Transcripcion: Proceso selectivo Reiterativo Conservador No requiere cebador Procariotas Eucariotas 1 ARN pol 3 ARN pol separada de la traducción ARN r y ARNt grandes moleculas precursoras ARNm policistronicos monocistronicos No maduración de ARN m Si hay maduración Un gen es el conjunto de secuencias de ADN de todo tipo, estructurales (intrones y exones) y reguladoras necesarias para codificar un producto genico sea este un ARN maduro de cualquier tipo o una proteína funcional (?) Transcripción (1) Transcripción (1) ARN polimerasas eucariotas ARN pol Localización ARNsint. I núcleo II núcleo III núcleo Mitocondrial mitocondria Pre rRNA (NO 5S) Pre mRNA , Nucleares pequeños Pre tRNA, rRNA 5S, nucleares pequeños EUCARIOTAS Potenciadores y silenciadores Elementos proximales Elementos basales Elementos distales Corriente arriba del promotor upstream +1 Expresión regulada genes inducibles Expresión basal Region estructural Genes constitutivos e inducibles Region reguladora El promotor basal (core) de la ARN Pol II está constituido por combinaciones de cuatro elementos de secuencias diferentes Promotor eucariota contiene diferentes elementos que interaccionan con diferentes componentes de la maquinaria transcripcional Factor and Order Binding Features 1. TFIID binds to the sequence TATA; this sequence is present in all eukaryotic genes and is called the TATA box; TFIID is composed of the TATA box­ binding protein (TBP) and more than eight other subunits 2. TFIIA stabilizes the binding of TFIID; prevents inhibitor from disrupting the TFIID complex 3. TFIIB 4. TFIIF­ RNA Polymerase II 5. TFIIE, TFIIH, TFIIJ these factors must be added in this order for transcription to occur Factores de Iniciación de la transcripcion Modelo mostrando los Lugares de interacción de TBP con : II A(228­235) IIB (284­286­287) II F (320) Pol (206­232) TBP y ... Modelo mostrando el TBP Humano unido al promotor Adenovirus (interacciones otros factores en colores Modelo conteniendo TFIIA (verde) TF II B (azul) TF II F(naranja) Estructura tridimensional de TBP y su interacción con otros factores Estructura de TF II B unido y no unido ADN TBP y otros TF Similitudes estructurales entre los factores de transcripción y las histonas ARN pol in vitro e in vivo vitro Formación del complejo In vivo el inicio de la transcripcion requiere proteinas adicionales El mediador consta de varias subunidades muchas de ellas conservadas en la evolución Composicion del complejo Mediador humano y la Relacion entre los diferentes Modulos y otros reguladores transcripcionales Complejo mediador Elementos necesarios para la transcripción basal y activada Estructura de un promotor eucariotico activo Promotor activo NFR region libre de nucleosoma TSS sitio de inicio de la transcripcion Promotor “core” ;elementos Nucleosomas flanqueantes con variantes de histonas Acetilacion despues del promotor y metilacion en gradiente Elongación Factores de elongación TFII S – reduce el tiempo de pausa lectura de prueba pTEFb­ fosforila a la ARNp ­Fosforila a hSPT5 ­Recluta TAT­ SF1 TAT­ SF1­ empalme hSPT5­ formación del casquete Transcripción en Eucariotas La ARN pol en la elongación se asocia con un nuevo conjunto de factores proteicos que participan en el procesamiento del ARN Estructura y formación del casquete Reclutamiento co­transcripcional de factores de procesamiento Guanililtransferasa GT 7 metiltransferasa MT CBC complejo de union a CAP C/P factores de clivaje polia Rat 1exonucleasa Poliadenilación y terminacion de la transcripcion Co­ transcripcional splicing y poliadenilacion y corte Promotores de RNA pol III Review TRENDS in Genetics Vol.23 No.12 Roles celulares de los transcriptos por la ARNpolIII Review TRENDS in Genetics Vol.23 No.12 Terminación ARNpol I Proteína terminadora (impide el avance) y una secuencia rica en AT en la hebra no molde facilita la separación ARN pol II Similar a pol I ARN pol III Secuencias especificas Regiones C/T Las imágenes incluidas en esta presentación son del dominio público y no se pretendió violentar ningún derecho de copyright Bibliografía: Biochimica et Biophysica Acta 1677 (2004) 64– 73 PNAS August 7, 2007 vol. 104 no. 32 12955–12961 ENCYCLOPEDIA OF LIFE SCIENCES / & 2003 Macmillan Publishers Ltd, Nature Publishing Group / www.els.net Curr Opin Cell Biol. 2005 Jun;17(3):251­6. Trends Genet. 2007 Dec;23(12):614­22 Trends Biochem Sci. 2005 May;30(5):250­5 Biochimie. 2007 Dec;89(12):1439­46 Curr Opin Cell Biol. 2006 Jun;18(3):291­8 Cell Mol Life Sci. 2007 Feb;64(4):386­400