Bioquímica de la saliva- Citación 32 - Facultad de Odontología

GLANDULAS
SALIVALES
BIOQUÍMICA
DE LA
SALIVA
MAYORES Y MENORES
SALIVA
Flujo reposo: 0.02-0.05 a 1.8 ml/min
Flujo estimulado: 2.5- 5ml/min
Cavidad oral: 1 ml de saliva
– Forma una película de 100 µm de espesor
– Facilita el intercambio iónico entre saliva y esmalte
– Recambio 700-800 veces/día, elimina exceso de bacterias y
restos alimenticios
Cátedra de Bioquímica General y Bucal- Facultad de Odontología- UBA
FUNCIONES DE LA SALIVA
Suma de secreciones de las GS
mayores y menores + Líquido
gingival (transudado seroso)
Saliva total
Líquido turbio, posee partículas en suspensión
(bacterias, leucocitos, células descamadas del
epitelio bucal, restos alimenticios)
Saliva Parcial
Saliva parotídea o mezcla de
saliva submaxilar y sublingual sin
contaminación con el medio bucal
Líquido límpido y
estéril
ALIMENTACIÓN Y COMUNICACIÓN
Humedecer Degustación
–
secreción parotídea
Lubricar Bolo alimenticio, fonación,
–
mucinas submaxilares, sublinguales y gl. menores
–
glicoproteínas rica en prolina (parotídea)
INMUNOLÓGICAS Y ANTI-CARIOGÉNICAS
Limpieza físico-mecánica: por dilución y/o barrido.
Lubricar y mantener mucosa bucal mucinas
–
elásticas y adhesivas
Digerir Amilasa salival
–
células serosas parotídeas y seromucosas submaxilares
–
rol secundario sobre restos alimentarios entre dientes
–
–
glándulas linguales de Von Ebner
–
imp. en recién nacido
Sobre mucosas proveen barrera contra desecación y
agentes irritantes de alimentos o toxinas (limita
Digerir Lipasa lingual
Glucoproteínas muy hidratadas, poco solubles, viscosas,
permeabilidad)
–
Atemperante de alimentos muy fríos o calientes
–
Aglutinación de bacterias evitando su adhesión
INMUNOLÓGICAS Y ANTI-CARIOGÉNICAS
Reducir el tiempo de Hemorragia lisozima y Ca
–
REGULATORIAS –HOMEOSTASIS–
–
–
Cicatrización de heridas bucales factores de crecimiento
–
Bicarbonato/ácido carbónico
Péptidos ricos en histidina
Fosfatos
Nervioso (FCN) y epidérmico (FCE)
Acción antimicrobiana Inmumoglobulinas, enzimas y
péptidos.
pH bucal 6,8 -7,2 mediante buffers
Activadores de coagulación
–
IgAs, IgG, IgM: aglutinan, opsonizan, facilitan fagocitosis
–
Lisozima: hidroliza unión α 1-4 del ácido N-acetilmurámico y
Integridad dentaria Ca2+, PO43-,F-, Mg2+
–
–
–
–
capacidad buffer
maduración post-eruptiva del esmalte
limpieza mecánica y aglutinación (mucinas de bajo PM)
favorecer el ambiente iónico para una potencial remineralización
sin precipitación espontánea
Interviene en la formación de la película adquirida del esmalte
N-acetilglucosamina en pared bacteriana
–
Peroxidasa: 2H2O2
–
Lactoferrina: bacteriostático quela Fe
–
Histatinas: antifúngicos
–
2H2O + O2
MODELO DE SECRECIÓN SALIVAL
Equilibrio hídrico sensación de “boca seca”
MOVIMIENTOS IONICOS ACTIVOS Y PASIVOS
Activo
SIALONA: unidad fisiológica mínima
Acinos y
Conductos
Intercalares
Secreción primaria:
K, Na, Ca, HCO3
Cond. Estriados:
Reabsorción: Na
Liberación: K, HCO3
Saliva primaria:
isotónica respecto al
plasma
Na+
Conductos
estriados
Pasivo
K+
Ingreso a células acinares:
Na, Ca, H2O, CO2
Cl -
HCO
HCO3 3- Conductos
excretores
Cond. Estriados: Cl, Na, K
y excretores: Na, H2O, K, Cl, HCO3
Saliva final (secundaria): hipotónica.
Se modifica su composición durante el
pasaje por los conductos
COMPOSICION QUÍIMICA
Tomada de Fisiología oral,
Jenkins GN, 4ta. Edición, 1978
COMPOSICIÓN
SALIVA COMPLETA VERSUS SANGRE
Componente
saliva mixta humana
Agua
99%
puede llegar a 94-95 %
Sólidos < 1%
0,5 % (estimulada) - 6,0 % (no estimulada)
Peso específico
1,002 - 1,008
pH (rango)
6,8 – 7,2
Flujo (ml/min)
pH
Bicarbonato(mM)
Sodio(mM)
Potasio(mM)
Calcio(mM)
Magnesio (mM)
Cloruro(mM)
Fósforo inorg.(mM)
Fluoruro(µg%)
Glucosa(mg%)
Amoníaco (mg%)
Urea (mg%)
Proteínas (mg%)
Osmolaridad
(mOsm/kg)
Saliva completa
No estimulada
Estimulada
0.011
1.0
6.7
6.8-7.5
5
15-50
4-6
26
22
20
1.5-4
1.5-3
0.2
0.15-0.2
15
30-100
6
4
8-25
2-20
0.5-1.0
1.0
12
4-8
20
13-22
225-350
280-300
87.7
132.0
Suero, plasma o
sangre
-7.35-7.45
23-32
135-145
3.5-5.5
2-2.5
1-1.5
95-105
1-1.5
10-20
70-100
0.08-0.11
14-40
6.5-8.2 g%
296.0
COMPOSICIÓN DE LA SALIVA EN FUNCIÓN DE LA
VELOCIDAD DE FLUJO SALIVAL VERSUS PLASMA
CALCIO Y FOSFATOS SALIVALES
CALCIO
50% IÓNICO
50% unido a proteínas.
FOSFATOS w 80 % IÓNICO w PO43-, PO4H2-, PO4H- (pH salival)
ÉSTERES ORGÁNICOS
Saliva parotídea calcio iónico y fosfatos:
"no estimulada", superan el producto de solubilidad de la hidroxiapatita.
“ estimulada” superan también la del fosfato octacálcico y la del fosfato
dicálcico (brucita).
El calcio y el fosfato
CALCIFICAR PLACA BACTERIANA
sarro, tártaro o cálculos dentales.
Saliva Submaxilar→ + [calcio ] pH -
COMPONENTES PROTEICOS DE LA SALIVA
COMPONENTES ORGÁNICOS
SALIVA VERSUS PLASMA
PAROTIDA SUBMAXILAR
fuerza iónica → sarro cara lingual
de incisivos inferiores
ORIGEN = LUGAR DE SÍNTESIS
PLASMA
Amilasa, lipasa, mucinas, GP ricas en
UREA
15 mg%
7 mg %
25 mg%
AMONIACO
0.3 mg%
0.2mg %
PROTEINAS 250 mg %
150 mg%
6000mg %
6.8-7.2
7.35
acinares
prolina, GP básicas, P acídicas, P ricas
en tirosina (estaterina), P ricas en
histidina, peroxidasa, lactoferrina
no acinares
pH
6.8-7.2
Lisozima, IgAs, factores de crecimiento,
péptidos regulatorios
GP = GLICOPROTEÍNAS
P = PROTEÍNAS
Tomado de Ellison S.A.,1979
PROTEÍNAS ACINARES EN RELACIÓN
AL AUMENTO DEL FLUJO SALIVAL
PROTEÍNAS NO ACINARES EN RELACIÓN
AL AUMENTO DE FLUJO SALIVAL
VARÍAN EN FORMA DIRECTAMENTE
PROPORCIONAL
VARÍAN EN FORMA INVERSAMENTE PROPORCIONAL
Glicoproteínas:
IgAs:
•
Proteínas más abundantes
•
•
Confieren propiedades de viscosidad y lubricación
Sintetizada por células plasmáticas como dímeros con
cadena proteica J
•
Cadenas laterales de heterosacáridos unidos
covalentemente a la proteína y ramificados
•
Componente secretor aportado por células acinares es parte
de una proteína trans-membrana receptora de IgA
•
Grupo carboxilo de ác. siálico (pK 2,6) ionizado a
valores fisiológicos de pH , gran carga negativa
Estaterina: fosfopéptido de 47 aa. Junto con trazas de PPi evita la
formación de cristales fosfocálcicos en glándulas y conductos salivales.
ELECTROFORESIS
IONIZACIÓN DE LAS PROTEÍNAS
DEPENDIENTE DEL PH
SALIVA PAROTÍDEA ESTIMULADA
CÁTODO
Glucoproteína parotídea
Peroxidasa
COOH
NH3+
COOH
NH3+
COO –
H
OH
NH3+
COO -
+
NH3
COO -
+
–
OH
NH2
NH2
COO
-
Ig As
H+
Carga neta +
polo negativo
(cátodo)
– Glucoproteína responsable
del grupo sanguíneo (A;B;O
y de Lewis).
– Mucinas (alto PM)
Carga neta –
polo positivo
(ánodo)
SALIVA
SUBLINGUAL
Secreción a predominio
mucoso
Mayor cantidad de aporte
mucoso:
– GP grupo sanguíneo
– Mucinas
Pieza sec libre
Seroalbúmina
Carga neta 0
SALIVA
SUBMANDIBULAR
Secreción a predominio
seroso
Concentración 5 veces
menor que el de saliva
parotídea.
Composición más
compleja aportada por
células mucosas:
VISCOELASTICIDAD
medio básico
pI
Lisozima
(pI alto)
3 Histonas
Protamina
2 prot. Básicas (bajo
PM) ven.serpiente
AMILASA
2 polipéptidos
Ricos en His
medio ácido
Proteínas
catiónicas
Glucoproteína (alto PM):
– pI < 3
– Glúcidos 50% de su peso
– Composición azúcares:
neutros
fucosa
glucosamina
ác. siálico
PRP
Proteínas aniónicas
(pI bajo)
película adquirida
+
ÁNODO
Gel de poliacrilamida en columna
BUFFER SALIVALES
Aquellas
soluci
que resist
en cambios ones
bruscos de
-agregar
pH
un ácido o
una base-
pH= -log (H+)
SISTEMAS AMORTIGUADORES EN SALIVA
= log 1/(H+)
[CO3H-] [H+]
Kd =
[CO3H2 ]
CO3H2 / CO3H-
Ka= (sal) . [H+]
(ácido)
HPO42- / H2PO4-
[H+] =
(ácido). Ka
(sal)
pKa
pH= log 1/(H+) = log ( sal) + log 1
(ácido)
Ka
pH = pKa + log (sal)
(ácido)
Ka= (CO3H- ) (H+) / (CO3H2)
BUFFER SALIVAL
pKa es el log negativo de la cte de disociación del ácido con el signo cambiado
(es el pH en el cual el 50% está disociado)
pH = pKa + log [SAL]
[ACIDO]
CO3H2 / CO3HNO ESTIMULADA
ácido carbónico y bicarbonato
(> reabsorción de
bicarbonato)
pH = pKa + log [CO3H- ]
[CO3H2 ]
2-3 mM
ESTIMULADA
pH (pK de 6,1 )
1ml/min o más
(+bicarbonato) 30 - 60 mM.
Ecuación de Henderson-Hasselbach
pH de 7,5 - 7,8
EFECTO DEL FLUJO SALIVAL
SOBRE EL PH
PRODUCCIÓN DE BICARBONATO
POR LA GLÁNDULA SALIVAL
AC
pK 6,1
AC
Luego de la recolección, en la saliva en contacto con el aire el pH puede
aumentar hasta 8,5-9,0 por la acción de la anhidrasa carbónica (AC).
HPO42- / H2PO4
H2PO4-
pH Crítico
H+ + HPO42pK 6,8
NO ESTIMULADA
pH 6,1 ( 5mM)
ESTIMULADA
2 mM y el pH
H2PO4- / HPO42- (cte) ( Henderson-Hasselbach),
Este HPO42- es ahora el predominante, aunque su
concentración es semejante en la saliva no estimulada.
Producto iónico (Ca+2).(HPO42-)
pH crítico
TITULACIÓN DE SALIVA MIXTA
CON ÁCIDO
pH por debajo del cual el fluído en la superficie de los dientes se
hace NO SATURADO respecto a la HA y permite la remoción
de calcio y fosfato del esmalte.
Si pH < pH crítico: disolución
Si pH > pH crítico: precipitación
Producto iónico (Ca+2).(HPO42-)
pH crítico
Por lo cual el producto iónico debe estar por encima del producto
de solubilidad de la sal para proteger el esmalte
Producción de amoníaco en saliva
Regiones “buffers” : A, principalmente bicarbonato y fosfato;
B, debido a proteínas salivales
FACTORES QUE AFECTAN LA
COMPOSICIÓN SALIVAL
Contribución relativa de varias glándulas:
Según la glándula que secrete varía la proporción de
sus componentes
Velocidad de flujo :
Regulado fisiológicamente (ritmo circadiano)
Nausea: incrementa salivación
Miedo y anestesia: disminuye boca seca
La naturaleza del estímulo:
Comida seca y arena: salivación profusa y acuosa
Carne: secreción espesa y mucosa
Dietas ricas en hidratos de carbono: aumenta amilasa
Gracias!