I. INTRODUCCIÓN Entre los cultivos alimenticios de mayor

Desarrollo de marcadores SCAR y CAPS en un QTL con efecto
importante sobre la resistencia al tizón tardío de la papa. Trujillo
Luján, Guillermo.
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I. INTRODUCCIÓN
Entre los cultivos alimenticios de mayor importancia, la papa ocupa el quinto lugar
a nivel mundial (FAOSTAT, 2002), siendo en nuestro país el segundo en producción
(Ministerio de Agricultura, 2002). Este importante cultivo es afectado por la enfermedad
conocida como “tizón tardío” o “rancha”, causada por el oomiceto Phytophthora infestans,
principal patógeno de la papa a escala mundial.
Los programas de mejoramiento de cultivos para el consumo humano consideran
dentro de sus objetivos la obtención de variedades con resistencia a enfermedades, la cual
se expresa de dos maneras: la resistencia vertical o monogénica, gobernada por genes
mayores y la Resistencia Horizontal o poligénica, gobernada por QTLs. Ambos tipos de
resistencia han sido introducidos mediante mejoramiento clásico, proceso que puede
tomar entre 10 y 25 años hasta obtener una variedad mejorada (CIP, 1997). Este tiempo
puede ser reducido significativamente mediante el empleo de la Selección Asistida por
Marcadores (MAS, del inglés Marker-Assisted Selection) (Beckmann y Soller, 1983). Este
proceso que combina procedimientos de biología molecular con técnicas de mejoramiento
clásico y permite seleccionar los individuos que reúnen los caracteres de importancia que
interesa conservar en la población.
Con la finalidad de comprender mejor la resistencia horizontal al tizón tardío, el
Centro Internacional de la Papa (CIP) desarrolló una población diploide denominada PD,
que consta de 246 individuos híbridos provenientes del cruce entre el individuo diploide
Solanum phureja (clon CHS-625
P) (2n=2x=24) como progenitor femenino, el cual
presenta resistencia horizontal al tizón tardío, con el individuo dihaploide Solanum
tuberosum (clon PS-3
D) (n=2x=24), susceptible a la enfermedad, como progenitor
masculino. Empleando marcadores RAPD, RFLP, SSR y AFLP, se identificaron QTLs de
Elaboración y diseño en formato PDF, por la Oficina General del Sistema de Bibliotecas y
Biblioteca Central UNMSM
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importante sobre la resistencia al tizón tardío de la papa. Trujillo
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resistencia a tizón tardío: 3 QTLs en el parental S. phureja (phu) y 8 en el parental
dihaploide S. tuberosum. (tbr). Dentro de los QTLs, el que está ubicado en el cromosoma XII
de S. tuberosum dihaploide aporta en la variación fenotípica de la resistencia horizontal
hasta en un 43% (Ghislain et al., 2001) y está asociado a 3 marcadores ligados a genes
candidatos involucrados en rutas bioquímicas de defensa (Trognitz et al., 2002). Gebhardt
y Valkonen (2001) señalan que la estrategia de genes candidatos es conveniente para
identificar marcadores útiles para MAS.
Dentro de los marcadores moleculares, los AFLP resaltan por ser muy convenientes
debido a la obtención de un alto número de bandas (entre 50-100) por vez, no siendo
necesario un conocimiento previo del genoma del organismo en estudio (Vos et al., 1995),
sin embargo su aplicación a gran escala puede significar costos relativamente altos y
requerir de laboratorios debidamente equipados.
Por esto, para una detección rápida, económica y confiable del QTL tbr-XII, se hizo
necesario el desarrollo de marcadores SCAR (Sequence Characterized Amplified Regions,
Regiones Amplificadas y Caracterizadas por Secuencia, Paran y Michelmore, 1993), lo que
facilitará el seguimiento de este QTL durante su introgresión en otras poblaciones de papa.
Se seleccionaron 4 marcadores AFLP ligados al QTL tbr-XII, considerando aspectos
técnicos y su posición dentro del mismo; para el desarrollo de marcadores SCAR. La
técnica de PCR inversa (Ochman et al., 1988) fue implementada para la búsqueda de
polimorfismo en el ADN adyacente al marcador AFLP. Asimismo, se consideró como
alternativa el desarrollo de marcadores directamente de la secuencia AFLP.
Adicionalmente, se consideraron como mínimo 2 marcadores AFLP vinculados a
los QTLs restantes de cada progenitor, para convertirlos a marcadores SCAR, procurando
así cubrir todos los QTLs detectados en la población PD.
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Desarrollo de marcadores SCAR y CAPS en un QTL con efecto
importante sobre la resistencia al tizón tardío de la papa. Trujillo
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I.1 Objetivos
I.1.1 Objetivo general
-
Desarrollar marcadores de secuencia específica basados en PCR para detectar QTLs
de importancia en la resistencia a tizón tardío.
I.1.2 Objetivos específicos
1. Desarrollar marcadores de secuencia específica que permitan una fácil
detección de los QTLs de resistencia a tizón tardío, en especial del QTL tbr-XII,
para su introgresión en otras poblaciones de papa.
2. Evaluar la técnica de PCR inversa como estrategia de búsqueda de
polimorfismo.
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