fosforo inorganico

FOSFORO INORGANICO
abc
UV Method
Manual
PARA SU USO
Para la determinación cuantitativa in vitro de Fosforo
Inorganico en suero. Este producto es adecuado para su
utilización en Manual.
Cat. No.
PH 1016
300 ml
1. Reactivo Blanco
2. Molibdato
3. Patrón
210 ml
90 ml
1 x 5 ml
SIGNIFICADO CLINICO
El cuerpo humano contiene aproximadamente un kilo de
fósforo. La parte inorgánica del hueso comprende sales
de fosfato cálcico que representan el 80% del contenido
de fósforo total. El resto se distribuye a traves de otras
células del cuerpo en forma de fósforo orgánico en
fosfolípidos y fosfoproteínas. En el suero la mayoría del
fósforo inorgánico existe en una forma libre, con un 15%
aproximadamente . Los fosfatos anormales en suero se
encuentran comunmente en enfermedades hepáticas,
oseas y paratiroideas. El fosfato se mide junto con el
calcio en suero, dado que cada medida es útil para la
intrepretación de la otra.
(1)
PRINCIPIO
El fósforo inorgánico reacciona con ell molibdato
amónico en presencia de ácido sulfúrico para formar un
complejo fosfomolibdato que se mide a 340 nm.
(2)
TOMA Y PREPARACION DE LA MUESTRA
Se recomienda utilizar suero como muestra.
El suero es estable durante 5 días cuando se conserva
entre +2 y +8°C. Estable durante 3 meses si se conserva
a -20°C. Evitar muestras hemolíticas ya que la hemólisis
interfiere con el ensayo.
COMPOSICIÓN DEL REACTIVO
Componentes
1. Reactivo blanco
Acido sulfúrico
Cloruro Sódico
Detergente
2. Reactivo Molibdato
Molibdato amónico
Acido sulfúrico
Cloruro sódico
3. Patrón
Fósforo potásico
Concentración inicial
de las soluciones
0,36 mol/l
154 mmol/l
3,5 mmol/l
0,36 mol/l
154 mmol/l
1,61 mmol/l (5 mg/dl)
PRECAUCIONES DE SEGURIDAD
Unicamente para diagnóstico in vitro. No pipetear con la
boca. Respetar las precauciones normales necesarias,
que se requieren al manejar reactivos de laboratorio.
Las soluciones 1 y 2 contienen ácido sulfúrico. Evitar la
ingestión así como el contacto con piel y mucosas.
La solución 3 contiene azida sódica. Evitar su ingestión o
el contacto con la piel y mucosas. En caso de contacto
con la piel, lavar inmediatamente el área afectada con
agua abundante. En caso de ingestión o contacto con los
ojos llamar inmediatamente a un médico.
La azida sódica reacciona con el cobre y plomo de las
tuberías, lo que podría producir azidas explosivas.
Cuando se desheche este reactivo enjuagar
abundantemente con agua para evitar la formación de
estas azidas. Las superficies metálicas que hayan sido
puestas en contacto con la azida sódica deben ser
lavadas con hidróxido sódico al 10%.
Hojas informativas sobre Salud y Seguridad están
disponibles si se desean.
Los reactivos deben ser utilizados solo para los
propósitos indicados por personal adecuado
cualificado de laboratorio bajo condiciones
apropiadas de laboratorio.
ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
Todos los reactivos están listos para su uso. Estables
hasta la fecha de caducidad cuando se conservan entre
+15 y +25°C.
ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
DE TRABAJO
Mezclar una botella de Reactivo Blanco 1 con una botella
de Molibdato 2 (300 ml de reactivo de trabajo ). Para
volúmenes más pequeños preparar el reactivo para el
análisis según la tabla siguiente:
Reactivo Blanco
Molibdato
7,0 ml
14,0 ml
28,0 ml
3,0 ml
6,0 ml
12,0 ml
Estable durante 8 semanas entre +15 y +25°C.
MATERIALES SUMINISTRADOS
Reactivo blanco
Reactivo Molibdato
Patrón
MATERIALES NECESARIOS NO SUMINISTRADOS
Pipetas apropiadas para dispensar de 10 Hl and 1 ml.
Cronómetro. Bloque de calentamiento o baño de agua
para mantener 25, 30 ó 37°C.
Un espectrofotómetro con longitud de onda de 340 nm.
Multisueros Valorados Randox Nivel 2 (No. Cat. HN
1530) y Nivel 3 (No. Cat. HE 1532)
PROCEDIMIENTO
Longitud de onda:
Cubeta:
Temperatura:
Medida:
340 nm
1 cm de espesor
20°C-25°C/37°C
frente al reactivo blanco
Pipetear en la cubeta:
Agua destilada
Muestra
Patrón
Reactivo de trabajo
Blanco
Patrón
Muestra
10 Hl
----1 ml
----10 Hl
1 ml
--10 Hl
--1 ml
Mezclar e incubar durante 10 min a 20-25°C ó 5 min a
37°C. Leer la absorbancia de la muestra (Amuestra) y del
patrón (Apatrón) frente al reactivo blanco.
MANUAL - FOSFORO INORGANICO
-
PH 1016
PAGE 2 OF 2
NOTA
Muestras ictéricas y ligeramente lipémicas requieren un
blanco de muestra. Usando el mismo esquema, pipetear
10 Hl de Muestra con 1000 Hl de Reactivo Blanco y
mezclar. En este caso debe restarse la absorbancia
Blanco de Muestra (Ablanco muestra) de la absorbancia de
Muestra (Amuestra).
PRECISION (Suero)
Intra Serie
Muestra
1
Media
0,96
SD
0,023
CV (%)
2,38
n
20
2
4,35
0,092
2,1
20
CALCULOS
Concentración de fósforo inorgánico
Entre series
Muestra
Media
SD
CV (%)
n
2
4,32
0,106
2,44
20
Amuestra
= Concentración del patrón x
Apatrón
CONTROL DE CALIDAD
Se recomiendan los Multisueros Valorados Randox, Nivel 2
y Nivel 3 para el control de calidad diario. Analizar dos
niveles distintos de controles al menos una vez al día. Los
valores obtenidos deberán encontrarse dentro del rango
especificado. Si los valores se encuentran fuera del rango y
su repetición excluye error, se deberán seguir los
siguientes pasos:
1. Comprobar la programación del instrumento y la
lámpara.
2. Comprobar que todo material está limpio.
3. Comprobar el agua, contaminación ej. el crecimiento
bacteriano puede contribuir a la inexactitud de los
resultados.
4. Comprobar la temperatura de reacción
5. Comprobar la fecha de caducidad del kit y sus
componentes.
6. Ponerse en contacto con el Soporte Técnico al Cliente
de los Laboratorios Randox, Irlanda del Norte +00 44
28 94422413.
1
0,97
0,031
3,21
20
COMPARACION DE METODO (Suero)
El método Randox (Y) se comparó con otro método
comercial (X). Se analizaron 40 muestras de pacientes,
con un rango de 0,87 a 6,94 mmol/l. El análisis de
regresión linear de estos datos resultó en la ecuación
Y = 0,996 X + 0,04 con un coeficiente de correlación de
r =0,999.
REFERENCIAS
1. Henry, R.J., Clinical Chemistry, Principles and
nd
Techniques, 2 Edition, Harper and Row, p. 525,
1974.
2. Tietz, N., Clinical Guide to Laboratory Tests, W.B.
Saunders Company, Philadelphia 1983; 5: 384.
INTERFERENCIA
Los siguientes analitos se analizaron hasta los siguientes
niveles y se encontró que no interfieren:
Bilirrubina
500 Hmol/l
Intralipid®
0,4%
Triglicérido
4,05 mmol/l
Hemoglobina
7 g/l
VALORES NORMALES
Suero:
(2)
0,87 - 1,45 mmol/l (2,68 - 4,5 mg/dl)
Se recomienda que cada laboratorio establezca su
propio rango que refleje la edad, sexo, dieta y localidad
geográfica de la población.
CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DE
FUNCIONAMIENTO
Los datos siguientes se obtuvieron utilizando un
analizador Cobas Mira a 37°C. Se pueden solicitar a
Randox Laboratories protocolos de funcionamiento y
aplicacion para analizadores automaticos.
SENSIBILIDAD
El nivel mínimo perceptible es 0,325 mmol/l.
LINEALIDAD
El método es lineal hasta una concentración de 6,5
mmol/l (20 mg/dl). Las muestras con concentraciones
superiores deberán diluirse 1+4 con NaCl al 0,9 % y
repetir la prueba. Multiplicar el resultado por 5.
Revisado 20/08/03 wpt
RANDOX Laboratories Ltd., Ardmore, Diamond Road, Crumlin, Co. Antrim, United Kingdom, BT29 4QY
Tel:CRUMLIN (028)94422413 Fax.No.INT.44
Fax.No.INT.44 (028)94452912 UK (028)94452912
Email:
Email: [email protected] Website: www.randox.com
ABC A
A