PROTOZOARIOS INTESTINALES PATÓGENOS CURSO TEÓRICO-PRÁCTICO 2011 “DIAGNÓSTICO DE ENTEROPARASITOSIS HUMANAS” Prof.Agda.Dra.Ana Ma.Acuña INTRODUCCIÓN Los protozoarios son organismos unicelulares Reino Protista, subreino Protozoa eucariotas pueden reproducirse asexuada o sexuadamente movilidad variable dependiendo de sus órganos de locomoción la mayoría tienen nutrición de tipo heterótrofa (incapaces de transformar C inorgánico en C orgánico). Pueden vivir libremente o actuar como parásitos. Pueden parasitar a distintos animales y a la especie humana. EUCARIOTAS Con membrana nuclear Con nucleolo Membrana celular Con citoesqueleto Con organelos: mitocondrias, RE, Golgi, vacuolas y lisosomas Capaces de realizar endocitosis y exocitosis Con ribosomas compuestos por subunidades 40S y 60S CARACTERÍSTICAS MORFOLÓGICAS RELEVANTES NÚCLEO CROMATINA central y periférica NUCLEOLOS MEMBRANA NUCLEAR CITOPLASMA (ecto y endoplasma) VACUOLAS RE, RIBOSOMAS, GOLGI MITOCONDRIAS LISOSOMAS (contienen proteasas) ELEMENTOS DE SOSTÉN (AXOSTILO) WFB (cuerpos formadores de pared) MEMBRANA PLASMÁTICA simple o rodeada de glicocálix DISTINTAS ETAPAS BIOLÓGICAS TROFOZOÍTO: es la forma activa del protozoario, en la cual se alimenta, se reproduce, se moviliza y ejerce su acción patógena QUISTE: es la forma de resistencia (a la desecación, a los cambios de temperatura, pH, humedad, concentración de oxígeno, etc) y de transmisión (etapa infectante), y también de multiplicación OOQUISTE: proviene de la fusión de los GAMETOS, correspondiente a la etapa sexuada de reproducción, y aparece solo en algunas especies. También se denomina cigoto o cigote. FORMAS DE REPRODUCCIÓN DE LOS PROTOZOARIOS ASEXUADA FISIÓN BINARIA DIVISIÓN MÚLTIPLE BROTAMIENTO EXTERNO o plasmotomía ENDODIOGENIA: formación de 2 células hijas por brotamiento interno ESQUIZOGONIA: división del núcleo celular en gran número de núcleos secundarios que se rodean de citoplasma. MEROGONIA: produce merozoítos y esquizontes ESPOROGONIA: produce esporozoítos SEXUADA GAMETOGONIA: produce gametos y un cigoto FORMAS DE DESPLAZAMIENTO DE LOS PROTOZOARIOS SEUDÓPODOS: prolongaciones del citoplasma: LOBÓPODOS: digitiformes con ecto y endoplasma (ej. E.histolytica) FILÓPODOS: filamentosas, solo ectoplasma (ej. Acanthamoeba) FLAGELOS CILIAS COMPLEJO APICAL TAXONOMÍA Los parásitos humanos se pueden clasificar taxonomicamente en 4 Phylum basándose en sus características nucleares, de reproducción y de locomoción. REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA Sub Phylum Mastigophora Sub Phylum Sarcodina PHYLUM APICOMPLEXA (Levine 1970) Clase Sporozoa PHYLUM MICROSPORA Orden Microsporita PHYLUM CILIOPHORA Orden Trichostomatida REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA Sub Phylum Mastigophora Orden Tricomonadida Género Trichomonas -T.vaginalis Género Pentatrichomonas -P.hominis Orden Retortamonadida Género Chilomastix -Ch.mesnilii Género Retortamonas -R.intestinalis Orden Diplomonadida Género Giardia -G.lamblia (Stiles 1915) Sub Phylum Sarcodina Orden Amoebida Género Entamoeba Género Blastocystis -E.histolytica (Schaudinn 1903) -B.hominis (Zierdt, 1989) REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM APICOMPLEXA (Levine 1970) Clase Sporozoa Sub Clase Coccidia Género Isospora -I.belli Género Cryptosporidium-C.parvum Género Cyclospora -C.cayetanensis REINO PROTISTA SUB REINO PROTOZOA PHYLUM MICROSPORA Orden Microsporita Género Encephalitozoon -E.intestinalis Género Enterocytozoon -E.bieneusi PHYLUM CILIOPHORA Orden Trichostomatida Género Balantidium -B.coli (Malmsten 1857) CLASIFICACIÓN DE PROTOZOOS DE INTERÉS MÉDICO SEGÚN LOCALIZACIÓN EN EL HUÉSPED TUBO DIGESTIVO Y VÍAS GÉNITOURINARIAS PATÓGENOS PRIMARIOS GIARDIASIS AMIBIASIS TRICOMONIASIS OPORTUNISTAS EMERGENTES Giardia lamblia Entamoeba histolytica Trichomonas vaginalis Isospora belli Cryptosporidium parvum Cyclospora cayetanensis Enterocytozoon bieneusi Encephalitozoon intestinalis PATOGENICIDAD DISCUTIDA Entamoeba coli Endolimax nana Chilomastix mesnilii Iodamoeba bütschlii Blastocystis hominis Pentatrichomonas hominis ISOSPOROSIS CRIPTOSPORIDIOSIS CICLOSPOROSIS MICROSPORIDIOSIS MICROSPORIDIOSIS IMPORTANCIA DE LOS PROTOZOARIOS INTESTINALES: • • • • • • Diarrea aguda Diarrea prolongada Diarrea crónica Diarrea con deshidratación Síndrome de malabsorción Síndrome disentérico AGENTES ETIOLÓGICOS Protozoos Patógenos Giardia lamblia Entamoeba histolytica Giardia lamblia • • • • • • Flagelado intestinal con 2 formas evolutivas: Trofozoíto fijado al duodeno por discos suctorios Quiste resistente que se elimina al exterior Prevalencia: 10-20% población infantil 3% población adulta Epidemiología: cosmopolita Localización: epitelio de intestino delgado Mecanismos de adhesión: lectinas (proteínas parasitarias que se unen a azúcares de la membrana superficial de los enterocitos) vesículas periféricas con función de lisosomas Transmisión: quistes (ciclo fecal-oral) interhumana - zoonosis? Giardia lamblia Giardia lamblia: CICLO EVOLUTIVO • Patogenia de la giardiasis: Daño directo Factor mecánico (disco suctorio) Bloqueo o tapizado de la mucosa intestinal Competencia por nutrientes Factor químico (productos de excreción-secreción) Daño indirecto Factor enzimático (disacaridasas) Disminución de sales biliares Factores inmunológicos • Mecanismos de defensa intestinal Microfotografías electrónicas: trofozoítos de Giardia tapizando enterocitos y con mayor aumento enfoque de disco suctorio. DIAGNÓSTICO DE GIARDIASIS Examen coproparasitario directo, enriquecimiento y macroscópico Seriado: 3 muestras sucesivas Sondeo duodenal Biopsia de intestino delgado Coproantígenos % Parasitismo 20 Giardiasis Giardiasis Casos Niños Nuevos 10 Giardiasis Casos Niños Controlados 0 2006 2007 2008 Año Año Giardiasis Giardiasis Casos Niños Nuevos Giardiasis Casos Niños Controlados 2006 12,6 8,4 3,9 2007 14,6 10,7 3,9 2008 12,9 8,5 4,4 Grafico de tendencia comparativas Giardiasis CEI 2006-2008, Montevideo, Uruguay. Entamoeba histolytica-dispar • • • • • • Ameba con 2 formas evolutivas: Trofozoíto: vive en intestino grueso humano y puede invadir y atravesar mucosa intestinal Quiste: se elimina al exterior con las heces Prevalencia en Uruguay: 1-2% adultos y niños mayores de 5 años (95% portadores sanos u oligosintomáticos). Localización: intestino grueso Adhesión: lectinas Invasión por E. histolytica: proteasas, erosión ulceración en “botón de camisa” complicaciones extraintestinales Transmisión: quistes en heces ciclo fecal-oral (manipuladores de alimentos) Entamoeba histolytica / dispar Entamoeba histolytica: CICLO EVOLUTIVO DIAGNÓSTICO DE AMIBIASIS Coproparasitario seriado: Observado por técnico entrenado Con técnicas de enriquecimiento Con control de calidad Rectosigmoidoscopía Serología en amibiasis tisular DIFICULTADES EN EL DIAGNÓSTICO • imposible diferenciación morfológica entre las especies englobadas en el denominado “complejo Entamoeba” : E.histolytica puede causar enfermedad invasiva intestinal y extraintestinal E.dispar no ¿Interconversión entre ambas? ¿Coexistencia de ambas especies en el huésped? DEBERÍA INFORMARSE COMO E.histolytica/E.dispar NUEVAS HERRAMIENTAS DIAGNÓSTICAS TÉCNICAS INMUNOLÓGICAS: DETECCIÓN DE ANTÍGENOS EN HECES: ELISA IE CROMATOGRÁFICOS TÉCNICAS DE BIOLOGÍA MOLECULAR: PCR NUEVAS HERRAMIENTAS DIAGNÓSTICAS DETECCIÓN DE ANTICUERPOS EN SUERO O EN SALIVA: ELISA HAI + en amibiasis intestinal invasiva (75%) + en abseso hepático amebiano (90%) CONTROL DE LAS PROTOZOOSIS INTESTINALES 1. Educación en salud 2. Saneamiento adecuado 3. Tratamiento de los casos diagnosticados PROFILAXIS DE INFECCIONES POR PROTOZOOS INTESTINALES LAVADO DE MANOS Previo a la ingesta de alimentos Posterior al uso del baño Riguroso en relación con la preparación de alimentos LAVADO DE FRUTAS Y VERDURAS HIGIENE AMBIENTAL Limpieza minuciosa de mesadas y utensilios de cocina Desinfección de baños y área de cambio de pañales Lavado de pisos y áreas de juego Higiene de juguetes MUCHAS GRACIAS