AC CITOPLASMÁTICOS INFORMACIÓN QUE PUEDE APORTARNOS

Anuncio
CAC
onANTICITOPLASMÁTICOS INFORMACIÓN
gr QUE PUEDEN APORTARNOS
es
oN
ac
ion
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
íni
co
20
15
Dra Mª Belén Aparicio Hernández
Complejo Universitario Salamanca
Co ¿DE QUÉ HABLAMOS CUANDO NOS
ng
REFERIMOS
A AC ANTICITOPLASMÁTICOS?
re
so
Na
cio
na
ld
el
La
bo
ra
t
or NÚCLEO CELULAR
CÉLULA COMPLETA
io
Cl
íni
co
20
CITOPLASMA
1
5
CELULAR
BIO RAD LABORATORIES
Education and Training Tools
Co
ng
CICLO CELULAR
re
so
Na
cio
n
al
PROFASE
de
METAFASE
lL
ab
or
ato
rio
ANAFASE
TELOFASE
Cl CEL.
ínDIVIDIDA
ico
20
1
5
Co
DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS
ng
ESTRATEGIA A SEGUIR
r
•
•
es
oN
Inmunofluorescencia
indirecta (IFI)
ac
– Sustratos: io
n
al AMA, LKM)
• TRIPLE TEJIDO (ASMA,
de
• HEp-2 (ANA)
l
La
• LEUCOCITOS HUMANOS (ANCAS).
b
or
– Subjetivo
ato
Inmunoensayos
rio
– ELISA
Cl
íni
– Inmunoblot
co
– Eliminan la variación intra e inter observador de la 2
IFI
01
5
Co
nIFI
gr
es
oN
• Informe
ac
– Positivo/negativo
ion
al
– Patrón fluorescencia
d
– intensidad/título el
L
– intervalos referencia
• Conjugado
ab
or
– Anti IgG humana
– FITC/proteína (3)
– Contenido Ab (30-60
µg/ml)
– Dilución trabajo
Substrato
Hep 2
Triple tejido
(Riñón/hígado/estómago)
Leucocitos humanos.
ato
rio
Muestra
CSuero
lín
ico
2
01
5
Co
ng
Patrones de fluorescencia
HEP 2
re
so
N
ac
NUCLEAR
ion
homogéneo/periférico,
moteado, centromérico, nucleolar,
aldots, membrana nuclear, granular difuso
PCNA, nuclear
de
lL
CITOPLASMÁTICO ab
o
ra citoesqueleto.
moteado, granular, punteado,
tor
io
Cl
MITÓTICO
íni Cenp-F
huso mitótico, centrosoma, NuMA, cuerpo medio,
co
20
15
Co Anticuerpos Citoplasmáticos
ng
re
Células
Hep
2
so
Na
cio
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
íni
M2
co
20
Actina
JO1
Tropomiosi
na
Vimentina
SRP
RIBOSOMAL
Citoesquel.
Moteado
Otros
Citoqueratina
LISOSOMAL
Vinculina
GOLGI
Mitocond
15
Dra Mª Belén Aparicio Hernández
Complejo Universitario Salamanca
Co
ng
ANTI JO1
re
so
Na
cio
n
al
de
ANTICUERPO
Anti Jo-1
ANTÍGENO
HISTIDIL-t-RNA
SINTETASA
ENFERMEDADES
ASOCIADAS
POLIMIOSITIS Y
DERMATOMIOSITIS
SID. OVERLAP
l LPATRÓN TÍPICO
ab
or
ato
rio
NOTAS
HEP 2. PATRÓN
MOTEADO FINO DIFUSO
EN TODO EL
CITOPLASMA.
MATERIAL
CROMOSÓMICO NO SE
TIÑE.
CCONSIDERADO
UNO DE
l
í
LOS n
6 ENAS
ico
INDIVIDUALES.
EL MAS FRECUENTE
EN
2
LAS MIOSITIS. 0
15
Co
ANTI
P- RIBOSOMIAL
ng
re
so
Na
cio
n
al
de
lL
ANTICUERPO
Anti P- RIBOSOMIAL
ANTÍGENO
PROTEÍNAS
RIBOSOMIALES P0,P1 Y
P2
ENFERMEDADES
ASOCIADAS
LES
ASOCIADO A
SÍNTOMAS
NEUROLÓGICOS
ab
or TÍPICO
PATRÓN
ato
rio
NOTAS
HEP 2. PATRÓN HOMOGÉNEO
GRANULAR DENSO EN TODO
EL CITOPLASMA.
NUCLEOLOS MARCADOS
HOMOGÉNEAMENTE.
Cl
íni
NORMALMENTE
NO
INCLUIDO
EN
c
o
DETERMINACIONES DE
20
ENA SCREENING.
15
10-20%. PACIENTES.
Co
AC
ng APARATO DE GOLGI
re
so
Na
cio
n
al
de
ANTICUERPO
COMPLEJO DE GOLGI
ANTÍGENO
LOCALIZADOS EN EL
COMPLEJO DE GOLGI
l LENFERMEDADES
ab
ASOCIADAS
or
ato
PATRÓN TÍPICO
rio
LES,SÍNDROME SJOGREN.
INFECCIONES
NEOPLASIAS
HEP 2. PATRÓN GRANULAR
IRREGULAR FOCALIZADO
CERCA DEL NÚCLEO EN
CITOPLASMA(INTERFASE).
TINCIÓN DIFUSA
CITOPLASMÁTICA (CELS
DIVISIÓN)
Cl
ín
ico
20
15
Co
ng AC ANTI LISOSOMAL
re
so
ANTICUERPO
LISOSOMAL
Na
ANTÍGENO
PROTEÍNAS LISOSOMALES
cio
Y LAMPS (ASOCIADOS A
na
LAS PROTEÍNAS DE LAS
MEMBRANAS
ld
LISOSOMALES)
el ENFERMEDADES
S (POCO FREC)
LASOCIADAS
ab
SÍN ASOCIACIÓN CLÍNICA
IMPORTANTE.
or
ato
PATRÓN TÍPICO
HEP 2. PATRÓN GRANULAR
MEDIO,
rio IRREGULAR
GRUESO EN EL
CCITOPLASMA..
línHAY FLUORESCENCIA
NO
ico Y NUCLEOLOS
EN NUCLEO
20
15
LE
.
Co
ng
AC ANTI SRP
re
so
Na
cio
n
al
de
ANTICUERPO
SIGNAL RECOGNITION
PARTICLE
ANTÍGENO
COMPLEJO DE 6
POLIPÉPTIDOS DE
RIBONUCLEOPROTTEÍNAS
ENFERMEDADES
ASOCIADAS
POLIMIOSITIS.
RARO: DERMATOMIOSITIS
ESCLEROSIS SITÉMICA
FIBROSIS PULMONAR
INTERSTICIAL
lL
ab
or
ato
rio
PATRÓN TÍPICO
NOTAS
HEP 2. PATRÓN
MOTEADO GRANULAR
CITOPLASMÁTICO.
NÚCLEO NEGATIVO.
Cl
íni MOTEADO
PATRÓN
CITOPLASMÁTICO.
c
o2
INMUNOBLOT.
01
5
Co
ng
AC ANTI F ACTINA
re
so
Na
cio
n
al
de
ANTICUERPO
Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO.
ANTÍGENO
F ACTINA
ENFERMEDADES
ASOCIADAS
HEPATITIS AUTOINMUNE 1
CIRROSIS BILIAR PRIMARIA
ENFS TJ CONECTIVO
lL
ab
or
PATRÓN TÍPICO
ato
rio
NOTAS
HEP 2. PATRÓN DE
MICROFILAMENTOS
RECTILÍNEOS Y PARALELAS.
NÚCLEO Y NUCLEOLOS
NEGATIVOS.
Cl
íniPACIENTES CON HAI Y
20%
ASMA c
NO
SON F ACTINA.
o
IFI HEP 2, INMUNOBLOT
o
2
01
ELISA.
5
Co
ngAC ANTI
re
so
Na
cio
na
l
VIMENTINA
de
ANTICUERPO
Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO
ANTÍGENO
VIMENTINA
ENFERMEDADES
ASOCIADAS
HEPATITIS AUTOINMUNE
ARTRITIS REUMATOIDE
SIND FATIGA.
lL
ab
or
PATRÓN TÍPICO
ato
rio
NOTAS
HEP 2. PATRÓN DE
FILAMENTOS INTEMEDIOS
CON TINCIÓN
PERINUCLEAR DENSA Y
FIBRILAR
CITOPLASMÁTICA.
Cl
ín
ico
SU PRESENCIA TIENE UNA
CORRELACIÓN INCIERTA.
20
15
Co
ACnANTI
CITOQUERATINA
g
re
so
Na
cio
n
al
de
ANTICUERPO
Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO
ANTÍGENO
CITOQUERATINA
ENFERMEDADES
ASOCIADAS
HEPATOPATÍA ALCOHÓLICA
ARTRITIS REUMATOIDE
PSORIASIS
INDIVIDUOS SANOS.
lL
ab
or
ato
rio
PATRÓN TÍPICO
HEP 2. PATRÓN
CON TINCIÓN
PERINUCLEAR DENSA Y
RETICULAR
CITOPLASMÁTICA.
Cl
ín
ico
20
15
Co
ACngANTI TROPOMIOSINA
re
so
Na
cio
n
al
de
ANTICUERPO
Ac CITOPLASMÁTICO
CITOESQUELETO
ANTÍGENO
TROPOMIOSINA
ENFERMEDADES
ASOCIADAS
INDIVIDUOS SANOS.
COLITIS ULCEROSA
ARTRITIS REUMATOIDE
ESCLEROSIS SISTÉMICA
lL
ab
or
PATRÓN TÍPICO
ato
rio
NOTAS
HEP 2. MARCAJE DE LAS
FIBRAS DE ESTRÉS POR
DEBAJO DE LA
MEMBRANA
CITOPLASMÁTICA.
INTERFASE Y METAFASE
NEGATIVO.
Cl
ín
ico
INTERACTÚA CON OTRAS
MOLÉCULAS EN LA
CONTRACCIÓN
MUSCULAR
20
15
Co
ng AC ANTI VINCULINA
re
so
ANTICUERPO
Ac CITOPLASMÁTICO
Na
CITOESQUELETO
cio
ANTÍGENO
VINCULINA
na
l d ENFERMEDADES
INDIVIDUOS SANOS.
el ASOCIADAS
MIASTENIAS GRAVIS
TROMBOCITOPENIA
La
INMUNE
bo
ato
PATRÓNrTÍPICO
HEP 2. FIBRAS
A LO
rio FLUORESCENTES
LARGO DE LA
ClMEMEBRANA
CITOPLASMÁTICA
íDIRIGIDAS
nic HACIA EL
NÚCLEOo
20
15
Co
AC ANTIMITOCONDRIALES
ng
re
so
Na
cio
n
al
ANTICUERPOS
ANTIMITOCONDRIALES
9 TIPOS M1-M9.
96% M2
ANTÍGENO
COMPLEJO PIRUVATO
DEHIDROGENASA (PDC).
de ENFERMEDADES
l ASOCIADAS
La
bo
PATRÓN TÍPICO
ra
tor
io
CIRROSISBILIAR PRIMARIA
(CBP)
ESCLERODERMIA,CREST,
LES,SIND. SJOGREN,SIND
OVERLAP.
HEP 2. PATRÓN
CITOPLASMÁTICO
GRANULAR IRREGULAR
DESDE EL NUCLEO POR TODO
CITOPLASMA.
NOTAS
Cl
ín
ico
CONFIRMAR EN TRIPLE
TEJIDO: TINCIÓN GRANULAR
CITOPLASMÁTICA EN
HEPATOCITOS, TÚBULOS
RENALES Y CEL. PARIETAL
ESTÓMAGO.
20
15
PATRONES
AC CITOPLASMÁTICOS
Co
ng
re
so
Na
cio
GRANULAR
MOTEADO
na
l
DIFUSO
FINO
MIT
HEP 2
d
GOLGI elLISOSOMAL
La
bo
HEPATOCITOra
GW
tor
LC-1
CITOESQUELETO
PUNTEADO
LKM-1
io
OTRAS
ACTINA
CEL
PARIETAL
GÁSTRICA
Cl
ín
GSTT-1
ico
20
15
Report of the first international consensus on standardized nomenclature of
antinuclear antibody HEp-2 cell patterns 2014–2015
Edward K. L. Chan1, Jan Damoiseaux2, Orlando Gabriel Carballo3,4, Karsten Conrad5,
Wilson de Melo Cruvinel6, Paulo Luiz Carvalho Francescantonio6, Marvin J. Fritzler7,
Ignacio Garcia-De La Torre8, Manfred Herold9, Tsuneyo Mimori10,11, Minoru Satoh12,
Carlos A. von Mühlen13 and Luis E. C. Andrade14,15* Frontiers in Immunology August
2015. Volume 6. Article 412. The 12th International Workshop on Autoantibodies
and Autoimmunity
Co
ng
re
so
Na
cio
n
al
,
held in Sao Paulo, Brazil, on August 28 2014,
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
15
Frontiers in immunology. August 2015,Vol 8, Article 412. Chan et al.
Co
ngRecordando y Participando
re
so
1. Cuál deNlos
ac siguientes autoanticuerpos son
ion
criterios diagnósticos
de HAI tipo 1
al
de
lL
A. ANA y ASMA.
ab
o
ra
B. LKM3 y ASMA.
tor
C. LKM-1 y LC-1.
io
C
lín
D. LKM-1 y ANA.
ico
20
15
Co
IFI
ng AutoAc Hepatitis Autoinmune
re
so
Na
cio
n
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
R. Liberal et al. / Autoimmunity Reviews 13 (2014) 435–440
20
15
Co
ng
re
so
Nacriterio diagnóstico definitivo de HAI
2. Se considera
cio presenta una de las siguientes
cuando un paciente
na
respuestas:
ld
el
A. IgG en concentracionesLmenores
a 1 vez el límite
ab
superior normal.
or
a
B. Presentar hepatotoxicidad por talcohol
or o fármacos.
i
o C inferiores a
C. Presencia de autoanticuerpos a títulos
lín
1/40.
ico
D. Ninguna de las anteriores.
20
15
Co
ngHEPATITIS AUTOINMUNE
re
so Parámetros
Parámetros
N
clínicos
bioquímicos
ac
ion
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
<1
0
íni
co
Sexo femenino +2
Fármacos
Sí
-4
No
+1
FA/ALT (AST)
<1.5
+2
1.5-3
0
>3
-2
Parámetros
inmunológicos y
virológicos
Parámetros
histológicos
ANA, SMA O LKM -1
Hepatitis de
>1/80
+3
Interfase
1/80
+2
1/40 (niños)
AMA +
Alcohol
<25g/día
>60g/día
+2
-2
Otras
enfermedades
autoinmunes +2
Gammaglobulina o
IgG
>2
+3
1.5-2
+2
1-1.5
+1
+3
Infiltrado linfoplasmocitario
predominante
+1
+1
1/40 (adultos)
Respuesta al
tratamiento
0
Rosetas (aspecto
seudoglandular)
-4
Ninguno de los anteriores
-5
(pANCA, anti.LC1, antiSLA, etc.)
+2
Alteraciones biliares -3
Recaída al
suspender el
tratamiento
+1
Otros hallazgos que
sugieran otra
(sólo si autoAc -)
etiología
Marcadores de
hepatitis vírica
Positivo
3
Negativo
+3
+2
+1
Positividad para otros
autoanticuerpos definidos
(sólo si autoAc clásicos -)
HLA DR3 o DR 4
Completa
-
-3
20
Diagnostic criteria of autoimmune hepatitis. R. Liberal et al. Autoimmunity
Reviews,13,435-440.2014
15
+3
Co
ng
re
so
Na
3.Los anticuerpos
mitocondriales positivos en
cio
riñón en IFI dentriple tejido afectan:
al
de
lL
ab
A. Los túbulos renales proximales
y distales.
or
ato
B. Túbulos renales proximales.
rio
C. Túbulos renales distales.
Cl
íni
D. Ninguna de las anteriores.
co
20
15
Co
ng
IFI TRIPLE TJ RATA
re
so
Na
cio
n
al
MITOCONDRIALES
de
MITOCONDRIALES
lL
ab
or
LKM 1
ato
rio
Cl
ín
ico
20
15
Co
ng
re
so
Na anticuerpos no son
4. Cuál de estos
cio
anticitoplasmáticos:
na
ld
el
L
ab
A. Ac Anti f-actina.
or
B. Ac Anti citoqueratina ato
rio
C. Ac Anti histona
Cl
ín
D. Ac Anti mitocondriales
ico
20
15
Co Anticuerpos Citoplasmáticos
ng
re
Células
Hep
2
so
Na
cio
na
ld
el
La
bo
ra
tor
io
Cl
íni
M2
co
20
Actina
JO1
Tropomiosi
na
Vimentina
SRP
RIBOSOMAL
Citoesquel.
Moteado
Otros
Citoqueratina
LISOSOMAL
Vinculina
GOLGI
Mitocond
15
Dra Mª Belén Aparicio Hernández
Complejo Universitario Salamanca
Co
ng
re
so
Na sospecha clínica, analítica o
5. Ante una
cio
histológica de nHAI se deben determinar los
al
anticuerpos:
de
lL
A. ANAS
ab
or
B. ASMA
ato
r
io
C. ANTI LKM1
Cl
íni
D. Todas las anteriores.
co
20
15
Co AUTOANTICUERPOS ASOCIADOS
ng
re
HAI
so
Na
Hepatitis
cioAutoanticuerpos
Prevalencia HAI
Autoinmune
asociados
na
ld
ASMA el
40-90%
TIPO I
La
ANA
5-70%
b
ANTI-SLA/LP or
10-30%
ato
rio
ANTI LKM-1
2-4%
TIPO II
ANTI LC-1
1-2%
Cl
íni 10-30%
ANTI SLA/LP
co
20
15
Los Tipos se establecen de acuerdo a los anticuerpos
Co
ng
Muchas Gracias
re
so
Na
cio
n
al
de
lL
ab
or
ato
rio
Cl
ín
ico
20
15
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