VWF Activity 0020004700

HemosIL®
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
Instrument/test procedures
Intended use
Automated latex enhanced immunoassay for the quantitative determination of von
Willebrand Factor Activity (VWF Activity) in human citrated plasma on IL Coagulation
Systems.
Refer to the appropriate IL instrument’s Operator’s Manual and/or Application Manual for
the complete assay procedure instructions.
Summary and principle
Nine parts of freshly drawn venous blood are collected into one part of trisodium citrate.
Refer to CLSI (formerly NCCLS) Document H21-A4 for further instructions on specimen
collection, handling and storage.3
Frozen plasma samples should be rapidly thawed at 37°C while gently mixing before
testing. After thawing the assay must be performed within 2 hours.
The diagnosis of von Willebrand Disease (VWD), probably the most common congenital
bleeding disorder, requires a number of special tests at the laboratory level. The
measurement and comparison of von Willebrand Factor Antigen (VWF:Ag), VWF Activity
and Factor VIII (FVIII) levels in plasma aid in the differentiation of quantitative defects (type
1 or type 3) or qualitative defect (type 2) of VWF and therefore to diagnose the different
types of VWD.1-2
When an extremely low or undetectable level of VWF:Ag is obtained, a type 3 VWD
could be expected. If a moderate or even normal result is obtained, VWF Activity and
FVIII assays must be performed and compared with the VWF:Ag result. If all three values
are within the normal range, VWD and Hemophilia A may be excluded. If at least one
parameter is abnormally low, it is necessary to calculate the ratios VWFActivity/VWF:Ag
and FVIII/VWF:Ag. If both ratios are close to 1 (some authors suggest 0.7 as cut-off),
a VWD type 1 may be diagnosed.1-2 When the VWF/Activity/VWF:Ag ratio is low (0.7
is also the suggested cut-off), types 2A, 2B or 2M may be diagnosed. These subtypes
are characterized by its abnormal multimeric pattern and/or its altered platelet affinity.1-2
Additional laboratory tests as RIPA (Ristocetin Induced Platelet Aggregation), multimeric
analysis and binding assays are required in order to be able to distinguish the different
subtypes.2
When the FVIII/VWF:Ag ratio is low (0.7 is also the suggested cut-off), a type 2N or
Hemophilia A may be diagnosed and a FVIII binding assay is necessary to discriminate
among them.
The VWF Activity kit is a latex particle enhanced immunoturbidimetric assay to quantify
VWF Activity in plasma. The activity of VWF is determined by measuring the increase
of turbidity produced by the agglutination of the latex reagent. A specific anti-VWF
monoclonal antibody adsorbed onto the latex reagent, directed against the platelet
binding site of VWF (Glycoprotein Ib receptor), reacts with the VWF of patient plasma. The
degree of agglutination is directly proportional to the activity of VWF in the sample and is
determined by measuring the decrease of transmitted light caused by the aggregates.
Composition
The von Willebrand Factor Activity kit consists of:
R Latex Reagent (Cat. No. 0020004710): 2 vials x 4.5 mL of a lyophilized suspension of
polystyrene latex particles coated with purified anti-VWF mouse monoclonal antibody
directed against a functional epitope of VWF, containing bovine serum albumin,
stabilizers and preservative.
BBuffer (Cat. No. 0020004720): 2 vials x 4.5 mL of Tris buffer containing bovine serum
albumin, stabilizers and preservative.
PRECAUTIONS AND WARNINGS:
Hazard class: None
Risk phrases: None
Safety phrases: None
The buffer contains less than 0.1% sodium azide that may form explosive azides in metal
plumbing. Use proper disposal procedures.
This product is for in vitro Diagnostic Use.
Preparation
Buffer: The reagent is ready for use.
Latex Reagent: Dissolve the contents of each vial by pouring the entire contents of one
vial of Buffer into one vial of Latex Reagent. Replace the stopper and swirl gently for a
minimum of 20 seconds to completely dissolve the lyophilized latex. Make sure of the
complete reconstitution of the product. It must appear as a homogenous and slightly milky
suspension. Keep the reagent at 15-25°C for 30 minutes and invert to mix before use. Do
not shake.
Note: Avoid foam formation when homogenizing reconstituted reagents. Bubbles on top of
the liquids may interfere with the instruments liquid sensors.
Reagent storage and stability
Unopened reagents are stable until the expiration date shown on the vial when stored at
2-8°C.
Latex Reagent - Stability after reconstitution: 1 month at 2-8 °C in the original vial, 3 days
at 15°C on the ACL® ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, 1 day at 15°C on the ACL Futura®/ACL
Advance Systems or 5 days at 15°C on the ACL TOP™. Do not freeze.
For optimal stability remove reagents from the system and store them at 2-8°C in the
original vial.
Specimen collection and preparation
Additional reagents and control plasmas
The following are not supplied with the kit and must be purchased separately.
Americas and Pacific Rim
Europe
Cat. No.
Cat. No.
Calibration Plasma
0020003700
0020003700
Normal Control
0020003120/0020003110 0020003110
Special Test Control Level 1
0020010100
0020010100
Factor diluent
0009757600
0009757600
Quality control
Normal and abnormal controls are recommended for a complete quality control program.4
Normal Control and Special Test Control Level 1 is designed for this program. Each
laboratory should establish its own mean and standard deviation and should establish
a quality control program to monitor laboratory testing. Controls should be analyzed at
least once every 8 hour shift in accordance with good laboratory practice. Refer to the
instrument’s Operator’s Manual for additional information. Refer to Westgard et al for
identification and resolution of out-of-control situtations.5
Results
VWF Activity results are reported in % normality. Refer to the instrument’s Operator’s
Manual for additional information. The assay results should be used with other information,
including the clinical context, in forming a diagnosis.
Limitations/interfering substances
VWF Activity results on ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 are not affected by bilirubin up
to 3.8 mg/dL and lipids up to 265 mg/dL.
VWF Activity results on ACL Futura/ACL Advance Systems are not affected by bilirubin up
to 3.6 mg/dL and lipids up to 929 mg/dL.
The presence of rheumatoid factor may produce an overestimation of the test result.
Hemolyzed and turbid samples should not be assayed. VWF Activity results on ACL TOP
are not affected by hemoglobin up to 70 mg/dL, bilirubin up to 4.2 mg/dL, triglycerides up
to 1020 mg/dL and Rheumatoid Factor up to 200 IU/mL.
Specimens from patients who have received preparation of mouse monoclonal
antibody for diagnosis or therapy may contain human anti-mouse antibody (HAMA).
The presence of HAMA may cause an over-estimation of results in immunoassays that
utilize mouse monoclonal antibodies. HemosIL von Willebrand Factor Activity Buffer
contains a blocking agent against HAMA to minimize this interference on the assay
results.
The presence of increased levels of Human Anti-Bovine IgG antibodies (HABIA) in
some patients may lead to an overestimation of results.8
The results of this assay should therefore be used with other information, including
the clinical context, in forming a diagnosis. Do not use this assay as the sole basis for
therapy decisions.
ENGLISH - Insert revision 06/2014
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
Performance characteristics
Aplicación
Método de ensayo
Inmunoensayo automatizado para la determinación cuantitativa de la actividad del
Factor von Willebrand (FVW Actividad) en plasma humano citratado por turbidimetría de
partículas de látex, en los Sistemas de Coagulación de IL.
Las instrucciones completas del ensayo se encuentran en el correspondiente Manual del
Usuario del Instrumento y/o en el Manual de Aplicaciones.
Precision:
Within run and total (run to run and day to day) precision was assessed over multiple runs.
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
Mean (% VWF Activity) CV% (Within run) CV% (Total)
Normal Control
79.6
2.7
4.9
Special Test Control Level 1
49.8
4.6
9.0
Special Test Control Level 2
27.7
7.5
8.7
ACL Futura/ACL Advance Mean (% VWF Activity) CV% (Within run) CV% (Total)
Normal Control
92.1
4.1
5.6
Special Test Control Level 1
64.1
4.8
6.5
Special Test Control Level 2
36.6
6.5
8.3
ACL TOP
Mean (% VWF Activity) CV% (Within run) CV% (Total)
Normal Control
102.4
2.6
3.4
Special Test Control Level 1
68.4
3.5
6.3
Special Test Control Level 2
30.3
6.5
8.0
Correlation:
System
Slope
Intercept
r
Comparative method
ACL ELITE/
0.832
4.782
0.972
VWF Activity EIA
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance 0.954
3.854
0.958
VWF Activity EIA
ACL TOP
0.988
2.288
0.995 VWF Activity on ACL Advance
An additional clinical study (n=114), comparing this VWF Activity kit on the ACL 9000 to
a Ristocetin cofactor activity (VWF:RCo) assay on an automated optical coagulometer,
resulted in an r of 0.950 and a slope of 0.841. The precision and correlation results were
obtained using specific lots of reagents and controls.
Detection limit:
System
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
12 (% VWF Activity)
ACL Futura/ACL Advance
1.3 (% VWF Activity)
ACL TOP
3.2 (% VWF Activity)
Linearity:
System
Regular test (% VWF Activity) Rerun test (% VWF Activity)
ACL ELITE/
21 - 200
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance
19 - 120
40 - 240
ACL TOP
19 - 130
57 - 390
If the linear range (Rerun test) is exceeded, then samples should be manually diluted 1:4
with Factor diluent (100 μL of sample + 300 μL of Factor diluent) on the ACL ELITE/ELITE
PRO/8/9/10000 and ACL Futura/ACL Advance or 1:10 with Factor diluent (50 μL of sample
+ 450 μL of Factor diluent) on the ACL TOP and reassayed in the standard test. The
printed results must be multiplied by 4 or 10 to correct for the dilution.
The assay does not show prozone effect (i.e. antigen excess) up to 700% on ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000, up to 350% on ACL Futura/ACL Advance and up to 1000% on the
ACL TOP.
Expected values
El diagnóstico de la enfermedad de von Willebrand (EVW), probablemente el más común
de los desórdenes hemorrágicos congénitos, requiere un número elevado de pruebas
especiales de laboratorio. La medida y comparación de los niveles en plasma de Factor
von Willebrand Antígeno (FVW:Ag), FVW Actividad y Factor VIII (FVIII), ayuda en la
diferenciación de deficiencias cuantitativas de FVW (tipo 1 o tipo 3) o cualitativas (tipo 2) y
por tanto en el diagnóstico de los diferentes tipos de la EVW.1-2
Cuando el nivel obtenido de FVW:Ag es extremadamente bajo o indetectable, puede
esperarse una EVW del tipo 3. Si el nivel obtenido es moderado o incluso normal, se
deberán realizar los ensayos de FVWActividad y FVIII y compararlos con el resultado
de FVW:Ag. Si los tres valores se encuentran dentro del rango de normalidad, podrá
excluirse la EVW y la Hemofilia A.
Si al menos uno de ellos está por debajo de la normalidad, será necesario calcular las
relaciones FVWActividad/FVW:Ag y FVIII/FVW:Ag. Si ambas relaciones están cerca de 1
(algunos autores sugieren 0,7 como valor umbral), puede ser diagnosticada una EVW del
tipo 1.1-2
Cuando la relación FVW Actividad/FVW:Ag es baja (0,7 es también el valor umbral
sugerido), podrán diagnosticarse los tipos 2A, 2B, o 2M. Estos subtipos se caracterizan
por un patrón de multímeros anómalo y/o una afinidad por las plaquetas alterada.1- 2 Para
poder distinguir los diferentes subtipos, se necesitarán otras pruebas complementarias
tales como el RIPA (aglutinación plaquetar inducida ristocetina), el análisis multimérico
y los ensayos de unión.2 Cuando la relación FVIII/FVW:Ag es baja (0,7 es también el
valor umbral sugerido), podrá diagnosticarse un tipo 2N o una Hemofilia A y para poder
diferenciarlas se necesitará la prueba de la capacidad de unión al FVIII.
El ensayo FVW Actividad es una inmunoturbidimetría amplificada con partículas de
látex que permite cuantificar la actividad del FVW en plasma. La actividad del FVW se
determina midiendo el incremento de turbidez debido a la aglutinación del reactivo látex.
Un monoclonal anti-FVW unido al reactivo látex, dirigido específicamente contra el lugar
de unión de las plaquetas en el FVW (receptor de la Glicoproteína Ib), reacciona con
el FVW presente en el plasma del paciente. El grado de aglutinación es directamente
proporcional a la actividad del FVW en la muestra y se determina midiendo el descenso
de la luz transmitida causado por los agregados.
Composición
El kit von Willebrand Factor Activity consiste en:
R Latex Reagent (Núm. Cat. 0020004710): 2 viales de 4,5 mL de una suspensión
liofilizada de partículas de látex de poliestireno a las que se les ha unido un
anticuerpo monoclonal de ratón purificado, específico contra un epítopo funcional del
FVW. Contiene albúmina de suero bovino, estabilizantes y conservante.
BBuffer (Núm. Cat. 0020004720): 2 viales de 4,5 mL de tampón Tris que contiene
albúmina de suero bovino, estabilizantes y conservante.
MEDIDAS DE PRECAUCIÓN Y ADVERTENCIAS:
Indicaciones de peligro: ninguna
Frases de riesgo: ninguna
Frases de seguridad: ninguna
El tampón contiene menos de un 0,1% de azida sódica, que puede reaccionar con las
tuberías metálicas dando lugar a azidas altamente explosivas. Tomar las precauciones
adecuadas para su desecho.
Este producto es para diagnóstico in vitro.
Preparación
A normal range study was performed using the VWF Activity kit.
Blood ABO Type6 N ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 N
ACL Futura/ACL Advance
O
122 38.0 - 125.2 (% VWF Activity) 120 40.8 - 138.8 (% VWF Activity)
A + B + AB
126 49.2 - 169.7 (% VWF Activity) 123 58.1 - 175.5 (% VWF Activity)
In a separate study using 266 individual blood bank donor samples, the following results
were obtained:
Blood ABO Type6 N
ACL TOP
O
132 40.3 - 125.9 (% VWF Activity)
A + B + AB
134 48.8 - 163.4 (% VWF Activity)
Note: VWF is an acute-phase reactant and stress, pregnancy and other situations affect
its plasma concentration and therefore it might be advisable to repeat the analysis from
another blood sample obtained on a different day.1
Ranges were calculated as recommended by the International Federation of Clinical
Chemistry (IFCC).7 These results were obtained using a specific lot of reagent. Due to
many variables, which may affect results, each laboratory should establish its own VWF
Activity normal range.
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
Principio
Buffer: El reactivo está listo para su uso.
Latex Reagent: Reconstituir cada vial de reactivo látex añadiéndole todo el contenido de
un vial de tampón. Tapar el vial y homogeneizar suavemente un mínimo de 20 segundos.
Asegurarse de la completa disolución del producto. Debe aparecer como una suspensión
homogénea y ligeramente lechosa. Mantener el reactivo entre 15-25°C durante 30
minutos. Mezclar por inversión del vial antes de su uso. No agitar.
Nota: Evitar la formación de espuma al homogeneizar los reactivos reconstituidos. Las
burbujas en la superficie del líquido pueden interferir con los sensores de nivel de líquido
de los instrumentos.
Conservación y estabilidad de los reactivos
Los viales que no hayan sido abiertos y se hayan conservado a 2-8°C son estables hasta
la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
Latex Reagent - Estabilidad una vez reconstituido: 1 mes a 2-8°C en el vial original, 3
días a 15°C en los Sistemas ACL® ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, 1 día a 15°C en los
Sistemas ACL Futura®/ACL Advance o 5 días a 15°C en el ACL TOP™. No congelar.
Para una óptima estabilidad, sacar los reactivos de los instrumentos y conservarlos a
2-8°C en sus viales originales bien tapados.
ESPAÑOL - Revisión Folleto 06/2014
Recolección y preparación de las muestras
Recoger nueve partes de sangre recién extraída por punción venosa sobre una parte de
anticoagulante citrato trisódico. Para la recolección, manejo y conservación del plasma
seguir las recomendaciones del Documento H21-A4 de la CLSI.3
Los plasmas congelados deben descongelarse rápidamente a 37°C y agitarse bien antes
de su análisis. Se debe realizar el ensayo de los mismos antes de transcurridas 2 horas
de su descongelación.
Reactivos y plasmas de control adicionales
Los siguientes materiales no se suministran con el kit y deberán pedirse por separado.
América y Área del Pacífico
Europa
Núm. Cat.
Núm. Cat.
Plasma de calibración
0020003700
0020003700
Control Normal
0020003120/0020003110 0020003110
Control de Técnicas Especiales Nivel 1 0020010100
0020010100
Diluyente de factores
0009757600
0009757600
Control de Calidad
Para realizar un programa completo de control de calidad, se recomienda el uso de
dos niveles de control, normal y patológico.4 El Control Normal y el Control de Técnicas
Especiales Nivel 1 cumplen con los requisitos del programa. Cada laboratorio debe
establecer su propia media y desviación estándar, y debe realizar un programa de control
de calidad para monitorizar sus resultados. Los controles deben ser analizados como
mínimo una vez por cada turno de 8 horas, de acuerdo con la normativa de Buenas
Prácticas del Laboratorio. El Manual del Usuario contiene información adicional. Consultar
la publicación de Westgard et al para la identificación y resolución de situaciones
anormales del control de calidad.5
Resultados
Los resultados de FVW Actividad se informan en % de normalidad. Consultar el Manual
del Usuario para información adicional. Para establecer un diagnóstico, los resultados
del análisis deben ser usados conjuntamente con el resto de información, incluyendo el
contexto clínico.
Limitaciones/interferencias
Concentraciones de bilirrubina hasta 3,8 mg/dL y de lípidos hasta 265 mg/dL no
afectan los resultados de FVW Actividad en los ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000.
Concentraciones de bilirrubina hasta 3,6 mg/dL y de lípidos hasta 929 mg/dL no afectan
los resultados de FVW Actividad en los ACL Futura/ACL Advance. La presencia de factor
reumatoide en la muestra puede producir resultados falsamente positivos.
No se deben usar muestras turbias o hemolizadas.
Concentraciones de hemoglobina hasta 70 mg/dL, de bilirrubina hasta 4,2 mg/dL, de
triglicéridos hasta 1020 mg/dL y de factor reumatoide hasta 200 UI/ml no afectan los
resultados de FVW Actividad en el ACL TOP.
Las muestras de pacientes que han recibido preparados de anticuerpos
monoclonales con fines diagnósticos o terapéuticos pueden contener anticuerpos
humanos anti-ratón (HAMA). La presencia de HAMA puede causar una
sobrevaloración de los resultados en inmunoensayos que utilicen anticuerpos
monoclonales de ratón. El HemosIL von Willebrand Factor Activity Buffer contiene un
agente bloqueante de los HAMA para minimizar su interferencia en los resultados del
análisis.
La presencia de niveles elevados de anticuerpos humanos anti-IgG bovina (HABIA)
en algunos pacientes puede dar lugar a una sobrevaloración de los resultados.8
Por tanto, para establecer el diagnóstico, los resultados de este ensayo deben ser
usados conjuntamente con el resto de información, incluyendo el contexto clínico. No
utilizar este ensayo como la única base para la toma de decisiones terapéuticas.
Valores esperados
Se ha realizado un estudio del rango de normalidad utilizando el kit FVW Actividad.
Grupo Sanguíneo6 N ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 N
ACL Futura/ACL Advance
O
122 38,0 - 125,2 (% VWF Activity) 120 40,8 - 138,8 (% VWF Activity)
A + B + AB
126 49,2 - 169,7 (% VWF Activity) 123 58,1 - 175,5 (% VWF Activity)
En otro estudio realizado utilizando 266 muestras individuales de donantes de banco de
sangre, se obtuvieron los siguientes resultados:
Grupo Sanguíneo6 N
ACL TOP
O
132 40,3 - 125,9 (% VWF Activity)
A + B + AB
134 48,8 - 163,4 (% VWF Activity)
Nota: El FVW es un agente de fase aguda cuya concentración en plasma puede verse
afectada en situaciones como el estrés, el embarazo y otras, por lo que se aconseja
repetir el análisis con otra muestra extraída otro día distinto.1
Los rangos han sido calculados tal como recomienda la Federación Internacional de
Química Clínica (IFCC).7 Estos resultados se han obtenido utilizando un lote específico
de reactivo. Debido a las muchas variables que pueden afectar a los resultados, cada
laboratorio debe establecer su propio rango de normalidad de FVW Actividad.
Características técnicas
Precisión:
El estudio de precisión intraserie y total (serie a serie y día a día) fue realizado en
diferentes series.
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
Media (% VWF Actividad) CV% (Intraserie) CV% (Total)
Normal Control
79,6
2,7
4,9
Control de Técnicas Especiales
Nivel 1
49,8
4,6
9,0
Control de Técnicas Especiales
Nivel 2
27,7
7,5
8,7
ACL Futura/
ACL Advance
Media (% VWF Actividad) CV% (Intraserie) CV% (Total)
Normal Control
92,1
4,1
5,6
Control de Técnicas Especiales
Nivel 1
64,1
4,8
6,5
Control de Técnicas Especiales
Nivel 2
36,6
6,5
8,3
ACL TOP
Media (% VWF Actividad) CV% (Intraserie) CV% (Total)
Normal Control
102,4
2,6
3,4
Control de Técnicas Especiales
Nivel 1
68,4
3,5
6,3
Control de Técnicas Especiales
Nivel 2
30,3
6,5
8,0
Correlación:
Sistema
Pendiente Intersección
r
Método de referencia
ACL ELITE/
0,832
4,782
0,972
FVW Actividad EIA
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance 0,954
3,854
0,958
FVW Actividad EIA
ACL TOP
0,988
2,288
0,995 FVW Actividad en ACL Advance
En un estudio clínico adicional (n=114) en el que se comparó el kit VWF Activity en el ACL
9000 con el ensayo automatizado de la actividad del FVW como cofactor de la ristocetina
(FVW:RCo) en un coagulómetro óptico, se obtuvo una r de 0,950 y una pendiente de
0,841.
La precisión y los datos de correlación se han obtenido usando lotes específicos de
reactivos y de controles
Límite de detección:
Sistema
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
12 (% VWF Actividad)
ACL Futura/ACL Advance
1,3 (% VWF Actividad)
ACL TOP
3,2 (% VWF Actividad)
Linealidad:
Sistema
Test Regular (% VWF Actividad) Test Rerun (% VWF Actividad)
ACL ELITE/
21 - 200
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance
19 - 120
40 - 240
ACL TOP
19 - 130
57 - 390
Si se excede el rango de linealidad (Test Rerun), las muestras deben diluirse
manualmente 1:4 con el Diluyente de factores (100 μL de muestra + 300 μL de Diluyente
de factores) en los ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 y en los ACL Futura/ACL Advance
o 1:10 con el Diluyente de factores (50 μL de muestra + 450 μL de Diluyente de factores)
en el ACL TOP y reanalizarse. Los resultados obtenidos deben multiplicarse por el factor
de dilución 4 o 10.
El ensayo no presenta efecto de prozona hasta 700% en los ACL ELITE/ELITE
PRO/8/9/10000, hasta 350% en los ACL Futura/ACL Advance o hasta 1000% en el ACL
TOP.
DEUTSCH - Packungsbeilage Version 06/2014
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
Verwendung
Lagerung und Haltbarkeit
Referenzbereiche
Utilisation
Conservation et stabilité des réactifs
Valeurs attendues
Vollautomatischer Latex-Immunoassay zur quantitativen Bestimmung der von Willebrand
Faktor Aktivität (VWF Aktivität) in humanem Citratplasma auf IL-Analysensystemen.
Die ungeöffneten Reagenzien sind bei Lagerung zwischen 2-8°C bis zu dem auf dem
Etikett angegebenen Verfallsdatum haltbar.
Latex Reagent - Haltbarkeit nach Rekonstitution:
- bei 2-8°C in der Originalflasche: 1 Monat
- bei 15°C im ACL® ELITE/ELITE PRO und ACL 8/9/10000: 3 Tage
- bei 15°C im ACL Futura/ACL Advance-Analysensystem: 1 Tag
- bei 15°C im ACL TOP: 5 Tage
Nicht einfrieren.
Für eine optimale Haltbarkeit sollten die Reagenzien nach dem Gebrauch aus dem Gerät
entnommen und im Kühlschrank bei 2-8°C in der Originalflasche aufbewahrt werden.
Mit dem VWF Aktivitäts Kit wurde eine Studie zur Bestimmung des Normalbereichs
durchgeführt.
Blutgruppe6
N ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 N
ACL Futura/ACL Advance
O
122 38,0 - 125,2 (% VWF Aktivität) 120 40,8 - 138,8 (% VWF Aktivität)
A + B + AB
126 49,2 - 169,7 (% VWF Aktivität) 123 58,1 - 175,5 (% VWF Aktivität)
In einer gesonderten Studie, anhand von 266 Blutspendern, wurden die folgenden Werte
ermittelt:
Blutgruppe6
N
ACL TOP
O
132 40.3 - 125,9 (% VWF Aktivität)
A + B + AB
134 48,8 - 163,4 (% VWF Aktivität)
Hinweis: VWF ist ein akute Phase Protein. Stress, Schwangerschaft und andere
Situationen beinflussen seine Plasmakonzentration. Aus diesem Grunde kann es ratsam
sein die Analyse mit einer anderen Probe, an einem anderem Tag entnommen, zu
wiederholen.1 Die Bereiche wurden gemäß den Vorschriften der “ International Federation
of Clinical Chemistry (IFCC)” berechnet.7 Die Werte wurden mit einer spezifischen
Reagenziencharge ermittelt. Aufgrund verschiedener Variablen, die die Gerinnungszeit
beeinflussen können, wird empfohlen, dass jedes Labor seinen eigenen Normalbereich
ermittelt.
Méthode ultrasensible automatisée de dosage immunologique Latex pour la détermination
quantitative de l’activité du Facteur von Willebrand (Activité VWF) dans le plasma humain
citraté, sur les appareils de coagulation IL.
Conserver à 2-8°C, les réactifs sont stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur le
flacon.
Latex Reagent -La stabilité du réactif reconstitué est de: 1 mois à 2-8°C dans le flacon
d’origine, 3 jours à 15°C sur les ACL® ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, 1 jour à 15°C sur les
ACL Futura/ACL Advance ou 5 jours à 15°C sur l’ACL TOP. Ne pas congeler.
Pour une stabilité optimale, conserver le réactif à 2-8°C dans le flacon d’origine entre
chaque utilisation.
Les valeurs normales de cette étude ont été obtenues en utilisant le coffret Activité VWF.
Groupes ABO6
N ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 N
ACL Futura/ACL Advance
O
122 38,0 - 125,2 (% Activité VWF) 120 40,8 - 138,8 (%Activité VWF)
A + B + AB
126 49,2 - 169,7 (% Activité VWF) 123 58.1 - 175.5 (% Activité VWF)
Lors d’une étude spécifique portant sur 266 échantillons de patients provenant
d’établissements de transfusion sanguine, les résultats suivants ont été obtenus:
Groupes ABO6
N
ACL TOP
O
132 40,3 - 125,9 (% Activité VWF)
A + B + AB
134 48,8 - 163,4 (% Activité VWF)
Note: La concentration plasmatique de VWF est affectée lors de la phase aiguë
de l’inflammation, lors d’un stress, durant la grossesse ou dans d’autres situations
physiologiques particulières. Aussi, dans ces situations, il est recommandé de réitérer
l’analyse sur un autre prélèvement effectué à un jour différent du premier.1 Les normales
ont été calculées comme il est recommandé par «l’International Federation of Clinical
Chemistry» (IFFC).7 Ces résultats sont obtenus en utilisant un lot spécifique de réactif. Du
fait qu’un grand nombre de variables peuvent affecter les résultats, nous recommandons à
chaque laboratoire d’établir ses propres valeurs normales pour l’activité VWF.
Testprinzip und Zusammenfassung
Die Diagnose des von Willebrand Syndroms (VWS), des wahrscheinlich häufigsten
angeborenen Blutungsleidens, erfordert eine Vielzahl von Spezialtesten im Labor. Die
Messung und der Vergleich von von Willebrand Faktor-Antigen (VWF:AG), VWF Aktivität
und Faktor VIII (F VIII) im Plasma unterstützt die Differenzierung von quantitativen (Typ 1
oder Typ 3) oder qualitativen (Typ 2) VWF Defekten.1-2 Bei einem extrem niedrigem oder
undetektierbarem VWF:AG Wert, kann von einem Typ 3 VWS ausgegangen werden. Sollte
man ein leicht erniedrigtes oder gar normales Resultat erhalten, sollten VWF Aktivität
und F VIII Tests durchgeführt und mit dem VWF:Ag Resultat verglichen werden. Falls
alle drei Werte innerhalb des Normalbereichs liegen, können ein VWS und Hämophilie
A ausgeschlossen werden. Falls mindestens ein Parameter abnormal niedrig ausfällt,
ist es notwendig die Ratios VWF Aktivität/ VWF:Ag und FVIII/VWF:Ag zu berechnen.
Wenn beide Ratios nahe 1 sind (einige Autoren schlagen 0,7 als cut-off vor), kann
ein VWS Typ 1 diagnostiziert werden.1-2 Beim Erhalten einer niedrigen VWF Aktivität/
VWF:Ag Ratio (0,7 ist der vorgeschlagene cut-off), können die Typen 2A, 2B oder 2M
diagnostiziert werden. Diese Subtypen sind durch ein abnormes Multimeren-Muster und /
oder durch eine veränderte Plättchen-Affinität charakterisiert.1- 2 Zusätzliche Labortests
wie RIPA (Ristocetin induzierte Plättchen Aggregation), Multimer-Analyse und Binding
Assays sind erforderlich um zwischen den verschiedenen Subtypen zu unterscheiden.2
Bei einer niedrigen FVIII/VWF:Ag Ratio (0,7 ist der vorgeschlagene cut-off), kann ein Typ
2N oder eine Hämophilie A diagnostiziert werden. Ein FVIII binding assay ist notwendig
um zwischen beiden zu unterscheiden. Der VWF Aktivität Kit ist ein Latex-verstärkter
Immunoassay zur Quantifizierung der VWF Aktivität im Plasma. Die Aktivität des VWF wird
bestimmt durch die Messung der Trübungszunahme, welche durch die Agglutination des
Latex-Reagenzes verursacht wird. Ein spezifischer anti-VWF monoklonaler Antikörper,
welcher gegen die Thrombozytenbindungs-Domäne (Glykoprotein Ib Rezeptor) des
VWF gerichtet ist, ist auf dem Latex-Reagenz adsorbiert und reagiert mit dem VWF des
Patientenplasmas. Der Grad der Agglutination nimmt proportional zur VWF Aktivität in
der Probe zu. Die Bestimmung erfolgt durch die Messung, der durch die Agglutination
bedingten Abnahme der Lichtdurchlässigkeit, bei 405 nm (turbidimetrischer Immunoassay).
Inhalt
Die von Willebrand Factor Activity Packung enthält:
R Latex Reagent (Art. Nr. 0020004710): 2 Flaschen x 4,5 mL lyophilisierte
Suspension aus Polystyrol-Latexpartikeln, beschichtet mit gereinigten Maus antiVWF monoklonalen Antikörpern, welche gegen das funktionelle Epitop des VWF
gerichtet sind. Sie enthalten zusätzlich bovines Serum-Albumin, Stabilisatoren und
Konservierungsmittel.
BBuffer (Art. Nr. 0020004720): 2 Flaschen x 4,5 mL mit Tris-Puffer, der bovines SerumAlbumin, Stabilisatoren und Konservierungsmittel enthält.
WARNUNG:
Gefahrenklasse: keine
Risikoeinstufung: keine
Sicherheitseinstufung: keine
Der Puffer enthält weniger als 0,1% Natriumazid (Natriumazid kann in metallenen
Abflußrohren potentiell explosive Azide bilden). Bitte die entsprechenden
Abfallbeseitigungsvorschriften beachten.
Dieses Produkt ist nur für die in vitro Diagnostik geeignet.
Herstellung
Buffer: Gebrauchsfertig.
Latex Reagent: Der Inhalt einer Flasche wird durch Hinzugabe des ganzen Inhalts einer
Flasche Puffer gelöst.
Das Reagenz sollte für mindestens 20 Sekunden vorsichtig geschwenkt werden um das
lyophilisierte Latex komplett zu lösen und eine homogene und leicht milchige Suspension
zu erhalten. Nach vollständiger Rekonstitution wird das Reagenz 30 Minuten bei 15-25°C
inkubiert und dann unter vorsichtigem Schwenken erneut gemischt. Nicht schütteln.
Hinweis: Schaumbildung bei der Homogenisierung des rekonstituierten Reagenzes
vermeiden. Auf der Flüssigkeitsoberfläche befindliche Luftblasen können den
Flüssigkeitssensor des Gerätes beeinträchtigen.
Bestimmungsansatz
Die ausführliche Beschreibung des Bestimmungsansatzes ist dem GeräteBedienerhandbuch und/oder dem Applikationshandbuch zu entnehmen.
Probenmaterial - Antikoaguliertes Plasma
9 Teile frisches venöses Blut und 1 Teil Trinatriumcitratlösung werden sorgfältig in einem
silikonisierten Glasröhrchen gemischt. Hinweise zur Aufbereitung des Blutes sind den
Empfehlungen des Deutschen Instituts für Normung - DIN 58 905 - oder dem CLSI
(ehemals NCCLS) Dokument H21-A4 zu entnehmen.3
Eingefrorene Plasmen sollten bei 37°C schnell aufgetaut und vor der Analyse leicht
geschwenkt werden. Aufgetaute Proben müssen innerhalb von 2 Stunden analysiert
werden.
Zusätzliche Reagenzien und Kontrollplasmen
Die folgenden Reagenzien sind nicht in der Packung enthalten und müssen zusätzlich
bestellt werden:
Amerikan. und Pazifischer Raum Europa
Art. No.
Art. No.
Kalibrationsplasma
00200037000020003700
Normal-Kontroll-Plasma0020003120/0020003110 0020003110
Spezialtest-Kontrolle Bereich 1 0020010100
0020010100
Faktor Diluent
0009757600
0009757600
Qualitätskontrolle
Es ist gängige Laborpraxis, die Qualität der Analyse mit Kontrollmaterialien im normalen
sowie im pathologischen Bereich zu überprüfen.4 Es wird empfohlen, als Kontrollmaterial
die oben angegebenen Kontrollen zu verwenden. Die Bereiche sind der jeweiligen
Packungsbeilage zu entnehmen. Jedes Labor sollte seinen eigenen Kontrollbereich
ermitteln. Spätestens nach jeweils 8 Stunden sollte eine Qualitätskontrolle durchgeführt
werden. Algorithmen zur Beurteilung der Qualitätskontrollergebnisse siehe z.B Westgard
et al.5 Siehe auch “Richtlinien der Bundesärztekammer zur Qualitätssicherung quantitativer
laboratoriumsmedizinischer Untersuchungen“ vom 24.8.2001.
Ergebnisse
VWF Aktivitäts Ergebnisse werden in Prozent der Norm dargestellt. Sie sollten bei der
Diagnosestellung immer im Zusammenhang mit weiteren Informationen, wie z.B. dem
klinischen Kontext, herangezogen werden.
Zusätzliche Informationen sind dem Bedienerhandbuch zu entnehmen.
Einschränkungen
VWF Aktivitäts Ergebnisse auf ACL ELITE/ELITE PRO und ACL 8/9/10000 werden durch
Konzentrationen von Bilirubin bis 3,8 mg/dL und Lipiden bis 265 mg/dL nicht beeinflusst.
VWF Aktivitäts Ergebnisse auf ACL Futura/ACL Advance- Analysensystemen werden
durch Konzentrationen von Bilirubin bis 3,6 mg/dL und Lipiden bis 929 mg/dL nicht
beeinflusst.
Das Vorhandensein von Rheumafaktoren kann zu einer Überbewertung der
Testergebnisse führen. Hämolytische und trübe (z.B. ikterische/lipämische) Proben sollten
nicht analysiert werden.
VWF Aktivitäts Ergebnisse auf dem ACL TOP werden durch Konzentrationen an
Hämoglobin bis zu 70 mg/dL, Bilirubin bis zu 4,2 mg/dL, Triglyceriden bis zu 1020 mg/dL
und Rheumafaktor bis zu 200 IU/mL nicht beeinflusst.
Proben von Patienten, die Präparationen von monoklonalen Maus- Antikörpern aus
diagnostischen oder therapeutischen Gründen erhalten haben, können humane
Anti-Maus Antikörper enthalten (HAMA). HAMA im Plasma können zu einer
Überschätzung der Ergebnisse von Immunoassays führen, die monoklonale MausAntikörper verwenden. Der Puffer des HemosIL von Willebrand Faktor Aktivitätstestes
enthält eine hemmende Substanz gegen HAMA zur Minimierung der Interferenzen auf
das Testergebnis.
Die Anwesenheit erhöhter Werte von humanen Anti-Rind IgG-Antikörpern (HABIA) bei
einzelnen Patienten kann zu einer Überschätzung der Testergebnisse führen.8
Die Ergebnisse sollten daher immer im Zusammenhang mit weiteren Informationen,
wie dem klinischen Kontext, beurteilt werden. Verwenden Sie diesen Test nicht als
einzige Basis für die Therapieentscheidungen.
Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
Testcharakteristik
Präzision:
Die Präzision im Lauf und von Tag zu Tag wurde bei mehreren Läufen bestimmt.
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000 Mittelwert (% VWF Aktivität) VK% (im Lauf) VK% (Tag zu Tag)
Normal-Kontroll-Plasma79,6
2,7 4,9
Spezialtest-Kontrolle Bereich 1
49,8
4,6
9,0
Spezialtest-Kontrolle Bereich 2
27,7
7,5
8,7
ACL Futura/
ACL Advance
Mittelwert (% VWF Aktivität) VK% (im Lauf) VK% (Tag zu Tag)
Normal-Kontroll-Plasma92,1
4,1 5,6
Spezialtest-Kontrolle Bereich 1
64,1
4,8
6,5
Spezialtest-Kontrolle Bereich 2
36,6
6,5
8,3
ACL TOP
Mittelwert (% VWF Aktivität) VK% (im Lauf) VK% (Tag zu Tag)
Normal-Kontroll-Plasma102,4
2,6 3,4
Spezialtest-Kontrolle Bereich1
68,4
3,5
6,3
Spezialtest-Kontrolle Bereich 2
30,3
6,5
8,0
Korrelation:
System
SteigungOrdinatenabschnittr
Vergleichsmethode
ACL ELITE/
0,832
4,782
0,972
VWF Aktivität EIA
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance 0,954
3,854
0,958
VWF Aktivität EIA
ACL TOP
0,988
2,288
0,995 VWF Aktivität am ACL Advance
Eine zusätzliche Vergleichsstudie (n=114), welche diesen VWF Aktivitäts-Kit auf einem
ACL 9000 mit der Ristocetin Cofaktor-Aktivität auf einem automatisierten optischen
Koagulometer vergleicht, erbrachte einen Korrelationskoeffizienten r von 0,950 und eine
Steigung von 0,841.
Die Präzisions- und Korrelationsergebnisse sind mit spezifischen Reagenzienund
Kontrollchargen ermittelt worden.
Bestimmungsgrenze::
System
ACL ELITE/
12 (% VWF Aktivität)
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance
1,3 (% VWF Aktivität)
ACL TOP
3,2 (% VWF Aktivität)
Linearität:
System
Regulärer Test (% VWF Aktivität) Rerun test (% VWF Aktivität)
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000
21 - 200
ACL Futura/ACL Advance
19 - 120
40 - 240
ACL TOP
19 - 130
57 - 390
Falls der lineare Bereich auch im Rerun Test überschritten wird, sollten die Proben am
ACL ELITE/ELITE PRO und ACL 8/9/10000 und ACL Futura/ACL Advance manuell 1:4 mit
Faktordiluent (100 μL Plasma + 300 μL Faktordiluent), am ACL TOP 1:10 (50 μL Plasma
+ 450 μL Faktordiluent) verdünnt und nochmals gemessen werden. Anschließend müssen
die erhaltenen Ergebnisse, entsprechend der eingesetzten Verdünnung, mit 4 oder 10
multipliziert werden.
Der Test zeigt keinen Prozone-Effekt (d.h. Antigen Überschuß) bis zu 700% auf ACL
ELITE/ELITE PRO und ACL 8/9/10000, bis zu 350% auf ACL Futura/ACL AdvanceAnalysensystemen und bis zu 1000% auf dem ACL TOP.
Principe
Le diagnostic de la maladie de Von Willebrand (VWM), probablement le plus fréquent
des syndromes hémorragiques congénitaux, nécessite la réalisation de plusieurs tests
spécialisés au laboratoire. La détermination puis la comparaison des valeurs obtenues
pour l’Antigène du facteur von Willebrand (VWF:Ag), l’activité VWF et le Facteur VIII (FVIII)
dans le plasma des patients aide à définir et à diagnostiquer plusieurs types de déficits en
facteur Von Willebrand, des déficits quantitatifs (type 1 ou 3) ou un déficit qualitatif (type
2).1-2 Une VWM de type 3 peut être suspectée lorsque l’on obtient un taux très bas, voire
indétectable de VWF:Ag. Si ce taux est modéré voire normal, les tests d’activité VWF et
facteur VIII doivent être réalisés et les résultats comparés à celui obtenu pour le VWF:Ag.
Si les trois valeurs sont normales la VWM et l’Hémophilie A peuvent être exclues. Si au
moins, l’une des trois valeurs est anormalement basse, il est nécessaire de calculer les
ratios Activité VWF/VWF:Ag et FVIII/ VWF:Ag.
Si chacun de ces deux ratios est proche de 1 (certains auteurs préconisant 0,7 comme
valeur seuil), une VWM de type 1 peut être diagnostiquée.1-2 Lorsque le ratio Activité VWF/
VWF:Ag est bas (le seuil préconisé étant également 0,7), une VWM de types 2A, 2B ou
2M peut être diagnostiquée. Ces sous types sont caractérisés par une anormalité du profil
multimérique et/ou une altération de l’affinité plaquettaire.1-2 Des tests complémentaires
tels que RIPA (Ristocetin Induced Platelet Aggregation, Agrégation plaquettaire induite par
la Ristocétine), analyse multimérique et tests de “binding”, sont nécessaires afin d’être en
mesure de discriminer les différents sous-types.2
Lorsque le ratio FVIII/VWF:Ag est bas (le seuil préconisé étant également 0,7), une VWM
de type 2N ou une Hémophilie A peuvent être diagnostiquées. Dans ce cas un test de
«binding» FVIII est nécessaire afin de les discriminer. Le test d’activité VWF est un test
immuno-turbidimétrique utilisant des particules de latex pour quantifier l’activité VWF
dans le plasma. L’activité VWF est déterminée en mesurant l’augmentation de turbidité
produite par l’agglutination de particules de latex contenues dans le réactif correspondant.
Un anticorps monoclonal anti-VWF dirigé contre le site plaquettaire spécifique du VWF
(récepteur Glycoprotéique Ib) adsorbé sur les particules de latex du réactif, réagit avec le
VWF du plasma du patient. L’importance de l’agglutination est directement proportionnelle
à l’activité en VWF de l’échantillon et est déterminée en mesurant la diminution de la
lumière transmise due à la formation d’aggrégats
Composition
Le coffret von Willebrand Factor Activity (Activité du Facteur von Willebrand) contient:
R Latex Reagent (Réf. 0020004710): 2 flacons de 4,5 mL d’une suspension lyophilisée
de particules de latex polystyrène adsorbées avec un anticorps monoclonal de souris
purifié anti-VWF dirigé contre un épitope fonctionnel du VWF, contenant également de
l’albumine bovine sérique, des stabilisants et un conservateur.
BBuffer (Réf. 0020004720): 2 flacons de 4,5 mL de tampon Tris contenant de
l’albumine bovine sérique, des stabilisants et un conservateur.
PRECAUTIONS:
Classification risque: Aucune
Phrases risque: Aucune
Phrases sécurité: Aucune
Le Tampon contient moins de 0,1% d’azide de sodium comme conservateur. L’azide
de sodium peut former des azides de plomb ou de cuivre avec les canalisations du
laboratoire, susceptibles d’exploser par percussion. Pour cette raison, il est conseillé de
rincer abondamment à l’eau après élimination des réactifs.
Ce produit est à usage diagnostique in vitro.
Préparation
Buffer: Le réactif est prêt à l’emploi.
Latex Reagent: Dissoudre le contenu de chaque flacon en versant la totalité du contenu
d’un flacon de tampon dans un flacon de réactif latex. Replacer le capuchon et agiter
doucement pendant au moins 20 secondes afin d’obtenir la dissolution complète du
lyophilisat. Le réactif est totalement reconstitué lorsqu’il se trouve sous forme d’une
suspension homogène et légèrement laiteuse. Conserver le réactif à 15-25°C pendant
30 minutes et retourner le flacon pour mélanger le contenu avant utilisation. Ne pas
agiter violemment. Note: Eviter la formation de mousse lors de l’homogéinisation des
réactifs reconstitués. La présence de bulles d’air en surface du liquide peut entraîner des
interférences avec les détecteurs fluidiques des instruments.
FRANÇAIS - Révision de la notice 06/2014
Procédures de test/instrument
Se référer au mode d’emploi de l’instrument IL approprié et/ou au manuel d’application
pour des informations complètes sur les procédures de dosage.
Recueil des spécimens et préparation
9 parts de sang fraîchement prélevé sont collectées avec 1 part de citrate trisodique. Se
référer au document CLSI (anciennement NCCLS) ou au document GEHT (STV, numéro
spécial, 1-40, 1998) pour plus d’informations sur le prélèvement des échantillons, leur
manipulation et leur stockage.3
Les échantillons de plasma congelés doivent être décongelés rapidement à 37°C et agités
doucement avant utilisation. Après décongélation le dosage doit être réalisé dans les 2
heures.
Réactifs auxiliaires et plasma de contrôle
Non fournis avec la trousse, ils doivent faire l’objet d’une commande séparée.
Amérique et Pacifique
Europe
Réf.Réf.
Plasma de calibration
0020003700
0020003700
Contrôle normal
0020003120/0020003110 0020003110
Contrôle Tests Spéciaux Taux 1 0020010100
0020010100
Factor diluent
0009757600
0009757600
Contrôle de qualité
Les contrôles normaux et anormaux sont recommandés pour un programme de contrôle
de qualité complet.4 Le Contrôle normal et le Contrôle Tests Spéciaux Niveau 1 est
spécifique à ce programme. Chaque laboratoire doit établir sa propre moyenne et déviation
standard et son programme de contrôle de qualité afin de vérifier l’état de fonctionnement
de son système analytique. Les contrôles doivent être analysés au minimum toutes les 8
heures en accord avec une bonne pratique de laboratoire. Se référer au mode d’emploi de
l’instrument pour des informations complémentaires. Se reporter à Westgard et al pour la
détermination et la résolution des contrôles hors limites..5
Résultats
Les résultats d’activité VWF sont reportés en % de la normalité. Se référer au mode
d’emploi de l’instrument pour des informations complémentaires. Les résultats du dosage
peuvent être utilisés avec d’autres informations, comprenant le contexte clinique, pour
établir le diagnostic.
Limites de la méthode et substances interférant avec celle-ci
Les résultats d’activité VWF sur les analyseurs ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 ne
sont pas affectés par la bilirubine jusqu’à 3,8 mg/dL (38 mg/l) et par les lipides jusqu’à
265 mg/dL (2,65 g/l).
Les résultats d’activité VWF sur les analyseurs ACL Futura/ACL Advance ne sont pas
affectés par la bilirubine jusqu’à 3,6 mg/dL (36 mg/l) et par les lipides jusqu’à 929 mg/dL
(9,29 g/l).
La présence de facteur rhumatoïde peut entraîner l’obtention de résultats par excès. Les
échantillons hémolysés ou turbides ne doivent pas être dosés. Les résultats d’activité
VWF sur l’ACL TOP ne sont pas affectés par l’hémoglobine jusqu’à 70 mg/dL, la bilirubine
jusqu’à 4,2 mg/dL (42 mg/l), les triglycérides jusqu’à 1020 mg/dL (10,2 g/l) et par le facteur
rhumatoïde jusqu’à 200 UI/ml.
Les patients ayant reçu à des fins diagnostiques ou thérapeutiques des préparations
d’anticorps de souris peuvent développer des anticorps antiimmunoglobulines de
souris (HAMA). Ces HAMA présents dans le sérum ou le plasma des patients peuvent
interférer avec les techniques immunologiques utilisant des anticorps monoclonaux
de souris. Le tampon de réaction du réactif HemosIL Von Willebrand Factor Activity
contient un inhibiteur des HAMA permettant de limiter leur interférence sur les
résultats du test.
La présence de niveaux élevés d'anticorps humains anti IgG bovine (HABIA) chez
certains patients pourrait entraîner une surestimation des résultats.8
Les résultats de ce test peuvent être utiliser avec d'autres informations tel que le
contexte clinique pour poser un diagnostic. Ne pas utiliser les résultats de ce test
isolément comme base pour arrêter des décisions thérapeutiques.
Caractéristiques et performances
Précision:
La précision intra-séries et totale (inter-séries et de jour à jour) a été évaluée au cours
d’essais multiples.
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
Moyenne (% Activité VWF)CV% (Intra-séries) CV% (Total)
Contrôle normal
79,6
2,7
4,9
Contrôle Tests Spéciaux Taux 1
49,8
4,6
9,0
Contrôle Tests Spéciaux Taux 2
27,7
7,5
8,7
ACL Futura/
ACL Advance
Moyenne (% Activité VWF)CV% (Intra-séries) CV% (Total)
Contrôle normal
92,1
4,1
5,6
Contrôle Tests Spéciaux Taux 1
64,1
4,8
6,5
Contrôle Tests Spéciaux Taux 2
36,6
6,5
8,3
ACL TOP
Moyenne (% Activité VWF)CV% (Intra-séries) CV% (Total)
Contrôle normal
102,4
2,6
3,4
Contrôle Tests Spéciaux Taux 1
68,4
3,5
6,3
Contrôle Tests Spéciaux Taux 2
30,3
6,5
8,0
Corrélation:
Analyseur
Pente Ordonnées à l’origine r
Méthodes de comparaison
ACL ELITE/
0,832
4,782
0,972
Activité VWF EIA
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance 0,954
3,854
0,958
Activité VWF EIA
ACL TOP
0,988
2,288
0,995 Activité VWF sur ACL Advance
Une étude clinique complémentaire (n=114), comparant le test HemosIL Activité VWF
sur analyseur ACL 9000 au test d’activité cofacteur de la Ristocétine (VWF:RCo) sur
un analyseur automatique de coagulation à détection optique, a donné les résultats de
corrélation suivants: r = 0,950, pente = 0,841. La précision et la corrélation de ces résultats
sont obtenues en utilisant un lot spécifique de réactifs et de contrôles.
Limite de détection:
Analyseur
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
12 (% Activité VWF)
ACL Futura/ACL Advance
1,3 (% Activité VWF)
ACL TOP
3,2 (% Activité VWF)
Linéarité:
Test sans dilution
Test après dilution
Analyseur
(% Activité VWF)
automatique (% Activité VWF)
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000
21 - 200
ACL Futura/ACL Advance
19 - 120
40 - 240
ACL TOP
19 - 130
57 - 390
Si la linéarité est dépassée (Test après dilution automatique), les échantillons pourront
être dilués manuellement au 1/4 avec du diluant facteur (100 μL d’échantillon + 300 μL de
diluant facteur) sur les analyseurs ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 et ACL Futura/ACL
Advance et 1/10 avec du diluant facteur (50 μL d’échantillon + 450 μL de diluant facteur)
sur l’ACL TOP et redosés. Les résultats ainsi obtenus doivent être multipliés par le facteur
de dilution.
Pas d’effet de zone (Excès d’antigène) jusqu’à 700% sur les analyseurs ACL ELITE/ELITE
PRO/8/9/10000, jusqu’à 350% sur les analyseurs ACL Futura/ ACL Advance et jusqu’à
1000% sur l’ACL TOP.
3800-3102 R5 06/2014
HemosIL®
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
ITALIANO - Revisione dell'inserto 06/2014
Utilizzo
Metodo
Test immunologico al lattice automatico per la determinazione quantitativa dell’attività
del fattore von Willebrand (Attività VWF) nel plasma umano citratato sui sistemi di
coagulazione ACL.
Per le metodiche e le procedure di lavoro fare riferimento al Manuale dell’Operatore e/o al
Manuale Applicativo degli strumenti IL.
Principio del metodo
La malattia di von Willebrand (VWD o MVW) è, probabilmente, la più diffusa patologia
emorragica congenita e per la sua diagnosi è necessaria l’esecuzione di alcuni esami
specialistici di laboratorio.
La determinazione e il confronto dei risultati dei test dell’antigene del fattore di von
Willebrand (VWF:Ag), dell’attività del VWF e del fattore VIII (FVIII) permettono la
differenziazione delle anomalie quantitative (tipo 1 e tipo 3) o qualitative (tipo 2) del VWF
e quindi la diagnosi dei diversi tipi di VWD.1-2 Quando si ottiene un valore estremamente
basso o non misurabile di VWF:Ag, è possibile prevedere una VWD di tipo 3. Se il risultato
è normale o vicino alla normalità, devono essere eseguite le determinazioni dell’attività
del VWF e del FVIII, confrontando poi i risultati ottenuti con il dato di WF:Ag. Se tutti e tre i
valori sono all’interno dell’intervallo di normalità, si possono escludere la VWD e l’emofilia
A. Se anche solo uno dei risultati è anormale, è necessario calcolare i rapporti dell’attività
del VWF/VWF:Ag e FVIII/VWF:Ag. Se entrambi i rapporti sono vicino ad 1 (alcuni autori
suggeriscono 0,7 come cut-off), può essere diagnosticata una VWD di tipo 1.1-2
Quando il rapporto dell’attività del VWF/VWF:Ag è basso (il cut-off suggerito è ancora
0,7), possono essere diagnosticati i tipi 2A, 2B o 2M. Questi sottotipi sono caratterizzati
dalla presenza di un’anomala composizione multimerica e/o da un’alterata affinità per la
piastrine.1-2 Per distinguere i differenti sottotipi sono necessari ulteriori test di laboratorio
come il RIPA (Ristocetin-induced platelet aggregation, Aggregazione piastrinica indotta
dalla Ristocetina), l’analisi dei multimeri e i test per la verifica della capacità di legame del
VWF al FVIII, al collagene e alle piastrine (recettore Glicoproteina Ib).2 Quando il rapporto
FVIII/VWF:Ag è basso (il cut-off suggerito è ancora 0,7), può essere diagnosticato un
tipo 2N o una emofilia A; per discriminare fra le due patologie è necessario effettuare
il test per la verifica della capacità di legame del VWF al FVIII. Con questo kit la
determinazione quantitativa dell’attività del VWF nel plasma viene eseguita con un metodo
immuno-turbidimetrico, misurando l’incremento di torbidità prodotta dalla reazione di
agglutinazione. Un anticorpo monoclonale specifico anti-VWF adsorbito su un reagente
al lattice, diretto contro il sito del legame piastrinico del VWF (recettore Glicoproteina
Ib), reagisce con il VWF del plasma in esame. Il grado di agglutinazione è direttamente
proporzionale all’attività del VWF nel campione ed è determinato misurando la diminuzione
della luce trasmessa causata dagli aggregati.
Composizione
Il kit von Willebrand Factor Activity è composto da:
R Latex Reagent (Nr. Cat. 0020004710): 2 flaconi da 4,5 mL di una sospensione
liofilizzata di anticorpi monoclonali purificati di topo diretti contro l’epitopo funzionale
del VWF legati a particelle di lattice di polistirene, con aggiunta di albumina bovina
serica, tampone, stabilizzanti e conservante.
BBuffer (Nr. Cat. 0020004720): 2 flaconi da 4,5 mL di tampone Tris, con aggiunta di
albumina bovina serica, stabilizzanti e conservante.
ATTENZIONE:
Simbolo di pericolo: nessuno
Frasi di rischio: nessuno
Consigli di prudenza: nessuno
Il Tampone contiene meno del 0,1% di sodio azide che potrebbe formare azidi esplosive a
contatto con tubature metalliche. Prendere le dovute precauzioni per lo smaltimento.
Per uso diagnostico in vitro.
Preparazione
Buffer: Pronto all’uso.
Latex Reagent: Versare tutto il contenuto di un flacone di tampone in un flacone di
reagente al lattice. Chiudere con il tappo e miscelare delicatamente per almeno 20 secondi
per ottenere la completa ricostituzione del prodotto. Deve apparire come una sospensione
omogenea e lattescente. Mantenere il reagente a 15-25°C per 30 minuti e miscelarlo
nuovamente per inversione prima dell’uso. Non agitare.
Nota: Evitare la formazione di schiuma durante la ricostituzione del prodotto. La presenza
di bolle può interferire nel corretto funzionamento dei sensori dei liquidi sugli strumenti.
Conservazione e stabilità dei reagenti
I reagenti sigillati sono stabili a 2-8°C fino alla data di scadenza stampata sull’etichetta.
Latex Reagent - Stabilità dopo la ricostituzione: 1 mese a 2-8°C nel flacone originale,
3 giorni a 15°C su strumenti ACL® ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, 1 giorno a 15°C su
strumenti ACL Futura®/ACL Advance o 5 giorni a 15°C su TOPTM. Non congelare.
Al termine dei cicli lavorativi si consiglia di conservare i reagenti a 2-8°C nel flacone
originale per una migliore stabilità.
Preparazione dei campioni
Aggiungere a nove parti di sangue venoso fresco una parte di trisodio citrato. Per
informazioni aggiuntive sulla preparazione, il trattamento e la conservazione dei campioni
fare riferimento al documento CLSI (ex NCCLS) H21-A4.3
Nel caso di campioni congelati, scongelarli rapidamente a 37°C e miscelarli delicatamente
prima dell’analisi. Analizzare i campioni entro 2 ore dallo scongelamento.
Reagenti ausiliari e plasmi di controllo
I seguenti prodotti non sono forniti insieme al kit e devono essere ordinati separatamente.
Nr. Cat.
Plasma Calibrante
0020003700
Controllo normale
0020003120
Controllo dei Test Speciali Livello 1
0020010100
Diluente fattori 0009757600
Controllo di qualità
Per un completo programma di controllo di qualità si raccomanda l’uso di plasmi normali
e patologici.4 Il Controllo normale e i Controlli dei Test Speciali Livello 1 sono specifici
per questo tipo di programma. Ogni laboratorio dovrà stabilire i propri valori medi e le
deviazioni standard per ogni controllo ed individuare le corrette procedure di analisi.
I controlli dovranno essere analizzati almeno una volta ogni 8 ore in accordo con le
esigenze del laboratorio. Consultare il Manuale dell’Operatore dello strumento per ulteriori
informazioni. Per l’identificazione e la risoluzione di situazioni particolari, fare riferimento
all’articolo di Westgard et al.5
Risultati
I risultati del test sono riportati in % di attività del VWF, assumendo che il valore normale
sia 100%. Riferirsi al Manuale dell’Operatore per ulteriori informazioni. I risultati del test
dovrebbero essere utilizzati insieme ad altre informazioni, compreso il quadro clinico, per
una diagnosi completa.
Limitazioni/sostanze interferenti
I risultati del test su strumenti ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 non sono influenzati
in presenza di livelli di bilirubina fino a 3,8 mg/dL e lipidi fino a 265 mg/dL. I risultati del
test su strumenti ACL Futura/ACL Advance non sono influenzati in presenza di livelli di
bilirubina fino a 3,6 mg/dL e lipidi fino a 929 mg/dL. La presenza del fattore reumatoide
potrebbe causare una sovrastima dei dosaggi. Nel caso di campioni emolizzati o torbidi
si consiglia di ripetere il prelievo. I risultati del test su ACL TOP non sono influenzati in
presenza di livelli di emoglobina fino a 70 mg/dL, bilirubina fino a 4,2 mg/dL, trigliceridi fino
a 1020 mg/dL e fattore reumatoide fino a 200 UI/ml.
I campioni di quei pazienti ai quali sono stati somministrati farmaci a base di anticorpi
monoclonali di topo, a scopo diagnostico o terapeutico, possono contenere anticorpi
umani anti-topo (HAMA). La presenza di HAMA nei campioni può causare una
sovrastima dei livelli di VWF attività. Il Activity Buffer contenuto nel kit HemosIL von
Willebrand Factor Activity contiene un agente diretto contro gli HAMA per limitarne le
interferenze sui risultati dei campioni.
La presenza, in alcuni pazienti, di un aumentato livello di Anticorpi Umani Anti-bovino
(HABIA) IgG può portare a una sovrastima dei risultati.8
Per una corretta diagnosi, i risultati di questo test devono essere utilizzati con altre
informazioni, compreso il quadro clinico. Non utilizzare questo test come unico criterio
decisionale per le terapie.
Imunoensaio automatizado para a determinação quantitativa da Actividade do Factor
von Willebrand (Actividade do FVW) em plasma humano citratado por turbidimetria de
partículas de látex, nos Sistemas de Coagulação da IL.
Resumo e Príncipio
O diagnóstico da doença de von Willebrand (DWD), provavelmente uma das patologias da
coagulação mais comuns, requer um número elevado de testes de laboratório especiais.
A quantificação e a comparação do Antigénio do Factor von Willebrand (VWF:Ag), a
Actividade do VWF e os níveis do Factor VIII (FVIII) no plasma auxiliam na diferenciação
dos defeitos quantitativos (tipo 1 ou tipo 3) ou defeitos qualitativos (tipo 2) do VWF e
portanto para diagnosticar os diferentes tipos de VWD.1-2
Quando se obtém um nível de extremamente baixo ou indetectável de VWF:Ag, por
esperar-se um VWD do tipo 3. Se for obtido um resultado moderado ou mesmo normal,
os testes da Actividade do VWF e do FVIII, devem ser realizados e comparados com os
resultados do VWF:Ag. Se os três valores estão dentro do intervalo normal, podem excluirse o VWD e a Hemofilia A. Se pelo menos um, dos parâmetros, estiver anormalmente
baixo, é necessário calcular os rácios Actividade VWF/VWF:Ag e FVIII/VWF:Ag. Se
ambos os rácios estão próximos de1 (alguns autores sugerem 0,7 como cut-off), pode
ser diagnosticado VWD tipo 1.1-2 Quando o rácio Actividade VWF/VWF:Ag é baixo (0,7
é também o cut-off sugerido), podem ser diagnosticados os tipos 2A, 2B o 2M. Estes
subtipos são caracterizados pelo seu padrão multimérico anormal e/ou pela sua afinidade
para plaquetas alterada.1-2 Testes adicionais de laboratório, como o RIPA (Agregação
plaquetária induzida pela Ristocetina), análise multimérica e ensaios de ligação, são
necessários para distinguir os diferentes sub-tipos.2 Quando o rácio FVIII/VWF:Ag é baixo
(0,7 é também o cut-off sugerido), pode ser diagnosticado o tipo 2N ou a Hemofilia A, é
necessário o ensaio de ligação do FVIII, para discriminar entre as duas.
O kit Actividade do FVW é uma imunoturbidimetria amplificada com partículas de
látex que permite quantificar o Actividade do FVW no plasma. Actividade do FVW é
determinada ao medir o aumento da turbidimetria resultante da aglutinação do reagente
de látex. Um anticorpo monoclonal específico anti-VWF adsorvido no reagente de
látex, dirigido contra o local de ligação do VWF às plaquetas (receptor da Glicoproteina
Ib), reage com o VWF do plasma do doente. O grau de aglutinação é directamente
proporcional à Actividade do FVW presente no plasma. Os agregados provocam um
decréscimo da luz transmitida.
Composição
O kit von Willebrand Factor Activity (Actividade do Factor von Willebrand) é
composto por:
R Latex Reagent (Núm. Cat. 0020004710): recipientes 2 x 4,5 mL de uma suspensão
de partículas de látex de poliestireno, às quais se juntou um anticorpo monoclonal
purificado específico de ratinho contra o epítopo funcional FVW. Contém albumina de
soro bovino, estabilizantes e conservante. Apresenta-se na forma liofilizada.
BBuffer (Núm. Cat. 0020004720): recipientes 2 x 4,5 mL de um tampão Tris que
contém albumina de soro bovino, estabilizadores e conservante.
PRECAUÇÕES E AVISOS:
Classe de risco: nenhuma
Frases de risco: nenhuma
Frases de segurança: nenhuma
O Tampão contém menos de 0,1% de azida de sódio que pode formar azidas explosivas
em contacto com o chumbo e cobre das canalizações. Utilize os métodos de eliminação
adequados.
Para uso em diagnóstico in vitro.
Preparação
Buffer: Pronto a ser utilizado.
Latex Reagent: Dissolver o conteúdo de cada recipiente, juntando o conteúdo completo
de um recipiente de tampão ao recipiente do Reagente de Látex. Fechar o recipiente e
homogeneizar suavemente, durante pelo menos 20 segundos até à completa dissolução
do látex liofilizado. Verificar se o produto fica completamente dissolvido.
Deve ter uma aparência homogénea e como uma suspensão ligeiramente leitosa.
Conservar o reagente entre 15 e 25°C durante 30 minutos e misturar suavemente antes
de utilizar. Não agitar.
Nota: Evitar a formação de espuma quando proceder à homogeneização dos reagentes
reconstituídos. Bolhas no cimo do líquido, podem interferir com os sensores de líquido do
aparelho.
Precisione:
La precisione nella serie e totale (tra ciclo e ciclo e tra giorno e giorno) è stata verificata
eseguendo numerosi test.
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
Media (Attività VWF)
CV% (nella serie) CV% (Totale)
Controllo normale
79,6
2,7
4,9
Controllo dei Test Speciali Livello 1
49,8
4,6
9,0
Controllo dei Test Speciali Livello 2
27,7
7,5
8,7
ACL Futura/ACL Advance Media (Attività VWF)
CV% (nella serie) CV% (Totale)
Controllo normale
92,1
4,1
5,6
Controllo dei Test Speciali Livello 1
64,1
4,8
6,5
Controllo dei Test Speciali Livello 2
36,6
6,5
8,3
ACL TOP
Media (Attività VWF)
CV% (nella serie) CV% (Totale)
Controllo normale
102,4
2,6
3,4
Controllo dei Test Speciali Livello 1
68,4
3,5
6,3
Controllo dei Test Speciali Livello 2
30,3
6,5
8,0
Correlation:
Sistema
Pendenza Intercetta
r
Metodo di riferimento
ACL ELITE/
0,832
4,782
0,972
Attività VWF (Metodo EIA)
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance 0,954
3,854
0,958
Attività VWF (Metodo EIA)
ACL TOP
0,988
2,288
0,995 Attività VWF su ACL Advance
In un ulteriore studio clinico (n=114) di comparazione, tra questo kit su ACL 9000 e un kit
per il dosaggio dell’attività del cofattore Ristocetinico su un coagulometro automatico, si è
ottenuto un coefficiente di correlazione di 0,950 e una pendenza di 0,841.
I risultati dei test di precisione e di correlazione sono stati ottenuti usando uno specifico
lotto di reagenti e controlli.
Limite di rilevabilità:
Sistema
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
12 (Attività VWF) (%)
ACL Futura/ACL Advance
1.3 (Attività VWF) (%)
ACL TOP
3.2 (Attività VWF) (%)
Linearità:
Sistema
Test (Attività VWF) (%)
Rerun (Attività VWF) (%)
ACL ELITE/ ELITE PRO/8/9/10000
21 - 200
ACL Futura/ACL Advance
19 - 120
40 - 240
ACL TOP
19 - 130
57 - 390
Se l’intervallo di linearità (Rerun) viene superato, i campioni devono essere diluiti 1:4 (1+3)
con il Diluente fattori (es. 100 μL di campione + 300 μL di Diluente fattori) su strumenti
ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 e ACL Futura/ACL Advance o 1:10 (1+9) con il Diluente
fattori (es. 50 μL di campione + 450 μL di Diluente fattori) su ACL TOP e rianalizzati
nuovamente. I risultati ottenuti devono essere moltiplicati per il relativo fattore di diluizione.
L’effetto ”prozona” è assente fino a 700% su strumenti ACL ELITE/ELITE PRO/ 8/9/10000,
fino a 350% su strumenti ACL Futura/ACL Advance e fino a 1000% su ACL TOP.
Valori attesi
Utilizzando questo kit è stato determinato il seguente intervallo di riferimento.
Gruppi Sanguigni6 N ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 N
ACL Futura/ACL Advance
O
122
38,0 - 125,2 (Attività VWF)
120 40,8 - 138,8 (Attività VWF)
A + B + AB
126
49,2 - 169,7 (Attività VWF)
123 58,1 - 175,5 (Attività VWF)
In un ulteriore studio effettuato analizzando campioni di 266 soggetti adulti sani, donatori,
si sono ottenuti i seguenti risultati:
Gruppi Sanguigni6 N
ACL TOP
O
132
40,3 - 125,9 (Attività VWF)
A + B + AB
134
48,8 - 163,4 (Attività VWF)
Nota: Il VWF è una proteina della fase acuta la cui concentrazione plasmatica può
aumentare in caso di stress, gravidanza e altre situazioni cliniche. In tali condizioni è
consigliabile ripetere l’analisi su un campione di sangue prelevato successivamente.
Gli intervalli di riferimento sono stati calcolati seguendo le raccomandazioni dell’
International Federation of Clinical Chemistry (IFCC).7 Tali risultati sono stati ottenuti
utilizzando un lotto specifico di reagente. A causa delle numerose variabili che possono
influenzare i risultati, ogni laboratorio dovrebbe stabilire il proprio intervallo di normalità.
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
Aplicação Prevista
Prestazioni
PORTUGUÊS - Revisão do folheto 06/2014
Conservação e estabilidade dos reagentes
Valores esperados
Os reagentes fechados, que ainda não foram utilizados, são estáveis até ao final do prazo
de validade, que consta no rótulo, desde que conservados entre 2-8°C.
Latex Reagent - Estabilidade depois da reconstituição: 1 mês a 2-8°C dentro do
recipiente original, 3 dias a 15°C nos Sistemas ACL® ELITE/ELITE PRO/8/9/10000, 1 dia
a 15°C nos Sistemas ACL Futura/ACL Advance ou 5 dias a 15°C no ACL TOP.
Não congelar.
Para obter uma estabilidade óptima retire os reagentes do aparelho e conserve-os entre
2-8°C, nos recipientes originais.
Efectuou-se um estudo de intervalo normal de valores utilizando o kit da Actividade do
FVW.
Grupo Sanguíneo6 N ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 N
ACL Futura/ACL Advance
O
122 38,0 - 125,2 (% Actividade do FVW) 120 40,8 - 138,8 (% Actividade do FVW)
A + B + AB
126 49,2 - 169,7 (% Actividade do FVW) 123 58,1 - 175,5 (% Actividade do FVW)
Num estudo separado com 266 amostras individuais de dadores do banco de sangue,
obtiveram-se os seguintes resultados:
Grupo Sanguíneo6 N
ACL TOP
O
132 40,3 - 125,9 (% Actividade do FVW)
A + B + AB
134 48,8 - 163,4 (% Actividade do FVW)
Nota: FVW é um agente reactivo de fase aguda e de stress, a gravidez e outras situações
afectam a sua concentração plasmática e portanto pode ser aconselhável repetir a
análise, com outra amostra de sangue obtida num dia diferente.1 Os limites foram
calculados de acordo com as recomendações da Federação Internacional de Química
Clínica (IFCC).7 Estes resultados obtiveram-se com a utilização de um lote específico de
reagente. Devido às diversas variáveis que podem afectar os resultados, cada laboratório
deve estabelecer os seus intervalos de valores normais.
Método de ensaio
Seguir as instruções da técnica de acordo com o Manual do Operador dos aparelhos IL ou
com o Manual de Aplicações dos Aparelhos IL.
Recolha e preparação de amostras
Adicionar nove partes de sangue extraído recentemente por punção venosa a uma
parte de citrato trissódico. Para efectuar a recolha, o manuseamento e a conservação da
amostra devem seguir-se as recomendações referidas no documento H21-A4 da CLSI
(anteriormente NCCLS).3
Caso as amostras tenham sido congeladas, deverão ser descongeladas rapidamente a
37°C e simultaneamente devem ser suavemente misturadas, antes da utilização. O ensaio
deverá ser efectuado antes de se terem completado 2 horas da sua descongelação.
Reagentes adicionais e plasmas de controlo
Este kit não inclui os produtos abaixo mencionados, pelo que deverão ser pedidos em
separado:
Américas e Pacífico
Europa
Núm Cat.
Núm Cat.
Plasma de Calibração
0020003700
0020003700
Controlo Normal
0020003120/0020003110 0020003110
Controlos Especiais de Teste Nível 1
0020010100
0020010100
Diluente de factores
0009757600
0009757600
Controlo de Qualidade
Para realizar um programa completo de Controlo de Qualidade, recomenda-se a utilização
dos controlos normais e anormais.4 Os controlos adequados para este programa são o
Controlo Normal e o Controlo Especial de Teste Nível 1. Cada laboratório deve estabelecer
a sua própria média e desvio padrão e deve efectuar um programa de controlo de
qualidade para monitorizar os seus resultados. Os controlos devem ser analisados uma
vez em cada turno de 8 horas, de acordo com a norma vigente no Laboratório. Ver Manual
do Operador para mais informações. Consultar a publicação de Westgard e col. para
identificar e solucionar situações anormais do Controlo de Qualidade.5
Resultados
Os resultados são expressos em % de normalidade da Actividade do FVW. Para mais
informações consultar o Manual do Operador dos Aparelhos.
Para estabelecer um diagnóstico, os resultados da análise devem ser utilizados em
conjunto com a restante informação, incluindo a história clínica.
Limitações/interferências
Não existe interferência nos resultados do Actividade do FVW nos aparelhos ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000 por níveis de bilirrubina até 3,8 mg/dL e de lípidos até 265 mg/dL.
Não existe interferência nos resultados do Actividade do FVW nos Sistemas ACL Futura/
ACL Advance por níveis de bilirrubina até 3,6 mg/dL e de lípidos até 929 mg/dL.
Não utilizar amostras hemolisadas e turvas. A presença de factor reumatóide na amostra
pode originar resultados falsamente positivos.
Não existe interferência nos resultados do Actividade do FVW no ACL TOP por níveis de
hemoglobina até 70 mg/dL, de bilirrubina até 4,2 mg/dL, de triglicéridos até 1020 mg/dL e
de factor reumatóide até 200 UI/ml.
As amostras de doentes a quem foram administradas preparações com anticorpos
monoclonais de origem murina, para diagnóstico ou terapêutica, podem conter
anticorpos humanos antimurino (human anti-mouse antibody- HAMA). A presença
de HAMA pode causar uma sobre-estimação dos resultados em imunoensaios que
utilizam anticorpos monoclonais murinos. O HemosIL von Willebrand Factor Activity
Buffer contém um agente bloqueante contra HAMA para minimizar esta interferência
nos resultados do ensaio.
A presença de níveis elevados de anticorpos Humanos Anti-Bovino IgG (HABIA) em
alguns pacientes pode levar a uma sobrevalorização dos resultados.8
Os resultados deste ensaio devem, portanto, ser utilizados com outra informação,
incluindo o contexto clínico, para a realização de um diagnóstico. Não use este ensaio
como única base para decisões terapêuticas.
Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
Venligst rekvirer den gældende udgave af metodeforskriften på dansk fra den lokale IL
distributør.
Vänligen kontakta ILS Laboratories AB Tel. 08 626 38 50. för den senast uppdaterade
svenska upplagan av bruksanvisningen.
FORHOLDSREGLER OG ADVARSLER
VARNINGAR OCH FÖRSIKTIGHETSÅTGÄRDER:
Fareklasse: Ingen
Risikosærninger: Ingen
Sikkerhedssætninger: Ingen
Buffer indeholder mindre end 0,1% Na-Azid der kan danne eksplosive metalazider ved
kontakt med visse metaller. Bortskaffes til destruktion via kommunal modtageordning.
Dette produkt er til in vitro diagnostisk anvendelse.
Faroklass: Ingen
Riskfraser: Ingen
Skyddsfraser: Ingen
Bufferten innehåller mindre än 0,1% natriumazid, som dock kan bilda explosiva azider inne
i metallrör. Använd lämplig avfallshantering.
Denna produkt är avsedd för in vitro diagnostik.
DANSK - Metodeforskrift revision 06/2014
von Willebrand Factor Activity - 0020004700
06/2014
SVENSK - Beskrivning Revision 06/2014
Σήμα κινδύνου Κατηγορία: ουδέν
Φράσεις κινδύνου: ουδέν
Φράσεις οδηγιών ασφαλούς χρήσης: ουδέν
in vitro
Bibliography / Literatur / Bibliografía / Bibliographie / Bibliografia /Bibliografia / Litteratur / Litteraturförteckning /
1. Montgomery RR, Coller BS. Von Willebrand Disease. In: Hemostasis and Thrombosis.
Basic Principles and Clinical Practice. Third edition. Chapter 7. Edited by Colman RW,
Hirsh J, Marder VJ and Salzman EW. JB Lippincott Company, Philadelphia, 1994.
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Major Cause of False Positive Reactions in Two Site Immunoassays based on
Monoclonal antibodies. J. Immunoassay Immunochem. 2004: 25; 1, 17-30.
ACL, ACL Futura and ACL TOP are trademarks of Instrumentation Laboratory
©2004 Instrumentation Laboratory.
Symbols used / Verwendete Symbole / Símbolos utilizados / Symboles utilisés / Simboli impiegati / Símbolos utilizados / Anvendte symboler / Använda Symboler /
In vitro diagnostic medical
device
In-vitro Diagnostikum
De uso diagnóstico in vitro
Dispositif mèdical de
diagnostic in vitro
Per uso diagnostico in vitro
Dispositivo médico para
utilização em diagnóstico
in vitro
“in vitro” diagnostisk udstyr
In vitro diagnostisk medicinsk
produkt
Batch code
Chargen-Bezeichnung
Identificación número de
lote
Désignation du lot
Numero del lotto
Número de lote
Batch nr.
Tillverkningskod
Use by
Verwendbar bis
Caducidad
Utilisable jusqu’à
Da utilizzare prima del
Data límite de utilização
Anvendelse
Användning
Temperature limitation
Festgelegte Temperatur
Temperatura de
Almacenamiento
Températures limites de
conservation
Limiti di temperatura
Límite de temperatura
Temperatur begrænsninger
Temperatur gräns
Consult instructions for use
Beilage beachten
Consultar la metódica
Lire le mode d’emploi
Vedere istruzioni per l’uso
Consultar as instruções de
utilização
Se vejledning for anvendelse
Ta del av instruktionen före
användning
Control
Kontrollen
Control
Contrôle
Controllo
Controlo
Kontrol
Kontroll
Biological risks
Biologisches Risiko
Riesgo biológico
Risque biologique
Rischio biologico
Risco biológico
Miljø oplysninger
Biologiska risker
Manufacturer
Hergestellt von
Fabricado por
Fabricant
Prodotto da
Fabricado por
Producent
Tillverkare
Authorised representative
Bevollmächtigter
Representante autorizado
Mandataire
Rappresentanza autorizzata
Representante autorizado
Leverandør
Auktoriserad representant
Características Técnicas
Precisão
A precisão foi avaliada, intra e na totalidade (de análise para análise e de dia para dia), ao
longo de vários ensaios.
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
Média (% Actividade do FVW) CV% (Intra-série) CV% (Total)
Controlo Normal
79,6
2,7
4,9
Controlos Especiais de Teste Nível 1 49,8
4,6
9,0
Controlos Especiais de Teste Nível 2 27,7
7,5
8,7
ACL Futura/ACL Advance Média (% Actividade do FVW) CV% (Intra-série) CV% (Total)
Controlo Normal
92,1
4,1
5,6
Controlos Especiais de Teste Nível 1 64,1
4,8
6,5
Controlos Especiais de Teste Nível 2 36,6
6,5
8,3
ACL TOP
Média (% Actividade do FVW) CV% (Intra-série) CV% (Total)
Controlo Normal
102,4
2,6
3,4
Controlos Especiais de Teste Nível 1 68,4
3,5
6,3
Controlos Especiais de Teste Nível 2 30,3
6,5
8,0
Correlação:
Sistema
declive intersecção
r
Método Comparativo
ACL ELITE/
0,832
4,782
0,972
EIA Actividade do FVW
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance 0,954
3,854
0,958
EIA Actividade do FVW
ACL TOP
0,988
2,288
0,995
Actividade do FVW
em ACL Advance
Num estudo clínico adicional (n=114), comparando este kit de VWF Activity no ACL 9000
com um ensaio de Ristocetin cofactor activity (VWF:RCo) num coagulometro óptico
automatizado, resultou num r de 0,950 e num declive de 0,841.
Estes resultados de precisão e de correlação foram obtidos utilizando lotes específicos, de
reagente e de controlo.
Limite de detecção:
Sistema
ACL ELITE/
ELITE PRO/8/9/10000
12 (% Actividade do FVW)
ACL Futura/ACL Advance 1,3 (% Actividade do FVW)
ACL TOP
3,2 (% Actividade do FVW)
Linearidade:
Sistema
Regular test (% Actividade do FVW) Rerun test (% Actividade do FVW)
ACL ELITE/
21 - 200
ELITE PRO/8/9/10000
ACL Futura/ACL Advance
19 - 120
40 - 240
ACL TOP
19 - 130
57 - 390
NOTE: Important user information.
ACHTUNG: wichtige Anwenderinformation.
NOTA: Información importante para el usuario.
NOTE: Information Utilisateur Importante.
NOTA: informazione importante per l'utilizzatore.
NOTA: Informação importante de utilizador.
NOTA: De belangrijke Informatie van de Gebruiker.
NOTERA: Viktig information om användare.
Se for excedido o intervalo linear (teste de repetição), então as amostras devem ser
diluídas manualmente de 1:4 com Diluente de factores (100 μL de amostra + 300 μL de
Diluente) nos aparelhos ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000 e ACL Futura/ACL Advance ou
de 1:10 com Diluente de factores (50 μL de amostra + 450 μL de Diluente) no ACL TOP, e
devem ser novamente analisadas. Os resultados impressos devem ser multiplicados por 4
ou 10 para corrigir a diluição.
Não ocorre efeito de prózona até 700% nos aparelhos ACL ELITE/ELITE PRO/8/9/10000,
até 350% nos Sistemas ACL Futura/ACL Advance e até 1000% no ACL TOP.
3800-3102 R5 06/2014
VWF Activity 0020004700
Printed Insert Sheet: 3800-3102
Revision: R5
Issued:06/2014
C.O.:438553
LANGUAGES
ENGLISH DEUTSCH ESPAÑOL
FRANÇAIS
ITALIAN
PORTUGUESE
DANSK
SVENSK
GREEK
TECHNICAL SPECS
PAPER: White paper, 50-60 g/m2 weight.
SIZE: 594 x 420 mm (DIN A2).
PRINT:Front/Back.
PRINT COLOR: Front - Top Band Green Pantone 382, all remaining type in black.
Back - All type in black.
Instrumentation Laboratory Company - Bedford, MA 01730-2443 (USA)
Instrumentation Laboratory SpA - V.le Monza 338 - 20128 Milano (Italy)
3800-3102 R5 06/2014