azucar determinacion del azucar reductor

Quito - Ecuador
NORMA TÉCNICA ECUATORIANA
NTE INEN 266:2012
AZUCAR DETERMINACION DEL AZUCAR REDUCTOR
Primera edición
SUGAR DETERMINATION OF REDUCTOR SUGAR
First edition
DESCRIPTORES: AZUCAR, AZUCAR REDUCTOR .
AL 02.04-303
CDU:664.1
CIIU:
ICS:
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
Norma Técnica
Ecuatoriana
NTE INEN
266 :2012
AZUCAR DETERMINACION DEL AZUCAR REDUCTOR
1.
OBJETO
1.1 Esta norma describe el método para determinar el contenido de azúcar reductor en el azúcar.
2. ALCANCE
Este método permite medir la capacidad reductora de soluciones de azúcar blanco conteniendo
substancias re- ductoras, por ejemplo azúcar invertido, en una solución alcalina débil de un complejo
++
de Cu
con tartrato
3. CAMPO DE APLICACIÓN
Este método es aplicable a azúcar blanco y azúcar blanco de plantación con contenido de azúcares
reductores de hasta de 0,089%
En el caso de la Determinación de Azúcares Reductores en Azúcar Blanco y en Azúcar Blanco de
Plantación, si el usuario tiene la libertad de elección de método, ICUMSA recomienda que se dé
preferencia al Método GS2/3/9-5.
4.
DEFINICIONES
4.1 Azúcares reductores - Son mono- y oligosacáridos que contienen un grupo aldehídico o cetónico
libre que presenta un efecto reductor sobre ciertos agentes oxidantes.
4.2 Azúcar invertido - es una mezcla equimolar de glucosa y fructosa.
4.3 Substancias reductoras - Son la suma de azúcares reductores y otras substancias en productos
azucarados definidas por su poder reductor sobre los reactivos que se emplean en la determinación
de azúcares reductores. Como en el caso de azúcares reductores, su cantidad se expresa en la
mayoría de los casos como cantidad equivalente de azúcar invertido, que es la cantidad de azúcar
invertido que presenta igual poder reductor bajo las condiciones de la reacción.
(Continúa)
DESCRIPTORES: AZUCAR, AZUCAR REDUCTOR
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
5 . FUNDAMENTO
El complejo formado entre iones Cu
++
y tartrato de sodio y potasio se reduce por los azúcares
+
reductores a Cu univalente que se precipita como Cu20. El Cu2O precipitado se determina por
valoración iodométrica.
El Cu2O es oxidado por un exceso de yodo en solución acida a Cu
++
y el exceso es retro-titulado con
tiosulfato de sodio.
La reacción entre los azúcares reductores y el complejo de Cu
++
no es estequiométrica. La cantidad
de Cu20 formado depende de las condiciones de la reacción recomendadas que por tanto deben ser
seguidas estrictamente.
Se ha determinado que 1 mL de solución dé yodo de 0,01615 mol/L es equivalente a 1 mg de
7
azúcares reductores, tras haber considerado la corrección por el efecto reductor de la sacarosa .
La modificación del método Ofner original, realizada por A Emmerich, consiste en adoptar las
siguientes características del método del Instituto de Berlín:
• La cantidad de cobre en el reactivo Ofner se incrementa en un 40 % para extender el rango de
medida desde menos de 20 mg hasta 25-30 mg.
• Se incluye un valor blanco que tiene en cuenta la influencia de impurezas en los reactivos.
Se incluye un valor en frío para corregir la influencia de substancias reductoras en la muestra, diferentes de los azúcares reductores, que forman Cu20 y reaccionan con yodo a temperatura ambiente
Una de las principales ventajas del método Ofner en comparación con el método del Instituto de
Berlín es que la corrección por sacarosa, que permite considerar la capacidad reductora de la
sacarosa, es de solo I mg por cada 10 g de sacarosa . Esto es la mitad de la corrección utilizada en el
método del Instituto de Berlín y es mucho más constante y fiable.
6 REACTIVOS Y MATERIALES
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS DE SEGURIDAD
Los USUARIOS DE ESTE MÉTODO DEBERÁN CONSULTAR su LEGISLACIÓN NACIONAL DE SALUD Y SEGURIDAD Y
A LOS PROVEEDORES DE PRODUCTOS QUÍMICOS ANTES DE MANIPULAR ESTOS REACTIVOS.
Usar solamente agua destilada o agua de calidad equivalente. Todos los reactivos deberán ser de
grado analítico o mejor a menos que se especifique lo contrario.
(Continúa)
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
6.1 Carbón activo - en polvo.
6.2 Pequeños trozos de piedra pómez
6.3 Hidrogeno fosfato disódico, dodecahidratado Na2HPO4 . 12 H2O
6.4 Ácido acético glacial p20 = 1,05 g/Ml
6.5 Solución de ácido acético, aprox. 5 mol/L
6.6 Tartrato de sodio y potasio tetrahidratado (sal de Rochelle o Seignette)
KOOC – CH (OH) – CH(OH) – COONa . 4 H2O
6.7 Sulfato de cobre pentahidratado CuSO4. 5 H2O
6.8 Carbonato de sodio anhidro, Na2CQ3. *
6.9
Almidón soluble.
6.10 Ácido clorhídrico, aprox. 1 mol/L.
6.11 Ácido clorhídrico, aprox. 2 mol/L.
6.12 Solución Ofner, modificada. Pesar 7,0 g de sulfato de cobre pentahidratado (5.7), 10,0 g de
carbonato de sodio (5.8), 300 g de tartrato de sodio y potasio (5.6) y 50 g de hidrógeno fosfato
disódico (5.3) en un matraz de 1000 mL. Disolver en aprox. 900 mL de agua (calentando levemente
para disolver si es necesario). Calentar la solución durante 2 horas en un baño de agua hirviendo.
Enfriar hasta temperatura ambiente y enrasar. Añadir aprox. 10 g de carbón activo (5.1) y agitar
durante 5-10 min. Filtrar la solución (6.11).
6.13 Solución de yodato de potasio 0,01667 mol/L.
Secar el yodato de potasio durante 3 horas a 100 °C antes de usarlo. Pesar 3,5667 g de yodato de
potasio, KIO3 Trasvasar a un matraz aforado de 1000 mL, disolver en agua y enrasar.
6.14 Solución de almidón (indicador de yodo). Disolver 1 g de almidón soluble en 100 mL de
solución saturada de cloruro de sodio. Llevar la solución a ebullición durante unos pocos minutos.
6.15 Yoduro de potasio, KI.
6.16 Tiosulfato de sodio, Na2S203 • 5 H20.
6.17 Yodo, I2.
(Continúa)
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
6.18 Solución de tiosulfato de sodio, 0,1 mol/L. Pesar 24,818 g de tiosulfato de sodio (5.16).
Trasvasar a un matraz aforado de 1000 mL y disolver en 400 mL de agua destilada. Enrasar con
agua. Opcionalmente, emplear ampollas preparadas, por ej. Merck Art 1.09950.
6.19 Solución de tiosulfato de sodio, 0,0333 mol/L.
Diluir una solución de? tiosulfato de sodio 0,1 mol/L hasta tres veces su volumen con agua y
normalizar con yodato de potasio en 10 mL de agua. Añadir 5 Ml de acido clorhídrico aprox. 2 mol/Ml
y 10,0 Ml de solución de yodato de potacio de 0,01667 mol/L. (5,13). Cubrir el matraz Erlenmeyer
con un vidrio reloj, agitar suavemente y colocar la solución a oscuras durante aprox. 30 min. Valorar
el yodo formado con
una solución de tiosulfato de sodio (5.19)nhasta decolorar completamnet
añadiendo 1 mL de indicador de almidón (5.14) justo antes del punto final. Calcular el actor fth de la
solución de tiosulfato.
f Th 
30,96
vTh
VTh= mL de solución de tiosulfato de sodio valorada
NOTA
f Th corrige la solución de yodo utilizada al valor determinado experimentalmente de 0,01615
mol/L, para el que 1 mL corresponde a 1 mg de azúcares reductores
6.20 Solución de yodo, 0,05 mol/L. Disolver 53 g de yoduro de potasio (5.15) en 50 mL de agua
destilada en un matraz aforado de 1000 mL. Transferir 12,690 g de yodo (5.17) a este matraz,
disolver y llevar con agua hasta el enrase. Mantener esta solución protegida de la luz. Opcionalmente,
utilizar una ampolla preparada, por ej. Merck Art 1.09910.
6.21Solución de yodo, 0,01667 mol/L. Diluir la solución de yodo 0,05 mol/L (5.20) hasta tres veces
su volumen con agua y normalizar con solución de tiosulfato de sodio 0,0333 mol/L (5.19). Pipetar
25,0 mL de la solución de yodo 0,0166') mol/L en un matraz Erlenmeyer de 300 mL. Añadir 5 mL de
ácido acético mol/L (5.5) y, después de agitar suavemente la mezcla, valorar por retroceso con
solución de tiosulfato de sodio 0,0333 mol/L (5.19). Añadir 1 mL de indicador de almidón (5.14) justo
antes de alcanzar el punto final. Calcular el factor¡É de la solución de yodo:
fI 
VTh f Th
.
25
(Continúa)
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
VTh = mL de solución de tiosulfato de sodio valorada.
f Th = factor de corrección para solución de tiosulfato de sodio.
7 APARATOS
7.1 Balanza analítica - resolución 0,1 mg.
7.2 Balanza de precisión - resolución 0,1 g.
7.3
Buretas - Capacidad 50 Ml
7.4 Matraces Erlenmeyer “ capacidad 300 mL
7.5 Matraces aforados - 1000 mL y 200 mL.
7.6 Pipetas - capacidades 1 mL, 15 mL y 50 mL.
7.7 Vidrio de reloj - para cubrir los matraces Erlenmeyer
7.8 Mechero Bunsen, trípode y malla de tela metálica
7.9 Baño de agua hirviendo
7.10 Baño de agua con circuito de agua fría.
7.11 Papel filtro
8 PROCEDIMIENTO
8.1Preparación de la muestra. La solución preparada para el ensayo deberá contener como máximo
25 mg de azúcar invertido en 50 mL. Esto requiere que 40 g de •azúcar blanco se diluyan con agua
hasta 200 mL.
8.2“Valor en caliente”. Mezclar 50,0 mL de la solución preparada (7.1) en un matraz Erlenmeyer con
50,0mL de la solución Ofner (5.12). Añadir algunos trozos de piedra pómez (5.2) a la mezcla.
a) Llevar la mezcla hasta ebullición en 4 a 5 minutos usando el mechero Bunsen, el trípode y la tela
metálica. Hervir durante exactamente 5 min. Se considera que la ebullición se inicia cuando un gran
número de burbujas de vapor rompen por toda la superficie. Enfriar la mezcla en un baño de agua
con circulación de agua fría. Después de aprox. 10 minutos la mezcla deberá de haber alcanzado la
temperatura ambiente.
b) Añadir 1 mL de ácido acético concentrado (5.4). Añadir solución de yodo (5.21) hasta que el color
de la mezcla se coloree con el típico color del yodo. Este procedimiento disuelve el Cu 20 formado con
un exceso de yodo. Registre este volumen como V1
Añadir 15 mL de ácido clorhídrico, 1 mol/L (5.10) vertiéndolo sobre las paredes internas del matraz
de manera que las gotas residuales sean llevadas a la solución. Cubrir el matraz con un vidrio de reloj
y moverlo suavemente durante 2 min. hasta que el precipitado de Cu20 este completamente disuelto.
(Continúa)
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
Valorar la muestra con tiosulfato de sodio 0,0333 mol/L (5.19). Añadir 1 mL de solución de almidón
justo antes de alcanzar el punto final. Registrar este ^volumen como V2.
Repetir los pasos (a) y (b) con otra solución preparada mezclada con la solución Ofner y registrar el
promedio de las dos replicas V y V2 para el yodo y el tiosulfato respectivamente.
8.3 “Valor en frío”. Mezclar 50,0 mL de la muestra preparada (7.1) con 50,0 mL de la solución Ofner
(5.12)
Dejar la mezcla a temperatura ambiente durante 10 min.
Repetir el paso (b) en 7.2. Registrar los valores V3 y V4 para el yodo y el tiosulfato respectivamente.
8.4 “Valor del blanco”. Mezclar 50,0 mL de agua con 50 mL de la solución Ofner (5.12). Repetir los
pasos (a) y (b) en 7.2. Registrar los valores Vs y V6 para el yodo y el tiosulfato respectivamente.
NOTA - Es esencial que el tiempo entre la adición de solución de yodo y el comienzo de la valoración por retroceso sea igual
en el “Valor caliente” y en el “Valor frió”.
9 EXPRESIÓN DE RESULTADOS
9.1Calculo de resultados
Cantidad de yodo añadido para el “Valor en caliente”
= V1
Cantidad de tiosulfato añadido para el “Valor en caliente”=V2
Cantidad de yodo añadido para el “Valor en frío”
= V3
Cantidad de tiosulfato añadido para el “Valor en frío” = V4
Cantidad de yodo añadido para el “Valor del blanco” = V5
Cantidad de tiosulfato añadido para el “Valor del blanco”= V6
Consumo de solución de yodo de 0,01667 mol/L corregido
“Valor en caliente” calculado, A = (V1 •/,) - (V2 .f Th)
“Valor en frío” calculado,
B = (V3 •/,) - (V4 f Th)
“Valor del blanco” calculado, C = (V5 •/,) - (V6 . f Th)
En donde:
f T = factor de la solución de yodo, calculado en 5,21, y
(Continúa)
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
Corrección por sacarosa D, es 0,1 mL de solución de yodo / g de sacarosa en la mezcla de la
reacción.
( A-B-C-D) * 1000
Azúcar invertido, mg/kg = ------------------- —
s
En donde:
s = cantidad de muestra en 50 mL de solución preparada (7.1).
9.2 Ejemplo de cálculos. 40 g de azúcar blanco se pesan y diluyen hasta 200 mL. 50,0 mL de esta
solución contienen 10 g de sacarosa
Cantidad de solución de yodo añadida para el valor en caliente es
20 mL
Cantidad de tiosulfato de sodio consumido es
Cantidad de solución de yodo añadido para el valor frio es
18,00 mL
20,80 mL
Cantidad de tiosulfito de sodio consumido es
19,90 mL
Cantidad de yodo añadido para el valor blanco es
20 mL
Cantidad de tiosufato de sodio consumido es
20,00 mL
fTh cakclado es 1,029;
f1 calculado es 1,031
A= (20,00 . 1,031) -(18,80 - 1,029) = 1,27
B= (20,00 . 1,031) -(19,90 - 1,029) = 0,14
C= (20,00 . 1,031) -(20,00 - 1,029) = 0,04
D= 10,00 . 0,1 = 1,00
(Continúa)
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
Azucares reductores, mg/kg=
(1,27 - 0,14 - 0,04 - 1,00) . 1000
______________________________ = 9,0 mg/kg
10
9.3 Precisión . para azucares blancos y azúcares blancos de plantación que contengan entre 0,007%
y el 0,089% de azucares reductores, la diferencia absoluta entre dos resultados obtenidos bajo
condiciones de repetibilidad no deberá ser mayor del 0,006%. La diferencia absoluta entre dos
resultados obtenidos bajo condiciones de reproducibilidad no deberá ser mayor del 0,011
(Continúa)
CDU:664.1
ICS:
CIIU:
AL02.04-303
Z.3 BASES DE ESTUDIO
Libro de métodos 2011, Método GS 2/9-6 (2011) Determinación de azúcar blanco y en azúcar blanco
de plantación por el método volumentrico de ofner modificada ( ICUMSA), Bartens, Berlin, 2011
INFORMACIÓN COMPLEMENTARIA
Documento:
NTE INEN 266
TÍTULO: AZUCAR DETERMINACION DEL AZUCAR
REDUCTOR
ORIGINAL:
Fecha de iniciación del estudio:
Código:
AL0 2 .0 4 -3 0 3
REVISIÓN:
La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y
Productividad aprobó este proyecto de norma
Oficialización con el Carácter de Obligatoria
por Resolución No.
publicado en el Registro Oficial No.
Fecha de iniciación del estudio:
Fechas de consulta pública: No se realizó
Subcomité Técnico de:
Fecha de iniciación:
Integrantes del Subcomité:
Fecha de aprobación:
NOMBRES:
INSTITUCIÓN REPRESENTADA:
Mediante compromiso presidencial N° 16364, el
Instituto Ecuatoriano de Normalización – INEN, en vista
de la necesidad urgente, resuelve actualizar el acervo
normativo en base al estado del arte y con el objetivo de
atender a los sectores priorizados así como a todos los
sectores productivos del país.
Para la revisión de esta Norma Técnica se ha
considerado el nivel jerárquico de la normalización,
habiendo el INEN realizado un análisis que ha
determinado su conveniente aplicación en el país.
La Norma en referencia ha sido sometida a consulta
pública por un período de 30 días y por ser considerada
EMERGENTE no ha ingresado a Subcomité Técnico.
Otros trámites: Esta NTE INEN 266 (2012),Azúcar Determinación del Azúcar reductor reemplaza a la NTE
INEN 266 (1978) Azúcar Determinación del Azúcar reductor
La Subsecretaría de la Calidad del Ministerio de Industrias y Productividad aprobó este proyecto de norma
CDU:664.1
ICS:
Oficializada como:
CIIU:
AL02.04-303
Por Resolución No.
Registro Oficial No.
Instituto Ecuatoriano de Normalización, INEN - Baquerizo Moreno E8-29 y Av. 6 de Diciembre
Casilla 17-01-3999 - Telfs: (593 2)2 501885 al 2 501891 - Fax: (593 2) 2 567815
Dirección General: E-Mail:[email protected]
Área Técnica de Normalización: E-Mail:[email protected]
Área Técnica de Certificación: E-Mail:[email protected]
Área Técnica de Verificación: E-Mail:[email protected]
Área Técnica de Servicios Tecnológicos: E-Mail:[email protected]
Regional Guayas: E-Mail:[email protected]
Regional Azuay: E-Mail:[email protected]
Regional Chimborazo: E-Mail:[email protected]
URL:www.inen.gob.ec