CONCENTRACIÓN DE ÁCIDOS GRASOS VOLÁTILES (AGV´s) Y pH EN EL CONTENIDO DE CIEGOS DE CONEJOS ALIMENTADOS CON UNA DIETA COMERCIAL Y UNA EXPERIMENTAL. Moreno Ponce A. L1.; Aguilera Barreyro A1.; Escobar García K1.; Bernal Santos G1; Reis de Souza T1; Muñóz Hernández G2. 1 Facultad de Ciencias Naturales. Universidad Autónoma de Querétaro. 2 CIATEQ, A.C. RESUMEN Para evaluar el desarrollo del ciego según la edad y alimentación se hizo un ensayo con 20 gazapos nueva Zelanda divido en 2 poblaciones 1) alimentada con dieta comercial y 2) elaborada con desechos de forrajes en Amazcala. El contenido del ciego fue analizado por cromatografía de gases para determinar la concentración de los ácidos grasos volátiles (AGV´s): acético, propiónico, butírico y valérico. INTRODUCCIÓN El conejo está considerado un animal monogástrico, sin embargo, su fisiología digestiva es mixta, encontrándose más cerca de los rumiantes. El ciego es donde la flora del conejo fermenta y aprovecha los nutrientes que el intestino delgado no ha sido capaz de absorber (Ibáñez 2009). En el conejo, el proceso que caracteriza su fisiología digestiva se denomina "cecotrofia" y fue observado y descrito por primera vez por el Médico Veterinario francés Charles Morot en 1882. Otras especies que lo presentan son la liebre, castor, Koala y los lemings de Escandinavia (Gecel, 1986). Este consiste básicamente en que a partir de residuos alimentarios que ya sufrieron una digestión gástrico-intestinal; en el ciego y colon se produce un tipo de excreta (cecotrofo) (Ibáñez 2009; Gecel, 1986). Hay diferencias marcadas entre ambos tipos de excretas del conejo desde el punto de vista físico, las fecas son crotines secos, duros y se eliminan individualmente, en cambio los cecotrofos son más pequeños, irregulares en su forma, cubierto de una capa de mucina y son eliminados en forma de racimos como se ilustra en la figura 1(Gecel, 1986). Heces Cecotrofos Figura1. Diferencias físicas entre heces y cecotrofos Sin embargo, la diferencia más importante reside en la composición química de ambos, como se puede observar en el Cuadro 1. Cuadro 1. Composición química de los cecotrofos y heces en el conejo (Gecel, 1986). -Composición química CECOTROFO HECES Rangos Rangos Materia seca (%) 29.5 (38-16) 58.3 (47-70) Proteína cruda (%)* 29.5 (19-39) 13.1 Extracto Etéreo (%)* 2.4 (0,1-5,0) 2.6 (0,1-5,3) Fibra Cruda (%)* 22 (10-34) 37.8 (15-60) Cenizas (%)* 10.8 ( 3-18) 8.9 Ext. No Nitrog. (%)* 35.1 (25-45) 37.7 (30-46) ( 4-25) (0,5-18) CONTENIDO VITAMÍNICO Cecotrofo Heces Niacina (mg/kg) 139.1 39.7 Riboflavina (mg/kg) 30.2 9.4 Ac. Pantoténico (mg/kg) 51.6 8.4 Vitamina B12 (*ugrie*g/kg) 2,922.0 892.0 * BASE 100% M.S. La digestibilidad que tenga la fibra dependerá de la proporción en que estén estos polisacáridos en la dieta, del grado de lignificación que presenten y del tamaño de partícula o granulometría. En el conejo ésta fluctúa entre un 15 a 30%, lo que indica que esta actividad celulolítica es menor que la de los rumiantes o la de otros herbívoros monogástricos como el caballo (Gecel, 1986). Las bacterias cecales producen ácidos grasos volátiles (AGV) que son absorbidos a nivel de ciego y colon proximal. El nivel de AGV fluctúa entre: 180 a 240 μmoles/g M.S. por esta vía se satisface desde un 10% hasta un 30% de la energía metabolizable requerida por el animal. La proporción de los distintos AGV a nivel cecal fluctúa entre un 60 a 70% de ácido acético, 6 a 12% de ácido propiónico y 15 a 25% de ácido butírico. En el conejo, a diferencia de los rumiantes y equinos, el ácido propiónico se encuentra en una proporción menor que el ácido butírico, lo que se debe a la escasa cantidad de carbohidratos solubles en ciego (Gecel, 1986). Estos AGV además de jugar un rol energético, ejercen una marcada influencia sobre el pH cecal, la motilidad cecocólica y la mantención de un medio interno cecal adecuado para el desarrollo de la microflora normal (Gecel, 1986). MATERIAL Y MÉTODOS ANIMALES Y DIETAS: El estudio se llevó a cabo en las instalaciones de la Licenciatura en Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Facultad de Ciencias Naturales de la Universidad Autónoma de Querétaro en el Campus Amazcala, empleándose 20 gazapos de la raza Nueva Zelanda, los cuales se mantuvieron en jaulas junto con su respectiva madre durante la lactancia (35 días) y posteriormente en grupos de cuatro animales por jaula durante la engorda (97 días). Durante la lactancia, 12 gazapos fueron escogidos al azar de madres recibiendo un alimento comercial y 8 la experimental, permitiéndose a los gazapos el acceso al alimento de su madre. Al destete los animales fueron distribuidos completamente al azar en grupos entre los dos tratamientos: 1) alimento comercial (Control) y 2) alimento experimental, de acuerdo al alimento que habían recibido sus madres durante la lactancia. La ración experimental fue extrudida en el CIATEQ, conteniendo 40% de heno de alfalfa molido, 37% de salvado de trigo, 18% de maíz molido, 5% de melaza y un coccidiostato (AMZ). La composición química fue la mostrada en el cuadro 2. Cuadro 2. Composición química de las raciones Composición química (%) CONTROL AMAZCALA Materia seca 93.7±0.20 95.40±2.75 Proteína cruda 19.1±0.15 16.2±0.37 Fibra detergente neutro 36.0±0.56 34.2±0.62 Fibra detergente ácido 21.4±0.03 15.0±0.08 lignina 5.3±0.15 3.5±0.18 COLECCIÓN DE MUESTRAS: Los animales se adormecieron por inhalación de CO2 durante 3 min y posteriormente se sacrificaron seccionándoles la vena yugular para su exanguinación. Una vez sacrificados se procedió a la apertura del cadáver y extracción del ciego. El contenido cecal se guardo en bolsas de plástico identificadas, se congeló en nitrógeno líquido y se conservó a 80° C hasta su análisis. PREPARACIÓN DE LA MUETRA PARA CROMATOGRAFIA: Se pesó 1g de contenido cecal y se colocó en tubos de polietileno de 10 ml se le agregó 100 µl de ácido fosfórico, 5 ml de acetona grado HPLC y 1ml de agua tipo HPLC, se agitó en vortex a máxima velocidad por 10 segundos y se colocaron los tubos en la centrífuga refrigerante por 30 min a 10,000 r.p.m a 4 °C; se separó el sobrenadante con una jeringa y se filtró en un filtro de 0.20µm. El filtrado se colocó en viales ámbar con tapa para cromatografía. Todas las muestras se corrieron por duplicado. Las constantes del cromatógrafo fueron las mostradas en el cuadro 3. Cuadro 3. Constantes del cromatógrafo Gas acarreador He 40ml/s Horno 100°C x 5min. De 100 a 250°C aumentando 10°C por minuto Inyector Modo Split 1:50 250°C Detector FID 300°C presión 12.75 psi columna 30.0m x 320µm x .25 µm nominal PREPARACIÓN DE LA MUESTRA PARA pH: A 3g de contenido cecal se le agregaron 8ml de agua destilada, se agitó y se midió el pH con ayuda del potenciómetro. RESULTADOS La dieta comercial presentó una fermentación propiónica, no siendo así en la dieta experimental. Las concentraciones de ácido acético, valérico y butírico, así como el pH del contenido cecal se muestra en la figura 2. Figura 2. Concentración de ácidos grasos volátiles y pH en el contenido cecal de conejos CONCLUSIONES La dieta comercial presentó una mayor fermentación a nivel cecal, ya que las concentraciones de ácido acético y butírico fueron mayores, con lo cual los valores de pH fueron más ácidos que con la dieta experimental. AGRADECIMIENTO A la Fundación Produce Querétaro, A.C. por el financiamiento parcial del proyecto. BIBLIOGRAFIA 1. Ibañez S.G.. Alimentación y suplementos alimenticios. Revisado en VETERINARIOS DE ALBACETE http://www.anacweb.com/modules.php?file=article&name=News&sid=208 creado el 22 de julio 2009 2. Gecele P. Fisiología digestiva del conejo adulto. Monografías de Medicina Veterinaria, Vol.8(2), diciembre 1986.Universidad de Chile. Facultad de Ciencias Veterinarias y Pecuarias. Revisado en http://www.monografiasveterinaria.uchile.cl/CDA/mon_vet_completa/0,1421,SCID%253D1381 9%2526ISID%253D418,00.html el 20 de julio de 2009