Laboratori de Referència de Catalunya S.A. Información Clínica BANDAS MONOCLONALES EN ORINA (INMUNOFIJACION EN ORINA) INTRODUCCIÓN El análisis de orina se realiza inicialmente por electroforesis, y ante la presencia de componente monoclonal, por inmunofijación. El incremento de concentración de proteínas en orina puede ser debido a diferentes factores (afectación glomerular, con insuficiente capacidad de reabsorción de proteínas de bajo peso molecular por los tubos renales, o elevadas concentraciones séricas de una proteína determinada). El componente monoclonal no siempre está compuesto de una molécula de inmunoglobulina completa sino que, algunas veces esta representada por diferentes subunidades de inmunoglobulina, con lo que puede haber, cadenas ligeras, cadenas pesadas o moléculas mixtas. En orina las más comunes son les cadenas ligeras monoclonales (proteína de Bence-Jones) que en algunas ocasiones aparecen conjuntamente con el componente monoclonal de inmunoglobulina completa. Las proteínas de bajo peso molecular atraviesan la membrana glomerular y pueden escapar al filtrado del riñón. Las cadenas ligeras de las inmunoglobulinas (cadenas kappa y lambda) tienen un peso molecular de 20.000 ( 40.000 los dímeros), atraviesan fácilmente el glomérulo y se observan en el proteinograma en orina. La presencia de cadenas ligeras en orina no siempre es debida a un componente monoclonal, y puede ocurrir que su presencia, no esté relacionada con una patología claramente definida. Si el bajo peso molecular de estas cadenas permite que se eliminen rápidamente del suero del paciente, cuando se sospecha la existencia de un mieloma es importante realizar el estudio conjunto del componente monoclonal tanto en suero como en orina, ya que su presencia puede ser, algunas veces muy elevada (20-40 g/l) acompañándose de niveles indetectables en suero. La proteinuria de Bence-Jones es de origen pre-renal y su presencia permite detectar, incluso siendo baja, enfermedades linfoproliferativas en fases iniciales. UTILIDAD CLÍNICA La proteinuria de Bence-Jones se presenta en un 50 % de los mielomas múltiples, en amiloidosis primaria o en amiloidosis asociada a mieloma. El mieloma múltiple es una enfermedad hematológica maligna que normalmente se presenta en personas de edad, pero no se descarta que se 16/03/2009 11:23 1 © LRC SA Laboratori de Referència de Catalunya S.A. Información Clínica presente en algunos jóvenes. El diagnóstico de esta enfermedad está relacionado con un exceso de células plasmáticas en medula ósea, inmunoglobulinas monoclonales en suero i/o orina, y órganos o tejidos afectados observándose hipercalcemia, insuficiencia renal, anemia, o lesiones óseas. Dan infecciones agudas o crónicas y amiloidosis, con necesidad de transplante de medula ósea o intensa quimioterapia. En un 10 a 20 % de pacientes con mieloma múltiple, el componente monoclonal esta formado solamente por cadenas ligeras libres monoclonales (enfermedad de cadenas ligeras), fácilmente observables en orina. Las gammapatías monoclonales de significación indeterminada, en escasas ocasiones presentan proteinuria de Bence Jones. MÉTODO Inmunofijación en geles de agarosa con tampón alcalino (pH 9,1) de orinas de 24 horas, donde la muestra es sometida a seis carriles de separación electroforética y reacción posterior con antisueros específicos de inmunoglobulinas totales, cadenas ligeras kappa y lambda ligadas y libres. INTERFERENCIAS Muestras de orina que presenten altas concentraciones de sales, o de microorganismos, pueden producir interferencias. Si la concentración de proteína es muy baja puede ser necesario concentrar la orina previamente a la prueba. Si la concentración es muy alta la prueba se hará con muestra diluida. Las cadenas ligeras polimerizadas (cadenas lambda) pueden falsear los resultados, si no son previamente tratados con un agente reductor. Muestras viejas pueden tener las proteínas degradadas por acción enzimática. PROTOCOLO DE ANÀLISIS Es recomendable la valoración conjunta del proteinograma en suero y orina, y la cuantificación de las Inmunoglobulinas (4150, 4160, 4170) y cadenas ligeras tanto en suero como en orina (4175, 4177). BIBLIOGRAFIA - Rose, R N Friedman H, and Fahey JL. Manual of Clinical Immunology 3º Ed. American Society for Microbiology. Washington, D C 1986. - Blombäck B, and Hanson L A. Plasma Proteins. Ed John Wiley and Sons, 1979 - Bradwell, A R Serum Free Light Chain Analysis. 4th edition. The Binding Site Ltd 2006 16/03/2009 11:23 2 © LRC SA