¨AÑO DEL CENTENARIO DEL DESCUBRIMIENTO DE MACHHU

¨AÑO DEL CENTENARIO DEL DESCUBRIMIENTO DE MACHHU PICCHU PARA EL MUNDO¨
UNIVERSIDAD NACIONAL JOSÉ FAUSTINO
SÁNCHEZ CARRIÓN
FACULTAD DE INGENIERÍA AGRARIA,
INDUSTRIAS ALIMENTARIAS Y AMBIENTAL
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE
INGENIERÍA ZOOTÉCNICA
EFECTO DE UN INMUNOMODULADOR SOBRE
LA MASTITIS SUB CLÍNICA Y EFICIENCIA
REPRODUCTIVA EN VACAS LECHERAS
TESIS
Para optar el título profesional de
Ingeniero Zootecnista
PRESENTADO POR LOS BACHILLERES:
MARCO TULIO VIRHUEZ ESPINOZA
ENRIQUE RONALD VIDAL CHÁVEZ
ASESOR: M.V. MG. CARLOMAGNO RONALD VELÁSQUEZ VERGARA
HUACHO – PERU
2012
DEDICATORIA
Dedico esta tesis a mis padres Marco y Olga por darme vida y llenarla de
felicidad en todo momento, gracias por estar conmigo en los instantes que más
los necesite. Su constante lucha y coraje por salir adelante en la vida es
siempre un ejemplo para mi, gracias por apoyarme en cada uno de mis
proyectos pues sin su ayuda mis metas no se harían realidad. Estoy muy
orgulloso de tenerlos y el saber que sus dulces miradas observan cada paso
que doy me impulsa a dar lo mejor de mí para nunca decepcionarlos.
A mi familia en general, porque me han brindado su apoyo incondicional, por
compartir conmigo buenos y malos momentos y porque mi vida sin ustedes no
seria la misma.
Y en especial a DIOS por darme la oportunidad de tener una vida y permitirme
llegar hasta este momento, porque solo tú conoces del esfuerzo requerido para
la culminación de este trabajo, porque nunca me dejaste solo y por dejarme ser
parte de una familia maravillosa.
DEDICATORIA
A Dios.
Por haberme permitido llegar hasta este punto y haberme dado salud para
lograr mis objetivos, además de su infinita bondad y amor.
A mi madre Juana.
Por haberme apoyado en todo momento, por sus consejos, sus valores, por la
motivación constante que me ha permitido ser una persona de bien, pero más
que nada, por su amor.
A mi padre Jeremías.
Por los ejemplos de perseverancia y constancia que lo caracterizan y que me
ha infundado siempre, por el valor mostrado para salir adelante y por su amor.
AGRADECIMIENTOS
A DIOS, A LA VÍRGEN MARÍA Y A TODOS LOS ÁNGELES
A MIS PADRES MARCO Y OLGA
A MI HERMANA ADELINA Y MI CUÑADO OSCAR
A MIS SOBRINOS NATAN, FRANCO Y MARCO ANTONIO
A LA UNIVERSIDAD JOSE FAUSTINO SANCHEZ CARRION
A LA FACULTAD DE INGENIERÍA AGRARIA, INDUSTRIAS
ALIMENTARIAS Y AMBIENTAL
A LA ESCUELA DE ZOOTECNIA
A MI ASESOR DE TESIS Dr. CARLOMAGNO VELÁSQUEZ VERGARA
A LOS JURADOS, MIEMBROS INTEGRADOS POR: Ing. VICTOR TELLO,
Dr. OSCAR TORRES E Ing. GUIDO LAVALLE.
A DON CESAR CABRERA
AL ESTABLO SANTA JUANA
AL Dr. JORGE ROMANVILLE ESPEJO
AL Ing. FELIPE ORTEGA
Y A TODAS AQUELLAS PERSONAS QUE COLABORARON EN MI
FORMACIÓN PERSONAL, PROFESIONAL, EN EL TRABAJO DE
INVESTIGACIÓN Y EN MI EJERCICIO PROFESIONAL.
AGRADECIMIENTOS
A DIOS TODO PODEROSO.
A LA UNIVERSIDAD JOSE FAUSTINO SANCHEZ CARRION.
A LA FACULTA DE INGENIERÍA AGRARIA, INDUSTRIAS ALIMENTARIAS Y
AMBIENTAL.
A TODOS MIS CATEDRÁTICOS.
A MI ASESOR Dr. CARLOMAGNO VELÁSQUEZ VERGARA.
AL Dr. JORGE ROMANVILLE ESPEJO.
A DON CESAR CABRERA.
AL Ing. JAVIER VIDAL ANAYA.
A LA EMPRESA AGROPECUARIA SANTA JUANA POR SU VALIOSO.
APOYO EN LA ELABORACIÓN DE ESTA TESIS.
A MI FAMILIA POR TODO SU APOYO.
A TODAS LAS PERSONAS QUE COLABORARON CON LA
REALIZACIÓN DE ESTA TESIS.
ÍNDICE
INTRODUCCIÓN
1
I.
2
REVISIÓN DE LITERATURA
1.1 LA ESTRUCTURA HISTOLÓGICA DE LA GLÁNDULA MAMARIA 2
1.2 ORIGEN Y DINÁMICA DE LA MASTITIS
2
1.3 PÉRDIDAS ECONÓMICAS DEBIDO A MASTITIS
3
1.4 ETIOLOGÍA
4
1.4.1
Causas Determinantes de la Mastitis
4
1.4.1.1
Principales patógenos contagiosos
6
1.4.1.1.1 Staphylococcus aureus
6
1.4.1.1.2 Streptococcus agalactiae
7
1.4.1.1.3 Streptococcus dysgalactiae
8
Principales patógenos ambientales
8
1.4.1.2.1 Los coliformes
8
1.4.1.2.2 Estreptococos ambientales
9
1.4.1.2
1.4.2
Causas Predisponentes de la Mastitis
1.5 TIPOS DE MASTITIS
10
10
1.5.1
Mastitis Subclínica
10
1.5.2
Mastitis Clínica
11
1.6 CÉLULAS SOMÁTICAS
13
1.7 PATOGENIA DE LA MASTITIS
13
1.7.1
Fase de invasión
14
1.7.2
Fase de infección
15
1.7.3
Fase de inflamación
15
1.8 MÉTODOS DE DETECCIÓN DE LA MASTITIS BOVINA
16
1.8.1
Observación y palpación de la ubre
16
1.8.2
Prueba de despunte
16
1.8.3
Test de Mastitis California (CMT)
16
1.8.4
Métodos para el conteo de células somáticas
en la vaca
17
1.8.5
Conductividad eléctrica
18
1.8.6
Pruebas bacteriológicas de muestras de leche
19
1.9 MÉTODOS PARA EL CONTROL DE LA MASTITIS
19
1.10 SISTEMAS PARA EL CONTROL DE LA MASTITIS
20
1.10.1 Higiene de ordeño
20
1.10.2 Sistemas adecuados en el ordeño
21
1.10.3 Desinfectar los pezones después del ordeño
21
1.10.4 Tratamiento de secado a todos los cuartos de la vaca
22
1.10.5 Tratamiento inmediato a casos clínicos de mastitis
22
1.10.6 Eliminación de las vacas con infecciones crónicas
22
1.11 TERAPIAS CONTRA LA MASTITIS
23
1.11.1 Terapia de mastitis subclínica
23
1.11.2 Terapia de mastitis tóxica aguda
24
1.11.3 Terapia de secado
24
1.11.4 Tratamientos intramamarios
25
1.11.5 Respuesta celular somática a la terapia
26
1.11.6 Recuperación espontánea
26
1.11.7 Nuevas estrategias de tratamiento
27
1.11.8 Complemento de la terapia sistémica antimicrobiana
28
1.11.9 Drogas disponibles para el tratamiento de mastitis
28
1.11.10 Descarte
29
1.12 INMUNOMODULACIÓN
29
1.12.1 Inmunomoduladores de acción inespecífica
30
1.12.2 Inmunomoduladores de acción específica
30
1.12.3 Tipos de inmunomoduladores y acción terapéutica
30
1.13 EXTRACTO DE PROPIONIBACTERIUM GRANULOSUM Y
LIPOPOLISACARIDO DE E. COLI
33
1.14 LA MASTITIS Y SU RELACIÓN CON LA EFICIENCIA
REPRODUCTIVA Y LOS DÍAS ABIERTOS
1.15 EFICIENCIA REPRODUCTIVA DEL GANADO LECHERO
II.
34
35
1.15.1 Días abiertos
36
1.15.2 Factores de Importancia en la Eficiencia Reproductiva
37
1.15.2.1 Intervalo parto-parto
37
1.15.2.2 Porcentaje de preñez
37
1.15.2.3 Porcentaje de concepción
38
1.15.2.4 Número de servicios por concepción
38
MATERIALES Y MÉTODOS
40
2.1 LUGAR DEL ESTUDIO Y DURACIÓN DEL MISMO
40
2.2 CARACTERÍSTICAS DEL ESTABLO Y DEL MANEJO
40
2.3 MATERIALES
41
2.3.1
Animales utilizados
41
2.3.2
De campo y de escritorio
41
2.3.3
De laboratorio
41
2.4. METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN
42
2.4.1.
Tipo de investigación
42
2.4.2.
Tratamientos
42
2.4.3.
Variables en estudio
42
2.4.4.
Procedimiento
43
2.5 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
44
RESULTADOS Y DISCUCIÓN
46
3.1 RCS posterior a la aplicación de inmunomoduladores
46
3.2 Efecto del inmunomodulador sobre la tasa de concepción
48
3.3 Efecto de uninmunomodulador sobre los días abiertos
49
3.4 Efecto de los inmunomoduladores sobre la salud
49
IV.
CONCLUSIONES
51
V.
RECOMENDACIONES
52
III.
VII. BIBLIOGRAFÍA
53
VIII. ANEXOS
56
ÍNDICE DE CUADROS
Pág.
Cuadro N° 1. RCS en los días 0, 5 y 8 posterior a la aplicación
del tratamiento con inmunomodulador (T1) y con
inmunomodulador más una vacuna contra
Mastitis (T2).
46
Cuadro N° 2. Tasa de concepción y N° de servicios por concepción
en vacas holstein posterior a la aplicación
del Inmunomodulador(T1) y al Inmunomodulador
más vacuna contra mastitis (T2)
48
Cuadro N° 3. Días abiertos posterior a la aplicación del tratamiento
con Inmunomodulador (T1) e Inmunomodulador más
vacuna contra mastitis (T2)
49
Cuadro N° 4. Problemas infecciosos presentados en el grupo control,
tratamiento con inmunomodulador (T1) e inmunomodulador
más vacuna (T2)
50
INDICE DE GRÁFICOS
Pág.
Anexo N° 1. ANOVA unidireccional: RCS primer parto vs. T
62
Anexo N° 2. ANOVA unidireccional: RCS segundo parto vs. T
63
Anexo N° 3. ANOVA unidireccional: RCS tercer parto vs. T
64
Anexo N° 4. Prueba chi-cuadrada: preñez, no preñez
65
Anexo N° 5. Prueba e IC para dos proporciones. T0 vs T1
65
Anexo N° 6. Prueba e IC para dos proporciones.T0 vs T2
66
Anexo N° 7. Prueba e IC para dos proporciones: T1 vs T2
66
RESUMEN
Los inmunomoduladores son productos biológicos que estimulan el sistema
inmunológico, mejorando la respuesta de los animales frente a una infección.
La presente investigación tuvo como objetivo general evaluar el efecto de la
aplicación de un inmunomodulador sobre el Recuento de Células Somáticas
(RCS), tasa de concepción, días abiertos y presentación de problemas
sanitarios. Se realizó en el establo Santa Juana, durante los meses de
noviembre y diciembre del 2011. Se seleccionaron 90 vacas de raza Holstein
entre 15 a 45 días posparto, se dividieron al azar en tres grupos y se aplicaron
los siguientes tratamientos: T0: Control; T1: Inmunomodulador; T2: Vacuna
contra mastitis más Inmunomodulador. Los datos se evaluaron mediante
ANVA, Chi cuadrado y prueba de proporciones. El RCS evaluado en el día 8
pos
aplicación
del
(769,900±529,200)
y
inmunomodulador
en
fue:
T0
T2 (707,000±391,600)
(857,500±571,900),
sin
existir
T1
diferencias
significativas (p>0.05) entre los tratamientos. La tasa de concepción y los "días
abiertos" no fueron diferentes (p>0.05) en el T0: 26.0%, 263 días; T1: 29.2%,
235 días y; T2: 36.1%, 185 días, respectivamente. No hubo diferencias (p>0.05)
en la presentación de problemas sanitarios (Mastitis, metritis) en T0: 38.9%; T1:
33.33% y; T2: 28.57%. Se concluye, que la aplicación del inmunomodulador en
vacas entre los 15 y 45 días posparto no redujo el RCS, no mejoró la fertilidad,
ni la presentación de problemas sanitarios
Palabras claves: Inmunomodulador, vacas, mastitis, metritis, fertilidad.
ABSTRACT
Immunomodulators are biological products that stimulate the immune system,
enhancing the response of animals against infection. The present study aimed
to evaluate the overall effect of the application of an immunomodulator on
somatic cell count (SCC), conception rate, days open and presenting health
problems. Was held at the Santa Juana stable during the months of November
and December 2011. We selected 90 Holstein cows from 15 to 45 days
postpartum, were randomly divided into three groups and the following
treatments were applied; T0: Control; T1: Immunomodulator; T2: more
Immunomodulator mastitis vaccine. The data were evaluated by ANOVA, Chi
square test and proportions. The RCS evaluated on day 8 after application of
immunomodulator was: T0 (857.500 ± 571.900), T1 (769.900 ± 529.200) and
T2 (707.000 ± 391.600) without significant differences (p> 0.05) between
treatments. Conception rate and "open days" were not different (p> 0.05) at T0:
26.0%, 263 days; T1: 29.2%, 235 days; T2: 36.1%, 185 days, respectively.
There was no difference (p> 0.05) in presenting health problems (mastitis,
metritis) in T0: 38.9%; T1: 33.33% and, T2: 28.57%. We conclude that the
application of immunomodulator in cows between 15 and 45 days postpartum
did not reduce the RCS, did not improve fertility, and the presentation of health
problems
Keywords:
Immunomodulator,
cows,
mastitis,
metritis,
fertility.
INTRODUCCIÓN
En el valle de Huaura, los principales problemas sanitarios en establos lecheros
de crianza intensiva son la Mastitis y Metritis. La Mastitis subclínica tiene una
prevalencia de 47% (Velásquez y Vega, 2011); Metritis, 22% y; la tasa
promedio de abortos anual, 20% (Velásquez, 2009). Además, estas
enfermedades constituyen las principales causas de descarte y generan
importantes pérdidas económicas al productor lechero.
En los últimos años, diversos Laboratorios han introducido al mercado
productos
biológicos
que
tienen
capacidad
de
estimular
el
sistema
inmunológico, de tal manera que los animales al tener una mejor defensa,
pueden superar mejor las infecciones que padecen. Estos productos se les
conocen con el nombre genérico de inmunomoduladores.
El uso de inmunomoduladores, acelera la curación de los animales, reduce los
síntomas y mejora la fertilidad, razones más que suficientes que justifican su
uso en los establos.
Sin embargo, Investigaciones realizadas con inmunomoduladores en diversos
países, demuestran una gran variabilidad en la respuesta en el ganado bovino,
originada por el mismo producto, estado fisiológico del animal, momento de
aplicación, dosis y frecuencia, que es necesario evaluar para realizar una mejor
recomendación sobre su uso a los ganaderos.
La presente investigación tiene como objetivo general evaluar el efecto de un
inmunomodulador, aplicado en vacas lecheras a los 15 días posparto, sobre el
Recuento de Células Somáticas (RCS), tasa de concepción, días abiertos y
presentación de problemas sanitarios, en el establo Santa Juana- Irrigación
San Felipe.
1
CAPÍTULO I
REVISIÓN DE LITERATURA
1. 1 ESTRUCTURA HISTOLÓGICA DE LA GLÁNDULA MAMARIA
La ubre es un gran cuerpo glandular, el cual sirve para la nutrición del
becerro y
consta de cuatro cuartos (Wolter, Castañeda, 2004). Cada
glándula mamaria es una entidad por separado. La mitad derecha y la
mitad izquierda tienen cada una un cuarto caudal; cada mitad es casi
independiente de la otra en lo que respecta a riego, inervación y aparato
suspensorio (Frandson, 1995).
Las mamas están confundidas exteriormente y envueltas en una misma
cápsula fibrosa, no ofrecen ninguna continuidad de su tejido glandular,
contrayendo enfermedad o infección independientemente una de otra; así
mismo la forma o tamaño de cada pezón es independiente de la forma o
tamaño de la ubre (Anavitarte, 1979).
Al ocurrir el estímulo para la bajada de la leche, las células mioepiteliales
que rodean a los alvéolos se contraen y cierran extrayendo leche de los
alvéolos hacia los conductos. Entonces la leche fluirá a la cisterna de la
glándula y luego al Pezón (Blowey, 1999). La constitución anatómica de la
ubre, la expone constantemente a lesiones y agentes patológicos de
diversos orígenes (Báez, 2002; citado por Valdivieso, 2012).
1.2. ORIGEN Y DINÁMICA DE LA MASTITIS
El término mastitis se deriva de las palabras griegas “mastos”, que quiere
decir “pechos” e “Itis” que significa “inflamación de”. La mastitis es una
enfermedad compleja que puede definirse simplemente como una
inflamación de la glándula mamaria (Bedolla y Ponce de León, 2008).
2
La inflamación se caracteriza por alteraciones físicas, químicas y casi
siempre bacteriológicas de la leche y por modificaciones patológicas del
tejido glandular (Barioglio, 2001). La reacción inflamatoria tiene como
agente causal principalmente a la bacteria, éstas penetran en la ubre a
través del canal del pezón, la cisterna y los conductos galactóforos, en
otros casos a través de heridas de la piel y pezones o por el torrente
sanguíneo (Dahme,1989). Las inflamaciones tienen dos objetivos; el
primero es lograr que los mecanismos protectores de tipo inmunitario se
orienten a una región hística determinada, allí localizan y eliminan a los
invasores y la segunda prioridad es la reparación de la lesión hística, para
que la glándula vuelva a su normalidad (Tizard, 1998).
1.3 PÉRDIDAS ECONÓMICAS DEBIDO A MASTITIS
La mastitis es considerada la enfermedad que más costos ocasiona a la
producción lechera. Casi el 70 % de las pérdidas económicas son debidas
a una reducción en la producción láctea causada por infecciones
subclínicas. Esta reducción va acompañada por una alteración de la
composición láctea que produce una disminución de su calidad (Calvinho,
2005), además existe un aumento en el número de tratamientos clínicos
y desecho temprano de vacas. Por lo que se ha reconocido, durante algún
tiempo, como la enfermedad más costosa en los hatos lecheros (Sixtos,
2011; citado por Hernández y Peñuelas, 2011).
Los costos incluyen además de la disminución en la producción de leche y
descarte de la misma, trabajo adicional, consultas médicas, tratamientos y
penalidades impuestas por altos conteos de células somáticas y bacterias
o por detección de inhibidores.
3
Las pérdidas anuales mundiales debido a mastitis se calculan para el
2002 en 35 billones de dólares americanos (Wellenberg, 2002; citado por
Fuertes; 2008).
Las pérdidas en producción de leche por mastitis clínicas son mayores
cuando la enfermedad se presenta al principio de la lactancia. Si se
presenta antes del pico de lactación se puede perder hasta un 11 % en
producción, comparado con un 6 % de reducción cuando se produce la
enfermedad en cualquier otra etapa de la lactancia (Calvinho, 2005).
En los Estados Unidos esta enfermedad causa pérdidas económicas
estimadas en $ 200 por vaca por año (Smith y Hogan, 2001; citado por
Bascuñan, 2010).
En Europa un estudio realizado en Noruega entre el 2003 y 2004, con una
población de 270,000 vacas lecheras, determinó que las pérdidas por
mastitis se estimaron en 23.5 millones de euros (0.016 euros por litro de
leche). Dichas pérdidas correspondieron al 4% del valor comercial de la
leche a nivel de granja (Osteras, 2006; citado por Bedolla y Ponce de
León, 2008).
1.4 ETIOLOGÍA
Zurita (1987) menciona que la etiología de la mastitis puede agruparse en
dos grandes causas: determinantes y predisponentes.
1.4.1
Causas Determinantes de la Mastitis
Los microorganismos causantes de
clasificados
en: patógenos
la mastitis han sido
contagiosos y ambientales, de
acuerdo con sus características de distribución e interacción con
el pezón.
4
Los patógenos contagiosos viven y se multiplican en la glándula
mamaria y la piel del pezón, transmitiéndose de animal a animal
especialmente durante el ordeño (Calvinho, 2005), los principales
son:
Staphylococcus
aureus,
Streptococcus
agalactiae
y
Streptococcus disgalactyae.
Los patógenos ambientales son aquellos cuyo reservorio primario
es el lugar donde viven las vacas. Estos organismos constituyen
un grupo heterogéneo de géneros y especies bacterianas, siendo
los más frecuentemente aislados los estreptococos y las bacterias
coliformes (Calvinho, 2005). Su hábitat no son las glándulas
mamarias, sino que son del medio ambiente o corporal.
Mientras los patógenos contagiosos son transmitidos por vacas
infectadas durante el proceso de ordeño, los patógenos
ambientales son encontrados en el ambiente de la vaca (heces
fecales, cama de los establos, alimentos, polvo, suelo, agua y
material vegetal), por lo que la transmisión ocurre generalmente
en el intervalo entre ordeños, pudiendo ocurrir también durante el
contacto ambiental de los pezones en el momento del ordeño; por
tales motivos se dice que la transmisión se realiza de ambiente a
vaca. Por lo tanto, los métodos de control desarrollados para la
mastitis contagiosa, no son efectivos contra los patógenos
ambientales (National Mastitis Council, 1997)
5
1.4.1.1 Principales patógenos contagiosos
1.4.1.1.1 Staphylococcus aureus
Este microorganismo es causa común de infecciones
subclínicas y no tanto de clínicas, responde mal a la
terapia antibiótica (Andrews, 2005); las bacterias se
adhieren a las células epiteliales de las glándulas
mamarias y crecen formando colonias envueltas en una
matriz extracelular constituyendo un biofilm, este biofilm
no
puede
ser
fagocitado
por
neutrofilos
polimorfonucleares o macrófagos (Prenafeta, 2011), una
vez instaurada la infección resulta sumamente difícil
eliminarla (Blowey, 1999).
Los microorganismos colonizan la piel del pezón y el
canal del pezón aumentando las probabilidades de
infecciones intramamarias (Quinn, 2005), en mastitis
estafilocócicas
crónicas
o
subclínicas
ocurren
excreciones de bacterias desde cuarterones infectados y
recuento celular elevado. La multiplicación de bacterias
ocurre en los conductos galactóforos y en menor medida
en los anchis glandulares. La inflamación ocasiona
obstrucción de conductos y la atrofia de los acinis
asociados con aquellos (Quinn, 2005).
Los Staphylococcus aureus producen toxinas que al ser
excretadas al exterior se denominan exotoxinas y si se
quedan fijas a las bacterias son llamadas endotoxinas.
6
Jawetz (2002) clasifica a las toxinas de Staphylococcus
aureus de la siguiente manera:
 Leucocidinas:
pueden
matar
leucocitos,
polimorfonucleares, macrófagos.
 Hemolisinas: pueden causar lisis de eritrocitos y dañar
las plaquetas. Forman poros en las membranas de los
hematíes haciendo que estallen.
 Exfoliatinas:
producen
descamación
de
la
piel,
mediante la ruptura de las capas más superficiales.
 Enterotoxinas: son termoestables (resisten la ebullición
durante 30 minutos), son causas importantes de
intoxicación
alimenticia
(causas
gastroentericas),
estimulan el vómito, provocan peristaltismo intestinal.
1.4.1.1.2 Streptococcus agalactiae
Se presenta generalmente en infecciones subclínicas y
también clínicas, aunque rara vez producirá una
enfermedad severa, pero un daño fuerte en el cuarto
puede convertirlo en improductivo (Rebhun, 1999).
Este organismo vive en la ubre de la vaca y sobrevive
solo un corto periodo de tiempo fuera de la glándula
mamaria, principalmente se esparce durante el ordeño
por
medio
de
la
maquina
de
ordeño,
manos
contaminadas del ordeñador y material utilizado para
lavar la ubre (Galicia de León, 2004).
7
En vacas infectadas de forma individual la pérdida de
producción será de un 25% durante la lactación y en
rebaños infectados la pérdida de productividad estará
entre 10 a 15% (Blood y Radostitis, 1992).
1.4.1.1.3 Streptococcus dysgalactiae
El Streptococcus dysgalactiae presenta características
de patógeno contagioso, sin embargo, en algunos
trabajos se clasifica como un patógeno ambiental,
debido a que epidemiológicamente se comporta como
patógeno contagioso en algunos rebaños y como
ambiental
en
otros.
Normalmente
las
infecciones
subclínicas desarrollan rápidamente un cuadro clínico,
razón por la cual la mayoría de las infecciones son
tratadas de inmediato y eliminadas (Osorio, 2010).
1.4.1.2 Principales patógenos ambientales
Entre los principales patógenos ambientales tenemos a los
Coliformes y los Estreptococos ambientales.
1.4.1.2.1 Los coliformes
Coliformes es el nombre que señala a una serie de
patógenos de la familia Enterobacteriaceae, que incluye
principalmente al género Escherichia coli, éstos son
microorganismos gram
negativos generalmente
de
presentación ligeramente aguda y ocasionalmente con
cuadros de mastitis severamente agudos.
8
Los coliformes son los agentes secundarios productores
de mastitis más importantes en muchos hatos. La
patogenia por coliformes se atribuye a efectos de
endotoxinas,
lesiones
por
endotoxinas
en
la
microvascularización de las paredes alveolares y en el
tejido intersticial de la glándula mamaria, provocan
hiperemia hemorrágica y edema del cuarterón afectado.
Los coliformes no invaden los tejidos y si las vacas
sobreviven a los efectos de las endotoxinas los
cuarterones
afectados
recuperan
parcialmente
su
producción (Quinn, 2005).
Está comprobado que la infección por E. coli aparece
más que todo en cuartos con conteos de células
somáticas bajos (Mensies, 2000; citado por Quinn,
2005).
A diferencia de las bacterias descritas previamente, los
coliformes no se adhieren a los conductos y al alvéolo de
la ubre, en lugar de ello se multiplican rápidamente en la
leche y producen toxinas que son absorbidas dentro del
torrente circulatorio. Como resultado, las infecciones por
coliformes conducen a mastitis clínicas agudas (Correa,
2001).
1.4.1.2.2 Estreptococos ambientales
Existen varias especies de Estreptococcus en el
ambiente de la vaca y entre
los más comúnmente
9
aislados en los casos de mastitis tenemos: S. uberis, S.
bovis, S. faecalis S. equinus y otras especies de
Streptococcus.
Por lo general la sintomatología de los Estreptococcus
es de aguda a leve, aparición clínica con edema leve,
con poco dolor, forma tapones y altera el funcionamiento
de la glándula. Por lo general suelen aparecer al primer
ordeño.
Los signos de mastitis por Estreptococcus ambientales
son:
- Muchas vacas con mastitis al inicio del secado
- Vacas con mastitis en el momento del parto
- Mastitis durante los primeros 30-60 días de lactación,
incluso con el tratamiento (Rinbaud, 2005).
1.4.2
Causas Predisponentes de la Mastitis
a) Factores climáticos.
b) Condiciones en la estabulación.
c) Factores nutricionales.
d) Higiene.
e) Máquina de ordeño.
1.5 TIPOS DE MASTITIS
1.5.1
Mastitis Subclínica
La mastitis subclínica es definida como la presencia de un
microorganismo en combinación con un conteo elevado de células
somáticas en leche (De Mool, 2000; citado por Bedolla, 2011).
10
La mastitis subclínica no se puede detectar a simple vista ni en la
vaca ni en la leche, la vaca parece saludable, las ubres no
muestran ninguna inflamación y la leche tiene apariencia normal,
pero los microorganismos infecciosos y las células somáticas se
encuentran elevados en la leche (Sánchez, 2003).
Pinzón (1989) menciona que la mastitis subclínica es considerada
la más importante por diversas razones, como las siguientes:
Es de 15 a 40 veces más común que la mastitis clínica,
generalmente precede a la forma clínica -por lo tanto, si queremos
controlar la forma clínica, debemos empezar por controlar la
subclínica-, es de larga duración, es difícil de detectar, disminuye
la producción de leche, influye negativamente en la calidad de la
leche, provoca infección en otros animales del rebaño.
El Manual Merck (2000), indica que los casos de mastitis
subclínica pueden
ser
comprobados
mediante una de
las
siguientes pruebas: Test de Mastitis California, prueba de Mastitis
Wisconsin y los contadores celulares electrónicos.
Loor (1999), citado por Valera (2004), señala que el número de
células somáticas en leche, indicativo de la respuesta inflamatoria,
se encuentra elevado al igual que el número de bacterias. Lo que
va acompañado de una disminución del nivel de producción de la
secreción láctea, así como de la alteración de la composición de
dicho producto.
11
1.5.2 Mastitis Clínica
En las infecciones clínicas el cuarto infectado estará inflamado,
existiendo anormalidades visibles en la ubre o en la leche
(Sánchez, 2003).
Las formas clínicas de mastitis se clasifican de acuerdo a su
severidad y duración, dividiéndose en sub agudos, agudos, súper
agudos y crónicos (Sumano López, 1996).
En los casos sub agudos no se reconocen signos sistémicos. Los
cambios de secreción de la glándula mamaria son evidentes,
como grumos, escamas o secreciones descoloridas.
Los casos de mastitis aguda se caracterizan por: presencia de
inflamación, enrojecimiento, hinchazón, dolor, endurecimiento,
leche anormal y reducción en la producción, acompañado de
fiebre leve o moderada y depresión moderada, también hay faltas
de apetito.
Los
súper
agudos
ocasionarán
un
repentino
ataque
de
inflamación e incluyen los síntomas ya dichos, pero además los
casos súper agudos presentan anorexia, pérdida de peso,
deshidratación, debilidad, pulso y respiración agitada, pérdida de
coordinación muscular, extremidades frías, falta de reflejo en las
pupilas (Sumano López, 1996).
En la forma crónica la infección tiene más de 5 días, toda la leche
sale con tolondrones, la ubre está severamente inflamada y
caliente (Cano, 2006), cuando no se conoce la historia clínica no
hay una distinción definida entre mastitis aguda y crónica, los
12
casos agudos pueden persistir lo suficiente para convertirse en
crónica. La mastitis crónica a menudo es acompañada de
endurecimiento de la glándula y la cisterna, el edema tisular
también puede estar presente, pero lo más característico es la
continua o intermitente apariencia de leche acuosa y hojuelas,
grumos, tolondrones, coágulos y fibriones en los primeros chorros
de leche. En la mastitis crónica por Estreptococcus agalactiae el
tejido cicatrizal en la cisterna es característico (Gasque, 2008).
1.6 CÉLULAS SOMÁTICAS
La leche contiene -en condiciones normales- células denominadas
epiteliales que proceden de la descamación de las glándulas. Pero en su
mayor parte son leucocitos que están en la leche asumiendo un papel
defensivo (Buxade, 2002), la combinación de leucocitos y células
epiteliales forman a las células somáticas. Los leucocitos constituyen del
98 al 99% del total (Blowey, 1999).
Si aparece una infección o se hiere el tejido de la ubre los mecanismos de
defensa envían a los leucocitos que se acumulan en la leche con el
objetivo de liquidar bacterias. Si el objetivo es alcanzado y la infección
liquidada entonces los recuentos celulares descienden a la normalidad, de
lo contrario aparece una infección subclínica (Blowey, 1999).
1.7 PATOGENIA DE LA MASTITIS
En primer lugar ocurre invasión en el conducto del pezón creando una
colonia y desplazándose hacia el seno del mismo, el canal del pezón es la
principal barrera contra los microorganismos que causan mastitis
(Gasque, 2008).
13
Así mismo Ordoñez (2004) explica que durante la invasión el
microorganismo atraviesa las tres capas del pezón, las cuales son el
Epitelio escamoso estratificado, la queratina y el esmegma que es la más
resistente. Buxade (2002) dice que si los mecanismos de defensa de la
ubre fallaran las bacterias encontrarían un medio ideal para su
crecimiento.
En la etapa de infección los gérmenes podrían ser detenidos por las
células somáticas que son la segunda línea de defensa de la vaca. Si esto
ocurre la infección se detiene, si no es así los gérmenes proliferan en las
cisternas de la ubre e invaden el tejido mamario, esto sumado al daño
causado al tejido creará una inflamación (Gasque, 2008), una vez
producido la inflamación aparece la mastitis clínica en la que aumentan
notablemente los recuentos de leucocitos en la leche ordeñada (Blood y
Radostitis, 1992).
La patogenia según Blood y Radostitis (1992) se divide en tres fases:
1.7.1
Fase de invasión.1) Presencia y densidad de población de las bacterias en el
medio, la tasa de infección del cuarterón y el grado de
contaminación de la piel de los pezones se utiliza como índice
de este factor.
2) La frecuencia con que los pezones se hallan contaminados
con bacterias depende mucho de la higiene del ordeño.
3) El grado de lesión de los esfínteres del pezón facilitará la
entrada de bacterias al conducto glandular, por eso es
14
importante el diseño de la maquina de ordeño y el uso
apropiado de la misma.
4) El tono del esfínter de los pezones, especialmente después
del ordeño cuando dicho esfínter se halla relajado. La
debilidad del esfínter facilita la invasión permitiendo aspiración
y crecimiento bacteriano en el pezón.
5) Presencia de sustancias antibacterianas en el conducto
glandular.
1.7.2
Fase de infección.6) Tipo de bacterias y su capacidad de multiplicarse en la leche y
adherirse al epitelio mamario.
7) Susceptibilidad de la bacteria al antibiótico que se emplee
normalmente. Esto depende de la resistencia natural o
adquirida de la utilización inadecuada de los antibióticos.
8) Presencia de sustancias protectoras en la leche. Las
sustancias inmunitarias pueden ser naturales o hallarse en la
leche a consecuencia de infección previa o de vacunación.
9) Leucocitos inintenso preexistente, consecutiva a mastitis
intercurrente o a traumatismo físico.
10) Etapa de lactación, la infección se produce más fácilmente en
el período de secado o debido a la ausencia de flujo físico. Si
bien se acepta este concepto, un análisis cuidadoso sugiere
que la susceptibilidad es alta en el período de secado aunque
mucho menos en el cuarterón glandular que ha permanecido
seco durante algún tiempo.
15
1.7.3
Fase de inflamación.La patogenicidad y capacidad invasora de los tejidos varía entre
las bacterias, ejemplo: los estreptococos causan pocos cambios
patológicos en las células secretoras, en tanto que estafilococos
producen cambios degenerativos microscópicos.
La susceptibilidad de los tejidos mamarios a las bacterias varía
desde gran resistencia por la presencia de un anticuerpo tisular
fijo, hasta hipersensibilidad como resultado de infección previa
(Blood y Radostitis, 1992).
1.8 MÉTODOS DE DETECCIÓN DE LA MASTITIS BOVINA
1.8.1
Observación y palpación de la ubre.Los signos de mastitis se detectan mejor luego del ordeño cuando
la ubre está vacía, se examina la posible existencia de cuartos
inflamados, calientes, endurecimiento, temperatura elevada y
dolor (Sánchez, 2003).
1.8.2
Prueba de despunte.La detección de mastitis se produce casi siempre al examinar los
primeros chorros de leche; al respecto Chávez (2007) indica que
esta maniobra contribuirá a la bajada de la leche permitiendo
además un diagnóstico precoz de la mastitis clínica e identificando
animales que requieren una atención especial. Esta acción puede
realizarse sobre el piso limpio o sobre una jarra de fondo negro.
Las anormalidades frecuentes son: decoloración de leche,
presencia de grumos, sangre o pus.
16
1.8.3
Test de Mastitis California (CMT).Esta prueba mide el grado de coagulación al mezclarse la leche
de vaca con reactivos (Andrews, 2005). Los resultados dependen
del número de leucocitos (WBC) nucleados existentes en la leche.
Basados en la cantidad de gelificación cuando reaccionan
volúmenes iguales de leche y reactivo Alfil Aril Sulfonato, el cual
reacciona con el ácido desoxirribonucleico (DNA) contenido en los
leucocitos detectando mastitis clínica y subclínica (Galicia de
León, 2004), la prueba se leerá subjetivamente como: negativo,
indicio,+1,+2,+3. Estas puntuaciones equivalen a los niveles de
células somáticas que se encuentren en la leche. Es útil para
detectar mastitis subclínica (Rebhun, 1999)
1.8.4
Métodos para el conteo de células somáticas en la vaca.Los recuentos de células somáticas son comunes en la industria
láctea, ya que miden la calidad de la leche. En el establo se utiliza
como indicador de las infecciones.
Actualmente existe el contador electrónico para realizar recuentos
celulares de vacas en lactancia (Blodd y Radostitis, 1992), este
conteo se hace con la mezcla total de leche de todos los cuartos
en cada vaca, por lo general cada mes (Philpot, 2001). Los
recuentos inferiores a 250,000 células por ml. indicarán que la
vaca no tiene infecciones o alguna inflamación, si los recuentos
superan esta cantidad las posibilidades de infección son mayores
(Blood y Radostitis, 1992). Una razón de conteos ligeramente
altos en vacas no infectadas es que algunas tuvieron una
17
infección previa de la cual no se han recuperado totalmente
(Philpot, 2001; citado por Hernández 2008).
Para reconocer la mastitis a nivel del hato se realiza un estudio
del recuento total de células somáticas, del total de bacterias y los
tipos de bacterias en el tanque. En algunos países un recuento de
células de leche del tanque que supera los 300,000/ml. indica
mastitis en el rebaño, entonces se plasmará un examen individual;
sin embargo en algunos hatos conteos de 300,000 células o
menos son comunes, el nivel de 200,000 células es prácticamente
una meta (Blood y Radostitis, 1992).
La asociación de recuentos de células somáticas del tanque con
recuentos bacterianos en placa y con cultivos de leche de mezcla
del tanque añade mas información pero en caso de mastitis la
información de cada una de las vacas es esencial (Rebhun,
1999).
1.8.5
Conductividad eléctrica.La prueba de conductividad eléctrica se fundamenta en el
aumento de iones de sodio y cloro a consecuencia de una lesión
del tejido glandular, los cuales aumentan la conductividad
eléctrica (Cotrino, 2003); este método confía en los diferentes
niveles de concentración de sal entre los cuartos infectados y los
sanos de la misma vaca. Las bacterias infecciosas aumentan el
sodio y cloro en la leche mientras disminuye los iones de calcio y
lactosa. El sodio y el cloro aumentan en los cuartos inflamados
porque salen de la sangre durante la inflamación (FMVZ-USAC,
18
2012). La prueba se realiza bien con equipo de laboratorio o al
lado de la vaca (Andrews, 2005).
1.8.6
Pruebas bacteriológicos de muestras de leche.En las pruebas bacteriológicas se realiza el cultivo, identificación y
sensibilidad antibiótica de la bacteria causante de mastitis
(Andrews,
2005);
esta
prueba
se
desarrolla
en
vacas
seleccionadas para las que los conteos de células somáticas de
muestras compuestas revelan un problema persistente serio
(Wattiaux,
2011).
Para
la
investigación
inicial,
pequeñas
cantidades de leche se extienden sobre la placa con agar sangre
y se incuban a 37º c. durante 48 horas. Los patógenos de mastitis
son identificados según el aspecto de las colonias, la leche de un
cuarterón no infectado no muestra crecimiento bacteriano
(Andrews, 2005). Muchas veces el extremo del pezón está
contaminado masivamente por una serie de bacterias ambientales
pero no son necesariamente la causa de mastitis (Blowey, 1999).
1.9 MÉTODOS PARA EL CONTROL DE LA MASTITIS
Por lo general un método de control debe ser económico, práctico y
efectivo, orientándose a la disminución de nuevas infecciones, así como
destruir las infecciones que estén presentes en el hato (Phillips, 1988). El
tratamiento exitoso de las infecciones existentes tiene su efecto en la
duración de la misma, pero tiene un efecto también sobre la tasa de
nuevas infecciones porque disminuye la prevalencia de cuartos infectados
en el hato completo. Cualquier programa de control indicará la temprana
detección y el tratamiento inmediato de casos clínicos. Los requerimientos
19
de leche de alta calidad, principalmente en lo referente a conteos de
células somáticas han incrementado el enfoque a la mastitis subclínica.
Esto ha creado herramientas de manejo para identificar las infecciones
subclínicas. El identificar estas infecciones, evaluar el caso y cuando sea
apropiado eliminar esas infecciones, ya sea por tratamiento o a través de
desecho de la vaca infectada son procedimientos que deberían formar
parte de cualquier programa de control de mastitis (Biggs, 2009).
1.10 SISTEMAS PARA EL CONTROL DE LA MASTITIS
Un sistema adecuado se puede sub dividir en:
1- Reducir reservorios de infección, ósea mantener el ambiente lo más
limpio posible y reducir el número de vacas portadoras de organismo
infeccioso.
2- Controlar la propagación por vectores.Medida importantísima en caso
de organismos contagiosos.
3- Mantener los pezones y los extremos de los pezones en buen estado,
es esencial en el control de mastitis y esto es influido por el buen
funcionamiento de la ordeñadora mecánica (Blowey, 1999).
Dentro de los puntos más importantes para un buen control de la mastitis
podemos citar los siguientes:
1.10.1 Higiene de ordeño.Las infecciones se pueden reducir al mínimo mediante la higiene
apropiada antes, durante y después del ordeño.
La higiene pre ordeño incluye limpieza de pezones con agua
limpia
con
o
sin
agentes
higienizantes,
luego
secarse
completamente el tejido mojado con toallas desechables. Una
20
alternativa
es
el
presellado
con
una
solución
yodada,
seguidamente los pezones se secan para evitar que el germicida
pase a la leche (Rebhun, 1999).
Para reducir los riesgos de infección es necesario realizar una
buena rutina de ordeño extremando las medidas de higiene y
evitando los factores predisponentes por el inadecuado uso de la
máquina de ordeño (Kruze, 1998).
1.10.2 Sistemas adecuados en el ordeño.Al
iniciar
la
ordeña
se
observará
constantemente
el
funcionamiento de las pezoneras, constatando que estén bien
agitadas para que no entre aire al sistema. El exceso de vacio
(sobre 15 pulgadas de Hg) es causa de “trepación” de las
pezoneras produciendo decoloración de los pezones o heridas en
la punta del pezón.
Antes de retirar las unidades de ordeño se cortará el vacío, esto
se hace justo cuando termina de ordeñar el último cuarto (Kruze,
1998).
1.10.3 Desinfectar los pezones después del ordeño.Desinfectar los pezones al término de la ordeña con una solución
desinfectante segura y eficaz. Inmediatamente después de
finalizada la ordeña y retiradas las pezoneras, se deben
desinfectar todos los pezones con una solución desinfectante
apropiada y de eficacia probada. Existen numerosas evidencias
en diferentes países que la desinfección de pezones postordeña,
21
práctica conocida como "dipping", es capaz de reducir las
neoinfecciones
intramamarias
causadas
por
patógenos
contagiosos entre 50-90%, constituyendo la medida higiénica
individual más importante de un programa de control (Bramley,
1981; citado por Kruze, 1998).
1.10.4 Tratamiento de secado a todos los cuartos de la vaca.El uso de un antibiótico a largo plazo en los cuartos de la ubre en
el último ordeño de la lactancia reducirá la incidencia de nuevas
infecciones durante el periodo de seca. Además, la terapia de
secado de las vacas es la mejor forma de curar las mastitis
crónicas y subclínicas que durante la lactancia son tratadas muy
rara vez (Wattiaux, 2011), este método es el más eficaz contra la
implantación de bacterias (Smith, 1976; citado por Phillips, 1998).
1.10.5 Tratamiento inmediato a casos clínicos de mastitis.Al presentarse mastitis clínica debe tratarse inmediatamente con
una terapia adecuada, esto evitará la diseminación de la
enfermedad en el resto de animales (Wattiaux, 2011); mientras
que los casos de mastitis subclínica no deben tratarse durante la
lactancia sino al momento de la seca salvo que el hato tenga
prevalencia
de
infecciones
por
Streptococus
agalactiae
(Andresen, 2001).
1.10.6 Eliminación de las vacas con infecciones crónicas.El descarte de vacas con infecciones crónicas es efectivo debido
a que en la mayoría de hatos, solo 6 a 8% de todas las vacas son
responsables de 40 a 50% de todos los casos de mastitis
22
(Wattiaux, 2011); además las investigaciones revelan que el 64%
de las vacas que han tenido 2 casos de mastitis en la corriente
lactancia tendrán otro episodio clínico antes del final de la misma,
esta cifra aumenta a 70% para vacas que han tenido 3 casos
clínicos (Sthepen C. Nickerson, 2010).
1.11 TERAPIAS CONTRA LA MASTITIS
Según Nickerson (2010), los objetivos estándares de una
terapia
antimicrobiana deben incluir los siguientes puntos:
- retorno de la vaca a la producción y composición normal de la leche.
- prevenir la mortalidad en casos peragudos.
- eliminar los microorganismos infecciosos.
- prevenir nuevas infecciones, especialmente en el período seco.
- prevenir residuos de droga en leche y carne.
- evitar que los casos existentes empeoren.
- minimizar el daño a los tejidos secretores.
- reducir la diseminación de infecciones existentes a otras vacas.
- mejorar la sanidad total del rodeo.
En general los tratamientos contra la mastitis son muy variados y se llevan
a cabo según el caso, así tenemos los siguientes:
1.11.1 Terapia de mastitis subclínica.Generalmente existen de 15 a 40 casos subclínicos por cada caso
clínico. Un axioma es que los casos de mastitis subclínica no
deben tratarse durante la lactancia sino al momento de la seca,
salvo que el porcentaje de vacas infectadas sea alto (Wattiaux,
2011) o cuando el Streptococus agalactiae esté presente, la tasa
23
de curación contra Streptococus agalactiae está en el rango de 90
a 95% (Sthepen C. Nickerson, 2010).
1.11.2 Terapia de mastitis tóxica aguda.La mastitis aguda especialmente causada por coliformes pone en
peligro la vida de la vaca. Si ésta muestra síntomas de infección
en la ubre o incapacidad de pararse, pulso acelerado, fiebre,
entonces se llama un profesional en la materia (Wattiaux, 2011).
El ordeño del cuarto afectado cada 3 a 4 horas ayudará a eliminar
toxinas (Sánchez, 2003). La terapia se dirigirá primariamente
contra la endotoxina, ésta eventualmente logrará alcanzar el
torrente sanguíneo y causará los síntomas arriba mencionados
incluyendo el shock. Muchos programas de manejo indican la
administración cuidadosa de antibióticos, grandes volúmenes de
fluidos
y
electrolitos,
agentes
antiinflamatorios,
glucosa,
bicarbonato y calcio (Nickerson, 2010).
1.11.3 Terapia de secado.Este es el momento ideal para tratar las mastitis subclínica con la
infusión intramamaria de antibióticos de liberación lenta. Los
tratamientos de secado curan por lo general cerca del 50% de
mastitis por Staphilococus aureus y 80% de Streptococus
ambientales (Wattiaux, 2011).
En hatos con niveles altos de Staphylococcus aureus es
recomendable aplicar antibiótico parenteral al secado, así como
antibiótico parenteral dos semanas antes del parto, esto
aumentará el margen de curación (A. Biggs, 2009).
24
Blowey (1999) argumenta que las ventajas de la terapia de las
vacas secas son las siguientes:
- No se desecha la leche.
- La respuesta aumentada se produce porque pueden ser
infundidas en el cuarterón, dosis más elevadas de antibióticos
sin preocuparse del periodo de retiro de leche.
- Se utiliza preparados de antibióticos de actividad prolongada
para mayor eficacia.
1.11.4 Tratamientos intramamarios.El tratamiento intramamario a través del pezón es de gran utilidad
en las mastitis. Los tubos desechables que contienen fármacos
adecuados, con una base de pomadas hidrosolubles se adaptan
bien para el empleo en casos clínicos y casos individuales. Las
infusiones acuosas también son aconsejables por su bajo costo y
están indicados cuando se tratan gran número de cuarterones
(Blood y Radostitis, 1992). El compartimiento principal donde
permanece el antibiótico es en los alvéolos de la glándula
mamaria. Las bacterias que se quedan allí y que no invaden las
células epiteliales como en el caso del Streptococus agalactiae
suelen sucumbir a los antibióticos aplicados vía intramamaria.
Pero existen bacterias que sí invaden las células epiteliales o
cuando existe presencia de fibrina y formación de microabsesos,
entonces la tasa de curación bajará ya que el antibiótico no acaba
25
de entrar en contacto directo con la bacteria. Esto se da en
infección por Staphilococus aureus (Martín Richard, 2010).
1.11.5 Respuesta celular somática a la terapia.Una verdadera curación es la eliminación de todos los
microorganismos del cuarto previamente infectado por al menos
un período de tres semanas. El tiempo requerido después del
tratamiento exitoso para que el SCC descienda substancialmente
depende de la cantidad de tejido dañado que resulte de la
infección.
El
rango
variará
de
unos
pocos
días
para
microorganismos tales como Streptococcus agalactiae a unos
pocos meses o incluso hasta la próxima lactancia para algunas
infecciones por Staphylococcus aureus.
Algunos cuartos
quedarán permanentemente dañados como resultado de la
infección y producirán leche con un elevado SCC indefinidamente.
1.11.6 Recuperación espontánea.La recuperación espontánea es el término utilizado cuando la
vaca
se
cura
por
sí
misma
de
una
infección.
Según
investigaciones esto ocurre sólo en 20% de infecciones
confirmadas. La mayoría de recuperaciones son en cuartos con
infecciones
leves,
pero
raramente
en
infecciones
bien
establecidas o crónicas. Al ocurrir la infección el sistema inmune
de la vaca intenta eliminar los microorganismos infectantes.
Ejemplo: los leucocitos se mueven de la sangre a la leche y su
actividad microbiana se incrementa, con ayuda de anticuerpos del
torrente sanguíneo tratarán de sobreponerse a la infección por
26
engolfamiento y destrucción de microorganismos infecciosos. La
recuperación espontánea es mejorada en vacas vacunadas contra
bacterias especificas (S. Nickerson, 2010).
1.11.7 Nuevas estrategias de tratamiento.Nuevas estrategias de tratamiento son necesarias para mejorar
las tasas de curación para mastitis existentes y reducir las
incidencias de nuevas infecciones. La falta de éxito contra
infecciones crónicas causadas principalmente por Staphilococus
aureus ha estimulado la reevaluación de estrategias de
tratamiento.
Las infecciones son frecuentemente refractarias a la terapia
intramamaria debido a la inaccesibilidad de los microorganismos
producida por el tejido cicatrizal, inflamación y bloqueo de
conductos lácteos. El método terapéutico más efectivo puede ser
la administración sistémica para alcanzar áreas profundas de
tejido infectado debido a que los antibióticos pueden moverse de
la sangre al tejido mamario cuando se combina con la infusión
intramamaria.
Otros métodos de tratamiento investigados son:
1) Terapia combinada, con la cual las vacas son tratadas
simultáneamente
en
la
ubre,
como
así
también
sistemáticamente con drogas compatibles.
2) Terapia extendida, en la cual los cuartos infectados son
tratados por un período largo (Stephen C. Nickerson, 2010).
27
1.11.8 Complemento de la terapia sistémica antimicrobiana.El complemento de la terapia sistémica antimicrobiana tiene por
objetivo bajar la intensidad del edema inflamatorio que permite la
difusión del antibiótico desde la sangre a leche con la perspectiva
de alcanzar CMI en leche, exudado y células de la glándula
mamaria- aumentan con la velocidad de vaciamiento de leche por
ordeño contribuyendo a la eliminación de bacterias y toxinas,
además de favorecer el contacto antibiótico-bacteria con menor
posibilidad de inactivación del antibiótico in situ por PH, exudado,
enzimas bacterianas o titulares.
Muchos fármacos son ensayados para servir de apoyo en casos
subagudos. El uso de antiinflamatorios por vía parenteral
intramuscular o intravenosa es un recurso muy frecuente. El
resultado es favorable si se comparan con casos tratados y no
tratados.
La
oxitocina
por
su
acción
constrictora
sobre
células
mioepiteliales, favorece la eyección láctea y el ulterior vaciamiento
glandular. Los ordeños sucesivos en casos de mastitis clínica
favorece la excreción de bacterias y toxinas siendo esto un
adicional en la terapia (L. Zurich, 1992).
1.11.9 Drogas disponibles para el tratamiento de mastitis.La terapia de drogas es la principal alternativa para eliminar una
infección o infecciones en un hato vacuno.
28
Existe un sin número de productos para el tratamiento de mastitis,
desde combinaciones con penicilina procaína-dihidrostreptomicina
y nafcilina por vía parenteral, el uso de oxitetraciclina lentamente
soluble administrada vía subcutánea como recurso contra la
mastitis
subclínica,
hasta
nuevas
opciones
terapéuticas
incluyendo antiinflamatorios como fluxamin (sal meglumina), el
uso de corticosteroides, antibióticos de alta especificidad y
tropismo en el tejido glandular (H. Sumano López, 1996).
1.11.10 Descarte.La eliminación es el medio más práctico de eliminar infecciones
crónicas, más que nada en vaca repetitivas que constantemente
crean problemas. La presencia de estos animales es una reserva
de microorganismos que podrían diseminarse a otras vacas
(Biggs, 2009).
1.12 INMUNOMODULACION
Inmunomodulación
es
sinónimo
de
inmunoestimulación
o
inmunopotenciación; no obstante el término inmunomodulación podría
comprender también efectos negativos, tales como inmunodepresión o
inmunosupresión. Es así como la inmunoestimulación puede ser
específica contra un antígeno, y en este caso se referirá a una
vacunación. Pero si se refiere a una estimulación al sistema inmune
innato o natural, podrá denominarse siempre como inmunomodulación
(Bascuñan, 2010).
La inmunoestimulación pretende potenciar una respuesta inmunológica
deficiente; ya que el tratamiento con estos compuestos mejora las
29
manifestaciones aunque no normaliza los niveles de inmunoglobulinas,
así también no está indicado como tratamiento primario que sustituya a
los antibióticos, siendo más bien beneficioso como tratamiento de
coadyuvante (Manual Merck, 2000).
Los inmunomoduladores, en su mecanismo de acción pueden actuar de
forma específica o inespecífica:
1.12.1 Inmunomoduladores de acción inespecífica.Son agentes que logran una estimulación o supresión de la
respuesta inmune, sin que la actividad de las células estimuladas
vaya dirigida hacia un antígeno determinado. Se diferencian en
tres tipos según su acción, los que actúan sobre el sistema
inmune normal (Tipo I); los que actúan sobre el sistema inmune
inmunodeprimido (Tipo II); los que actúan sobre el sistema
inmune funcionalmente normal e inmunodeprimido (Tipo III)
(Martínez, 2006).
1.12.2 Inmunomoduladores de acción específica.Logran su acción sobre células del sistema inmune, por la
presencia de un antígeno o inmunógeno dado, por lo que hay
especificidad selectiva en la acción de estas células para producir
una respuesta inmune. La inmunomodulacion es selectiva cuando
hay estimulación y su resultado significa una inmunoreacción
hacia un antígeno o varios, como en el caso de los adyuvantes
inmunológicos o las vacunas terapéuticas (Martínez, 2006).
30
1.12.3 Tipo de inmunomoduladores y acción terapéutica.Bacilo Calmete Guering (BCG): es una vacuna liofilizada de
bacilos vivos, no patógenos, procedentes de una cepa de
Mycobacterium bovis atenuada por primera vez por CalmetteGuering.
Posee
acción
específica
e
inespecífica,
activa
macrófagos, células T y la producción de interleuquinas 2 (IL-2);
se aplica en la vacuna terapéutica contra el cáncer a la vejiga,
ovario, calor y melanomas (Martinez, 2006).
Levamisol: es el levo –isomero activo del tetramisol. Se emplea
como antihelmíntico y como adyuvante en algunos tipos de
cáncer, actúa de forma inespecífica, es capaz de restaurar la
respuesta inmune humoral y celular. Se aplica fundamentalmente
en inmunodeficiencias producidas por helmintos y protozoos
(Martinez, 2006).
Dipéptido Murámico (MDP): su modo de acción puede ser
específico e inespecífico, estimula la respuesta inmune humoral y
celular, con acción antitumoral; es utilizado en tratamientos del
cáncer e infecciones bacterianas (Martínez, 2006).
Glucanos hongos y polisacáridos de algas: los glucanos son
estructuras amorfas de la pared celular de los hongos que
contienen los principales antigenos de la pared, su acción puede
ser inespecífica y especifica. Estimula la respuesta inmune
humoral y celular, y células del sistema retículo endotelial. Los
polisacáridos de algas se han ensayado en aplicaciones para la
31
terapia tumoral en oncogénesis virales y metástasis (Martinez,
2006).
Hormonas timicas, limosina y timopoyetina: su acción es
inespecífica, permiten la diferenciación y maduración de linfocitos
T y estimulan la inmunidad celular. Son efectivas en la terapia de
inmunodeficiencias de células T (Martinez, 2006).
Proteínas del complemento (globulinas): son capaces de actuar
por vía inespecífica y especifica. Fundamentalmente activan la
respuesta
humoral.
Se
usan
en
la
terapia
de
hipogammaglobulinemias y anemias.(Martinez, 2006).
Citoquinas: interleuquina 1(IL-1), interferón gamma (INF g),
interleuquina 2 (IL.2), interleuquina 5 (IL-5), factor de necrosis
tumoral alfa (FNT a),
interleuquina 18 (IL-18), factor
de
transferencia, y factor de crecimiento y diferenciación granulositomacrófago. (Martinez, 2006).
(GM-CSF), interleuquina 12 (IL-12): éstos actúan de forma
inespecífica en sentido general, pero muchas veces pueden
actuar de forma específica. Capaces de regular y activar la
respuesta inmune humoral y celular. Son utilizadas en la terapia
de inmunodeficiencias, cáncer, hepatitis, y en la recuperación
hemtopoyetica. (Martinez, 2006).
Lectinas, concavalina A y fitohemaglutina (PHA): su acción es
inespecífica con efectos mitógenos en linfocitos, por lo que son
utilizados para la activación de estas células en ensayos de
proliferación. (Martinez, 2006).
32
Lipopolisacárido bacteriano (LPS): pueden actuar por vía
inespecífica
y
específica,
son
activadores
de
linfocitos,
macrófagos y TNFa. Se han ensayado en la terapia experimental
de inmunodeficiencias. (Martinez, 2006)
Lectina (Mistetloe): de origen vegetal, su modo de acción es
inespecífico, siendo capaz de activar las células natural killer
(NK), macrófagos, PMN, FNT, INFg, IL-1 e 1L-6. Se han realizado
ensayos para la terapia del cáncer. (Martinez, 2006)
1.13 EXTRACTO
DE
PROPIONIBACTERIUM
GRANULOSUM
Y
LIPOPOLISACÁRIDO DE E. COLI
Activa linfocitos macrófagos y otras poblaciones celulares que participan
en las defensas del organismo e inducen a su proliferación en médula
ósea. También regulan la secreción de los mediadores inmunitarios
necesarios para el desarrollo de la respuesta inmune manteniendo los
niveles adecuados de ínter leucinas, interferón y factores de crecimiento.
Todo ello posibilita el correcto funcionamiento del sistema inmune y una
mejor respuesta del organismo a agresiones externas (Laboratorios
Calier).
Composición del inmunoestimulante a utilizar:
Célula inactivadas de Propionibacterium granulosum………………..25mg
Lipopolisacarido procedente de células de E. coli………………………2mg
Excipientes s.p. ..………………………………………………………….100ml
Los componentes del inmunomodulador son ubicados por las células
inmunitarias al momento de entrar al organismo. La forma de
reconocimiento es poco conocida, algunas células tienen receptores de
33
membrana específicas para el LPS o el PBG (Lipopolysaccharide binding
protein: proteína seca que se une al LPS) en monolitos, el marcador
CD14, en células B. (C. Martínez, 2006).
El LPS y PBG poseen la siguiente característica:
- Estimulan las defensas del animal, eficaces contra gran parte de agentes
infecciosos.
- Mejora la respuesta a vacunaciones y a tratamientos anti infecciosos.
- Metaboliza rápidamente por ser un producto biológico (no hay residuos).
- No crea tolerancia. Mantiene su efecto en administraciones sucesivas.
- Efecto inmediato y duradero.
1.14 LA MASTITIS Y SU RELACIÓN CON LA EFICIENCIA REPRODUCTIVA
Y LOS DÍAS ABIERTOS
El bienestar de las ubres, la producción lechera y la reproducción
son los puntos más importantes en un establo lechero, una
infección de mastitis da lugar a efectos negativos en toda
explotación. Cullor (1990) reportó que las endotoxinas de la pared
celular de las bacterias Gram-negativas, inducían lúteolisis
afectando la concepción y la vida del embrión, aparentemente a
través de la liberación de mediadores de la inflamación como
PFGa un estudio muestra el efecto negativo de la mastitis clínica
en la reproducción. Cuando la mastitis clínica ocurre antes de la
primera inseminación artificial (a más días a la primera
inseminación artificial) o después de la primera inseminación
artificial (más servicios por concepción), llevando en ambos casos
a más días abiertos (más días a la concepción).
34
Maizon et al (2004), identificaron los casos de mastitis como uno
de los factores más importantes que aumentan los días abiertos
cuando la mastitis clínica se presenta después de 45 días de
lactación (Rivera, 2007).
1.15 EFICIENCIA REPRODUCTIVA DEL GANADO LECHERO
La Eficiencia reproductiva del ganado lechero es también conocido como
el intervalo entre partos en un establo. Este intervalo influye en el tiempo
que la vaca muestra su mejor producción lechera generalmente en los
primeros 120 días de producción. Este intervalo entre partos afecta la
cantidad de producción lechera por día en el establo, así como la cantidad
de vacas eliminadas por fallas reproductivas (Risco y Archibald, 2005).
La eficiencia reproductiva de un rebaño se mide en el rendimiento o
capacidad reproductiva de cada animal ya que todo establo debe buscar
que esta medida sea lo más alta posible, explotando el máximo potencial
de los animales y reduciendo al mínimo la cantidad de animales problema
(Cerna, 1995).
Costo de la eficiencia reproductiva.Cabrera y Alvarado (2009) indican básicamente los siguientes problemas
reproductivos:
- Incremento del periodo de lactación y por consiguiente en el intervalo
entre partos.
- Períodos secos prolongados.
- Incremento del gasto en pajillas de semen.
- Descenso en el número de partos.
35
- Disminución de la velocidad de mejora genética.
1.15.1 Días abiertos
También llamado intervalo parto concepción. “El día abierto” en
vacas normales está compuesto por el puerperio fisiológico, que
son los días necesarios para que aparezca un primer celo
después del parto que es un promedio de no menos de 45 días y
un máximo de 60 días, este periodo llamado periodo de espera
voluntario; no puede ser modificado sustancialmente ya que
responde a variables fisiológicas. Los otros componentes de los
días abiertos están originados en fallas relacionadas a la
detección de celos y fallas en la concepción, lo cual implica en
ambos casos adicionar 21 días al nuevo ciclo estral a los días
abiertos (Syntex, 2005).
El intervalo parto concepción es el número de días que una
hembra permanece “Vacía” después del parto (Days open) para
que el período ínter partos (periodo que transcurre entre dos
partos sucesivos de un mismo animal) sea de un año; el intervalo
parto concepción no debe ser mayor de 85 días (Cabrera, 1995).
El intervalo entre parto y concepción o “Días abiertos” es un índice
valioso que refleja la eficiencia en la detección del estro y la
fertilidad tanto de las hembras como de los machos en un hato
(Hafez, 2000).
36
En un hato lechero bien manejado el intervalo parto concepción
no debe sobrepasar de los cien días, por cada día sin preñar que
excede este límite se pierde 2.5 dólares (Quispe, 2003).
Los días abiertos son menos y las tasas de concepción son más
altos en vacas que se aparean a los 50 días después del parto,
que en las que se aparean a intervalos preparto más prolongados
(Hafez, 2000).
Los días abiertos pueden reducirse incrementando la eficiencia
en la detección del estro, de este modo una mayor cantidad de
vacas serían sometidas a inseminación artificial entre los días 55
y 85 del post parto (Hafez, 2000).
1.15.2 Factores de Importancia en la Eficiencia Reproductiva
Para Velásquez (2004) la eficiencia reproductiva se mejora si
tomamos en cuenta los siguientes parámetros reproductivos:
1.15.2.1
Intervalo parto-parto.Es el período de tiempo que transcurre entre un
parto y el siguiente. En condiciones de buen manejo
debe ser de 365 días, sin embargo diversos factores
relacionados principalmente con la producción,
hipocalcemias, partos distócicos, prolongan los días
abiertos. Períodos entre partos largos reducen el
porcentaje de un tiempo de vida de una vaca en el
primer período de lactación.
37
1.15.2.2
Porcentaje de preñez.Es el número de vacas preñadas en relación al total
de vacas expuestas.
%Preñez = Nº de vacas preñadas x 100Nº total de
vacas expuestas
1.15.2.3
Porcentaje de concepción.Este parámetro nos muestra, el número de vacas
que quedan preñadas en relación al número total de
inseminaciones efectuadas en el hato.
%Concepción = Nº de vacas preñadas x 100
Nº total de servicios
1.15.2.4
Número de servicios por concepción.Indica el promedio de servicios necesarios para
lograr la gestación en las vacas del rebaño. Se
obtiene dividiendo el número de servicios ocupados
en las vacas en que se logró la preñez por el número
de vacas preñadas. Un mayor número de servicios
por concepción implica mayor costo (dosis de
semen, mano de obra para detección de estros e
inseminación, intervalo entre partos más largo,
38
alimentación), el criterio de evaluaciones en la vaca
es el siguiente:
-
Excelente : 1.5 servicios
-
Muy bueno : 1.5 - 1.75
-
Bueno : 1.75 – 2 servicios
-
Regular : 2- 2.25 servicios
-
Malo : mayores de 2.5 servicios
39
CAPÍTULO II
MATERIALES Y MÉTODOS
2.1 LUGAR DEL ESTUDIO Y DURACIÓN DEL MISMO
El experimento se realizó en el establo Santa Juana, propiedad de la
Sociedad Civil Agropecuaria CAMAY; ubicado en el kilómetro 172 de la
carretera Panamericana Norte; perteneciente al Centro Poblado Menor,
Medio Mundo; Distrito, Vegueta; Provincia, Huaura; Región, Lima
Provincias.
La ejecución del experimento comenzó en el mes de noviembre del 2011
y concluyó en diciembre del mismo año.
2.2 CARACTERÍSTICAS DEL ESTABLO Y DEL MANEJO
El establo Santa Juana, cuenta en total con 2500 bovinos Holstein, 1500
vacas que producen 30 000 litros diarios de leche. El sistema de crianza
es intensivo, en total tiene 47 corrales cada uno con sus respectivos
comederos y
bebederos, existen
también divisiones para vacas de
preparto, vacas en parto, vaquillonas primerizas, vacas en producción,
vacas en seca, corrales para tratamiento de mastitis, corrales para
vaquillas, terneras, terneros, toretes y cunas. Cuenta con dos salas de
ordeño modelo espina de pescado. La alimentación de los animales es a
base de maíz chala picado y concentrado.
Las condiciones climáticas en la zona de medio mundo son: temperatura
media anual máxima, 21,97ºC y la mínima, 17ºC. La humedad relativa
fluctúa entre 90% a 92% (SENAMHI, 2011).
40
2.3 MATERIALES
2.3.1 Animales utilizados
Para el estudio se seleccionó 90 bovinos de la raza Holstein
Friesan de primer, segundo y tercer parto; luego se distribuyó al
azar a tres grupos de 30 animales cada uno.
2.3.2
2.3.3
De campo y de escritorio
•
Soga.
•
Aretes identificadores.
•
USB.
•
Cuadernos de registros (cardex).
•
Lápices, lapiceros, borrador.
•
Fólder de campo.
•
Hojas de registros y de producción impresas.
•
Papel bond.
•
Tintas de inyección.
•
Computadora Pentium IV.
•
Impresora.
•
Papel bond.
•
Botas de hule.
•
Motocicleta.
•
Gasolina.
De laboratorio
•
Alcohol.
•
Algodón.
•
1 caja de agujas descartables № 16x1-1/2.
41
•
1 caja de jeringas descartables de 10 ml.
•
3 cajas
de Portacheks de 100 tiras de calibración con su
respectivo reactivo.
•
24 frascos de inmodulen x 50 ml.
•
Lector digital o contador electrónico de células somáticas.
2.4 METODOLOGÍA DE LA INVESTIGACIÓN
2.4.1
Tipo de investigación
Corresponde a una investigación de tipo experimental.
2.4.2
Tratamientos
Las vacas del experimento se separaron aleatoriamente en tres
tratamientos:
T0: control, sin aplicación de ningún tratamiento
T1: aplicación de un Inmunomodulador
T2: Aplicación de Vacuna más Inmunomodulador
2.4.3
Variables en estudio
-
Variables independientes (X)
X1: aplicación de Inmunomodulador
X2: Aplicación de Vacuna más Inmunomodulador
-
Variables dependientes (Y)
Y1: Contaje de células somáticas
Y2: Días abiertos
Y3: N° de servicios / concepción
Y4: % de concepción
Y5: % de mastitis
Y6: % de metritis
42
2.4.4.
Procedimiento y Distribución de los animales
Se seleccionaron 90 vacas entre los 15 a 45 días de lactación, 30
de primer parto, 30 segundo parto y 30 de tres partos. Estos
animales se distribuyeron de manera aleatoria a cada uno de los
tres tratamientos.
Contaje de células somáticas
Se realizó con el contador electrónico de partículas Porta Check,
de acuerdo al siguiente protocolo:
- Ordeño de 10 cc. de leche de cada cuarto.
- Mezcla de leche en un tubo de ensayo.
- Extracción de una gota de leche con una pipeta y colocación en
una tira reactiva.
- Adición de 03 gotas de reactivo en la tira de calibración.
- Reposo 45 minutos.
- Lectura con la lectora de células somáticas.
Aplicación de INMODULADOR
Se aplicó inmodulen, vía intramuscular, de acuerdo al siguiente
protocolo:
- Día 0*: Recuento de células somáticas.
- Día 01: Aplicación de 10 ml de inmodulen.
- Día 04: Aplicación de 10 ml de inmodulen.
- Día 05: Recuento de células somáticas.
- Día 08: Recuento de células somáticas.
*15 días post parto.
43
Aplicación de vacuna más Inmunomodulador
- 02 meses antes del parto aplicación de Hipramastivac, 2ml vía
im.
- 24 horas post parto aplicación de Hipramastivac, 2ml vía im.
(segunda dosis).
- Día 0*: Recuento de células somáticas.
- Día 01: Aplicación de 10 ml de inmodulen.
- Día 04: Aplicación de 10 ml de inmodulen.
- Día 05: Recuento de células somáticas.
- Día 08: Recuento de células somáticas.
*15 días post parto.
Eficiencia reproductiva
- “Días abiertos”: Intervalo de tiempo que transcurre entre el
parto y la concepción.
- Número
de
servicios/concepción:
Número
de
inseminaciones necesarias para preñar a una vaca.
- %
de
concepción:
Total
de
vacas
preñadas
/
total
inseminaciones.
Estado de salud animal
- % de presentación de metritis.
- % de presentación de mastitis.
2.5 ANÁLISIS ESTADÍSTICO
Los datos se analizaron con el programa estadístico Minitab v. 16.
Se utilizó la prueba de ANVA para determinar diferencias en el contaje de
células somáticas de los tratamientos.
44
Prueba de Chi cuadrado para determinar si existe relación entre los
tratamientos y las variables dependientes en estudio. La prueba de
proporciones para determinar diferencias entre categorías. El modelo
matemático propuesto fue el siguiente:
Yijk : u +Tij + Eijk
Donde:
Yijk: Contaje de células somáticas
U : Media del contaje de células somáticas
Tij : Tratamientos, 1,2,3
Eijk: Error experimental
45
CAPITULO III
RESULTADOS Y DISCUSION
3.1. RCS posterior a la aplicación de inmunomoduladores
Los resultados se detallan en el cuadro 3.1.
CUADRO N° 1. RCS en los días 0, 5 y 8 posterior a la aplicación del tratamiento con
inmunomodulador (T1) y con inmunomodulador más una vacuna contra
Mastitis (T2). Establo Camay, 2011.
DIAS
TRATAMIENTOS
T0: CONTROL
T1: INMUNOMODULADOR
T2: VACUNA + INMUNOMODULADOR
0
PROM ± DE1
416,800 ±561,200a
559,700 ±433,200a
534,500±400,000a
5
PROM ± DE
660,700±567,100a
758,000±517,000a
677,900±359,200a
a
letras iguales entre columnas indican que no existen diferencias significativas (p<0.05)
1
Recuento de células somáticas / mL de leche
8
PROM ± DE
857,500±571,900a
769,900±529,200a
770,700±391,600a
En el día 0, antes de la aplicación del inmunomodulador, no hubieron
diferencias significativas (p>0.05) en el RCS del T0 (416,800 ±561,200), con el
T1 (559,700 ±433,200) y el T2 (534,500 ±400,000). El RCS obtenido en todos
los tratamientos es moderadamente elevado, por encima del nivel de 200,000
células somáticas /mL de leche, lo que indica presencia de MSC en el establo
evaluado (Philpot and Nickerson, 2000). El RCS promedio de los tres
tratamientos, 503,000 celulas/ml, se encuentra bordeando el límite máximo
permitido por INDECOPI para considerar a la leche como apto para el consumo
humano (INDECOPI, 2003).
En el día 5, posterior a la aplicación del inmunomodulador, el RCS se
incrementó
en
(758,000±517,000)
los
y
tres
en
tratamientos:
T0
T2 (677,900±359,200),
(660,700±567,100),
sin
T1
haber diferencias
significativas entre tratamientos (p>0.05). El incremento del RCS indica que
hasta esa fecha, no se observa el efecto del inmunomodulador de potenciar la
respuesta inmunológica que permita la disminución del RCS.
46
En el día 8, posterior a la aplicación del inmunomodulador, el RCS se
incrementó aún más en los tres tratamientos: T0 (857,500±571,900), T1
(769,900±529,200)
y
en
T2 (707,000±391,600)
sin
existir
diferencias
significativas entre ellos (.p>0.05). El factor de determinación (R2) obtenido fue
bajo (1.77), que indica la intervención de muchos otros factores que no fueron
determinados por el modelo estadístico y es la razón de la gran variabilidad de
la respuesta obtenida.
Los resultados obtenidos fueron diferentes a los reportados por Nanda y
Thaperewal (2006), quienes en un experimento similar, aplicando dos dosis del
inmunomodulador con 48 horas de intervalo, registraron un RCS en leche antes
del tratamiento de 576,857 cel/ml, luego después de 21 días pos aplicación
disminuyó a 497,609 cel/ml.
En
la
presente
investigación
se
aplicó
dos
dosis
de
10
ml
del
inmunomodulador, al inicio del experimento y a las 48 horas posteriores, lo que
al parecer no fue suficiente para estimular la respuesta inmunológica que
permita la disminución del RCS en los animales tratados. Martinez, (2006),
aplicó un inmunomodulador en dosis de 0.25 ml / Kg de peso vivo, a las 24
horas posparto, 20 días posparto y luego cada 04 meses, concluyó que el
inmunomodulador es efectiva en la reducción de la sintomatología y la tasa de
infección de mastitis, pero cuando se evalúa mediante el RCS no refleja el
efecto del inmunomodulador por ser un parámetro sujeto a alta variabilidad.
Resultados diferentes reportan Rimbaud y Lorenzo (2004), quienes luego de
aplicar un inmunomodulador dos veces, con intervalo de 14 días, obtuvieron
una reducción del RCS de 33% en el grupo tratado.
47
Laboratorios Socolur, en un ensayo
realizado
en
Bélgica
en 1998
administrando 04 tratamientos con inmunomodulador a intervalos de 12 horas
logró reducir el RCS en 75% y cuando a los mismos animales se le aplicó
después dos dosis de 15 ml con intervalo de 30 días, El RCS de 560,555 mL
de leche que se obtuvo antes del tratamiento luego de 60 días se redujo a
301,111 (46.3%).
3.2. Efecto del inmunomodulador sobre la tasa de concepción
Los resultados se muestran en la tabla 3.2. Mediante la prueba de Chi
cuadrado se estableció que los tratamientos no están relacionados (p>0.05)
con la preñez. Sin embargo, los tratamientos con inmunomodulador
presentaron una mayor tasa de concepción no significativa (p>0.05) en relación
al grupo control.
Estos resultados son diferentes a los obtenidos por Naperewal (2006),
quienes encontraron diferencias significativas (p<0.05) entre las tasas de
concepción del grupo control (9.09 %) y el tratado con inmunomodulador
(38.4%), estos autores concluyeron que los inmunomoduladores mejoran la
fertilidad y salud de las ubres probablemente por su efecto de mejora
generalizada en el sistema inmunológico tanto especifico como inespecífico.
Cuadro N° 2 .- Tasa de concepción y N° de servicios por concepción en vacas holstein
posterior a la aplicación del Inmunomodulador(T 1) y al Inmunomodulador +
vacuna contra mastitis (T2)
Tratamientos
To : Control
T1 : Inmunomodulador
T2 : Inmunomodulador
+ vacuna
Total de
vacas
Total
I.A
Preñadas
% de
Concepcion
N° de Serv./
Preñez
28
30
50
41
13a
12a
26,0
29.2
3,8
3,4
29
36
13a
36,1
2,7
* Se considera la evaluación hasta el 4° servicio de I.A.
a letras iguales indican que no existen diferencias significativas (p>0.05)
48
3.3. Efecto del inmunomodulador sobre los días abiertos
Los efectos se especifican en la tabla 3.3. Se encontraron diferencias
significativas (p<0.05) entre los días abiertos del grupo control (187 días) con el
tratamiento T2 (187 días). Entre el grupo control y el T1 (235 días) no se
encontraron diferencias significativas (p>0.05). Estos resultados son similares a
los obtenidos por Nanda y Thaperewal (2006), quienes concluyeron que el
tratamiento parenteral con inmunomoduladores mejora la fertilidad en las
vacas.
Cuadro N° 3. Días abiertos posterior a la aplicación del tratamiento con Inmunomodulador
(T1) e Inmunomodulador mas vacuna contra mastitis (t2)
Tratamiento
T0: control
T1: Inmunomodulador
T2: Inmunodulador †vacuna
a,b
Días
abiertos
263a
235a
187ab
%
38.3
34.3
27.2
Intervalo de confianza 95%
(0.34, 0.42)
(0.30, 0.37)
(0.23, 0.30)
letras diferentes en las columnas indican diferencias significativas (p<0.05)
3.4. Efecto de los inmunomoduladores sobre la salud
Los resultados se detallan en la tabla 3.4. No se encontraron diferencias
significativas (p<0.05) en la presentación de problemas infecciosos entre los
tres tratamientos. Sin embargo, el grupo de vacas
aplicadas con
inmunomoduladores tuvieron una menor presentación de mastitis en relación
al grupo control. La presentación de metritis fue similar en los tratamientos.
Resultados similares fueron reportados por Martínez (2006), quienes
concluyeron que la aplicación de inmunomoduladores a vacas afectadas con
Mastitis reduce la sintomatología y la tasa de infección de la ubre. Nanda y
Thaperewal (2006), también concluyeron que loos inmunomoduladores son
eficaces en el tratamiento de la endometriosis.
49
Cuadro N° 4. Problemas infecciosos presentados en el grupo control, tratamiento con
inmunomodulador (T1) e inmunomodulador mas vacuna (T2)
Intervalo confianza
Tratamiento
Metritis Mastitis Total
%
95%
a
T0: control
5
11
16
38.09
(0.23, 0.54)
a
T1: Inmunomodulador
6
8
14
33.33
(0.19, 0.49)
a
T2: Inmunodulador † vacuna
5
7
12
28.57
(0.15, 0.44)
a, letras iguales en las columnas indican que no existen diferencias significativas (p>0.05)
50
IV.
-
CONCLUSIONES
La aplicación del inmunomodulador en las vacas tratadas no
disminuyó el RCS.
-
No mejoró la tasa de concepción, N° de servicios/concepción, ni
los días abiertos.
-
No redujo significativamente la presentación de problemas
infecciosos.
51
V. RECOMENDACIONES
Realizar trabajos de mayor envergadura para tener una mayor
certeza de su eficacia en la reducción de los problemas infecciosos y
su mejora en la fertilidad.
52
VI. BIBLIOGRAFÍA
1. Andresen, H. 2001. Mastitis Prevención y control. Pág. 5, 6.
2. Anavitarte, F. 1979. Anatomía Comparada de los animales
domésticos. Universidad Nacional Agraria. Programa Académico
de Zootecnia.
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edición. Editorial Acribia. Zaragoza. España. 412pag. 241, 248,
250, 251.
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respuesta inmune (en línea). Artículo técnico. Universidad de
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Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Pág.3.
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53
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www.absamericalatina.com/recursos/index.shtml
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Editorial
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de vacunos de leche. Traduc. Ramis Vergés. Editorial AcribiaZaragosa - España. 208 Pág. 7, 34, 35, 39, 49, 135, 137,
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Pág.
95,98
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61
VII. ANEXOS
Anexo 1. ANOVA unidireccional: RCS primer parto vs. T
Fuente
T
Error
Total
GL
2
84
86
S = 0.4683
SC
0.333
18.425
18.758
MC
0.166
0.219
F
0.76
R-cuad. = 1.77%
P
0.472
R-cuad.(ajustado) = 0.00%
ICs de 95% individuales para
la media
Nivel
N
Media
-----+----1
28 0.4168
2
30 0.5597
----)
3
29 0.5345
--)
Desv.Est.
basados en Desv.Est. agrupada
----+---------+---------+----
0.5612
0.4332
(-----------*-----------)
(----------*-------
0.4000
(-----------*-----------+---------+---------+----
-----+----0.30
0.45
0.60
0.75
Desv.Est. agrupada = 0.4683
62
Anexo 2. ANOVA unidireccional: RCS segundo parto vs. T
Fuente GL
T
2
Error
84
Total
86
S = 0.4885
SC
MC
F
P
0.158 0.079 0.33 0.719
20.048 0.239
20.206
R-cuad. = 0.78%
R-cuad.(ajustado) = 0.00%
ICs de 95% individuales para
la media
Nivel
N
Media
---+--------1
28 0.6607
---)
2
30 0.7580
-----------)
3
29 0.6779
-----)
Desv.Est.
basados en Desv.Est. agrupada
+---------+---------+------
0.5671
(--------------*-----------
0.5170
(--------------*---
0.3592
(--------------*---------+---------+---------+------
---+--------0.48
0.60
0.72
0.84
Desv.Est. agrupada = 0.4885
63
Anexo 3. ANOVA unidireccional: RCS tercer parto vs. T
Fuente
T
Error
Total
GL
2
84
86
S = 0.5029
SC
0.145
21.248
21.393
MC
0.072
0.253
F
0.29
R-cuad. = 0.68%
P
0.752
R-cuad.(ajustado) = 0.00%
ICs de 95% individuales para
la media
Nivel
N
Media
---+-------1
28 0.8575
----------)
2
30 0.7697
--)
3
29 0.7707
---)
Desv.Est.
basados en Desv.Est. agrupada
-+---------+---------+------
0.5719
(--------------*-----
0.5292
(--------------*------------
0.3916
(--------------*------------+---------+---------+------
---+-------0.60
0.72
0.84
0.96
Desv.Est. agrupada = 0.5029
64
Anexo 4. Prueba chi-cuadrada: preñez, no preñez
Las contribuciones chi-cuadradas se imprimen debajo de los
conteos esperados
si
13
12.23
0.048
no
15
15.77
0.038
Total
28
2
12
13.10
0.093
18
16.90
0.072
30
3
13
12.67
0.009
16
16.33
0.007
29
Total
38
49
87
1
Chi-cuadrada = 0.267, GL = 2, Valor P = 0.875
Anexo 5. Prueba e IC para dos proporciones. T0 vs T1
Muestra
1
2
X
13
12
N
50
41
Muestra p
0.260000
0.292683
Diferencia = p (1) - p (2)
Estimado de la diferencia: -0.0326829
IC de 95% para la diferencia: (-0.217557,
0.152191)
Prueba para la diferencia = 0 vs. no = 0: Z = 0.35 Valor P = .729
Prueba exacta de Fisher: Valor P = 0.815
65
Anexo 6. Prueba e IC para dos proporciones.T0 vs t2
Muestra
1
2
X
13
13
N
50
36
Muestra p
0.260000
0.361111
Diferencia = p (1) - p (2)
Estimado de la diferencia: -0.101111
IC de 95% para la diferencia: (-0.299606,
0.0973841)
Prueba para la diferencia = 0 vs. no = 0: Z = 1.00 Valor P = 0.318
Prueba exacta de Fisher: Valor P = 0.348
Anexo 7. Prueba e IC para dos proporciones: T1 vs T2
Muestra
1
2
X
12
13
N
41
36
Muestra p
0.292683
0.361111
Diferencia = p (1) - p (2)
Estimado de la diferencia: -0.0684282
IC de 95% para la diferencia: (-0.278226,
0.141369)
Prueba para la diferencia = 0 vs. no = 0: Z = 0.64 Valor P = 0.523
Prueba exacta de Fisher: Valor P = 0.627
66