Resistencia al frío en dos microalgas verdes del genero

Resistencia al frío en dos microalgas verdes del
genero Chlorella, aisladas de la Octava Región y del
territorio Antártico chileno.
Nombre de los estudiantes que integran el equipo de trabajo (máximo 3)
Nombre completo:
Curso:
1. María Pa z Soto Vergara
2. Daniel Ignacio Figueroa Jerez
3. Eugenio Nicolás Sanhueza Monsalves
Asesor(a)
3ro Medio
3ro Medio
3ro Medio
Nombre:
RUT:
Juana Verónica Torrejón Montenegro
Especialidad:
Biologia
Establecimiento Educacional:
Colegio San Agustín
Dirección Particular:
Tucapel 216, Concepcion
Teléfono
Particular:
Celular:
8.222.544 - 7
95980628
E-mail
personal:
[email protected]
Director del establecimiento educacional que respalda la propuesta
Nombre:
María Paulina Bellolio Olivieri
RUT:
5.568.093-0
Firma:
Nombre del
educacional:
establecimiento Liceo San Agustín de Concepción
Dirección:
Tucapel 219, Concepción
Ciudad/Región:
Concepción
Teléfono:
41 – 2954549
Fax:
41 – 2954549
E-mail:
Dependencia:
Part/Subvenc.
[email protected]
Científico (a) asesor (a)
Nombre:
Dra. Patricia Gómez Vergara
Especialidad:
Biotecnología microalgal
Institución:
Universidad de Concepción.
Teléfono:
E-mail:
Informe si se ha desarrollado parte o toda la investigación en otras instituciones que no
haya sido su establecimiento educacional.
Toda la investigación se desarrolló en los laboratorios de Cultivo de Microalgas y
Sistemática Molecular del Departamento de Botánica, Facultad de Ciencias Naturales y
Oceanográficas, Universidad de Concepción.
1
INDICE
.
▪ Resumen de la Investigación…………………...……………………………………
3
▪ Introducción……………………………………………………………………………
4
▪ Formulación del Problema…………………………………………………………..
6
▪ Materiales y metodología de investigación…………………………………………
7
▪ Resultados Obtenidos………………………………………………………………
10
▪ Análisis y discusión de resultados…………………………………………………
12
▪ Conclusiones…………………………………………………………………………
13
▪ Bibliografía……………………………………………………………………………
14
▪ Participación…………………………………………………………………………
15
▪ Agradecimientos……………………………………………………………………
16
2
RESUMEN DE LA INVESTIGACION
.
La Antártica es el continente más frío del mundo. Las exploraciones y descubrimientos en
estos territorios se encuentran en estado de desarrollo, motivando su estudio a muchos
científicos.
El calentamiento global afecta en gran medida al continente blanco, ya que el aumento de
temperatura de la tierra está derritiendo los hielos, acabando con el hábitat y el
maravilloso paisaje de esta tierra.
Las algas son los productores primarios en el ambiente marino, con un rol muy
importante, sustentando a toda la trama alimenticia. Al ser fotosintéticas absorben CO2
del ambiente contribuyendo a disminuir el efecto invernadero producido por la
acumulación de este gas en la atmósfera.
Nuestra hipótesis se basa en que las algas antárticas son mas resistentes al estrés por
frio que algas de ambientes más cálidos, contribuyendo así a la disminución de las
cantidades de CO 2 en la Antártica, y así disminuir los efectos del calentamiento global en
este ambiente extremo.
En este trabajo se evaluó la capacidad de dos cepas de microalgas, una aislada de
Concepción y la otra del territorio Antártico Chileno, de recuperarse y seguir creciendo
luego de ser sometidas a estrés por frío.
Las cepas fueron sometidas por 24 h a 3 tratamientos de frío: 4ºC, -20ºC y -80ºC. Luego
se evaluó su crecimiento en el tiempo por medidas de la absorbancia del cultivo a 665nm
(longitud de onda a la que absorbe la clorofila). Para determinar la densidad celular en
células por ml se realizo una curva de calibración contando las células en una cámara
Neubauer.
Con los datos obtenidos se construyeron curvas de crecimiento para las dos cepas
sometidas a los distintos tratamientos de frío y se compararon los resultados.
En ambas cepas el crecimiento se vio favorecido luego del tratamiento de 4ºC. Las
microalgas crecieron en menor cantidad luego de ser incubadas a -20ºC en comparación
a los otros tratamientos, incluso al de -80ºC, tratamiento al que respondieron
sorprendentemente bien.
Los resultados obtenidos en la experimentación en base al crecimiento de las microalgas
fueron en general exponenciales hasta el día 12, donde los mejores resultados se
observaron a variaciones de temperaturas de 20 y 4°C. Se comprobó que ambas cepas
presentan la misma tendencia de crecimiento pero que la cepa antártica tiene un
crecimiento más lento que la cepa de Concepción.
Se concluye que las algas verdes responden positivamente al estrés de temperatura, lo
que permite su sobrevivencia en temperaturas extremas y así estarían contribuyendo en
forma muy importante a la disminución de los efectos del calentamiento global.
3
Investigadores Chilenos camino a Patrio Hills. Foto: Inach 16 de mayo 2011
INTRODUCCION
.
La antártica es una masa continental que ocupa el polo sur de nuestro planeta, es el
continente más frío y ventoso, y está cubierto por una espesa capa de hielo. Este territorio
se encuentra a 66.5° de latitud Sur, con unos catorce millones de kilómetros de tierra
aproximadamente. Su temperatura media es cercana a los -17°C. Cerca del 90% del agua
dulce del planeta se encuentra en este continente, lo que la convierte en la mayor reserva
hídrica del mundo.
El continente antártico es un lugar único, donde la ciencia ocupa un espacio privilegiado,
asemejándose a un inmenso laboratorio científico.
Hoy en día, el principal problema que afecta a nuestro planeta es el calentamiento global,
provocado por el aumento de CO 2, causante de los cambios de temperatura y
acidificación de las aguas, situación que se ve reflejada mayoritariamente en el continente
blanco. Según un estudio de la revista “Science”, este fenómeno natural ha sido
probablemente el principal causante del aumento de las precipitaciones y disminución de
la masa de hielos al interior de la antártica. En los últimos cincuenta años la temperatura
atmosférica de la península aumento más de 2,5°C. Los investigadores encontraron que
entre abril de 2002 y agosto de 2005, la placa de hielo antártica decreció anualmente 152
kilómetros cúbicos de hielo. Si este llegara a derretirse en su mayoría, el nivel del mar
subiría en todo el mundo unos 55 metros.
“El aumento del deshielo podría tener un impacto a mayor escala si es grave y se
mantiene en el tiempo”. (Steffen. K, 2007)
La temperatura normal de la Antártica ha ascendido en los últimos años por acción del
fenómeno actual, dejando los -17°C.
El continente antártico presenta una escasa vegetación de musgos, algas y líquenes.
Dentro de la escasa diversidad de algas, se encuentran las clorófitas, algas verdes que
presentan células con un núcleo bien definido, pared celular y se caracteriza por
presencia de clorofila a y b, y la acumulación de almidón en el interior del cloroplasto.
Existen en la Tierra hace más de 540 millones de años, siendo uno de los organismos
más primitivos, sorpresivamente se han conservado de forma casi inalterada hasta
nuestros días, gracias a su extraordinaria capacidad de supervivencia. La mayor parte de
las algas habitan en agua dulce, suelos húmedos o epifitas. Las clorofilas son
cosmopolitas, es decir, presentan una amplia distribución por todo el mundo, variando en
sus ambientes. Las algas verdes son organismos fotosintéticos, es decir, realizan el
proceso de captación de dióxido de carbono ambiental y lo transforman en oxígeno.
Esta flora puede verse afectada por el calentamiento global de manera positiva o
negativa, ya que cada especie reacciona de distinta manera a los cambios de temperatura
en el ambiente.
Por medio de fotosíntesis, estas algas al captar el CO 2 que existe en la atmósfera de
manera excesiva, lo disminuirían, y por consiguiente aportarían a minimizar la
4
temperatura existente que está aumentando por acción del fenómeno anteriormente
nombrado.
Dentro de los ambientes acuáticos, el fitoplancton aporta de la misma forma a mitigar el
efecto de calentamiento global que los organismos vegetales terrestres, los organismos
vegetales marinos cumplen una tremenda función, produciendo la mitad del oxígeno que
se respira, absorbiendo el dióxido de carbono y manteniendo a los peces del océano.
La importancia del fitoplancton en los océanos reside también en su labor como primer
eslabón de la red trófica o alimentaria marina. “Sería el equivalente a la vegetación
terrestre, ya que transforma elementos inorgánicos en energía y materia orgánica para
que el resto pueda alimentarse”. (Huertas. E, 2011)
Al conocer estas características del continente blanco y saber cómo le está afectando el
calentamiento global, nos lleva a pensar en cómo poder aportar a que este maravilloso
espacio para la ciencia continúe por un largo tiempo y nos deslumbre con sus hallazgos.
Un medio para conseguir esto son las algas verdes,
mediante su estudio y
experimentación podemos obtener los datos necesarios para responder a los problemas
que le afectan. Como el calentamiento global causa una variación de temperatura aparte
de las variaciones estaciónales, las algas verdes deberían recuperarse de estos cambios
y si es así, a temperatura alta responder de manera adecuada.
En este trabajo de experimentación se presenta una posible respuesta a nuestra
pregunta, mediante el trabajo en laboratorio con algas verdes, análisis e interpretación de
datos de cada muestra de algas y conclusiones que nos llevarán a lograrlo.
Para esto, a las microalgas las someteremos a distintos grados de estrés, provocados
por la variación de temperatura, y observaremos como se recupera en cada situación.
Todo esto con el objetivo de simular los cambios de temperatura en la antártica, tanto los
estacionales como los provocados por el calentamiento global, y ver cómo afecta en el
crecimiento de las algas verdes, y así comprobar si disminuiría o aumentaría su ayuda a
contrarrestar este cambio climático.
5
FORMULACION DEL PROBLEMA
.
Pregunta:¿Podrán las algas verdes antárticas resistir a una variación de temperatura y
luego seguir con un crecimiento eficiente?
Hipótesis: Las algas verdes antárticas responderán mejor que las algas de ambientes más
cálidos al estrés por frio, por lo que estarían adaptadas para contribuir a disminuir el CO2
atmosférico y por ende el calentamiento global en la Antártica.
Objetivos:
▪ Motivar al estudio de las microalgas y su rol en el calentamiento global ya que no se les
ha dado el grado de importancia en su aporte a contrarrestar este fenómeno.
▪ Establecer una comparación de la resistencia al frío entre una microalga verde antártica
y una aislada de la Octava Región.
6
MATERIALES Y METODOLOGIA DE INVESTIGACION
.
Tratamiento a algas verdes locales y antárticas: Se somete a las algas verdes a ciertos
grados de estrés provocados por la variación de temperatura en 24 horas y luego se deja
en una sala de cultivo para comprobar su viabilidad días después.
1.- Área de estudio: Ficología.
2.-Materiales:
Cepa antártica (Aff.Chlorella), Cepa local (Aislada de la Laguna
Grande de San Pedro, Octava Región), Espectrofotómetro con
Cubetas de cuarzo, Maquinas refrigerantes (refrigerador, freezer y
congelador), Tubos Eppendorf, Tubos de ensayo, Pipeta con rodillo,
Pipetas plásticas, Micropipetas de 500-1000μL con los tips
correspondientes, Timer, Medio de cultivo Bristol, Matraz, Gradilla, Microscopio binocular,
Cámara de Neubauer.
3.- Metodología
3.1.-Preparacion de la Muestra:
Jueves 15 de Septiembre de 2011
La preparación de las muestras consiste en igualar la densidad celular en ambas cepas
para que comiencen con la misma cantidad de células por mL. Para lograr esto, debimos
tomar la absorbancia a 750 nm (Turbidez) y a 665 nm (Clorofila) de ambas cepas en el
espectrofotómetro, ya que la absorbancia es directamente proporcional con la densidad
celular:
Primero, debemos tomar 4 mL de medio de cultivo Bristol, con una pipeta, y vertirlo en la
Cubeta de cuarzo, especial para el espectrofotómetro, luego se debe ubicar esta cubeta
en la primera celda de la máquina.
Segundo, extraer 4 mL de cultivo del alga antártica con una pipeta de plástico, y vaciarlo
en una segunda cubeta de cuarzo, poner esto en la celda dos del espectrofotómetro.
Medir absorbancia a 750 nm y 665 nm.
Tercero, retirar la cubeta con muestra de la máquina, y vaciarla en el frasco de desechos
líquidos. Lavar el recipiente con agua para eliminar los residuos de la cepa.
Cuarto, extraer 4mL de cultivo del alga local, con una pipeta de plástico diferente a la
primera, y echarlo en la cubeta de cuarzo lavada. Poner esto en la segunda celda de la
máquina. Medir Absorbancia a 750nm y 665 nm
Resultados:
Cepa antártica:
750 nm
0,020
665 nm
0,021
Cepa Local:
0,800
0,856
Para igualar las absorbancias debemos diluir cierta cantidad de cepa local en un
determinado volumen de Bristol. Queremos obtener 20 mL de solución “Cepa Local +
Bristol” con una turbidez de 0.020 nm. Utilizamos una proporción Inversa como la
siguiente:
7
“20 mL x 0,020 = V x 0,8”
Siendo “V” la cantidad de mL de cepa local.
Despejamos “V” y nos da como resultado que es 0,5 mL de cepa local. Por lo tanto
debemos agregar 19,5 mL de medio Bristol para completar los 20 mL de solución.
Finalmente a un matraz esterilizado agregamos, con una pipeta, 19,5 mL de Bristol y,
con otra pipeta, agregamos 0,5 mL de cepa local. Así nuestras dos cepas poseen la
misma absorbancia, por lo tanto, la misma densidad celular.
3.2.- Procedimiento del experimento
Jueves 15 de Septiembre de 2011
En primer lugar, con una micropipeta extraemos 1,5 mL de cepa local para cada tubo
Eppendorf rotulado con números del 1 al 4, luego cambiamos la punta del instrumento y
repetimos el mismo procedimiento con la cepa antártica, con otros 4 tubos Eppendorf
rotulados del 5 al 8. Pondremos a diferentes temperaturas cada tubo, por 24 horas, como
se indica a continuación:
Tubo eppendorf 1: Cepa Local a 20ºC en laboratorio con temperatura
controlada
Tubo eppendorf 2: Cepa Local a 4ºC en la parte baja de un refrigerador
Tubo eppendorf 3: Cepa local a -20ºC en el freezer de un refrigerador
Tubo eppendorf 4: Cepa local a -80ºC en un congelador (deep freezer)
Tubo eppendorf 5: Cepa Antártica a 20ºC en laboratorio con temperatura controlada
Tubo eppendorf 6: Cepa Antártica a 4ºC en la parte baja de un refrigerador
Tubo eppendorf 7: Cepa Antártica a -20ºC en el freezer de un refrigerador
Tubo eppendorf 4: Cepa local a -80ºC en un congelador (deep freezer)
MUES TRAS
Viernes 16 de Septiembre de 2011
24 horas después sacamos nuestras muestras de sus respectivos lugares y esperamos a
que se descongelen por 20 min aprox. Mientras tanto, con una pipeta, vertimos 3 mL de
medio Bristol en los 8 tubos de ensayo, cada uno rotulado para cada muestra. Una vez
descongeladas las muestras, las homogenizamos agitándolas suavemente, tomamos 1
mL con una micropipeta y lo ponemos en los tubos de ensayo, cambiando la punta del
instrumento por cada cepa. Estos 4 mL (cepa + medio de
cultivo), se llevan a una sala de cultivo, con temperatura 18ºC ±
1ºC e intensidad luminosa de 17 μmol / m 2•seg, para iniciar con
su crecimiento.
Jueves 22 de Septiembre de 2011.
Para saber la cantidad de células por mL, podemos crear una
relación entre la absorbancia a 665 nm y la densidad celular, ya
que son directamente proporcionales. Para ello debemos crear
una curva de calibración, que servirá para extrapolar los datos
8
que obtendremos, tanto como de la cepa antártica como local porque son más o menos
del mismo tamaño.
La forma en que creamos la curva fue:
Primero debemos hacer una disolución seriada de la cepa local, colocando 3 mL de
Bristol en un tubo de ensayo rotulado con la letra A y agregando 2 mL de cepa local. Lo
homogenizamos y luego extraemos 2 mL de solución del tubo A y lo vaciamos en un tubo
de ensayo rotulado con la letra B. Se repiten los pasos con los tubos C y D.
Teniendo los 4 tubos de ensayos A, B, C y D listos, procedemos a contar el número de
celular en el microscopio óptico binocular a magnificación
40X con ayuda de una cámara de Neubauer. En esta
cámara podemos contar el número de celular en un
volumen de 0.004mm 3, ya que de largo y ancho tiene 0.2
mm y alto 0.1 mm por celda. Los resultados son 121; 35;
30 y 20 de los tubos A; B; C y D respectivamente.
Una vez contadas las 4 muestras, calcularemos el número
de células en 1 mL con una proporción directa. Por ejemplo si en 0,004 mm 3 hay 20
células, en 1000 mm 3 habría 5x106 células. Así calculamos las restantes. Luego las
llevaremos al espectrofotómetro y mediremos su absorbancia a 665 nm. Hasta el
momento los datos que tenemos son los siguientes:
A665
Cels/ml
A
0.988
30500000
B
0.384
8750000
C
0.116
7500000
D
0,025
5000000
Tendiendo estos datos, crearemos un gráfico con la absorbancia a 665nm en el eje de las
abscisas y el número de células en el eje de las ordenadas. A los puntos que se crean, le
crearemos la ecuación de la recta (línea de tendencia) que los delimita, pasando a ser
esta la curva de calibración. Esta ecuación es y=30.000.000x + 3.000.000. Por lo tanto,
sabiendo la absorbancia de nuestra muestra, podemos ingresarla a la ecuación y saber
cuántas células por mL hay en el cultivo.
Después de 6 días de crecimiento, se realiza la primera medición de absorbancia a 665
nm de todas las muestras. Devolver las muestras a sus respectivos tubos y volver a
ponerlos en la sala de cultivo.
También se repite el paso anterior a los 10 y 12 días de crecimiento.
Los datos obtenidos de las mediciones se ingresan a la formula hecha a partir de la curva
de calibración y se extrapolan en un gráfico que tiene el número de días en el eje de las
abscisas y el número de células por ml en el eje de las ordenadas.
A partir de lo anterior, tenemos el número de células por mL de cada día, tratamiento de
temperatura y cepa para crear gráficos comparativos entre estas.
9
RESULTADOS OBTENIDOS
.
Grafico 1: Curva de Crecimiento cepa Local
45000000
40000000
35000000
30000000
25000000
Local 20ºC
20000000
Local 4ºC
15000000
Local -20ºC
10000000
Local - 80ºC
Cels/ml
5000000
0
0
2
4
6
8
10
12
14
Dias
Días de Crecimiento
Local 20ºC
Local 4ºC
Local -20ºC
Local - 80ºC
0
907500 cels/mL
907500 cels/mL
907500 cels/mL
907500 cels/mL
6
8460000 cels/mL
8940000 cels/mL
4500000 cels/mL
7380000 cels/mL
10
22200000 cels/mL
25620000 cels/mL
12870000 cels/mL
18090000 cels/mL
12
37020000 cels/mL
41400000 cels/mL
18120000 cels/mL
22020000 cels/mL
Según el grafico 1:
▪ Ninguno de los cuatro tratamientos mata en su totalidad a los cultivos.
▪ Posterior al tratamiento térmico, el crecimiento de las algas verdes locales fue
exponencial (en el tratamiento de 20, 4 y -80ºC), a diferencia del tratamiento a -20ºC que
comienza a disminuir su velocidad de crecimiento entre el día diez y doce de cultivo.
▪ La temperatura de tratamiento no es directamente proporcional con el número de
células, ya que el tratamiento de -80ºC obtuvo un mayor número de células en todas las
mediciones que el tratamiento de -20ºC.
▪ Al tratamiento de 4ºC obtuvo la mayor densidad celular en menor tiempo, que fue de
41400000 cels/mL.
10
Grafico 2: Curva de Crecimiento cepa Antártica
25000000
20000000
Antártica
20ºC
Antártica
4ºC
Antártica
-20ºC
Antártica
-80ºC
15000000
10000000
Cels/ml
5000000
0
0
2
4
6
Dias 8
10
12
14
Días de Crecimiento
Antártica 20ºC
Antártica 4ºC
Antártica -20ºC
Antártica -80ºC
0
907500 cels/mL
907500 cels/mL
907500 cels/mL
907500 cels/mL
6
5160000 cels/mL
6300000 cels/mL
3750000 cels/mL
4800000 cels/mL
10
15030000 cels/mL
15030000 cels/mL
8910000 cels/mL
12180000 cels/mL
12
22470000 cels/mL
21990000 cels/mL
12930000 cels/mL
18630000 cels/mL
Según el grafico 2:
▪ Ninguno de los cuatro tratamientos mata en su totalidad a los cultivos
▪ El crecimiento posterior a los cuatro tratamientos fue exponencial.
▪ La temperatura de tratamiento no es directamente proporcional con el número de
células, ya que el tratamiento de -80ºC obtuvo un mayor número de células en todas las
mediciones que el tratamiento de -20ºC
▪ La muestra del tratamiento a 20ºC a los seis días es muy similar en densidad celular al
tratamiento de -80ºC, y luego a los doce días es muy cercano al número de células de la
cepa del tratamiento a 4ºC.
▪ La densidad más alta se dio en el tratamiento a 20ºC con 22470000 cells/mL
Comparación entre cepa antártica y local:
▪ En todas las mediciones, la cepa que mayor crecimiento celular presentó, fue la cepa
local.
▪ En ambos casos, la muestra del tratamiento de -80ºC supero en densidad celular a la
cepa del tratamiento de -20ºC.
11
ANALISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
.
A partir de los gráficos anteriores podemos deducir que:
- El alga Antártica responde favorablemente al tratamiento de temperatura extrema, esto
nos comprueba su adaptabilidad a medios extremos
- Las algas estudiadas tienen una amplia resistencia a diversas variaciones de
temperaturas.
- En el gráfico de la cepa local, se aprecia una disminución en la velocidad de crecimiento
a temperatura de -80°C (entre el día 10 y día 12) a diferencia de la antártica que continua
exponencialmente hasta el día 12. Esto podría deberse a que la población está llegando a
su capacidad carga, ya que al haber estado sometidas a un estrés necesito más
nutrientes para sobrellevar este cambio.
- Las cepas del género Chlorella, podrían tener una característica que les permita
adaptarse a temperaturas extremas.
- Se valida que estas algas verdes también aportarían a frenar el calentamiento global, ya
que a temperaturas altas (20 y 4ºC) el número de células por mL es mayor, lo que se
traduce como una mayor actividad fotosintética, captando más CO 2.
- Los cambios de temperatura a 20 y 4ºC provocaron que las microalgas verdes del
género Chlorella sobrevivieran y continuaran creciendo exponencialmente, lo que valida
nuestra hipótesis diciendo que el microalga verde antártica crece favorablemente a las
variaciones de temperaturas altas.
-Los datos obtenidos en el tratamiento de -80ºC fueron más positivos que los del
tratamiento de -20ºC, lo que nos permitiría afirmar, que estas algas incluso pueden
resisitir temperaturas inferiores a la temperatura media de la antártica (-17ºC).
-La proyección de nuestra investigación es la interrogante ¿de qué manera utilizan los
nutrientes las algas para poder sobrellevar el estrés causado por la variación de
temperatura?
12
CONCLUSIONES
.
► Las cepas de Chlorella son capaces de reactivarse luego de una variación drástica de
temperatura, continuando con su crecimiento a una temperatura estándar (20°C).
► La microalga antártica puede crecer luego de un tratamiento de 4ºC, por lo tanto se
deduce que sobrevivirían al cambio de temperatura causado por el calentamiento global,
e incluso mejoraría en comparación al tratamiento de 20°C.
► Se infiere que la cepa local se podría adaptar exitosamente en el continente antártico a
pesar de las bajas temperaturas que este presenta.
► Las microalgas fotosintéticas disminuyen el CO 2 presente en el agua, regulando el pH y
con ello favoreciendo la vida acuática.
► El calentamiento global produce un aumento de temperatura, por lo que las microalgas
de género Chlorella resistirían temperaturas extremas y continuarían con un crecimiento
óptimo, ayudando a que la concentración de CO 2 disminuya y así no afecte mayormente
al
continente
antártico
13
BIBLIOGRAFIA
.
Sitios web:
• Bioma Antártico, Wikipedia enciclopedia libre. Articulo principal: Flora antártica;
conclusión. 29 de junio, 2007. [En línea]. [Consulta: 02 de septiembre de 2011]
http://es.wikipedia.org/wiki/Bioma_ant%C3%A1rtico
• La antártica se derrite y es la nueva amenaza mundial. 20 de mayo 2005. [En línea].
(Consulta: 03 de septiembre de 2011.)
http://www.infobae.com/notas/nota.php?Idx=184764&IdxSeccion=100558
• Península antártica: 85% de los glaciares se redujeron por el calentamiento global.
22 de mayo 2005. [En línea]. [Consulta: 04 de septiembre de 2011]
http://old.clarin.com/diario/2005/04/22/sociedad/s-04601.htm
• El portal de la ciencia y la tecnología en español. Detectada una importante pérdida en la
masa de hielo antártico. [En línea]
http://www.solociencia.com/ecologia/06040305.htm
•Educación Hielos. 31 de mayo 2005. [En línea] [Consulta: 04 de septiembre de 2011.]
http://www.inach.cl/category/educacion/page/4/
• Ecología verde, desarrollo sostenible para un mundo mejor.
Medio ambiente: La Antártida sufre consecuencias del calentamiento global.
17 de mayo 2007. [En línea] [Consulta: 07 de septiembre de 2011]
http://www.ecologiaverde.com/la-antartida-sufre-consecuencias-del-calentamiento-global/
• Biodiversidad y taxonomía de plantas criptógamas. Chlorophyta. [En línea] [Consulta: 07
de septiembre de 2011.]
http://linneo.bio.ucm.es/plantas_criptogamas/materiales/algas/chlorophyta.html
• Investigación Chlorella. [En línea] [Consulta: 07 de septiembre de 2011]
http://www.chlorella.es/invest.html
• Biodiversidad. Explican importancia del fitoplancton para la vida, por Stephen Leady.
02 de agosto 2010. [En línea] [Consulta: 07 de septiembre de 2011]
http://www.diariodigital.com.do/articulo,55456,html
• El Fitoplancton en mar abierto, más vulnerable al cambio de temperatura. 17 de mayo
2011 [En línea] [Consulta: 08 de septiembre de 2011]
http://www.publico.es/ciencias/376748/el-fitoplancton-en-mar-abierto-mas-vulnerable-alcambio-de-temperatura-planetatierra
14
PARTICIPACION
.
→ María Paz Soto Vergara: Experimentación, introducción, resultados obtenidos y
respectivo análisis. Objetivos, hipótesis y conclusión. Desarrollo y redacción del proyecto
en general.
→ Daniel Figueroa Jerez: Experimentación. Metodología, introducción, análisis de
resultados y conclusión. Desarrollo y redacción del proyecto en general.
→ Eugenio Nicolás Sanhueza Monsalves: Experimentación. Metodología, Análisis de
resultados, registro fotográfico. Desarrollo y redacción del proyecto en general.
→ Profesora Juana Verónica Torrejón: Ayuda y explicaciones antes y durante el proyecto.
→ Dra. Patricia Gómez: Ayuda y guía en realización del experimento. Indicaciones previas
y durante el experimento.
15
AGRADECIMIENTOS
.
Como finalización de este trabajo, queremos agradecer especialmente a la Doctora
Patricia Gómez, Bioquímico, Doctora en Ciencias Biológicas área Botánica, quien nos
ayudó y guió en este experimento, por su tiempo y paciencia, siendo un gran apoyo en
nuestro proyecto. También, agradecer a nuestra Profesora Verónica Torrejón, quien nos
motivó y alentó para seguir con el proyecto, cuidándonos y apoyándonos en todo
momento. Agradecemos a nuestro colegio, que nos apoyó y nos facilitó materiales, uso
del laboratorio, y nos permitió salir en horario escolar. Agradecer a la Universidad de
Concepción, por facilitar sus dependencias para la realización de este proyecto.
Finalmente, un agradecimiento a las familias de cada uno de los participantes, por el
apoyo incondicional.
16