CAPÍTULO 6. MEJORA GENÉTICA DE CEREALES Y LEGUMINOSAS ESTUDIO DEL APAREAMIENTO CROMOSÓMICO ENTRE ESPECIES DEL GÉNERO Hordeum Y TRIGO HARINERO EN EL FONDO GENÉTICO DE MUTANTES ph1 Rey M.D., Prieto P. Departamento de Mejora Genética, Instituto de Agricultura Sostenible (CSIC), Apdo. 4084, Córdoba, España. Palabras clave: meiosis, cereales, introgresiones genéticas, locus Ph1, Hordeum chilense, Hordeum vulgare. INTRODUCCIÓN El trigo harinero (Triticum aestivum, 2n = 6x = 42), es una especie aloploide que posee un genoma complejo con tres juegos de cromosomas (genomas A, B y D). A pesar de ser un poliploide, el trigo se comporta como una especie diploide durante la meiosis debido a la presencia de varios genes de apareamiento homólogo (Ph, del inglés “Pairing homologous”), siendo el más importante el locus Ph1. Este locus se encuentra en el brazo largo del cromosoma 5B y su función principal, es restringir el apareamiento a los cromosomas homólogos o idénticos, impidiendo por tanto, el apareamiento entre cromosomas homeólogos o relacionados. En ausencia del locus Ph1 todos los cromosomas pueden sufrir un cambio en la estructura de la cromatina sin requerimiento de homología, que incrementa la probabilidad de que cromosomas homeólogos puedan asociarse y recombinar entre ellos (Prieto et al. 2004). La introgresión de material genético de especies relacionadas es clave en programas de mejora genética de trigo. Hordeum chilense (cebada silvestre, 2n = 2x = 14) y Hordeum vulgare (cebada cultivada, 2n = 2x = 14) son especies con gran potencial para la mejora genética del trigo. Sin embargo, la hibridación entre trigo y especies relacionadas produce generalmente híbridos inter-específicos en los que no ocurre apareamiento entre los cromosomas de trigo y de la especie relacionada. El principal factor que previene dicho apareamiento homeólogo es el locus Ph1. En este trabajo se persigue desarrollar nuevo germoplasma de trigo con introgresiones del género Hordeum en el fondo genético de mutantes de apareamiento, para facilitar la transferencia de caracteres de interés desde Hordeum a trigo. MATERIAL Y MÉTODOS Para el desarrollo de los cruzamientos genéticos se han utilizado líneas de sustitución para cada uno de los cromosomas de H. chilense en trigo harinero y líneas de adición para cada uno de los cromosomas de H. vulgare y H. chilense en trigo harinero (Miller et al., 1982), así como líneas mutantes de deleción del locus Ph1 en trigo harinero. El escrutinio y la caracterización de las líneas obtenidas se hizo mediante marcadores microsatélites (Hagras et al., 2005) e hibridación in situ con sondas de ADN genómico de H. chilense y H. vulgare (Prieto et al., 2001). Las líneas de trigo portadoras de la mutación ph1 se seleccionaron con el marcador ABC920 (Wang et al., 2002). RESULTADOS Y DISCUSIÓN Con la finalidad de introducir en trigo caracteres de interés agronómico desde H. chilense y H. vulgare, se realizaron cruzamientos entre líneas de sustitución para cada uno de los cromosomas de H. chilense en trigo o líneas de adición para cada uno de los cromosomas tanto de H. vulgare como de H. chilense en trigo con líneas de trigo mutantes para el locus Ph1. La primera generación obtenida para cada uno de los cruzamiento se retrocruzó nuevamente por 169 ACTAS DE HORTICULTURA N.º 62 líneas de trigo mutantes para el locus Ph1, debido a que al ser la mutación ph1 una mutación recesiva, debe estar en homocigosis para observar el fenotipo mutante. Se han obtenido más de 75 líneas de trigo portadoras de cromosomas de Hordeum en el fondo genético del mutante ph1 (Tabla 1). La caracterización de las líneas se realizó mediante marcadores moleculares para determinar la presencia del cromosoma de Hordeum y de la mutación ph1, e hibridación in situ, para visualizar la presencia de los diferentes cromosomas de H. chilense o de H. vulgare. El estudio mediante hibridación in situ del apareamiento en metafase I de la meiosis en las líneas portadoras de introgresiones de H. chilense o H. vulgare en el fondo genético del mutante ph1 ha permitido la detección de apareamiento entre los cromosomas de trigo y de Hordeum, que dará lugar a pequeñas introgresiones de Hordeum en el fondo genético del trigo. AGRADECIMIENTOS Este trabajo está financiado por proyectos de la Unión Europea (ERC-Starting grants 243118) y el Ministerio de Economía y Competitividad (AGL2009-10511). REFERENCIAS Hagras, A.A., Masahiro, K., Tanaka, K., Tsujimoto, H. 2005. Genomic differentiation of Hordeum chilense from H. vulgare as revealed by repetitive and EST sequences. Genes Genet. Syst. 80: 147-159. Miller, T.E., Reader, S.M., Chapman, V. 1982. The addition of Hordeum chilense chromosomes to wheat. In: Proc. Int. Symp. Eucarpia on Induced Variability in Plant Breeding (ed. C Broertjes). Pudoc, Wageningen, p. 79-81. Prieto, P., Ramírez, M.C., Ballesteros, J., Cabrera, A .2001. Identification of intergenomic translocations involving wheat, Hordeum vulgare and Hordeum chilense chromosomes by FISH. Hereditas 135: 171-174. Prieto, P., Shaw, P., Moore, G. 2004. Homologue recognition during meiosis is associated with a change in chromatin conformation. Nat. Cell Biol. 6: 906–908. Wang, X., Lai, J., Liu, G., Chen, F. 2002. Development of a Scar marker for the Ph1 locus in common wheat and its application. Crop Sci. 42: 1365-1368. Tabla 1. Número de plantas obtenidas en los cruzamientos entre las líneas de introgresión para cada uno de los cromosomas de Hordeum en trigo y los mutantes ph1. Cromosoma Género H. chilense H. vulgare 170 1 2 3 4 5 6 7 Plantas totales - - - 33 117 97 181 ph1ph1/HchHch - - - 4 9 19 22 Plantas totales - 29 35 43 - 57 27 ph1ph1/HvHv - 5 7 4 - 6 7