1. Hibridación somática interespecífica

1. Hibridación somática interespecífica
- Híbridos somáticos
- Concordancia y discordancia
2. Hibridación “in situ” cromosómica
- FISH
3. Secuenciación
4. Mapeo comparativo
HIBRIDACIÓN CELULAR SOMÁTICA INTERESPECÍFICA
2n = 46
2n = 22
homocariontes hamster(2n=44)
homocariontes humano(2n=92)
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Mapeo mediante celulas híbridas: un ejemplo
CLONES CONCORDANTES
% CONCORDANCIA
* Tienen
Ti
ell factor
f
a mapear y ell cromosoma ( +/+
/ )
* No tienen el factor a mapear y tampoco está presente
el cromosoma ( -/-)
CLONES DISCORDANTES
% DISCORDANCIA
* Tiene el factor y no el cromosoma (+/ -)
* No tienen el factor y si el cromosoma ( - / + )
2
HIBRIDACIÓN “ IN SITU”
Localiza el gen en una banda o zona cromosómica
( > poder de resolución )
Leucocitos en metafase (bandas G)
Desnaturalización DNA cromosomas (formamida)
Hibridación con sonda específica
Antes : marcada con 3H
Ahora: marcada con fluorescencia (FISH)
(sonda con nucleótidos unidos a la biotina. El fluorocromo se unirá a la
biotina y será visible en un microscopio de fluorescencia)
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CARTOGRAFÍA COMPARADA
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