Titulación potenciométrica de ácido fólico en comprimidos

Resumen: E-035
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006
Titulación potenciométrica
de ácido fólico en comprimidos
De Asmundis, Cecilia - Sarno, María del C. - Delfino, Mario R.
Laboratorio de Química Analítica Instrumental. Facultad de Ciencias Exactas y Nat. y Agrim. UNNE.
Av. Libertad 5640 (3400) Corrientes- Argentina
TE:03783- 457996 int111/Fax: 03783- 473930/E-mail : [email protected]
Antecedentes
El ácido fólico ó pteroil- glutámico (Figura 1) es una vitamina del grupo B, hidrosoluble, cuya ingesta ayuda a prevenir
malformaciones fetales relacionadas con el cerebro y la médula espinal (defectos del tubo neural, principalmente espina
bífida y anencefalia) sólo si ésta tiene lugar antes de la concepción y durante la primera etapa del embarazo.
Figura 1: Estructura Química del Ácido Fólico
El ácido fólico procedente de los suplementos vitamínicos y alimentos enriquecidos es más fácil de absorber por el
organismo que el folato natural de los alimentos. Según el Institute Of Medicine (IOM), el organismo humano absorbe
aproximadamente el 50% del folato de los alimentos, mientras que puede absorber el 85% del ácido fólico presente en
los alimentos enriquecidos y el 100% del ácido fólico de los suplementos vitamínicos. La cocción y el almacenamiento
pueden destruir parte del folato de los alimentos. El IOM y los Centros de prevención y control de enfermedades (CDC:
Centers for Disease Control and Prevention) recomiendan que las mujeres que puedan quedar embarazadas consuman 4
a 5 mg al día de la forma sintética del ácido fólico, incrementándose esta dosis en una fase más avanzada del embarazo.
El ácido fólico es importante para la producción de glóbulos rojos normales, y las personas con deficiencias de éste a
veces desarrollan un tipo de anemia denominada megaloblástica, caracterizada por un número reducido de glóbulos
rojos. El informe de los expertos de la FAO/ OMS aconseja una ingesta diaria superior a los 350 µg para mujeres
embarazadas, dosis que no han producido ningún efecto tóxico, indicando además que dosis superiores a 1 mg han
provocado un estado epiléptico en pacientes con anemia megaloblástica.
Asimismo, estudios efectuados en la Universidad de California constataron que el consumo de ácido fólico puede
disminuir el riesgo de que una persona desarrolle el mal de Alzheimer.
La Planta de Medicamentos de Corrientes (PLAMECOR) elabora comprimidos de 5 mg de ácido fólico, los que son
distribuidos para su uso en pacientes que acuden a hospitales y centros de salud de la provincia.
El método de referencia propuesto por la Food and Drugs Administration (FDA) para cuantificar el contenido de este
principio activo en tabletas es HPLC con detección UV a 254 nm. En el presente trabajo se propone su determinación
por un método de bajo costo, sencillo y de fácil automatización como lo es la titulación con amoníaco con punto final
potenciométrico. El uso de la primera derivada mejora su detección.
Materiales y Métodos
Materia prima
Principio Activo: Ácido fólico Lote FB/006/03-04. Origen: Dinamarca. Pureza: 98%
Comprimidos: de 5mg de ácido fólico. Lote 020. Elaborados por PLAMECOR
Reactivos
Amoníaco concentrado, p-a.
Solución de amoníaco 0,0100 M
Solución Buffer pH 7,00 ± 0,02.
Solución Buffer pH 4,00 ± 0,02.
Resumen: E-035
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006
Equipos
Celda de titulación de vidrio encamisada p/ termostatización. Volumen útil: 50 mL.
PHmetro c/ control automático de temperatura.
Agitador magnético
Bureta 25 mL c/ robinete de teflón
Balanza analítica (± 0,1 mg)
Procedimiento
a) Principio Activo: Se pesa una masa de patrón de ácido fólico en el rango de 20 a 100 mg, se dispersa en 50 mL de
agua destilada y se transfiere a la celda electrolítica. Se sumerge la barra del agitador magnético y el electrodo de vidrio
combinado. Se conectan el potenciómetro y el agitador. Desde la bureta se van adicionando pequeños volúmenes de
solución 0,0100 M de amoníaco. Para cada agregado se registra el cambio del potencial de la celda electroquímica. Con
los datos obtenidos se construyen las gráficas de pH vs. Volumen de titulante y la correspondiente a la primera derivada
de la curva de titulación.
b) Comprimidos: Se disuelven seis (6) comprimidos de 5 mg de ácido fólico en 50 mL de agua destilada y se repite el
procedimiento descrito en a).
Discusión de Resultados
pH
El ácido fólico no es enteramente soluble en agua, aunque la acidifica hasta alcanzar pH cercanos a 3 . Sin embargo, en
soluciones alcalinas muestra una disolución progresiva a partir de pH 5,5 aproximadamente, dependiendo de su
concentración original.
La titulación del ácido fólico con amoníaco conduce a una curva, mostrada en la figura 2, en el transcurso de la cual
puede localizarse un punto crítico de disolución por un lado y luego una inflexión poco acentuada.
10
8
6
4
2
0
0
5
10
15
20
25
30
V (mL)
Figura 2: Titulación de 25 mg de estándar de ácido fólico con NH3 0,01 M
La leve inflexión puede ser bien manifiesta mediante el cálculo de la primera derivada, con la consecuente
transformación de estos puntos en máximos, mejorando así su detección (Figura 3)
1
Deriv(pH/V)
0,8
0,6
0,4
Vprom
0,2
0
-0,2
0
10
20
30
V (mL)
Figura 3: Primera Derivada de la titulación de 25 mg de estándar de ácido fólico con NH3 0,0100 M
Resumen: E-035
UNIVERSIDAD NACIONAL DEL NORDEST E
Comunicaciones Científicas y Tecnológicas 2006
Los resultados de la titulación potenciométrica de distintas masas de estándar de ácido fólico con amoníaco 0,0100 M se
dan en la tabla 1.
M ác. Fólico estándar (mg)
Mmol amoníaco
Consumido
0,0
0,0
26,0
0,081
50,0
0,153
60,0
0,198
75,0
0,261
100,0
0,342
7,10 x 10-3
A= Ord. al origen
3,46 x 10-3
B = Pendiente
0,998
R = Coef. Correl. lineal
Tabla 1: Regresión lineal de la Titulación de ácido fólico con amoníaco 0,0100 M
Si bien se trata experimentalmente de una simple titulación, los resultados inducen a una estequiometría distinta de la
asumida al considerarla únicamente como equilibrio ácido-base. Es por ello que se recurre a una curva de calibrado.
La regresión de los valores obtenidos confirma la relación lineal entre el consumo de amoníaco y la masa de ácido
fólico.
Nº determinación
Mmol amoníaco
M ácido fólico (mg)
La aplicación del método, haciendo uso
1
0,092
28,60
de la curva de calibrado, aplicado a los
2
0,096
29,75
comprimidos de 5 mg de ácido fólico
3
0,098
30,33
elaborados por PLAMECOR condujo a
4
0,092
28,60
los resultados que se dan en la tabla 2.
5
0,099
30,62
Se efectuaron seis repeticiones del
6
0,096
29,75
análisis de un pool de 6 pastillas (30mg
Xmedio = 29,608 mg ácido fólico
ácido fólico), con la finalidad de estimar
S = 0,8506 mg
su precisión.
DRS % = 2,87%
Tabla 2: Determinación de ácido fólico en pool de 6 pastillas de 5 mg por titulación con amoníaco 0,01 M
Conclusiones
Ensayos realizados con soluciones de hidróxido de sodio, si bien disuelven al ácido fólico en medio acuoso, no
condujeron a puntos de inflexión en las titulaciones, lo que demuestra la efectividad del amoníaco para llegar a los
resultados expuestos.
Los análisis realizados no permitieron demostrar la existencia de una reacción que ayude a interpretar los resultados de
los puntos finales de la titulación. Cabe agregar que se ha operado en todos los casos a temperatura ambiente.
Los resultados alcanzados permiten la aplicación de esta metodología analítica a preparados farmacéuticos que
contengan al ácido fólico como monodroga.
Bibliografía
Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Folic Acid Now Fact Sheet. www.cdc.gov/doc.
Berry, R.J., et al. Prevention of Neural Tube Defects with Folic Acid in China. New England Journal of Medicine,
vol. 341, Nº 20, 11/11/99, pag. 1485-1490.
Mercereau, P., et al. Spina Bifida and Anencephaly Before and After Folic Acid Mandate – United States, 19951996 and 1999-2000. Morbidity and Mortality Weekly Report, vol. 53, Nº 17, 7/05/04, pag. 362-365.
Carter, H.K., et al. Use of Vitamins Containing Folic Acid Among Women of Childbearing Age – United States,
2004. Morbidity and Mortality Weekly Report, vol. 53, Nº 36, 17/04.
Centers for Disease Control and Prevention. Folate Status in Women of Childbearing Age, by Race/Ethnicity –
United States, 1999-2000. Morbidity and Mortality Weekly Report, vol. 51, Nº 36, 13/09/02, pag. 808-810.
U.S. Food and Drug Administration. Folic Acid Fortification Fact Sheet. 29/02/96, www.cfsan.fda.gov~dms/whfolic.html.
FAO/OMS Informe de Una Consulta Mixta de Expertos. Necesidades de Vitamina A, Hierro, Folato y Vitamina
B12. Roma (Italia ) . 1991.
Gindler, J. Zhu LI, Berry, R. J. et al. Folic acid supplements during pregnancy and risk of miscarriage. Lancet, 358:
796-800, 2001.