BACTERIAS FITOPATÓGENAS OBJETIVOS • Introducción a la clasificación de las fitopatógenas (taxonomía y nomeclatura) bacterias • Reconocer las fitopatógenas bacterias características de las • Reconocer síntomas y signos más comunes 12 de setiembre de 2011 Ing. Agr. María José Montelongo • Conocer el proceso de diagnóstico de una enfermedad bacteriana • Conocer las etapas de desarrollo de una enfermedad bacteriana • Conocer las medidas de manejo adecuadas para las enfermedades bacterianas Algunos datos… Algunos agentes fitopatógenos en una célula vegetal • El microscopista alemán Antoni van Leeuwenhoek (1632-1723), fue el primero que vio una bacteria de su placa dental • Robert Koch (1843-1910) demostró por primera vez, en 1876, que una bacteria causaba la enfermedad de antrax en las ovejas • Se conocen alrededor de 1.600 especies de bacterias, la mayoría son saprófitas y benéficas • Muchas especies causan enfermedades en humanos (tuberculosis, neumonia, fiebre tifoidea) y en animales (brucelosis y antrax) • Alrededor de 100 especies de bacterias causan enfermedades a plantas Árbol filogenético Bacterias fitopatógenas • Procariotas unicelulares Bacterias fitopatógenas – Cápsula – Pared celular compleja – Membrana citoplasmática – Citoplasma – Material genético nuclear y extranuclear • Flageladas • La mayoría Gram• Variabilidad genética – transformación, conjugación, transducción y mutación 1 Bacterias fitopatógenas Bacterias fitopatógenas •No producen endosporas •Se reproducen por fisión binaria •Alta tasa de multiplicación • La mayoría tienen forma de bacilo (1-2μm x <1μm) • Hay bacterias filamentosas Streptomyces spp. causante de la sarna de la papa: filamentosa Agrobacterium, Erwinia, Pseudomonas y Xanthomonas: bacilos Clase Mollicutes Bacterias fitopatógenas ÍA R • Saprófitos facultativos: se YO A multiplican en el huésped, M pero pueden sobrevivir en restos y en el suelo. Algunas se consideran habitantes del suelo (Pseudomonas, Agrobacterium, Streptomyces). • Forman un grupo monofilético dentro de las bacterias Gram + • Carecen de pared celular, sólo rodeados por la membrana plasmática • Son los procariotas más pequeños que pueden autoreplicarse • Parásitos (dependen de la célula hospedante para vivir) • Resistentes a penicilina (interfiere con la • Parásitos obligados: bacterias fastidiosas, limitadas al xilema y Mollicutes (fitoplasmas y espiroplasmas) producción de la pared celular) pero sensibles a tetraciclina y cloranfenicol (interfieren con la síntesis de proteínas) Clase Mollicutes • Los fitopatógenos son transmitidos por insectos que se alimentan del floema • Mollicutes fitopatógenos: fitoplasmas No se han podido cultivar in vitro y espiroplasmas taxonomía Taxonomía Características taxonómicas: – Morfológicas, – Culturales (forma, bordes, color de las colonias) – Fisiológicas – Bioquímicas – Patológicas (capacidad para atacar a determinado huésped) Cultivables in vitro 2 Principales géneros de Bacterias fitopatógenas flagelos Monótrico Lofótrico Polar Anfítrica Perítrica Pared celular Principales géneros de Bacterias fitopatógenas GRAM (+) – Clavibacter – Curtobacterium – Streptomyces Características culturales Coloración de colonias • Xanthomonas se caracteriza por su color amarillo el que se visualiza mejor creciendo sobre un medio YDC GRAM (-) – Erwinia – Pseudomonas – Xanthomonas – Xylella – Agrobacterium Morfología de colonia en medio sólido Forma Elevación Borde 3 Características fisiológicas Reacción de o/f Reacción de oxidación/fermentación La mayoría de las bacterias fitopatógenas tienen metabolismo oxidativo • Metabolismo oxidativo – Pseudomonas – Xanthomonas – Xylella – Agrobacterium – Clavibacter • Metabolismo fermentativo – Erwinia Características fisiológicas Producción de pigmentos fluorescentes Pseudomonas fluorescens se caracteriza por producir pigmentos fluorescentes (izq) nomenclatura Género especie patovar (variación patogénica) nomenclatura Género especie patovar (variación patogénica) Xanthomonas campestris pv. cucurbitae Xanthomonas campestris pv. vesicatoria Xanthomonas campestris pv. fragariae 4 Síntomas de enfermedades bacterianas Síntomas de enfermedades bacterianas Agallas o tumores • Manchas foliares • Manchas en frutos • Cancros • Marchitez • Hiperplasia • Podredumbre • Costras • Necrosis Agrobacterium tumesfasciens Síntomas de enfermedades bacterianas Agallas o tumores Síntomas de enfermedades bacterianas Lesiones en frutos Psudomonas savastanoi pv.savastanoi Xanthomonas arboricola pv. pruni Síntomas de enfermedades bacterianas Lesiones en frutos Síntomas de enfermedades bacterianas Lesiones en frutos Xanthomonas axonopodis pv. citri Pseudomonas syringae pv. papulans Xanthomonas campestris pv. cucurbitae 5 Síntomas de enfermedades bacterianas Podredumbres blandas Síntomas de enfermedades bacterianas Síntomas de enfermedades bacterianas Podredumbres blandas Síntomas de enfermedades bacterianas Afecciones vasculares Marchitez Síntomas de enfermedades bacterianas Manchas foliares Síntomas de enfermedades bacterianas Manchas foliares Manchas foliares 6 Síntomas de enfermedades bacterianas Manchas foliares Síntomas de enfermedades bacterianas Manchas Pantoea stewartii Xanthomonas translucens Síntomas de enfermedades bacterianas Cribado Síntomas de enfermedades bacterianas Cancros Síntomas de enfermedades bacterianas Defoliación Síntomas de enfermedades bacterianas Costras 7 Técnicas para ver el signo de bacterias Signo de bacterias Zooglea: Aspecto mucilaginoso, constituido de masa bacteriana y restos del vegetal. Microcorrida: para hojas Técnicas para ver el signo de bacterias Test de flujo: para tallos Diagnóstico de enfermedades bacterianas • • • • • • • • • Observación de síntomas y signos Aislamiento en medios de cultivo Prueba de hipersensibilidad en no huésped Prueba de Gram Características culturales Pruebas de patogenicidad Pruebas bioquímicas y fisiológicas Pruebas serológicos (ELISA) Técnicas moleculares La bibliografía indica que podría ser una bacteria!! Diagnóstico de enfermedades bacterianas Hipersensibilidad en no húesped 1. Se realiza una inoculación masiva en el mesófilo de una hoja de una planta NO HUESPED 2. Se observa la ocurrencia (o no) de reacción de hipersensibilidad 8 Hipersensibilidad en no húesped Diagnóstico de enfermedades bacterianas La aparición de una reacción de hipersensibilidad indica que la bacteria inoculada es patógena. Prueba de patogenicidad Ciclo de la enfermedad • Sobrevivencia / Fuentes de inóculo • Diseminación • Inoculación • Penetración • Colonización • Aparición de los síntomas Inoculación mediante aspersión Sobrevivencia • Las bacterias pueden sobrevivir en: • restos vegetales • semillas • hospedantes alternativos • suelo diseminación • Las principales vías de diseminación de las bacterias fitopatógenas son • Agua de salpicado, escorrentía, riego o lavado. • Insectos vectores • Herramientas contaminadas • Plantas o partes de ellas infectadas • Hombre 9 diseminación El salpicado por el agua de lluvia o riego es una de las principales vías de diseminación de las bacterias fitopatógenas. diseminación • Diseminación por semillas infectadas o infestadas penetración diseminación • El agua de riego o las herramientas contaminadas pueden determinar el contagio en una fila de plantas. penetración • Las bacterias necesitan de heridas o aberturas naturales para producir infección. • Estomas, hidátodos, lenticelas colonización • Las bacterias producen lisis de los tejidos que colonizan • Las bacterias se multiplican exponencialmente en condiciones favorables El agua es un elemento indispensable • Pueden colonizar el parénquima intercelularmente • Pueden colonizar los haces vasculares. 10 Ciclo del cancro cítrico Manejo de enfermedades bacterianas • No existe un control químico efectivo • Las medidas de manejo se basan en la prevención • Es fundamental incidir sobre el ambiente (microclima) haciéndolo menos favorable al desarrollo de la enfermedad Manejo de enfermedades bacterianas • Enfermedades que no están presentes en el país: control legal Distribución de Huanglonbing Manejo de enfermedades bacterianas • Enfermedades presentes: aplicar medidas de manejo que afecten – la tasa de multiplicación – sobrevivencia – diseminación Ambiente Enfermedad Patógeno Control cultural Control cultural Control cultural Control cultural • Partir de material sano • Variedades resistentes • Suelo libre del patógeno • Sustrato/Suelo libre de la enfermedad • Evitar las condiciones de humedad – – – – – – Elegir sitios bien drenados Canteros altos Evitar encharcado Ajustar el riego Disminuir la densidad de plantas Control de malezas Huésped • Evitar heridas • Eliminar plantas o partes infectadas • Desinfectar herramientas, manos, estructuras • Rotación de cultivos 11 Control cultural Control cultural Cortinas rompe viento Severidad puede disminuir hasta 75 % Control cultural • Sustrato estéril o no infestado • Evitar contaminar con suelo infestado •Uso de material sano •Tratamiento de semillas •desinfección •termoterapia Control químico • Fungicidas con actividad bacteriostática: – Cúpricos – Fungicidas con zinc – Productos con Yodo • Antibióticos de uso agrícola: • Solarización Control químico • Desventajas de los antibióticos – Alto riesgo de que las bacterias se vuelvan resistentes – Riesgos a la salud del aplicador y consumidor – Prohibidos en los Programas de Producción Integrada – Sulfato de Estreptomicina – Kasugamicina Bibliografía • AGRIOS, G. 2005. Plant pathology. 5nd. ed. London, Elsevier Academic Press. 922 p. • KADO, C. 2010.Plant bacteriology. Minessota, APS Press. 336 p. • TRIGIANO, R.; WINDHAM, M.; WINDHAM, A. 2008. Plant pathology, concepts and laboratory exercises. 2nd. ed. Florida, RC Press. 558 p. 12