deriva y ruido - Colegio de bioquímicos de Jujuy

DERIVA Y RUIDO
Control de la estabilidad de las lecturas.
La deriva y el ruido deben comprobarse y registrarse al menos una vez al mes por
medio de la medición de las variaciones de ABS cada 30 segundos, durante 10
minutos, tanto para un blanco de agua de 0,000 UA como para una solución de
Dicromato de ABS aproximadamente a 0,400 UA a 340 nm. Un instrumento que
tenga alto ruido o deriva no debe usarse para ensayos cinéticos y cuando se usa
para métodos colorimétricos punto final con Estándares debe tenerse cuidado con
el intervalo de tiempo entre la primera y la última lectura de absorbancia.
La estabilidad fotométrica se define como la variación del cero del instrumento en
función del tiempo. La deriva es la variación de las lecturas de absorbancia hacia
absorbancia mas altas o más bajas durante un período de tiempo. El ruido es la
falta de estabilidad en las lecturas de absorbancia ( oscilaciones de la señal ).
Las causas de inestabilidad pueden ser de origen interno y externo. Las primeras
se hallan relacionadas al ruido electrónico debido al movimiento de los electrones
en los conductores y son tanto menores cuando mejor es la calidad de diseño y
construcción del instrumento. Las causas externas son debidas a la falta de
estabilidad de la corriente de la red de alimentación o a la captación de señales
externas. En general son evitables mediante la interposición entre la red y el
aparato de un estabilizador de corriente y de una buena conexión a tierra.
CONTROL DE ESTABILIDAD:
La deriva y el ruido deben comprobarse y registrarse al menos una vez al mes por
medio de la medición de las variaciones de ABS cada 30 segundos, durante 10
minutos, tanto para un blanco de agua de 0,000 UA como para una solución de
Dicromato de ABS aproximadamente a 0,400 UA a 340 nm. Elegimos 10 minutos
cuando trabajamos en forma manual, pues es tiempo que se tarda en leer en un
espectrofotómetro una serie de 15 tubos promedio. En el procedimiento
automático se requiere menor tiempo por que la velocidad de lectura en mayor.
La importancia de este tipo de control radica en que si el espectrofotómetro
presenta inestabilidad de lectura, las mismas que se realicen sufrirán un
corrimiento en el tiempo.
También se puede usar Cloruro de Níquel en solución ácida.
Abs
Abs
Tiempo
Bajo ruido y baja deriva
Tiempo
Baja deriva y alto ruido
Curso de Calidad II- Control de Calidad de Espectrofotómetros.
Sub-Comisión de Calidad Colegio de Bioquímicos de Jujuy- Año2005
Abs
Abs
Tiempo
Alta deriva y bajo ruido
Tiempo
Alta deriva y alto ruido
METODOLOGÍA DE TRABAJO:
Espectrofotómetros manuales:
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Tener encendido el tiempo que indique el fabricante antes de realizar la
experiencia.
Llevar el selector de longitud de onda a 405 nm . En caso de fotómetros de
filtro elegir el filtro mas próximo a 405 nm.
Elegir una cubeta limpia y sin ralladura y ajustar el cero de absorbancia con
agua destilada.
Medir la absorbancia de la solución y registrar el resultado. En ese momento
comenzar a tomar el tiempo. Sin retirar la cubeta del instrumento ni modificar
ninguna variable registrar la absorbancia cada 30 segundos durante 10 minutos
( es decir 21 medidas ), volcando los valores en una planilla de resultados.
Espectrofotómetros con bomba de aspiración.
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Llevar a cero de absorbancia a 405 nm con agua destilada. En caso de
fotómetros de filtro elegir el filtro mas próximo a 405 nm.
Aspirar aire.
Aspirar la solución de la ampolla y registrar el valor. En ese momento
comenzar r tomar el tiempo. Dejar la solución en la cubeta y sin modificar
ninguna variable leer la absorbancia cada 30 segundos durante un lapso de
10 minutos . Registrar estos 21 valores en una planilla de resultados.
Autoanalizadores y equipos automáticos
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Consultar el manual del fabricante para seleccionar la función que permita
medir absorbancias absolutas.
Seleccionar el filtro de 405 nm.
Llenar una copa de reacción con agua destilada y medir la absorbancia (
absorbancia del blanco )
Llenar otra copa con la solución provista y medirle la absorbancia. Sin
modificar ninguna variable volver a medir la absorbancia de la misma copa
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de reacción cada 30 segundos durante 10 minutos ( 21 lecturas ). Restar a
cada lectura la absorbancia del blanco de agua y registrarla en la planilla.
En caso que el camino óptico de las celdas de medidas sea distinto se 1 cm
normalizar dichas lecturas de la siguiente manera:
Abs. Normalizada = Abs. leída x
1 cm
--------------------------------------Camino óptico de la celda ( en cm)
Control de cubetas.
a) En caso de trabajar con más de una cubeta se debe verificar la homogeneidad
de las mismas. Por ejemplo, llenadas con Dicromato y llevadas en forma arbitraria
a ABS = 0,400 no deben diferir entre si en una cantidad mayor de 0,004 unidades
de absorbancia. Realizar la prueba a 340nm.
b) Si el instrumento que se usa tiene un portacubetas con más de una posición
variando la ubicación de la misma cubeta en el carro, no debe diferir la
absorbancia en  0,002 unidades en 0.400 UA.
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