Proyecto Procedimiento Extracción de ADN de células vegetales

Proyecto
Extracción de ADN de células vegetales
Procedimiento
Elijan uno de los siguientes tejidos vegetales para realizar el procedimiento: plátano (sin cáscara), kiwi
(sin cáscara), tallo de apio, flor de brócoli.
Antes de comenzar, laven bien sus manos con agua y jabón. Asegúrense que el material que utilizarán
y su lugar de trabajo estén limpios y ordenados.
1. Tomen la balanza y pesen 30 g del tejido vegetal que utilizarán.
2. En la licuadora, mezclen el tejido vegetal, con una taza de agua destilada. Muelan por 15 a 20
segundos, hasta obtener una mezcla homogénea. No muelan más, pues por agitación se puede romper
el ADN. Si no cuentan con licuadora muelan usando un tenedor o un mortero y, luego, mezclen bien la
solución con una cuchara.
3. En una taza, mezclen una cucharadita de champú o jabón para trastes, y dos pizcas de sal.
Agreguen 20 mL (4 cucharaditas) de agua destilada o llenen la taza hasta 1/3.
Disuelvan la sal y el champú o jabón para trastes mezclando lentamente con la cuchara evitando
producir espuma.
4. Agreguen a la solución de champú y sal, una cuchara sopera colmada de la mezcla del tejido vegetal
con agua. Después, con la cuchara, mezclen su solución por 5 a 10 minutos sin producir espuma.
5. Mientras uno mezcla la solución, otro compañero(a) coloca el filtro de café en una segunda taza.
Doblen la orilla del filtro alrededor de la taza, para que este no toque el fondo y permita que el líquido se
acumule en el fondo. Si no disponen de filtro de café, tomen un trozo de gasa y dóblenlo repetidas
veces para hacer un filtro.
6. Filtren la mezcla vertiéndola en el filtro de café o en la gasa. Dejen pasar la solución durante
varios minutos hasta obtener aproximadamente 5 mL de filtrado (que cubra el fondo de la taza).
7. Llenen un tubo de ensayo con el alcohol frío que estaba en el freezer o en hielo. Para obtener un
mejor resultado, el alcohol debe estar lo más frío posible.
8. Llenen la pipeta plástica con la solución filtrada.
9. Agreguen la solución al alcohol. Déjenla reposar por 2 a 3 minutos sin perturbarla. Es importante no
agitar el tubo de ensayo. En el tubo de ensayo se puede observar el ADN como un precipitado blanco.
10. En el mechero, calienten la punta de la varilla de vidrio formando un pequeño gancho, en el que
enrollarán el ADN. Después estírenlo suavemente sobre una superficie limpia.
11. Al finalizar, asegúrense de dejar su lugar de trabajo limpio y ordenado.
12. Expongan sus resultados con el curso y compárenlos con los demás grupos que utilizaron
otros tejidos vegetales.
13. Con su grupo, respondan las preguntas propuestas en la sección Análisis de resultados
Análisis de resultados
a. ¿Qué papel juegan el detergente y la licuadora en la primera etapa de la extracción?
b. ¿Qué habría pasado si antes de agregar la solución de ADN al alcohol, la hubieran agitado
fuertemente?, ¿por qué?
c. ¿De qué estará compuesto el precipitado blanco obtenido, en el que se encuentra el ADN?,
¿contendrá otras porciones celulares? Expliquen.
d. ¿Difiere el contenido de ADN obtenido por cada grupo?, ¿a qué creen que se deben estas
diferencias?
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