomas en Tumor Mixto
(16) y Carcinomas Simples (16)(siendo estos últimos los de peor pronóstico según Misdorp et al (1999)).
Los valores promedios de PCNA para los tres tipos tumorales fueron: 72,4 - 81- 83. Los de apoptosis:7,2 - 6,5 - 8,5.
El análisis estadístico reveló que no se encuentran diferencias significativas entre las medias de los tres tipos tumorales,
pero sí se observa una tendencia al aumento de imágenes de apoptosis en el grupo de los Carcinomas Simples, siendo la
tendencia similar con los recuentos medios de células epiteliales inmunomarcadas para PCNA.
11, 12 y 13 de Junio de 2008 - Campus Universitario “Deodoro Roca” - Avda. Libertad 5400 - (3400) Corrientes – Argentina.