Ingeniería enzimatica en fase solida 2016

CURSO POSGRADO PEDECIBA QUÍMICA
INGENIERÍA ENZIMÁTICA EN FASE SÓLIDA: UNA HERRAMIENTA EN
BIOTECNOLOGÍA
Se plantea en este curso introducir a tecnologías enzimáticas
basadas en
estrategias de inmovilización y estabilización, con el fin de desarrollar
biocatalizadores para su aplicación en diversos procesos biotecnológicos,
tanto en medio acuoso como en presencia de co-solventes orgánicos.
La exploración en forma teórica y experimental, de diferentes métodos de
inmovilización que involucran soportes activados mediante diversas químicas
así como también variedad de proteínas con actividad biológica y orígenes
variados
brindarán
herramientas
para
el
diseño
de
biocatalizadores
inmovilizados “a medida”, que puedan adecuarse a fines biotecnológicos
específicos en diversas áreas del conocimiento.
OBJETIVOS
-Introducir a las bases de la tecnología de proteínas en fase sólida
-Capacitar en el uso de metodologías de inmovilización de enzimas y en el
manejo y caracterización de derivados insolubles
-Explorar aplicaciones biotecnológicas de los derivados insolubles.
-Promover la integración y cooperación en el área de la biotecnología de
proteínas en fase sólida.
DIRIGIDO A:
-El curso estará dirigido en primer lugar a estudiantes de PEDECIBA
QUIMICA así como de otras áreas del Programa y de otros posgrados,
tanto nacionales como de la región.
COORDINADORES
Dras Carmen Manta y Karen Ovsejevi
Cátedra de Bioquímica, Facultad de Química, UDELAR.
PROFESORES
Dr Francisco Batista-Viera
Dra Cecilia Giacomini
Dra Paula Gonzalez
Dra Gabriela Irazoqui
Dra Carmen Manta
Dra Karen Ovsejevi
Docentes de la Cátedra de Bioquímica, Facultad de Química, UDELAR.
La Dra Valeria Grazú participará en el curso a dictarse en el 2016 como
Docente invitada de la Universidad de Zaragoza, España.
CUPOS
Curso Teórico: 40 participantes
Curso Práctico: 15 participantes
FECHA
Desde el 3 al 14 de octubre de 2016.
LUGAR
Cátedra de Bioquímica, Facultad de Química, UDELAR.
Gral Flores 2124, Montevideo, Uruguay.
CARGA HORARIA (equivalente a 7 créditos)
30hs de Práctico
10hs de Seminarios
22hs de Teórico
PROGRAMA
Módulo Teórico
1) Introducción a la tecnología de proteínas en fase sólida. Importancia del
proceso de inmovilización en las propiedades y aplicaciones de las
enzimas. Ventajas y desventajas del uso de enzimas inmovilizadas.
Clasificación de métodos de inmovilización. Características de las
distintas matrices.
2) Inmovilización covalente reversible de proteínas. Química de activación
de soportes hidroxilados para la introducción de grupos tiol-reactivos.
Importancia de la estructura de la enzima. Modificación química de las
proteínas: reducción de puentes disulfuro e introducción de grupos tiol
“de novo”.
3) Distintos métodos de inmovilización de proteínas mediante uniones
irreversibles proteína-soporte. Síntesis de geles glutaraldehído-agarosa.
Empleo de resinas epoxi-activadas. Ejemplo de sistemas enzimáticos
co-inmovilizados.
4) Estrategias de estabilización de derivados enzimáticos insolubles.
Entrecruzamiento con dextranos. Bloqueo de grupos residuales en el
soporte activado.
5) Rigidificación orientada de enzimas: una estrategia para mejorar la
estabilidad enzimática. Dra V.Grazú
6) Nanobiocatálisis y sus aplicaciones. Dra V.Grazú
7) Aplicaciones biotecnológicas de los biocatalizadores en fase sólida.
Módulo Práctico
Prácticos 1 y 2) Inmovilización covalente reversible de β-galactosidasas de
distinto origen. Cuantificación de grupos tiol en la enzima
a inmovilizar.
Modificación química de las enzimas dependiendo de su origen: Reducción de
puentes disulfuro nativos y/o tiolación. Reversibilidad de la unión enzimasoporte. Uso del derivado inmovilizado para hidrólisis de lactosa.
Prácticos 3 y 4) Comparación de la estabilidad de derivados inmovilizados
mediante distintas estrategias:
β-galactosidasa en geles glutaraldehído-
agarosa y tiolsulfinato agarosa. Aplicación del biocatalizador insoluble en la
síntesis de galactósidos
con potencial actividad biológica. Evaluación de la
síntesis mediante técnicas de TLC.
Prácticos 5 y 6)
Inmovilización covalente irreversible de β-glucosidasa de
A.niger en geles epoxi-activados y su aplicación para la liberación de aromas
en vinos.
Evaluación escrita
Material bibliográfico
Los participantes contarán con un Manual de trabajo práctico elaborado por
los docentes del curso.
Además se brindarán trabajos científicos y textos de las temáticas a abordar
en el curso, especialmente aquellas publicaciones de los docentes del curso
que estén directamente relacionadas con el trabajo experimental.